• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    大豆開花期性狀QTL定位和候選基因挖掘

    2022-07-08 09:26:14劉薇王玉斌李偉張禮鳳王彩潔徐冉戴海英張彥威
    中國油料作物學(xué)報 2022年3期
    關(guān)鍵詞:開花期同源擬南芥

    劉薇,王玉斌,李偉,張禮鳳,王彩潔,徐冉,戴海英,張彥威

    (山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所/山東省特色作物工程實(shí)驗(yàn)室,山東 濟(jì)南,250100)

    大豆是典型的短日作物,對光周期極為敏感[1,2]。同一品種在不同緯度地區(qū)間引種時,常因日照長度的變化導(dǎo)致開花期提前或延后,造成產(chǎn)量下降甚至顆粒無收。因此,大豆存在單一品種適應(yīng)性狹窄的特性,這一特性給大豆的遠(yuǎn)距離引種和高油高蛋白等優(yōu)良品種的全國性推廣帶來巨大困難。關(guān)注大豆開花位點(diǎn)及關(guān)鍵基因調(diào)控開花的分子機(jī)制,對培育廣適性大豆品種具有重要的指導(dǎo)意義。

    QTL定位方法的發(fā)展促進(jìn)了大豆開花等數(shù)量性狀相關(guān)位點(diǎn)的發(fā)掘。截至目前,大豆的開花期主效位點(diǎn)E1~E11,J和Tof11,Tof12相繼被發(fā)現(xiàn)[3]。其中E系列基因中的E1~E4與大豆品種的生態(tài)適應(yīng)性密切相關(guān)。E1編碼豆科植物特有的轉(zhuǎn)錄因子,對開花期及生育期的影響最為突出。該基因在長日條件下誘導(dǎo)表達(dá),是重要的開花抑制基因[4]。E2基因是擬南芥GIGANTEA(GI)的同源基因GmGIɑ[5],E3,E4基因分別為大豆光敏色素A基因GmPHYA3[6]和Gm-PHYA2[7],二者協(xié)同調(diào)控E1的表達(dá)。E1,E2,E3和E4在長日條件下通過下調(diào)開花促進(jìn)基因GmFT2ɑ和GmFT5ɑ的表達(dá)而延遲大豆的開花和成熟[4,5,8]。E1-E4基因型的組合雖然與大豆品種的生態(tài)適應(yīng)性密切相關(guān)[9],但研究發(fā)現(xiàn),在E1~E4基因型相同的群體中仍存在開花成熟時間差異較大的現(xiàn)象,說明可能還存在其它影響開花期和成熟期的基因[10]。

    本研究利用滑皮豆和齊黃26 構(gòu)建的重組自交系群體,對其F8:9和F8:10進(jìn)行2年的開花期數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),結(jié)合前期利用SLAF測序獲得的高密度遺傳圖譜[11],對開花期性狀進(jìn)行了QTL 定位分析,并篩選出了4個開花期調(diào)控的候選基因。研究結(jié)果將為理解大豆開花和適應(yīng)性機(jī)制提供理論基礎(chǔ),為大豆廣適育種提供新的基因資源。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    本研究所用材料為滑皮豆和齊黃26 雜交構(gòu)建的重組自交系群體(Recombinant Inbred Lines,RILs),該群體含有149 個家系。前期基因組測序結(jié)果顯示[11],母本滑皮豆與父本齊黃26 生育期基因E1~E4的基因型相同,均為E1e2ɑsE3-HɑE4。

    1.2 方法

    1.2.1 開花期的統(tǒng)計(jì) 將RIL 群體F8:9和F8:10代分別于2013 年和2014 年6 月種植在山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院濟(jì)南試驗(yàn)地。每個家系種一行,行長3 m,行距50 cm,株距10 cm,3 次重復(fù)。約50%的植株開花時的日期記為初花期。

