擬穴青蟹軟顆粒飼料的制備與應(yīng)用

林國(guó)文

（福建省閩東水產(chǎn)研究所，福建 寧德 352100）

0 引言

擬穴青蟹(Scylla paramamosain)屬甲殼綱，十足目，梭子蟹科，青蟹屬，俗稱“蟳”、青蟹、蝤蛑、黃甲蟹，主要分布于福建、廣東、廣西、浙江等沿海地區(qū)，其適應(yīng)環(huán)境強(qiáng)、生長(zhǎng)速度快、肉質(zhì)鮮美、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，兼有滋補(bǔ)強(qiáng)身之功效，是中國(guó)海水養(yǎng)殖重要品種[1]。國(guó)內(nèi)的一些科研機(jī)構(gòu)及學(xué)者先后對(duì)擬穴青蟹的遺傳多樣性[1]、CYP302al基因的克隆及表達(dá)模式分析[2]、人工雜交技術(shù)[3]、室內(nèi)高效人工育苗技術(shù)[4]、養(yǎng)殖技術(shù)[5]、養(yǎng)殖模式分析[6]、工廠化養(yǎng)殖[7-8]、“蟹公寓”養(yǎng)殖[9-10]開(kāi)展了系列研究并取得一定成果。隨著人們對(duì)擬穴青蟹需求的不斷提高，對(duì)其進(jìn)行規(guī)?；B(yǎng)殖探索就成為一種必然趨勢(shì)?！靶饭ⅰ别B(yǎng)殖，一蟹一盒避免互相殘殺、病害相互感染，自然災(zāi)害可控，提高了青蟹養(yǎng)殖成活率，實(shí)現(xiàn)了立體式精養(yǎng)，同時(shí)工廠化專用育肥、育膏養(yǎng)殖設(shè)備的采用，提高了養(yǎng)殖效益，促進(jìn)擬穴青蟹養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。

軟顆粒飼料，又稱濕顆粒飼料，是以新鮮或冰凍的鮮雜魚(yú)為主，按一定比例加入粉料、特定營(yíng)養(yǎng)成分和粘合劑，通過(guò)攪拌混合，經(jīng)軟顆粒機(jī)擠壓成型，可直接投喂或冷凍后投喂。其綜合了鮮雜魚(yú)等生物餌料和配合飼料的長(zhǎng)處，操作靈活、誘食性好、易消化吸收，還可根據(jù)不同生長(zhǎng)階段調(diào)整營(yíng)養(yǎng)成分，提高飼料利用率，減少殘餌污染水質(zhì)和病害發(fā)生，在大黃魚(yú)[11]、真鯛[12]、軍曹魚(yú)[13]養(yǎng)殖中得到較廣應(yīng)用。國(guó)內(nèi)外對(duì)擬穴青蟹飼料研發(fā)較少且起步較晚，養(yǎng)殖所用的飼料仍以小魚(yú)蝦、貝類等鮮料為主，它不易保存，易帶致病菌，投喂后易腐爛敗壞水質(zhì)，造成病害流行，不利于擬穴青蟹養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展。目前，相關(guān)學(xué)者開(kāi)展了青蟹營(yíng)養(yǎng)需求及配合飼料研制[14]、鋸緣青蟹系列配合飼料飼養(yǎng)[15]、營(yíng)養(yǎng)需求及健康養(yǎng)殖[16]等研究，人工餌料主要集中在配合飼料，雖然營(yíng)養(yǎng)成分較均衡，但是配合飼料在水中泡發(fā)后容易發(fā)生溶散，同時(shí)因其誘食性不佳，導(dǎo)致飼料攝食率不高，養(yǎng)殖效果不顯著。目前僅見(jiàn)黃偉卿等[17]報(bào)道了軟顆粒飼料對(duì)“紅膏蟹”培育生長(zhǎng)、存活和營(yíng)養(yǎng)成分的影響報(bào)道。本試驗(yàn)采用“蟹公寓”對(duì)大規(guī)格擬穴青蟹進(jìn)行育肥，探究軟顆粒飼料對(duì)擬穴青蟹的生長(zhǎng)、存活以及營(yíng)養(yǎng)成分的影響，以期為育肥擬穴青蟹軟顆粒飼料的制備及應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 軟顆粒飼料的制備

