甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1可濕性粉劑的制備及藥效研究

張 維，呂朝陽，李博雅，王 聰，葛蓓孛，張克誠，PARK Kyung Seok，施李鳴

（1中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，北京 100193；2河北農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院，河北 保定 071001；3廣西民族大學(xué)，廣西林產(chǎn)化學(xué)與工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，南寧 530006；4韓京大學(xué)，韓國 京畿道 17579）

0 引言

甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌(Bacillus methylotrophicus)是Madhaiyan等[1]在2010年發(fā)現(xiàn)的一個(gè)新的芽孢桿菌屬成員。研究發(fā)現(xiàn)甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌具有顯著的促生效果，如王亞楠等[2]研究表明，甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌BMF04菌株發(fā)酵液能顯著提高黃瓜的出苗率、鮮重、莖粗、株高和須根數(shù)；黎肇家等[3]發(fā)現(xiàn)甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌處理黃柏幼苗后葉綠素含量和POD活性增長，顯著促進(jìn)了黃柏幼苗生長；Liu等[4]發(fā)現(xiàn)甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌DD-1能夠促進(jìn)鉀的吸收、生長素的積累以及鐵載體的活性，進(jìn)而促進(jìn)水稻幼苗的生長。此外，甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌具有一定的抑菌效果。Jemil等[5]發(fā)現(xiàn)甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌DCS1菌株能夠抑制和破壞真菌生物膜的形成。Olfa等[6]發(fā)現(xiàn)甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌39b菌株對根癌土壤桿菌C58和B6表現(xiàn)出顯著的的抗菌活性。程敏等[7]發(fā)現(xiàn)甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌FJS01對多種煙草土傳病原菌有明顯的拮抗作用。甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌不僅對草莓有顯著的促生效果，而且能夠減緩灰霉菌的侵染，誘導(dǎo)植株產(chǎn)生系統(tǒng)抗性[8]。然而，經(jīng)農(nóng)藥信息網(wǎng)查詢，國內(nèi)登記的甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌菌劑僅有兩種。

可濕性粉劑作為生防制劑的主要劑型，具有高產(chǎn)值、高質(zhì)量、高濃度和便于運(yùn)輸?shù)奶攸c(diǎn)[9]?？蓾裥苑蹌┵|(zhì)量的重要指標(biāo)包括潤濕性、懸浮率以及pH等。研究表明，不同的載體對可濕性粉劑的懸浮率、潤濕性以及pH均有不同程度的影響[10]。在制劑中添加適宜的表面活性劑是提高藥液對靶潤濕沉積的有效方法，而藥液在靶標(biāo)體和作物葉片上的沉積、展著以及滲透的好壞，直接影響農(nóng)藥制劑的使用效果[11-12]。另外，研究表明通過氣流粉碎和添加助劑能夠顯著改善可濕性粉劑的潤濕性和懸浮率[13]。以前配方的優(yōu)化研究多為經(jīng)驗(yàn)和宏觀的篩選，優(yōu)化比較粗放，缺乏理論指導(dǎo)[14]。三角坐標(biāo)法、正交設(shè)計(jì)法雖可優(yōu)化成分組成，但均存在不足，如前者僅支持三種組分間的優(yōu)化而后者則試驗(yàn)繁瑣[15-16]。混料設(shè)計(jì)作為一種優(yōu)化物料配比的優(yōu)良方法，可以科學(xué)的指導(dǎo)配方優(yōu)化，減少實(shí)驗(yàn)次數(shù)[17]。其因子設(shè)計(jì)的響應(yīng)值會隨每個(gè)因子的數(shù)量而變化，因此可以合理選取少量試驗(yàn)點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)預(yù)測和分析混料效果。目前，該方法廣泛應(yīng)用于食品[18]、醫(yī)藥[19]和化工[20]等領(lǐng)域，但在研究微生物可濕性粉劑方面只有少數(shù)報(bào)道。