    1.2.2 QTL分析 采用分析軟件SPSS對群體2013年和2014 年開花期表型數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。利用前期構(gòu)建的高密度遺傳圖譜[11],采用QTLICIMapingV4.2 軟件中的ICIM-ADD 方法進(jìn)行大豆開花期性狀的QTL 分析。以似然函數(shù)比值對數(shù)值(logarithm of odds, LOD)>2.5 為依據(jù)確定QTL。QTL 的命名方式為:q+FT+染色體編號+QTL編號。

    1.2.3 候選基因預(yù)測 利用Soybase 數(shù)據(jù)庫(https://www. soybase. org/sbt/)提取QTL 位點(diǎn)間的所有基因,以親本基因組測序結(jié)果為依據(jù),篩選出QTL 位點(diǎn)區(qū)間內(nèi)且CDS 區(qū)在雙親間存在變異的基因。利用Soybase 中的Go enrichment 工具對基因進(jìn)行GO分析;利用Uniprot 數(shù)據(jù)庫(https://www.uniprot.org/)及基因?qū)?yīng)的擬南芥同源基因的功能篩選出開花調(diào)控候選基因。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 大豆RIL群體開花表型分析

    親本和RIL 群體在2013 和2014 年的開花表型分析結(jié)果見表1。結(jié)果表明,群體中的開花期存在一定的差異,其中2013年開花期在36~50 d之間,標(biāo)準(zhǔn)差為2.65,峰度為0.31,偏度為0.15;2014 年開花期在36~49 d 之間,標(biāo)準(zhǔn)差為2.90,峰度為-0.47,偏度為-0.07。開花期的峰度和偏度的絕對值均小于1(表1)。群體開花期數(shù)據(jù)分布近似正態(tài)分布(圖1),適合進(jìn)行QTL定位。

    表1 親本和群體開花期數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)Table 1 Flowering time statistical analysis result of the parents and the population

    圖1 RIL群體兩年開花期表型數(shù)據(jù)頻率分布Fig.1 Frequency distribution of soybean flowering time in RIL population over 2 years

    2.2 大豆開花期性狀QTL定位及分析

    利用ICIM-ADD 方法對大豆開花期性狀進(jìn)行QTL 定位。檢測到11 個與開花時間相關(guān)的QTL(圖2),分別位于6,8,11,14,16,19,20 這7 條染色體上(圖2,表2)。所有QTL 的LOD 值在3.83~13.55 之間,表型貢獻(xiàn)率在1.75%~8.25%之間。qFT6-1、qFT8、qFT11-1、qTF19、qFT20-1和qFT20-2在2013年和2014 年均被檢測到,其中qFT6-1的表型貢獻(xiàn)率最高,在2013 年和2014 年分別是8.25% 和7.13%,LOD 值分別是10.92 和13.55。6 個穩(wěn)定QTL 位點(diǎn)中僅有qFT11-1的加性效應(yīng)為負(fù)值,表現(xiàn)為負(fù)遺傳效應(yīng),其它5個位點(diǎn)的加性效應(yīng)均為正值,即表現(xiàn)為正遺傳效應(yīng)。另外,還檢測到了5 個單一環(huán)境下的QTL 位點(diǎn),即qFT6-2,qFT11-2,qFT11-3,qFT14和qFT16。通過Soybase 數(shù)據(jù)庫分析發(fā)現(xiàn),本研究檢測到的所有位點(diǎn)中有7個與已報道的開花相關(guān)QTL 交叉重合,其它4 個QTL(qFT8、qFT20-2、qFT14和qFT16)是新的QTL(表2)。

    表2 大豆開花期QTL定位結(jié)果Table 2 Details of QTLs associated with flowering time in soybean

    圖2 不同環(huán)境下開花期相關(guān)QTL位點(diǎn)Fig.2 QTL associating with flowering time detected under different environments

