六種殺菌劑對哈茨木霉菌絲生長影響研究

曹秀榮 董照鋒 任 崗 熊瀟垚 邵 鵬 徐 艷

木霉 (Trichoderma spp.) 是廣泛分布于土壤、植物殘體、植物根圍和葉圍、海洋以及空氣等環(huán)境中的一類真菌， 對多種細菌和病原真菌有拮抗作用， 已被作為生防制劑廣泛應用于農業(yè)生產。 但木霉也因具有適應性強、 繁殖速度快、為害期長等特性，極易侵染香菇、平菇、雙孢菇、杏鮑菇、茶樹菇、毛木耳和靈芝等多種食用菌的培養(yǎng)基質、菌種、菌絲和子實體，造成減產甚至絕收， 為食用菌生產中的第一大競爭性雜菌。 其中，綠色木霉（Trichoderma viride）與哈茨木霉（Trichoderma harzianum）是相對優(yōu)勢菌種。

我們研究了戊唑醇、 枯草芽孢桿菌、 四霉素、 春雷霉素、 多抗霉素、 多菌靈6 種殺菌劑對哈茨木霉菌絲生長的影響， 以期為哈茨木霉作為生防菌應用于農業(yè)生產時如何協(xié)調與生物防治、 化學防治的矛盾， 以及其作為食用菌生產中的競爭性雜菌時如何選擇防治藥劑提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1）供試藥劑。 430 g/L 戊唑醇懸浮劑，鹽城利民農化有限公司生產；100 億芽孢/g 枯草芽孢桿菌粉劑，陜西綠頓作物科技有限公司生產；0.15%四霉素水劑，遼寧微科生物工程股份有限公司生產；2%春雷霉素水劑， 績溪農華生物科技有限公司生產； 3%多抗霉素水劑， 績溪農華生物科技有限公司生產； 40%多菌靈懸浮劑，江蘇劍牌農化股份有限公司。以上材料均為市售。

2）供試培養(yǎng)基。 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)：無菌水1 000 mL，馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂15 g。

3）供試菌種。 供試的哈茨木霉菌株 （Trichoderma harzianum）， 來源于2021 年3 月3日從商洛盛澤農林科技發(fā)展有限公司香菇基地采回的染病香菇菌棒， 經實驗室分離鑒定后，接種到PDA 試管斜面培養(yǎng)基， 于4 ℃條件下保存。

1.2 試驗方法

1）試驗設計。 采用菌絲生長速率法，測定6種供試藥劑對哈茨木霉菌絲的抑制作用。 試驗設7 個處理，每個處理4 次重復，各處理濃度依據(jù)使用說明推薦用量確定，無菌水作對照。如表1 所示。

表1 6 種供試殺菌劑的試驗設計濃度

2）含藥PDA 平板制備。將供試藥劑用滅菌水稀釋至設計濃度的10 倍， 編號后備用。 取6 mL 稀釋好的藥液注入100 mL 經過滅菌處理的燒杯中， 再加入經高壓蒸汽滅菌并冷卻至50 ℃左右的PDA 培養(yǎng)基54 mL， 充分混勻，制成60 mL 設計濃度的含藥培養(yǎng)基（為防止培養(yǎng)基過快冷凝而影響試驗進程， 每個處理多配制20 mL），然后取10 mL 注入經過滅菌處理的9 cm 培養(yǎng)皿中， 制成試驗設計濃度的PDA 平板。 以無菌水替代藥液， 同上述方法制作空白對照。

3）菌絲接種。 將哈茨木霉菌接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，在溫度28 ℃、濕度90%條件下培養(yǎng)4 天，活化菌種。在一培養(yǎng)皿內菌落生長均勻、 旺盛的同一半徑處用打孔器制作直徑6 mm 的菌餅，用接種針挑取菌餅正面向下轉接種到各處理PDA 平板培養(yǎng)基中心位置，置于溫度28 ℃、 濕度90%條件下培養(yǎng)， 分別于48 小時、72 小時、96 小時用十字交叉法測量各皿菌落直徑，并按下試計算菌絲生長抑制率：

2 結果與分析

從表2、圖1 可知：依據(jù)使用說明推薦的田間劑量濃度下，6 種殺菌劑對哈茨木霉菌絲96小時抑制率由大到小排序為：戊唑醇＞枯草芽孢桿菌＞四霉素＞多菌靈＞春雷霉素＞多抗霉素。 戊唑醇抑制效果最好，48 小時、72 小時、96 小時抑制率均達到98%以上，呈逐漸增大趨勢；枯草芽孢桿菌抑制率略低于戊唑醇，48 小時、72 小時、96 小時抑制率均達到92%以上，72 小時達到最高，72～96 小時基本穩(wěn)定；春雷霉素和多抗霉素48 小時、72 小時、96 小時抑制率均低于20%，96 小時抑制率分別為6.3%和4.4%；多菌靈和四霉素抑制率處于中等水平，96 小時抑制率分別為58.4%和50.1%。

表2 6 種殺菌劑對哈茨木霉菌絲的抑制作用

圖1 6 種殺菌劑對哈茨木霉菌絲96 小時抑制效果

3 小結與討論

試驗結果表明，在推薦的田間劑量下，春雷霉素和多抗霉素對哈茨木霉菌菌絲生長抑制作用較小，96 小時抑制率分別為6.3%、4.4%；四霉素和多菌靈對哈茨木霉菌絲96 小時抑制率分別為58.4%、50.1%，抑制作用明顯；戊唑醇和枯草芽孢桿菌對哈茨木霉菌絲有顯著的抑制作用，96 小時抑制率分別達到99.4%、94.6%。

由以上結果得出，6 種殺菌劑中，能與哈茨木霉配伍， 增強防治效果的藥劑為春雷霉素和多抗霉素， 不建議與哈茨木霉配伍的藥劑為四霉素和多菌靈， 堅決禁止與哈茨木霉配伍的藥劑為戊唑醇和枯草芽孢桿菌。 由于戊唑醇和枯草芽孢桿菌對哈茨木霉抑制作用顯著， 可在進一步研究其對食用菌菌絲生長影響的基礎上，確定其可否適用于食用菌木霉病害防治。