本實(shí)驗(yàn)室在吉林長白山土壤中分離篩選到1株生防菌株NKG-1，通過16S rDNA序列分析并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹鑒定該菌株為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌。前期研究發(fā)現(xiàn)，該菌株不僅可以促進(jìn)番茄植株的生長，而且能夠有效防治番茄灰霉病和白粉病[21-22]。目前，對于該菌株的應(yīng)用直接采用發(fā)酵液的方式進(jìn)行，并未對其劑型進(jìn)行開發(fā)，而發(fā)酵液存在運(yùn)輸不便、不易保存等不足，進(jìn)而限制了其生產(chǎn)應(yīng)用。為了推動NKG-1產(chǎn)品的生產(chǎn)應(yīng)用，本文對其載體與助劑進(jìn)行篩選，通過混料設(shè)計(jì)優(yōu)化配比，制備NKG-1的可濕性粉劑，并測試可濕性粉劑對植物的藥效，為該菌株的生產(chǎn)應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 供試菌株 甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌(Bacillus methylotrophicus)NKG-1(CGMCC No.12055)，分離自中國吉林長白山的土壤中，由本實(shí)驗(yàn)室保藏。

1.1.2 植株 試驗(yàn)用番茄品種為抗TY粉果番茄，山東安信種苗股份有限公司。

1.1.3 主要試劑 白炭黑，麥克林生物科技有限公司；高嶺土、硅藻土、聚乙烯醇(PVA)，上海國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；Agrilan 700（改性聚丙烯酸酯共聚物）、Morwet D-425（烷基萘磺酸縮聚物鈉鹽）、Morwet D-450（烷基萘磺酸縮聚物的鈉鹽和陰離子磺酸鹽的混合物）、Morwet D-500（烷基萘磺酸鹽甲醛縮聚物和嵌段共聚物的混合物）、木質(zhì)素磺酸鹽、Morwet EFW（烷基萘磺酸鹽和陰離子潤濕劑的混合物）、Berol 790A、PetroAA（烷基萘磺酸鹽），南京捷潤科技有限公司。

1.1.4 主要儀器 ZWY-2102恒溫培養(yǎng)振蕩器，上海智城分析儀器制造有限公司；西廚高速多功能粉碎機(jī)，永康市鉑歐五金制品有限公司；MOBILE MINORTM-2000型噴霧干燥機(jī)，基伊埃工程技術(shù)（中國）有限公司。

1.2 可濕性粉劑理化性能測定

按照國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 1601—1993)[23]測定NKG-1可濕性粉劑的pH值、國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 16150—2000)[24]測定NKG-1可濕性粉劑的細(xì)度、國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 5451—2001)[25]測定NKG-1可濕性粉劑的潤濕時(shí)間、國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 14825—1993)[26]測定NKG-1可濕性粉劑的懸浮率，采用平板計(jì)數(shù)法計(jì)量NKG-1可濕性粉劑的有效活菌數(shù)[27]。

1.3 載體篩選

將NKG-1菌株發(fā)酵液(OD600=0.1±0.02)分別與載體白炭黑、高嶺土、硅藻土按照一定比例進(jìn)行吸附，在進(jìn)風(fēng)溫度為130℃、噴霧壓力為0.20 Mpa的條件下經(jīng)噴霧干燥機(jī)干燥噴粉，分別收集各載體的原粉，通過測定比較各原粉的細(xì)度、pH值、懸浮率、潤濕時(shí)間及有效活菌量，篩選出適合吸附NKG-1發(fā)酵液的載體。

1.4 助劑篩選

采用助劑單因素試驗(yàn)，篩選適配NKG-1可濕性粉劑的助劑。使用1.3中篩選出的載體制備NKG-1可濕性粉劑原粉，并按照廠家推薦的使用比例將助劑PVA、Agrilan 700、Morwet D-425、Morwet D-450、Morwet D-500、木質(zhì)素磺酸鹽、Morwet EFW、Berol 790A、Petro AA分別與NKG-1可濕性粉劑的原粉進(jìn)行混合，混勻后經(jīng)多功能粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，制得含各助劑的樣品，比較各助劑樣品的懸浮率、潤濕時(shí)間和有效活菌量，篩選出適合制備NKG-1可濕性粉劑的助劑。