    2.3 QTL區(qū)間內(nèi)基因注釋和候選基因的篩選

    對6 個在兩個環(huán)境中穩(wěn)定存在的QTL 位點(diǎn),包括4 個已經(jīng)報道的QTL(qFT6-1,qFT11-1,qFT19和qFT20-1)以及2個新的QTL(qFT8和qFT20-2)進(jìn)行候選基因的分析。6個QTL區(qū)間內(nèi)共有121個基因。親本基因組測序結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)有53 個基因CDS 區(qū)在雙親間存在變異(表3)。GO 分析結(jié)果顯示,這些基因主要參與生物過程和分子功能。生物過程涉及到花發(fā)育調(diào)控,如雄蕊發(fā)育、花瓣發(fā)育、胚珠發(fā)育以及防御反應(yīng)等;分子功能涉及到轉(zhuǎn)錄因子活性,如蛋白激酶活性、蛋白磷酸化活性等(圖3)。根據(jù)GO 分析結(jié)果,Uniprot 數(shù)據(jù)庫注釋信息以及擬南芥同源基因的功能分析,篩選出4 個開花期調(diào)控的候選基因(表4)。Glymɑ. 06g191800和Glymɑ. 20g153 600分別位于已報道的QTL(qFT6-1和qFT20-1)區(qū)間內(nèi)。Glymɑ. 08g039800和Glymɑ. 20g154200分別位 于 新 的QTL(qFT8和qFT20-2)區(qū) 間 內(nèi)。Glymɑ.06g191800編碼一個bHLH 轉(zhuǎn)錄因子,是擬南芥開花促進(jìn)基因PRE3(AT1G74500)[16]的同源基因。相比于父本齊黃26,母本滑皮豆中該基因第二個外顯子區(qū)處增加了4 個堿基,導(dǎo)致移碼突變。Glymɑ. 08g039800在滑皮豆中第563 個氨基酸由半胱氨酸變?yōu)榫彼?,是擬南芥開花促進(jìn)基因VRN5(AT3G24440)[17]的同源基因;Glymɑ.20g153600具有磷酸轉(zhuǎn)移酶活性,在滑皮豆中第37個氨基酸由脯氨酸變成絲氨酸,第232 個氨基酸由纈氨酸變成苯丙氨酸,與擬南芥開花促進(jìn)基因PGM1(AT5G51820)[18,19]同 源。Glymɑ. 20g154200是MADS-Box 家族轉(zhuǎn)錄因子,在母本滑皮豆中第2 個氨基酸由丙氨酸變?yōu)槔i氨酸,第105 個氨基酸由天冬氨酸變?yōu)楦拾彼幔菙M南芥開花促進(jìn)基因AGL42(AT5G62165)[20]的同源基因。

    表3 兩個環(huán)境均檢測到的QTL位點(diǎn)信息Table 3 Informationof QTLs identified in 2 years

    表4 大豆開花期性狀候選基因信息Table 4 Information of the candidate genes related to flowering time of soybean

    圖3 穩(wěn)定QTL區(qū)間內(nèi)基因GO分析Fig.3 GO annotation of genes in stable QTL interval

    3 討論

    開花期是影響大豆生長、決定大豆適應(yīng)性和產(chǎn)量的重要因素。生育期主效基因E1-E4基因型的組合與大豆品種的生態(tài)適應(yīng)性密切相關(guān)[9],但是,在這些生育期基因背景相同的群體中,仍存在開花成熟時間相差較大的現(xiàn)象[10],說明可能還存在其它影響開花期的基因。通過滑皮豆和齊黃26 的基因組測序結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)[11],二者的E1-E4基因型相同,因此利用二者構(gòu)建的RIL 群體進(jìn)行開花期的QTL 定位,能夠消除主效基因E1-E4的遺傳效應(yīng),進(jìn)而發(fā)現(xiàn)影響開花期的其它相關(guān)QTL位點(diǎn)。

