血流感染大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌耐藥性分析

孫榮

[摘要]目的探討徐州市中醫(yī)院住院患者血流感染分離的大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌臨床分布情況，并對耐藥性予以分析，為臨床抗感染治療提供參考。方法收集2018年1月1日至2021年11月29日大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌所致血流感染的住院患者共102例，采用DL-96II細(xì)菌測定系統(tǒng)對分離出的菌株進(jìn)行藥敏鑒定，通過WHONET5.6醫(yī)學(xué)軟件統(tǒng)計(jì)，并予以數(shù)據(jù)分析。結(jié)果102例血培養(yǎng)標(biāo)本中共分離出大腸埃希菌72株，肺炎克雷伯菌30株，其中產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）大腸埃希菌為35株（48.61%），產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌為11株（36.67%），產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的耐藥率高于非產(chǎn)ESBLs菌株;耐碳青霉烯類大腸埃希菌（CR-ECO）與耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌（CR-KP）分別為1株、8株，檢出率分別為1.39%、26.67%，CR-ECO對所有抗菌藥物耐藥率為100%，CR-KP對復(fù)方新諾明、氯霉素耐藥率分別為37.50%、50.00%，其余藥物耐藥率均>70%。重癥監(jiān)護(hù)室（ICU）分離的菌株數(shù)占首位。結(jié)論徐州市中醫(yī)院ICU血流感染分離的大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌耐藥形勢嚴(yán)峻，且具有多重耐藥菌株，合理使用抗菌藥物迫在眉睫。

[關(guān)鍵詞]血流感染;產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶;大腸埃希菌;肺炎克雷伯菌;耐藥性

[中圖分類號]R446.5

[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A

[文章編號]2095-0616（2022）11-0143-04

血流感染（bloodstream infections，BSI）是由多種病原微生物侵入血流所引起的，可引起一系列嚴(yán)重的臨床癥狀，如寒戰(zhàn)高熱、肝脾腫大、彌漫性血管內(nèi)凝血（disseminated intravascular coagulation，DIC）及多臟器功能衰竭等[1]。大腸埃希菌（Eschericha coli，E.coli）和肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae，KP）是引起B(yǎng)SI主要病原體之一。近年來由于廣譜抗生素的廣泛應(yīng)用，產(chǎn)生超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（extended spectrum β-lactamase，ESBLs）菌株

的數(shù)量顯著增加，同時(shí)耐碳青霉烯類大腸埃希菌（carbapenem-resistant eschericha coli，CR-ECO）與耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌（carbapenem-resistant K.pneumonia，CR-KP）已在世界范圍內(nèi)流行和傳播[2]，細(xì)菌耐藥性日益嚴(yán)重，臨床治療也面臨嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。本研究分析徐州市中醫(yī)院引起血流感染的大腸埃希菌與肺炎克雷伯的耐藥性，為臨床合理使用抗菌藥物提供幫助。

1資料與方法

1.1一般資料

收集2018年1月1日至2021年11月29日徐州市中醫(yī)院臨床各個(gè)科室送檢疑似BSI患者的血培養(yǎng)標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)，檢出大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌共102例，其中男50例，女52例，平均年齡（56.00±16.97）歲。

1.2納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：1年齡≥18周歲;2同一患者連續(xù)多次分離出同一菌株，將第1次血培養(yǎng)結(jié)果納入統(tǒng)計(jì)資料，且達(dá)到血流感染診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。排除標(biāo)準(zhǔn)：1住院時(shí)間≤2d;2病例資料不全;3將同一患者、同一部位、同一菌株的情況去除。

1.3儀器與試劑

BDBACTECTM9120/9240全自動(dòng)微生物血培養(yǎng)儀及其配套血培養(yǎng)瓶為美國BD公司產(chǎn)品;細(xì)菌藥敏鑒定系統(tǒng)（設(shè)備型號：DL-96II）及相應(yīng)配套試劑由珠海迪爾生物有限公司提供。

1.4細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)

細(xì)菌的分離、培養(yǎng)方式均參照第三版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[4]進(jìn)行，采用DL-96II進(jìn)行藥敏鑒定。參考美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化（clinical and laboratory standardsinstitute，CLSI）[5]中規(guī)定開展，按照敏感（S）、耐藥（M）、中介（I）對15種常用抗菌藥物進(jìn)行判讀，大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌質(zhì)控菌株分別為ATCC25922、ATCC700603。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

建立Excel數(shù)據(jù)庫，通過SSPS17.0及WHONET5.6醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件，并予以數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]，組間比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌科室分布情況

共檢出大腸埃希菌72株，15株來源于ICU，占20.83%，位于首位;其次是泌尿外科、腎內(nèi)科、呼吸內(nèi)科，分別占15.28%、13.89%、12.50%;30株肺炎克雷伯菌中，11株肺炎克雷伯菌來源于ICU，占36.67%，神經(jīng)內(nèi)科、腫瘤科、呼吸內(nèi)科依次占13.33%、10.00%、10.00%，見表1。

2.2大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌耐藥性分析

共檢出72株大腸埃希菌和30株肺炎克雷伯菌，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對氨芐西林耐藥率均>80%，位居首位，其次為頭孢曲松，均>60%，肺炎克雷伯菌對哌拉西林/他?巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦、亞胺培南、美羅培南耐藥率分別為30.67%、40.67%、26.67%、23.33%，明顯高于大腸埃希菌;肺炎克雷伯菌對氨基糖苷類抗菌藥物耐藥率均高于大腸埃希菌，而對于氟喹諾酮類抗菌藥物，大腸埃希菌耐藥率普遍高于肺炎克雷伯菌，見表2。