1.5 配方優(yōu)化

將1.4中篩選出的助劑分別按照質(zhì)量分?jǐn)?shù)4%、8%和12%的比例與原粉混合，經(jīng)多功能粉碎機(jī)粉碎后測定樣品的懸浮率、潤濕時(shí)間和有效活菌數(shù)，初步確定助劑劑量的添加范圍。

根據(jù)助劑添加的劑量范圍采用極端頂點(diǎn)設(shè)計(jì)法[28]進(jìn)行混料設(shè)計(jì)優(yōu)化，將載體與助劑的質(zhì)量分?jǐn)?shù)之和設(shè)定為1，分別測定所得制劑樣品的懸浮率、潤濕時(shí)間、有效活菌數(shù)等理化指標(biāo)。采用Minita 19軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，得出最優(yōu)的載體、懸浮劑與潤濕劑配比，經(jīng)噴霧干燥、粉碎后制得NKG-1可濕性粉劑，并用于NKG-1的防病促生試驗(yàn)。

1.6 防病促生試驗(yàn)

1.6.1 NKG-1可濕性粉劑的促生效果研究 試驗(yàn)于2021年3月在北京市中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所農(nóng)用抗生素組溫室開展。實(shí)驗(yàn)溫度、濕度、種植期等栽培條件均保持一致。試驗(yàn)共設(shè)4個(gè)處理，試驗(yàn)組分別施用NKG-1可濕性粉劑100、200和300倍液，對照組為清水處理，每處理設(shè)置3個(gè)重復(fù)。分別于番茄移栽后第14天進(jìn)行第1次灌根處理，之后每隔10天處理1次，共處理3次，第3次處理后7天測定番茄的鮮重、干重、根長等生理和形態(tài)指標(biāo)評價(jià)其促生效果。

1.6.2 NKG-1可濕性粉劑的防病效果研究 防病試驗(yàn)按照田間藥效準(zhǔn)則(GB/T 17980.30—2000)[29]進(jìn)行。試驗(yàn)共設(shè)4個(gè)處理，試驗(yàn)組分別施用NKG-1可濕性粉劑100、200、300倍液，每組處理10片葉子，設(shè)置3個(gè)重復(fù)。取健康的葉子正面朝上放于玻璃培養(yǎng)皿的吸水紙上，用不同稀釋倍數(shù)的NKG-1可濕性粉劑噴施番茄葉片，每片葉子噴施20 mL。隨后從培養(yǎng)2天的PDA培養(yǎng)基中取出灰霉病菌絲并放置在主葉脈旁，以不噴施NKG-1可濕性粉劑而接種灰霉菌菌絲的離體番茄葉片作為對照。用5.0 mm厚的透明塑料薄膜單獨(dú)覆蓋培養(yǎng)皿，并放置于25℃的溫室中（12 h光照/12 h黑暗）培養(yǎng)[21]。測量每個(gè)接種菌絲周圍形成的葉片病斑直徑，以形成病斑的接種點(diǎn)數(shù)除以接種總數(shù)計(jì)算各處理的發(fā)病率(%)。采用Xue[30]方法進(jìn)行生防效果評價(jià)。

2 結(jié)果與分析

2.1 NKG-1菌株發(fā)酵液在不同載體下的理化性能

將NKG-1菌株發(fā)酵液(OD600=0.1±0.02)按照一定比例分別吸附于高嶺土、硅藻土以及白炭黑，計(jì)量不同載體所得原粉的懸浮率、潤濕時(shí)間和有效活菌數(shù)，以評價(jià)載體對NKG-1原粉性能的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)使用白炭黑做載體時(shí)，其有效活菌量及懸浮率顯著高于高嶺土和硅藻土，雖然潤濕時(shí)間較長但在國家標(biāo)準(zhǔn)要求的范圍之內(nèi)，詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如表1所示。由于白炭黑相較于高嶺土和硅藻土具有一定的價(jià)格優(yōu)勢，故本實(shí)驗(yàn)選擇白炭黑作為NKG-1制劑的載體。