以70%冰鮮藍(lán)圓鯵肉攪碎作為飼料基礎(chǔ)，添加15%鰻粉、3%磷酸二氫鈣、2%石花粉、以及10%魚(yú)油，充分?jǐn)嚢杈鶆?，?jīng)軟顆粒機(jī)擠壓固定成型，再經(jīng)過(guò)100℃蒸煮15 min制得軟顆粒飼料。

1.2 軟顆粒飼料溶散率測(cè)定

先稱取一份未浸水的飼料，置105℃烘箱內(nèi)烘干24 h至恒重，計(jì)算含水率X。試驗(yàn)共設(shè)10個(gè)試驗(yàn)組，每組設(shè)2個(gè)平行，稱取M1重量的軟顆粒飼料樣品放入海水中浸泡，水溫為24℃，分別于浸泡1、2、3、4、5、6、7、8、9、10 h后取出飼料，置于105℃烘箱內(nèi)烘干24 h至恒重M2。飼料溶散率的計(jì)算見(jiàn)公式(1)。

式中，S為溶散率，%；X為含水率，%；M1為軟顆粒飼料初始質(zhì)量，g；M2為浸泡特定時(shí)間后烘干24 h至恒重的質(zhì)量，g。

1.3 軟顆粒飼料營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

縊蟶和試驗(yàn)組的軟顆粒飼料委托福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所，測(cè)定其粗蛋白、粗脂肪、粗灰分和水分。粗蛋白測(cè)定方法采用凱氏定氮法GB/T 6432—2018，粗脂肪測(cè)定方法采用GB/T 6433—2006，粗灰分測(cè)定方法采用GB/T 6438—2007，水分測(cè)定方法采用GB/T 6435—2014。

1.4 擬穴青蟹的來(lái)源及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2018年10月從三都澳海區(qū)收購(gòu)平均體質(zhì)量為(261.44±24.62)g的海區(qū)擬穴青蟹，從中挑選出體格健壯、無(wú)病害、無(wú)損傷的健康雌蟹，運(yùn)至寧德市鼎誠(chéng)水產(chǎn)有限公司青蟹養(yǎng)殖基地。

試驗(yàn)共設(shè)1個(gè)試驗(yàn)組和1個(gè)對(duì)照組，每組設(shè)3個(gè)平行，每個(gè)平行10只擬穴青蟹，放置于工廠化養(yǎng)殖設(shè)施“蟹公寓”（每個(gè)蟹盒規(guī)格：長(zhǎng)×寬×高=360 mm×260 mm×270 mm）進(jìn)行養(yǎng)殖，每個(gè)養(yǎng)殖盒放養(yǎng)1只擬穴青蟹，試驗(yàn)組投喂軟顆粒飼料，對(duì)照組投喂鮮活的縊蟶(Sinonovacula constricta)。日投喂飼料兩次，投喂時(shí)間為6:00和18:00，投喂量為青蟹體質(zhì)量的8%～10%；養(yǎng)殖用水采用流水方式，養(yǎng)殖條件：pH 7.8～8.2，水溫24～28℃，且日溫差不超過(guò)2℃，鹽度18～24，溶解氧＞5 mg/L，氨氮＜0.2 mg/L；每日定時(shí)清除死蟹、殘餌及排泄物并記錄水質(zhì)變化、活動(dòng)及攝食等情況。

1.5 擬穴青蟹生長(zhǎng)數(shù)據(jù)計(jì)算

養(yǎng)殖45天后，統(tǒng)計(jì)存活的擬穴青蟹數(shù)量，并用電子天平稱重，計(jì)算成活率、增重率及特定增長(zhǎng)率，見(jiàn)公式(2)～(4)。

式中，n為試驗(yàn)初青蟹數(shù)量，只；N為試驗(yàn)?zāi)┣嘈窋?shù)量，只；m1為試驗(yàn)初體質(zhì)量，g；m2為試驗(yàn)?zāi)w質(zhì)量，g；t為養(yǎng)殖時(shí)間，d。

1.6 擬穴青蟹營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

試驗(yàn)結(jié)束后，取擬穴青蟹生殖腺和肌肉，每個(gè)樣品200 g，委托福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所進(jìn)行氨基酸和脂肪酸的測(cè)定。氨基酸和脂肪酸的測(cè)定方法分別采用GB 5009.124—2016和GB 5009.168—2016。

1.7 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 17.0軟件處理，用單因素方差分析對(duì)結(jié)果進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 軟顆粒飼料溶散率及營(yíng)養(yǎng)組成

