血清視黃醇結(jié)合蛋白、胱抑素C、基質(zhì)金屬蛋白酶9與急性腦梗死患者頸動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)性

施 銳,陳 猛 (張家界市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南 張家界 427000)

急性腦梗死(ACI)是目前臨床上常見(jiàn)的腦卒中類型，具有發(fā)病率高、致死致殘率高、進(jìn)展快速等特點(diǎn)，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[1-2]。ACI發(fā)病機(jī)制比較復(fù)雜，影響因素主要是血栓形成、腦動(dòng)脈硬化、動(dòng)脈狹窄等引起腦部供血障礙或腦血管灌注不足而導(dǎo)致腦組織壞死[3]。而頸動(dòng)脈粥樣硬化是我國(guó)居民發(fā)生缺血性腦卒中的主要原因[4]。血清視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)具有加重脂質(zhì)代謝紊亂的作用，還能合成大量炎性物質(zhì)，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生及進(jìn)展[5]；胱抑素(Cys)-C參與了動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成與消退，而且與斑塊的穩(wěn)定性密切相關(guān)[6]；基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9與動(dòng)脈血管基膜的破壞以及頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成相關(guān)[7]，這些血清學(xué)指標(biāo)均與頸動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、進(jìn)展密切相關(guān)，是ACI患者頸動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)因素。本研究分析RBP、Cys-C、MMP9與ACI患者頸動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系，為臨床醫(yī)生的診療工作提供參考，達(dá)到早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)的目標(biāo)，以減少腦血管事件的發(fā)生。

1 資料與方法

1.1一般資料：收集2020年1月～2020年12月在本院神經(jīng)內(nèi)科收治的112例ACI患者作為ACI組，其中男60例，女52例；年齡30～70歲，平均(56.34±10.58)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)《中國(guó)腦梗死中西醫(yī)結(jié)合診治指南》(2017)的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，所有入組患者起病后24 h內(nèi)入院，均符合腦梗死的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并且經(jīng)過(guò)頭部磁共振成像證實(shí)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①肝腎功能受損嚴(yán)重；②自身免疫系統(tǒng)障礙；③有顱內(nèi)腫瘤史或顱腦損傷、出血史；④未進(jìn)行藥物控制的高血壓患者；⑤近期有服用抗凝藥物史；⑥惡行腫瘤患者。根據(jù)彩色多普勒超聲檢查頸動(dòng)脈內(nèi)-中膜厚度(IMT)測(cè)量值分為正常組31例，輕度狹窄組22例、中度狹窄組29例、重度狹窄組30例。并根據(jù)斑塊的特點(diǎn)分為無(wú)斑塊組28例，穩(wěn)定斑塊組45例，不穩(wěn)定斑塊組39例。選擇同期體檢中心健康體檢者100例為對(duì)照組，其中男54例，女46例；年齡30～70歲，平均(55.78±9.77)歲。兩組患者的年齡、性別等比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。所有入組的研究對(duì)象均簽署知情同意書，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)且備案。

1.2血清學(xué)檢測(cè)方法：研究對(duì)象空腹8 h以上于第2天8點(diǎn)左右抽取靜脈血3 ml，靜置30 min后離心，轉(zhuǎn)速3 000 r/min 10 min，取上清液待檢。RBP、Cys-C檢測(cè)儀器為日立7600全自動(dòng)生化分析儀，試劑為北京九強(qiáng)生物有限公司生產(chǎn)的配套試劑。RBP采用免疫透射比濁法；Cys-C檢測(cè)免疫透射比濁法。MMP-9采用ELISA雙抗體夾心法。所有檢測(cè)項(xiàng)目嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行，室內(nèi)質(zhì)控、陰陽(yáng)對(duì)照均在控。

1.3超聲檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：采用美國(guó)GE公司IU-9000彩超儀進(jìn)行測(cè)量。患者采用仰臥位，探頭的頻率5～10 Hz，探測(cè)雙側(cè)頸動(dòng)脈以及分叉處的血流信號(hào)，測(cè)定頸動(dòng)脈血管的內(nèi)徑、內(nèi)膜以及IMT值。狹窄率=(1-狹窄處的管腔內(nèi)徑)/狹窄處遠(yuǎn)端的正常管腔的內(nèi)徑。判斷標(biāo)準(zhǔn)：<30%為輕度狹窄，30%～69%為中度狹窄，70%～99%為重度狹窄。另外，同時(shí)測(cè)定動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的部位以及性質(zhì)，根據(jù)腦卒中患者血管超聲檢查指導(dǎo)規(guī)范按斑塊超聲特點(diǎn)進(jìn)行分組：以強(qiáng)回聲、中等回聲為主且表面光滑的斑塊定義為穩(wěn)定斑塊，以混合回聲、低回聲為主且表面粗糙的斑塊定義為不穩(wěn)定斑塊。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t及χ2檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1兩組RBP、Cys-C、MMP-9水平比較:ACI組血清RBP、Cys-C、MMP-9水平顯著高于對(duì)照組，ACI組IMT值顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組RBP、Cys-C、MMP-9水平比較

2.2ACI組不同狹窄程度患者RBP、Cys-C、MMP-9水平比較：隨著頸動(dòng)脈狹窄程度的增加，ACI組患者RBP、Cys-C、MMP-9水平在正常組、輕度狹窄組、中度狹窄組、重度狹窄組中逐漸升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 不同狹窄程度患者RBP、Cys-C、MMP-9水平比較