表1 不同載體對NKG-1原粉理化性能的影響

2.2 不同助劑對NKG-1原粉制劑的影響

將不同的助劑按照廠家推薦的使用比例，分別添加到以白炭黑為載體的NKG-1原粉中，測量混合不同助劑后NKG-1原粉的理化指標(biāo)，篩查相對適合開發(fā)NKG-1制劑的助劑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，不同的助劑對有效活菌數(shù)、潤濕時(shí)間和懸浮率具有不同的影響，與對照NKG-1原粉相比，助劑D-450、D-500以及Petro AA對有效活菌數(shù)的影響較?。浑m然木質(zhì)素、PVA和Agrilan 700擁有相對高的懸浮率，但其有效活菌數(shù)相對較低、潤濕時(shí)間更長。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如表2所示。而微生物制劑的藥效在很大程度上取決于有效活菌數(shù)的數(shù)量，因此后續(xù)的試驗(yàn)以潤濕劑D-500和分散劑Petro AA作為NKG-1原粉的助劑。

表2 不同助劑對NKG-1原粉理化性能的影響

2.3 助劑的添加比例對NKG-1制劑的影響

根據(jù)2.2所得結(jié)果，以Morwet D-425、Morwet D-500和Petro AA為對象，進(jìn)一步考察3種助劑在不同添加比例下對NKG-1制劑的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著添加比例的提高，助劑Morwet D-500的潤濕效果以及懸浮率均得以提高；助劑Petro AA其潤濕效果隨著添加劑量的增加而呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，而懸浮率則和助劑添加比例呈現(xiàn)正相關(guān)的關(guān)系；助劑Morwet D-425的潤濕效果及懸浮率隨著添加比例的增加，均呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如表3所示。綜合比較3種助劑對NKG-1制劑的潤濕和懸浮效果，助劑Morwet D-500、Petro AA優(yōu)于助劑Morwet D-425。因此，后續(xù)試驗(yàn)選擇載體白炭黑和助劑Morwet D-500、Petro AA進(jìn)行混料設(shè)計(jì)，以確定NKG-1制劑配方的最佳組成配比。

表3 不同助劑添加比例對NKG-1原粉制劑的影響

2.4 混料設(shè)計(jì)優(yōu)化甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1可濕性粉劑組分配比

根據(jù)2.3的試驗(yàn)結(jié)果，對制劑的各組分進(jìn)行上下限設(shè)定，采用軟件Minitab 19的極端頂點(diǎn)設(shè)計(jì)方法，選擇白炭黑、Morwet D-500和Petro AA進(jìn)行混料設(shè)計(jì)，其試驗(yàn)次數(shù)和相應(yīng)比例如圖1，即圖中的點(diǎn)。試驗(yàn)的具體方案及相應(yīng)制劑的pH值、懸浮率和潤濕時(shí)間響應(yīng)值結(jié)果如表4所示。

表4 混料試驗(yàn)設(shè)計(jì)及其響應(yīng)值

圖1 NKG-1可濕性粉劑組分的極端頂點(diǎn)設(shè)計(jì)

2.4.1 助劑組分配比對可濕性粉劑pH的影響 助劑Morwet D-500和Petro AA不同配比對pH影響的等值線分析結(jié)果如圖2所示。隨之助劑添加比例的增加，可濕性粉劑的pH值并沒有出現(xiàn)太大的波動，說明助劑對可濕性粉劑pH的影響較小，基本上穩(wěn)定在7.0～7.3之間。此外，不同助劑配比下的制劑pH大小，均符合相應(yīng)的國家標(biāo)準(zhǔn)。