    本研究共發(fā)現(xiàn)了11 個QTL 位點(diǎn),其中6 個QTL位點(diǎn)在兩個環(huán)境中穩(wěn)定存在,另外5 個QTL 位點(diǎn)僅在單一環(huán)境下存在,說明這些QTL 位點(diǎn)極易受到環(huán)境的影響。所有QTL 位點(diǎn)中,有7 個位點(diǎn)(qFT6-1、qFT11-1、qFT11-2、qFT11-3、qFT19、qFT6-2和qFT20-1)被前人報道。其中,qFT6-1位于First flower 26-2區(qū)間內(nèi)[12],qFT11-1位于Yamanaka 等定位的First flower 8-4的位點(diǎn)區(qū)間內(nèi)[13];qFT19位于Komatsu等定位的First flower 15-2位點(diǎn)的區(qū)間內(nèi)[14];qFT20-1與Khan 等定位到的開花位點(diǎn)First flower 16-3交叉重合[15]。這4個被報道的位點(diǎn)在本研究的兩個環(huán)境中穩(wěn)定存在,說明其受環(huán)境影響較小,是較為穩(wěn)定的QTL。另外,本研究還鑒定到4 個新的QTL,其 中qFT8和qFT20-2在2013 年和2014 年的兩個環(huán)境中均被檢測到,可能是控制開花期重要的新位點(diǎn)。

    基于QTL 定位結(jié)果,本研究對在兩個環(huán)境中都存在的QTL 位點(diǎn)進(jìn)行了候選基因的挖掘。通過親本序列分析以及區(qū)間內(nèi)基因的信息分析,篩選出4個可能參與開花期調(diào)控的候選基因。其中,Glymɑ. 06g191800和Glymɑ. 20g153600所在的QTL 位點(diǎn)(qFT6-1和qFT20-1)與前人報道的QTL 位點(diǎn)重合[12,15]。bHLH 是植物中的一個龐大的轉(zhuǎn)錄因子家族,擬南芥中該家族成員參與花期調(diào)控[21~23]。本研究中篩選的基因Glymɑ. 06g191800編碼一個bHLH轉(zhuǎn)錄因子,是擬南芥PRE3的同源基因。擬南芥中研究發(fā)現(xiàn),PRE1及其同源基因(PRE2,3,4,5)的過量表達(dá)會導(dǎo)致花期提前[16]。值得注意的是,Glymɑ.06g191800的CDS 區(qū)在母本滑皮豆中發(fā)生了移碼突變,導(dǎo)致編碼產(chǎn)物從第18個之后的氨基酸全部發(fā)生了變化。因此,Glymɑ. 06g191800可能是qFT6-1位點(diǎn)中的重要花期調(diào)控候選基因。在擬南芥的研究中發(fā)現(xiàn),PGM1編碼磷酸葡萄糖變位酶,能夠促進(jìn)葉片淀粉的合成,同時在短日條件下促進(jìn)開花[18,19]。本研究中位于qFT20-1位點(diǎn)區(qū)間內(nèi)的基因Glymɑ.20g153600是PGM1的同源基因,且在滑皮豆中發(fā)生了氨基酸的替換。擬南芥中,VRN5通過調(diào)節(jié)開花抑制基因FLOWERING LOCUS C(FLC)和FLOWERING LOCUS M(FLM)的表達(dá)促進(jìn)開花[17];MADS-box 家族基因AGL42通過赤霉素途徑促進(jìn)莖尖和腋生分生組織開花[20]。本研究中來自于新的QTL 位點(diǎn)(qFT8和qFT20-2)的2 個大豆開花調(diào)控候選基因Glymɑ.08g039800和Glymɑ.20g154200分別是上述擬南芥VRN5和AGL42的同源基因,且在母本滑皮豆中發(fā)生了氨基酸的替換,推測可能參與大豆的開花調(diào)控。后期需要對這些候選基因進(jìn)行功能分析以闡明其功能和作用機(jī)制。

    4 結(jié)論

    本研究以滑皮豆和齊黃26 雜交衍生的高世代RIL 群體,利用前期構(gòu)建的高密度遺傳圖譜,進(jìn)行QTL 定位。共獲得了11 個開花期相關(guān)QTL,其中4個未被報道。對QTL 區(qū)間內(nèi)基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析,篩選出4 個與大豆開花期調(diào)控相關(guān)的候選基因,為大豆廣適育種提供了一定的基因資源。