2.3產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌與非產(chǎn)ESBLs菌株耐藥性分析

共檢出產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的菌株數(shù)35株，占48.61%，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的菌株數(shù)11株，占36.67%。產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對氨芐西林、頭孢曲松耐藥率均>90%;產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對頭孢菌素類、喹諾酮類抗菌藥物耐藥率高于非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌。產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌、產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌和非產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌均對頭孢曲松、頭孢吡肟和慶大霉素的耐藥性比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表3～4。

2.4大腸埃希菌（CR-ECO）和肺炎克雷伯菌（CR-KP）耐藥性分析

檢出CR-ECO菌株1株，CR-KP菌株8株，檢出率分別為1.39%、26.67%，CR-ECO對所有抗菌藥物耐藥率為100%，CR-KP對復(fù)方新諾明、氯霉素耐藥率分別為37.50%、50.00%，其余藥物耐藥率均>70%，見表5。

3討論

BSI是一種嚴(yán)重的臨床感染性疾病，其病程發(fā)展迅速、致死率高，血培養(yǎng)是診斷BSI主要依據(jù)[6]。本研究結(jié)果顯示，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌所致血流感染患者主要分布在ICU，分別占20.83%、36.67%，這與展冠軍等[7]報(bào)道相似，這可能與ICU住院患者基礎(chǔ)疾病嚴(yán)重、住院時(shí)間較長、各種侵入性操作（機(jī)械通氣、器官插管吸痰）較多、抗菌藥物使用較長等多種因素有關(guān)[8]。從年齡分布來看，血流感染大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的患者主要為老年患者，老年患者免疫力低下，易產(chǎn)生心腦血管肌疾病、糖尿病等多種基礎(chǔ)疾病，也增加了BSI感染的機(jī)會[9]。

近年來，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢出率逐漸上升，成為引起血流感染的常見的革蘭陰性菌。據(jù)2013年中國CHINET細(xì)菌耐藥監(jiān)測數(shù)據(jù)顯示，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌屬的檢出率分別為54.00%和31.80%[10]，顯然，產(chǎn)ESBLs菌株已成為威脅人們健康的公共問題。本研究結(jié)果表明，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌檢出率分別為48.61%、36.67%，且其耐藥率明顯高于非產(chǎn)ESBLs菌株。產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對環(huán)丙沙星、復(fù)方新諾明、左氧氟沙星耐藥率分別為71.42%、68.57%、54.28%，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對頭孢吡肟、慶大霉素耐藥率為81.81%、63.63%，這與多篇報(bào)道基本一致[11-13]，ESBLs在細(xì)菌間通過質(zhì)粒傳播，在水解β-內(nèi)酰胺抗生素的同時(shí)攜帶氨基糖苷類、喹諾酮類等耐藥基因，形成了多重耐藥菌株，導(dǎo)致細(xì)菌感染暴發(fā)和流行[14]。本研究結(jié)果表明，大腸埃希菌對亞胺培南、美羅培養(yǎng)、哌拉西林/他?巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦具有較好的敏感性，這些抗菌藥物可優(yōu)先選用大腸埃希菌引起的血流感染，肺炎克雷伯菌對哌拉西林/他?巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率相對于大腸埃希菌較高，可能與產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌檢出高于大腸埃希菌有關(guān)，這與王莉潔等[12]報(bào)道有所不同，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌與產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌耐藥率可能與地區(qū)差異有關(guān)。

近年來，隨著碳青霉烯類抗生素在臨床上廣泛應(yīng)用，碳青霉烯類耐藥菌株開始流行和傳播，據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，CR-ECO菌株和CR-KP菌株致死率呈明顯上升的趨勢[15]，本研究檢出CR-ECO和CR-KP共9株，檢出率分別為1.39%、26.67%，雖然低于張琴等[16]報(bào)道，但CR-ECO對所有抗菌藥物耐藥率為100%，CR-KP對復(fù)方新諾明、氯霉素耐藥率分別為37.50%、50.00%，其余藥物耐藥率均>70%，高耐藥率應(yīng)引起醫(yī)務(wù)人員的重視，碳青霉烯類耐藥菌株主要產(chǎn)生碳青霉烯酶，CR-ECO主要產(chǎn)NDM型金屬酶，CR-KPN主要產(chǎn)KPC型和OXA-48型酶[17]。因?yàn)槟吞记嗝瓜╊惥昃哂袕V泛的耐藥特點(diǎn)，所以臨床微生物實(shí)驗(yàn)室開展耐碳青霉烯菌耐藥表型檢測及體外聯(lián)合藥敏試驗(yàn)就更加重要。

綜上所述，徐州市中醫(yī)院大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌所致血流感染的耐藥情況不容樂觀，由于同一菌可能會同時(shí)株攜帶多種耐藥基因，血流感染的治療更加面臨嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。加強(qiáng)對大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌耐的藥情況及時(shí)有效的監(jiān)測，對合理使用抗生素、降低血流感染致死率具有重要意義。

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（收稿日期：2022-01-04）