圖2 pH與Morwet D-500、Petro AA的等值線

2.4.2 助劑組分配比對可濕性粉劑懸浮率的影響 助劑Morwet D-500和Petro AA不同配比對懸浮率影響的等值線分析結(jié)果如圖3所示。在一定范圍內(nèi)隨著助劑Morwet D-500含量的增加，可濕性粉劑的懸浮率也隨之升高，而Petro AA含量的增加對于提升懸浮效果也有一定作用，但其效果并沒有Morwet D-500明顯。當(dāng)Morwet D-500占比在14%～17%，Petro AA占比在10%～14%時(shí)，其制劑產(chǎn)品的懸浮性能優(yōu)良，懸浮率能夠達(dá)到70%以上。與單一助劑相比，助劑Morwet D-500與Petro AA在一定范圍內(nèi)混配使用，對提升制劑的懸浮率具有一定的協(xié)同作用。

圖3 懸浮率與Morwet D-500、Petro AA的等值線

2.4.3 助劑組分配比對可濕性粉劑潤濕時(shí)間的影響 助劑Morwet D-500和Petro AA不同配比對潤濕時(shí)間影響的等值線分析結(jié)果如圖4所示。隨之兩種助劑含量的增加，可濕性粉劑的潤濕時(shí)間整體上均呈現(xiàn)出減少的趨勢，且所有配比下的制劑潤濕時(shí)間遠(yuǎn)低于相應(yīng)國家標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的值，表現(xiàn)出較好的潤濕效果。從圖4可以看出，當(dāng)兩種助劑混配使用時(shí)，Morwet D-500占比在8%～15%，Petro AA占比在10%～12%時(shí)，其潤濕效果尤其顯著，潤濕時(shí)間在55 s以內(nèi)。

圖4 潤濕時(shí)間與Morwet D-500、Petro AA的等值線

2.4.4 可濕性粉劑配方的優(yōu)化及驗(yàn)證 根據(jù)中國農(nóng)藥可濕性粉劑質(zhì)量要求，設(shè)定甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1可濕性粉劑的潤濕時(shí)間、懸浮率和pH的期望值范圍。通過Minitab軟件優(yōu)化得到了1個(gè)最優(yōu)的助劑組成配方范圍，即Morwet D-500和Petro AA的質(zhì)量分?jǐn)?shù)范圍分別為15%～17%和10%～14%時(shí)，其潤濕時(shí)間在53.85～66.08 s，懸浮率為68.83%～70.84%。

在此范圍內(nèi)任選一點(diǎn)作為驗(yàn)證制劑的配方，配方質(zhì)量組成為：白炭黑:Morwet D-500:Petro AA=72:16:12?；隍?yàn)證配方制成的可濕性粉劑，實(shí)測理化指標(biāo)與預(yù)測值接近，說明該預(yù)測范圍內(nèi)的制劑配方具有可行性。

2.5 甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1可濕性粉劑的效果研究

2.5.1 甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1可濕性粉劑對番茄的促生作用 從圖5可以看出，與對照相比，3個(gè)不同處理的NKG-1可濕性粉劑灌根對植株均有明顯的促生作用。NKG-1可濕性粉劑灌根后的番茄苗與對照組相比生長勢強(qiáng)，莖部粗壯，根系尤為發(fā)達(dá)，鮮重、干重、株高以及根長與對照相比均增加顯著。其中在NKG-1可濕性粉劑100倍液處理組中，促生效果尤其顯著，鮮重、干重、株高以及根長與對照相比，分別增加了53.34%、61.01%、88.02%、78.53%（表5）。

表5 不同濃度NKG-1可濕性粉劑灌根對番茄的促生作用

圖5 NKG-1可濕性粉劑不同稀釋倍數(shù)對番茄的促生效果

2.5.2 甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1可濕性粉劑對番茄灰霉病的預(yù)防作用 由圖6可以看出，隨著NKG-1可濕性粉劑稀釋倍數(shù)的增加，其防病效果也隨著降低。植株葉片在噴施NKG-1可濕性粉劑100倍液后，與對照相比，能夠有效抑制灰霉菌的侵染，葉片發(fā)病率降低了57.67%，平均防治效果為82.02%（表6），對灰霉菌具有較好的防治作用。