軟顆粒飼料浸泡于養(yǎng)殖海水中，隨著浸泡時(shí)間的增加，其飼料溶散率也隨之增加。軟顆粒飼料在1 h時(shí)，溶散率為0.41%，1～7 h溶散率穩(wěn)步增加，從0.41%增加到13.22%；7～10 h溶散率相對(duì)比較穩(wěn)定，維持在13%～14%之間，10 h溶散率為14.29%（見(jiàn)圖1）。

圖1 軟顆粒飼料隨時(shí)間變化的溶散率

軟顆粒飼料在濕重狀態(tài)下水分為51.6%，粗蛋白和粗脂肪含量分別為21.8%和0.84%，對(duì)照組鮮蟶的水分含量為85.6%，粗蛋白與粗脂肪含量分別為7.41%和0.71%?？鄢郑芍貭顟B(tài)下縊蟶的粗蛋白和粗脂肪的含量分別為51.46%和4.93%，高于軟顆粒飼料，分別為45.04%和1.74%（見(jiàn)表1）。

表1 不同飼料營(yíng)養(yǎng)成分表

2.2 軟顆粒飼料養(yǎng)殖擬穴青蟹效果

經(jīng)過(guò)45天養(yǎng)殖，試驗(yàn)組成活率、增重率和特定增長(zhǎng)率（分別為90.48%、34.62%和0.64%/d）均高于對(duì)照組（分別為71.43%、14.38%和0.29%/d）（見(jiàn)表2）。

表2 不同飼料對(duì)擬穴青蟹養(yǎng)殖效果的影響

2.3 軟顆粒飼料對(duì)擬穴青蟹氨基酸和脂肪酸含量的影響

本試驗(yàn)擬穴青蟹共檢測(cè)出17種氨基酸，包含除色氨酸以外的7種人體必需氨基酸(essential amino acid,EAA)和4種呈味氨基酸(delicious amino acid,DAA)。試驗(yàn)組青蟹肌肉和生殖腺各氨基酸含量均高于對(duì)照組（表3）。試驗(yàn)組青蟹氨基酸總量(total amino acid,TAA)、必須氨基酸含量和呈味氨基酸含量（肌肉：分別為9.19%、2.9%和3.96%；生殖腺：分別為6.87%、2.39%和2.63%）高于對(duì)照組（肌肉：分別為7.58%、2.53%和3.27%；生殖腺：分別為5.30%、1.80%和2.14%）。必需氨基酸中，均以賴氨酸與亮氨酸含量最高，甲硫氨酸含量最低；呈味氨基酸均以谷氨酸含量最高，天冬氨酸含量次之，蘇氨酸含量最低。試驗(yàn)組與對(duì)照組青蟹肌肉和生殖腺中EAA/TAA和DAA/TAA比值差異不明顯。詳見(jiàn)表3。

表3 不同飼料投喂的擬穴青蟹氨基酸含量（鮮樣）

擬穴青蟹肌肉和生殖腺的脂肪酸檢測(cè)結(jié)果詳見(jiàn)表4。對(duì)照組飽和脂肪酸(saturated fatty acids,SFA)含量（肌肉54.0%，生殖腺45.5%）高于試驗(yàn)組（肌肉33.1%，生殖腺33.2%），對(duì)照組飽和脂肪酸以C16:0為主，試驗(yàn)組青蟹肌肉以C15:0比例最高；試驗(yàn)組不飽和脂肪酸(unsaturated fatty acids,UFA)肌肉和生殖腺含量分別為55.2%和44.4%，高于對(duì)照組，分別為34.3%與35.7%，試驗(yàn)組單不飽和脂肪酸(monounsaturated fatty acid,MUFA)、多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA)以及多不飽和脂肪酸中的ω-3系列含量均高于對(duì)照組。試驗(yàn)組青蟹的肌肉和生殖腺EPA+DHA含量分別為22.1%和14.1%，高于對(duì)照組，分別為8.2%和4.8%。