    猜你喜歡
    開花期同源擬南芥
    藥食同源
    ——紫 蘇
    兩岸年味連根同源
    華人時刊(2023年1期)2023-03-14 06:43:36
    擬南芥:活得粗糙,才讓我有了上太空的資格
    高寒草原針茅牧草花期物候變化特征及其影響因子分析
    以同源詞看《詩經(jīng)》的訓(xùn)釋三則
    尿黑酸對擬南芥酪氨酸降解缺陷突變體sscd1的影響
    兩種LED光源作為擬南芥生長光源的應(yīng)用探究
    擬南芥干旱敏感突變體篩選及其干旱脅迫響應(yīng)機(jī)制探究
    SOLVABILITY OF A PARABOLIC-HYPERBOLIC TYPE CHEMOTAXIS SYSTEM IN 1-DIMENSIONAL DOMAIN?
    初春氣象條件對蘋果開花期的影響分析
    性色av乱码一区二区三区2| 亚洲国产精品成人综合色| 99国产精品一区二区蜜桃av| 色av中文字幕| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 999精品在线视频| 国产高清激情床上av| 国产亚洲精品久久久久5区| 18禁黄网站禁片午夜丰满| √禁漫天堂资源中文www| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 丁香欧美五月| 性色av乱码一区二区三区2| 99久久精品国产亚洲精品| 欧美最黄视频在线播放免费| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 91精品三级在线观看| 最近最新免费中文字幕在线| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲av五月六月丁香网| 午夜福利欧美成人| av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲欧美精品综合久久99| 欧美日本视频| av天堂在线播放| 亚洲精品美女久久av网站| 两个人视频免费观看高清| av片东京热男人的天堂| 国产1区2区3区精品| 久久精品国产综合久久久| 女性被躁到高潮视频| 久久精品91蜜桃| 色综合亚洲欧美另类图片| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 男人的好看免费观看在线视频 | 国产一区二区激情短视频| 欧美乱妇无乱码| 中文字幕最新亚洲高清| 国产精品99久久99久久久不卡| 免费少妇av软件| 免费观看人在逋| 操美女的视频在线观看| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 日本 av在线| 99国产精品一区二区蜜桃av| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 黄片小视频在线播放| www.www免费av| 国产av一区在线观看免费| 757午夜福利合集在线观看| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 欧美黑人精品巨大| 日韩高清综合在线| 精品国内亚洲2022精品成人| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲无线在线观看| 老司机午夜福利在线观看视频| 搡老熟女国产l中国老女人| 一级毛片高清免费大全| 国产精品亚洲美女久久久| 18禁观看日本| 久久久精品欧美日韩精品| 精品国产一区二区久久| 日韩精品中文字幕看吧| 午夜免费观看网址| 一级作爱视频免费观看| 国产99久久九九免费精品| 成人永久免费在线观看视频| 亚洲国产看品久久| 在线观看免费日韩欧美大片| 成人精品一区二区免费| 91字幕亚洲| 国产av一区二区精品久久| 国产精品爽爽va在线观看网站 | av片东京热男人的天堂| 免费无遮挡裸体视频| 久热这里只有精品99| 一边摸一边抽搐一进一小说| 久久国产精品人妻蜜桃| 欧美久久黑人一区二区| 国产精品电影一区二区三区| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 日韩视频一区二区在线观看| 亚洲成国产人片在线观看| 不卡av一区二区三区| 国产又色又爽无遮挡免费看| 亚洲五月天丁香| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 国产乱人伦免费视频| 免费av毛片视频| 嫁个100分男人电影在线观看| 大码成人一级视频| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 9191精品国产免费久久| 久久久国产欧美日韩av| 国产精品久久视频播放| 最近最新中文字幕大全电影3 | 精品不卡国产一区二区三区| 国产又爽黄色视频| 久久久久久大精品| 午夜老司机福利片| 亚洲国产精品合色在线| 亚洲av美国av| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 搞女人的毛片| 男女下面进入的视频免费午夜 | 中文字幕人妻丝袜一区二区| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产高清videossex| 女同久久另类99精品国产91| 长腿黑丝高跟| 精品久久蜜臀av无| 丝袜美足系列| 国产成人欧美| 在线永久观看黄色视频| 精品熟女少妇八av免费久了| 韩国av一区二区三区四区| 美女大奶头视频| 日韩av在线大香蕉| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 纯流量卡能插随身wifi吗| 亚洲无线在线观看| 日本在线视频免费播放| 一本综合久久免费| 