表6 不同NKG-1處理濃度下對番茄灰霉病的防治效果

圖6 灰霉病菌對離體番茄葉片3天的致病性試驗(yàn)

3 討論

本研究以NKG-1為研究對象，通過篩選載體、助劑和混料設(shè)計(jì)確定了其可濕性粉劑組分的最佳配比，達(dá)到了微生物農(nóng)藥相關(guān)的國家標(biāo)準(zhǔn)，通過盆栽試驗(yàn)和離體試驗(yàn)證明了其對番茄的促生效果和對病害的防治效果，為該菌株的開發(fā)和應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。

趙磊[31]、馬新[32]研究表明，不同的載體對可濕性粉劑的性能有不同程度的影響，白炭黑與高嶺土、硅藻土相比具有更大的比表面積和孔容，表明白炭黑具有更好的吸附能力，是多種化學(xué)和生物農(nóng)藥可濕性粉劑制備的重要填料。同時(shí)，這也與本實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果具有一定的相似性。助劑是影響可濕性粉劑性能的另一重要因素，如吐溫-20可以顯著降低蘇云金芽孢桿菌可濕性粉劑的潤濕時(shí)間，聚乙烯醇能夠提升可濕性粉劑的懸浮效果等[33-34]。合理的制劑組分配比是提升制劑效果的重要手段。相較于三角坐標(biāo)法及正交設(shè)計(jì)等傳統(tǒng)方法，本研究利用Minitab軟件進(jìn)行混料設(shè)計(jì)和響應(yīng)預(yù)測，通過合理選取試驗(yàn)點(diǎn)，在降低試驗(yàn)繁瑣程度的同時(shí)，獲得了NKG-1可濕性粉劑載體與助劑間的最佳配方；通過與預(yù)測值比較驗(yàn)證了配方比例的可行性，取得了的良好的試驗(yàn)效果。這與劉盼西等[18]、劉振華等[35]、張致軍等[36]的研究具有異曲同工之處。此外，盆栽試驗(yàn)表明，NKG-1可濕性粉劑100倍液處理后，與對照相比鮮重、干重、株高以及根長分別增加了53.34%、61.01%、88.02%、78.53%，其效果高于相同處理倍數(shù)下的菌株發(fā)酵液；同時(shí)，其對番茄灰霉病的平均防治效果達(dá)到了82.02%，高于菌株發(fā)酵液相同處理倍數(shù)下的60%[19]。這一結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)獨(dú)自研制的NKG-1可濕性粉劑能夠使甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NKG-1充分發(fā)揮防病促生的作用，同時(shí)也表明NKG-1可濕性粉劑具有廣闊的應(yīng)用潛力。

綜上，本研究為NKG-1可濕性粉劑的開發(fā)應(yīng)用提供了理論指導(dǎo)，并具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。然而本研究仍存在些許問題需要完善，如未開展田間試驗(yàn)效果評價(jià)和制劑有效期的測定，因此本研究后續(xù)仍有很多研究需要開展。

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)通過篩選明確了NKG-1可濕性粉劑的最適載體和助劑為白炭黑、Morwet D-500以及PetroAA，通過混料設(shè)計(jì)確定了NKG-1可濕性粉劑的最優(yōu)質(zhì)量配比為白炭黑：Morwet D-500:Petro AA=72:16:12，同時(shí)，盆栽番茄經(jīng)NKG-1可濕性粉劑100倍液處理后，其鮮重、干重、株高以及根長分別較清水對照增加了53.34%、61.01%、88.02%、78.53%，且其對番茄灰霉病的平均防治效果達(dá)到了82.02%。綜合研究表明，本研究研制的NKG-1可濕性粉劑具有廣闊的應(yīng)用潛力。