2.3ACI組不同斑塊類型患者RBP、Cys-C、MMP-9水平比較 ACI組患者穩(wěn)定斑塊組和不穩(wěn)定斑塊組血清RBP、Cys-C、MMP-9水平明顯高于無(wú)斑塊組，不穩(wěn)定斑塊組高于斑塊穩(wěn)定組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 不同斑塊類型患者 RBP、Cys-C、MMP-9水平比較

2.4ACI患者IMT值與血清RBP、Cys-C、MMP-9水平的相關(guān)性:ACI患者頸動(dòng)脈IMT值與血清RBP、Cys-C、MMP-9水平呈明顯正相關(guān)(P<0.001)，見(jiàn)表4。

表4 ACI患者IMT值與RBP、Cys-C、MMP-9水平的相關(guān)性

3 討論

ACI的發(fā)病機(jī)制比較復(fù)雜，大部分的觀點(diǎn)認(rèn)為是頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成、顱內(nèi)血栓栓塞性物質(zhì)的出現(xiàn)，從而導(dǎo)致顱內(nèi)動(dòng)脈血管的狹窄甚至堵塞，引起腦組織缺血、缺氧甚至壞死，引發(fā)一系列臨床癥狀[8]。據(jù)調(diào)查，大約有80%的ACI患者超聲檢查存在不同程度大小的頸動(dòng)脈粥樣斑塊[9]。頸動(dòng)脈粥樣硬化的形成是逐步發(fā)展的，病理因素主要涉及內(nèi)皮功能障礙、血流動(dòng)力學(xué)改變、炎癥刺激等[10]。

RBP是人體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)維生素的一種蛋白，由肝細(xì)胞分泌，廣泛分布于血液、腦脊液、體液中。以往RBP主要應(yīng)用于腎功能的監(jiān)測(cè)，近年研究發(fā)現(xiàn)RBP是動(dòng)脈硬化形成的標(biāo)志物之一，已經(jīng)發(fā)展成為心腦血管疾病的重要影響因素。RBP定位于富含泡沫細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的區(qū)域，脂質(zhì)豐富，導(dǎo)致其可能與ACI患者頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成相關(guān)。這主要是由于RBP能夠利用JNK以及STKT1途徑，增加清道夫受體CD36的表達(dá)，再加上RBP能改變酪氨酸激酶的膜分布，促進(jìn)膽固醇的吸收，加劇動(dòng)脈粥樣硬化形成[11]。因此，RBP是ACI頸動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)因素。

Cys-C是半胱氨酸蛋白酶抑制劑家族成員之一，存在于各種組織有核細(xì)胞之中，高水平的 Cys-C可以抑制半胱氨酸蛋白酶活性，參與細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生以及降解，另外還能激活中性粒細(xì)胞參與炎性反應(yīng)[12]。而基質(zhì)的產(chǎn)生、炎性反應(yīng)又是血管動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，因此Cys-C也是ACI患者頸動(dòng)脈粥樣硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

MMP是人體內(nèi)活性高度依賴鈣離子、鋅離子的具有類似化學(xué)性質(zhì)、結(jié)構(gòu)高度同源的蛋白水解酶，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)二十多種MMPs。MMP-9是MMP家族中重要的一員，它在炎性介質(zhì)引發(fā)的病理狀態(tài)下可促使脂質(zhì)內(nèi)的膠原蛋白以及細(xì)胞外基質(zhì)進(jìn)一步降解，導(dǎo)致粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定性加重，誘發(fā)ACI[13]。

本研究結(jié)果顯示，ACI組患者血清RBP、Cys-C、MMP-9水平顯著升高，而且隨著頸動(dòng)脈狹窄程度的增加而逐漸升高，提示我們這些檢測(cè)指標(biāo)與ACI患者頸動(dòng)脈粥樣硬化的形成及其嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。分析原因這主要是由于RBP、Cys-C、MMP-9影響了頸部血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷后的修復(fù)能力，促使血脂蓄積而誘發(fā)頸部血管發(fā)生病變，參與ACI的發(fā)生、發(fā)展。頸動(dòng)脈受損程度越嚴(yán)重，頸動(dòng)脈管腔就會(huì)越狹窄，RBP、Cys-C、MMP-9水平也就越高。本研究還發(fā)現(xiàn)，隨著頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊性質(zhì)從無(wú)斑塊到不穩(wěn)定型斑塊，患者血清中的RBP、Cys-C、MMP-9水平逐漸升高，說(shuō)明RBP、Cys-C、MMP-9水平與斑塊類型密切相關(guān)，參與了頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成及進(jìn)展。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)更加證明了RBP、Cys-C、MMP-9是頸動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的危險(xiǎn)因素，這與李晶等[14-15]的報(bào)道一致。

綜上所述，血清RBP、Cys-C、MMP-9水平在ACI患者中明顯升高，并且與頸動(dòng)脈粥樣硬化的程度、斑塊性質(zhì)密切相關(guān)。但本次研究樣本量比較小，可能會(huì)存在一定的選擇偏倚，有待日后進(jìn)行前瞻性設(shè)計(jì)并加大樣本量進(jìn)行更深度研究。