午夜久久久久精精品| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲在线自拍视频| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 国产99白浆流出| 久热这里只有精品99| 亚洲九九香蕉| 可以在线观看的亚洲视频| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 男人舔女人的私密视频| 88av欧美| 在线观看午夜福利视频| 国产精品久久电影中文字幕| 天天一区二区日本电影三级 | 热99re8久久精品国产| 精品久久久久久久久久免费视频| 在线观看免费视频日本深夜| 国产午夜精品久久久久久| bbb黄色大片| 国产精品亚洲美女久久久| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产精品久久视频播放| 亚洲avbb在线观看| 欧美成人午夜精品| 国产亚洲精品久久久久5区| 亚洲第一电影网av| 精品人妻1区二区| 两个人视频免费观看高清| 国产精品永久免费网站| 国产精品一区二区精品视频观看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 禁无遮挡网站| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 久久久久亚洲av毛片大全| 精品国产一区二区三区四区第35| 露出奶头的视频| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 国产高清videossex| 精品福利观看| 欧美黑人精品巨大| 两个人视频免费观看高清| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久久久久久久中文| 欧美亚洲日本最大视频资源| 国产欧美日韩一区二区三| 亚洲黑人精品在线| 国产国语露脸激情在线看| 一级毛片高清免费大全| 国产精品亚洲一级av第二区| 在线观看免费视频网站a站| 精品久久久久久成人av| 色播在线永久视频| 神马国产精品三级电影在线观看 | av中文乱码字幕在线| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲全国av大片| 亚洲无线在线观看| 美女 人体艺术 gogo| 国产99久久九九免费精品| ponron亚洲| 久久香蕉国产精品| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 国产成人免费无遮挡视频| 成人av一区二区三区在线看| 国产一区二区三区综合在线观看| 好男人在线观看高清免费视频 | 91九色精品人成在线观看| 男女午夜视频在线观看| 在线观看免费午夜福利视频| 日本vs欧美在线观看视频| 日本 欧美在线| 淫秽高清视频在线观看| 99在线视频只有这里精品首页| 成熟少妇高潮喷水视频| 99国产精品一区二区三区| 搡老岳熟女国产| 人成视频在线观看免费观看| 中文字幕色久视频| 午夜两性在线视频| 黄频高清免费视频| 亚洲精品国产色婷婷电影| 免费在线观看影片大全网站| 制服丝袜大香蕉在线| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 国产97色在线日韩免费| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产午夜精品久久久久久| 午夜激情av网站| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 美女午夜性视频免费| 老司机靠b影院| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 欧美不卡视频在线免费观看 | 制服诱惑二区| 超碰成人久久| 国产午夜精品久久久久久| 老司机福利观看| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产亚洲精品久久久久5区| 国产精品永久免费网站| 男女午夜视频在线观看| 成年人黄色毛片网站| 在线观看舔阴道视频| 婷婷六月久久综合丁香| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 69精品国产乱码久久久| 欧美日韩精品网址| 一个人免费在线观看的高清视频| 久久影院123| 波多野结衣高清无吗| 母亲3免费完整高清在线观看| 怎么达到女性高潮| 国产精品久久久人人做人人爽| 日韩有码中文字幕| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产精品一区二区免费欧美| 欧美av亚洲av综合av国产av| 一级作爱视频免费观看| 久久国产精品影院| 免费观看人在逋| xxx96com| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 久久这里只有精品19| av免费在线观看网站| av有码第一页| 九色国产91popny在线| 免费看a级黄色片| 久久久久国内视频| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲av美国av| 美女扒开内裤让男人捅视频| 亚洲少妇的诱惑av| 99在线视频只有这里精品首页| 美女国产高潮福利片在线看| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 国内精品久久久久精免费| 美女午夜性视频免费| 操出白浆在线播放| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产亚洲欧美98| 成人特级黄色片久久久久久久| 日韩欧美免费精品| 久久 成人 亚洲| 婷婷六月久久综合丁香| 欧美一级毛片孕妇| 久久欧美精品欧美久久欧美| 后天国语完整版免费观看| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产一区二区激情短视频| 