表4 不同飼料投喂的擬穴青蟹脂肪酸組成

3 討論

3.1 軟顆粒飼料的特點(diǎn)及養(yǎng)殖擬穴青蟹的可行性分析

工廠化養(yǎng)殖擬穴青蟹新模式，需要解決餌料投喂污染水體及影響擬穴青蟹攝食效果等問(wèn)題，王興春[18]、林建斌[19]和林旋等[20]的研究結(jié)果證實(shí)，養(yǎng)殖過(guò)程中投喂軟顆粒飼料的殘餌較投喂雜魚(yú)的為少，投餌后水體中的總氮、總磷和COD也顯著小于投喂雜魚(yú)的，起到保護(hù)養(yǎng)殖環(huán)境、提高養(yǎng)殖成活率的作用。本試驗(yàn)制作的軟顆粒飼料養(yǎng)殖擬穴青蟹，其成活率、生長(zhǎng)速度和營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)均優(yōu)于對(duì)照組，說(shuō)明制作的軟顆粒飼料是可行的。

青蟹的攝食方式是依靠觸角上的嗅覺(jué)找尋食物，用鰲足鉗住遞交給第三步足，由第三步足傳遞至大顎至口邊，由大顎將食物切斷磨碎，最后食物經(jīng)食道進(jìn)入胃部的特點(diǎn)，這對(duì)軟顆粒飼料的大小、形狀要求高，本試驗(yàn)配制的軟顆粒飼料為直徑不小于20 mm圓球，適口性好，且溶散率低，浸泡1 h和10 h時(shí)溶散率分別為0.41%與14.29%，低于市場(chǎng)上大黃魚(yú)軟顆粒飼料1 h和10 h溶散率（分別為4.64%～5.63%和42.04%～47.74%）[20]，說(shuō)明本試驗(yàn)制作的軟顆粒飼料適口性和穩(wěn)定性良好。

水產(chǎn)飼料的優(yōu)劣還在于其誘食性和飼料營(yíng)養(yǎng)成分的均衡。本試驗(yàn)制作的軟顆粒飼料營(yíng)養(yǎng)成分均衡，蛋白質(zhì)與脂質(zhì)主要來(lái)源于藍(lán)圓鯵肉、鰻粉和魚(yú)油，同時(shí)添加磷酸二氫鈣以滿足擬穴青蟹對(duì)鈣的需求，并使用石花粉粘合，質(zhì)地柔軟，誘食性好。通過(guò)營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定，發(fā)現(xiàn)干重狀態(tài)下本試驗(yàn)制備的軟顆粒飼料粗蛋白與粗脂肪分別約為45.04%和1.74%。與董蘭芳等[21]研究的青蟹從溞狀幼體5期到成蟹，配合飼料中蛋白質(zhì)含量為38.0%～45.9%、脂肪含量為6.0%～10.0%能滿足其生長(zhǎng)結(jié)果相似；與王悅等[22]得出的青蟹飼料最適蛋白質(zhì)和脂肪要求分別為42%～46%和6%～8%這一結(jié)論基本一致，與黃瑩等[23]研究表明的采用粗蛋白含量41.33%的膨化配合飼料進(jìn)行擬穴青蟹育肥，成活率達(dá)76.6%顯著高于天然飼料，結(jié)果相同。說(shuō)明本試驗(yàn)制備的軟顆粒飼料可滿足擬穴青蟹對(duì)蛋白質(zhì)和粗脂肪的營(yíng)養(yǎng)需求。

3.2 軟顆粒飼料對(duì)擬穴青蟹生長(zhǎng)和存活的影響

擬穴青蟹養(yǎng)殖過(guò)程中，餌料投喂不當(dāng)，容易造成水質(zhì)惡化，為病菌的滋生提供環(huán)境，引起弧菌病、甲殼潰瘍病、霉菌病等細(xì)菌和霉菌性疾病的發(fā)生，造成養(yǎng)殖擬穴青蟹的大量死亡[24-25]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示試驗(yàn)組的擬穴青蟹成活率和特定增長(zhǎng)率分別為90.48%和0.64%/d，高于縊蟶飼養(yǎng)的對(duì)照組成活率71.43%和特定增長(zhǎng)率0.29%/d。表明試驗(yàn)所用軟顆粒飼料可以有效提高擬穴青蟹的成活率和生長(zhǎng)性能。相比鮮活餌料，軟顆粒飼料在制作過(guò)程中，經(jīng)過(guò)高溫煮熟殺菌，能更有效的防止病菌感染，從而提高了擬穴青蟹養(yǎng)殖成活率。同時(shí)，對(duì)比鮮活餌料，軟顆粒飼料營(yíng)養(yǎng)成分更全面，蛋白質(zhì)含量與脂肪含量配比更合理，且軟顆粒飼料易消化吸收，有助于擬穴青蟹吸收利用，所以投喂軟顆粒飼料的試驗(yàn)組擬穴青蟹特定增長(zhǎng)率顯著高于(P＜0.05)對(duì)照組。