国产精品 欧美亚洲| 日韩精品青青久久久久久| 免费看十八禁软件| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲性夜色夜夜综合| 欧美久久黑人一区二区| 久热这里只有精品99| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 欧美不卡视频在线免费观看 | 国产午夜精品久久久久久| 亚洲第一电影网av| 国产xxxxx性猛交| 中文字幕人妻熟女乱码| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲色图综合在线观看| 黄片小视频在线播放| 欧美一级毛片孕妇| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 亚洲成a人片在线一区二区| 老汉色∧v一级毛片| 在线永久观看黄色视频| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 人人澡人人妻人| 国产在线精品亚洲第一网站| 91麻豆av在线| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产1区2区3区精品| 国产亚洲av高清不卡| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产三级在线视频| 88av欧美| 麻豆av在线久日| 性欧美人与动物交配| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 国产亚洲欧美在线一区二区| 亚洲人成电影观看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 一区二区三区国产精品乱码| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 亚洲中文字幕日韩| 大型黄色视频在线免费观看| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲精华国产精华精| 精品久久久久久成人av| 真人做人爱边吃奶动态| 身体一侧抽搐| 久久中文看片网| 日韩av在线大香蕉| 人人妻人人澡人人看| 国产人伦9x9x在线观看| 不卡av一区二区三区| 亚洲成人久久性| 国产精品,欧美在线| 亚洲国产精品成人综合色| 首页视频小说图片口味搜索| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 韩国av一区二区三区四区| 悠悠久久av| 国产免费av片在线观看野外av| 免费高清在线观看日韩| 国产色视频综合| 日韩欧美在线二视频| 日韩精品中文字幕看吧| av中文乱码字幕在线| 露出奶头的视频| 午夜老司机福利片| 看片在线看免费视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 自线自在国产av| 国产精品一区二区三区四区久久 | 动漫黄色视频在线观看| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲九九香蕉| 成人国语在线视频| 不卡av一区二区三区| 国产三级在线视频| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| netflix在线观看网站| 999久久久国产精品视频| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 在线观看免费日韩欧美大片| 久久午夜综合久久蜜桃| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 国产在线观看jvid| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | av欧美777| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产成人影院久久av| 精品久久久久久成人av| 中文字幕av电影在线播放| 国产成人免费无遮挡视频| av在线播放免费不卡| 后天国语完整版免费观看| 99国产精品99久久久久| 亚洲精品在线观看二区| 男人的好看免费观看在线视频 | 一区二区三区精品91| 国产亚洲精品一区二区www| 欧美午夜高清在线| 在线观看免费午夜福利视频| 一本综合久久免费| 国产精品二区激情视频| 精品欧美一区二区三区在线| 老熟妇仑乱视频hdxx| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 亚洲自拍偷在线| 91av网站免费观看| 最新美女视频免费是黄的| 欧美黄色片欧美黄色片| 黄片播放在线免费| 啦啦啦 在线观看视频| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 一级毛片高清免费大全| 久久精品人人爽人人爽视色| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲九九香蕉| 老司机在亚洲福利影院| 又大又爽又粗| 亚洲精品中文字幕在线视频| 久久香蕉激情| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 无人区码免费观看不卡| 人人妻人人澡欧美一区二区 | 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 久9热在线精品视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 久久热在线av| 99re在线观看精品视频| 最新在线观看一区二区三区| 