3.3 軟顆粒飼料對(duì)擬穴青蟹氨基酸和脂肪酸的影響

蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高低主要取決于其所含必需氨基酸的種類、數(shù)量和組成比例；呈味氨基酸的高低，也直接決定了食物的鮮美程度和被消費(fèi)者的接受程度[26]。由于采用鹽酸水解蛋白，導(dǎo)致色氨酸被降解，故本試驗(yàn)青蟹共檢測(cè)出17種常見(jiàn)氨基酸（包含7種EAA和4種DAA），與劉曉等[27]和黃愛(ài)霞等[28]檢測(cè)出17種常見(jiàn)氨基酸結(jié)果一致；黃愛(ài)霞等[28]研究表明野生擬穴青蟹硬殼蟹呈味氨基酸總量顯著低于養(yǎng)殖擬穴青蟹，與本試驗(yàn)結(jié)論相同，但必需氨基酸比例野生的顯著高于養(yǎng)殖的擬穴青蟹，與本試驗(yàn)得出的結(jié)果相反，這可能與其研究的養(yǎng)殖擬穴青蟹來(lái)源、養(yǎng)殖方式、養(yǎng)殖飼料等因素有關(guān)，有待進(jìn)一步探討?？傊囼?yàn)組擬穴青蟹肌肉和生殖腺EAA和DAA含量（肌肉：2.9%和3.96%；生殖腺：2.39%和2.63%）均高于對(duì)照組（肌肉：2.53%和3.27%；生殖腺：1.80%和2.14%），說(shuō)明軟顆粒飼料飼喂的擬穴青蟹營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和鮮味優(yōu)于縊蟶飼喂的擬穴青蟹。

脂肪酸的組成在一定條件下可以反映肌體的健康水平、攝食情況和營(yíng)養(yǎng)水平[29]。飽和脂肪酸SFA攝入量過(guò)高會(huì)導(dǎo)致膽固醇升高，繼發(fā)引起動(dòng)脈管腔狹窄，形成動(dòng)脈粥樣硬化，增加患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)[30]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示軟顆粒飼料試驗(yàn)組擬穴青蟹肌肉和生殖腺中飽和脂肪酸SFA含量（肌肉：33.1%；生殖腺：37.2%）均低于對(duì)照組（肌肉：54.0%；生殖腺：45.5%），說(shuō)明軟顆粒飼喂的擬穴青蟹更有利于人體健康。研究表明不飽和脂肪酸中的MUFA有降低膽固醇的作用，而PUFA是維持細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和機(jī)能完整性的重要成分，對(duì)于多種疾病具有較好的免疫調(diào)節(jié)作用[31–32]。PUFA主要分為ω-3系列和ω-6系列，ω-3系列又以EPA和DHA為主，具有抗炎癥、抗血栓形成、降低心腦血管等疾病，同時(shí)對(duì)嬰幼兒腦部發(fā)育起到極其重要的作用，本試驗(yàn)試驗(yàn)組擬穴青蟹的MUFA、EPA+DHA含量（肌肉：18.5%和22.1%；生殖腺：20.5%和14.1%）均比相應(yīng)對(duì)照組高（肌肉：15.4%和8.2%；生殖腺：17.7%和4.8%），說(shuō)明本試驗(yàn)所制作的軟顆粒飼料較縊蟶更優(yōu)，具有改善擬穴青蟹脂肪酸品質(zhì)的效果。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)制作的軟顆粒飼料，無(wú)論在誘食性、穩(wěn)定性，還是在飼養(yǎng)成活率和特定生長(zhǎng)率上均有顯著優(yōu)勢(shì)。飼喂軟顆粒飼料的擬穴青蟹在總氨基酸、必需氨基酸和呈味氨基酸含量上均高于鮮料投喂的對(duì)照組，不僅如此，投喂軟顆粒飼料組的擬穴青蟹在不飽和脂肪酸含量上也顯著高于對(duì)照組，說(shuō)明本試驗(yàn)所制作的軟顆粒飼料可以有效代替鮮料，為擬穴青蟹軟顆粒飼料的研發(fā)提供了參考。