97人妻天天添夜夜摸| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产亚洲精品第一综合不卡| 99在线视频只有这里精品首页| 亚洲一区中文字幕在线| or卡值多少钱| 黄色a级毛片大全视频| 国产精品综合久久久久久久免费 | 国产成人欧美在线观看| 亚洲片人在线观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产成年人精品一区二区| 看免费av毛片| 精品久久久久久久毛片微露脸| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲精品久久国产高清桃花| 久久久久久人人人人人| 亚洲国产精品成人综合色| 精品久久久精品久久久| 色综合亚洲欧美另类图片| 给我免费播放毛片高清在线观看| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 一区在线观看完整版| 在线观看免费视频日本深夜| 欧美在线一区亚洲| 人人澡人人妻人| 亚洲国产看品久久| 亚洲成a人片在线一区二区| 身体一侧抽搐| 一边摸一边抽搐一进一小说| 女性被躁到高潮视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 91老司机精品| 精品人妻在线不人妻| 夜夜夜夜夜久久久久| 神马国产精品三级电影在线观看 | 欧美不卡视频在线免费观看 | 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产极品粉嫩免费观看在线| 成人特级黄色片久久久久久久| 亚洲黑人精品在线| 不卡av一区二区三区| 一二三四社区在线视频社区8| 大码成人一级视频| 老司机靠b影院| 亚洲国产欧美一区二区综合| 脱女人内裤的视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 亚洲av成人一区二区三| 免费搜索国产男女视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 无人区码免费观看不卡| 在线观看一区二区三区| 国产在线精品亚洲第一网站| 极品教师在线免费播放| 麻豆成人av在线观看| 后天国语完整版免费观看| 亚洲少妇的诱惑av| www.熟女人妻精品国产| АⅤ资源中文在线天堂| 超碰成人久久| 青草久久国产| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 校园春色视频在线观看| 免费高清视频大片| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 电影成人av| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲一区高清亚洲精品| 在线永久观看黄色视频| 日日爽夜夜爽网站| 51午夜福利影视在线观看| 日韩中文字幕欧美一区二区| 热99re8久久精品国产| 国产成人系列免费观看| 人人澡人人妻人| 俄罗斯特黄特色一大片| 欧美成人午夜精品| aaaaa片日本免费| 一a级毛片在线观看| 国产在线精品亚洲第一网站| 免费看美女性在线毛片视频| 一级黄色大片毛片| 精品无人区乱码1区二区| 欧美黑人精品巨大| 亚洲色图综合在线观看| 大型av网站在线播放| 一区二区三区激情视频| 国产97色在线日韩免费| 免费av毛片视频| 一级毛片高清免费大全| 日本 欧美在线| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 老司机福利观看| 亚洲av成人av| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 69精品国产乱码久久久| 午夜福利欧美成人| 日韩大尺度精品在线看网址 | 亚洲欧美日韩另类电影网站| 老司机午夜十八禁免费视频| 久久天堂一区二区三区四区| 热re99久久国产66热| 国产精品 国内视频| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲欧美精品综合久久99| 99国产精品免费福利视频| 搞女人的毛片| 两性夫妻黄色片| 男女午夜视频在线观看| 久久热在线av| 久久人妻熟女aⅴ| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 欧美精品啪啪一区二区三区| 欧美乱妇无乱码| 国产在线观看jvid| 免费在线观看日本一区| 69av精品久久久久久| 丝袜在线中文字幕| 欧美另类亚洲清纯唯美| 变态另类丝袜制服| www日本在线高清视频| 亚洲成av人片免费观看| 免费少妇av软件| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美日韩黄片免| 亚洲成国产人片在线观看| 国产精品一区二区三区四区久久 | 欧美日韩黄片免| 99久久综合精品五月天人人| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| 在线观看一区二区三区| 波多野结衣巨乳人妻| 午夜福利在线观看吧| 纯流量卡能插随身wifi吗| 国产亚洲欧美精品永久| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 97人妻天天添夜夜摸| 国产极品粉嫩免费观看在线| 少妇被粗大的猛进出69影院| 精品卡一卡二卡四卡免费| 久久久久九九精品影院| 午夜影院日韩av| 高潮久久久久久久久久久不卡| 久久人妻熟女aⅴ| 成人av一区二区三区在线看| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 日韩三级视频一区二区三区| 国产精品99久久99久久久不卡| 很黄的视频免费| 亚洲激情在线av| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 色综合婷婷激情| 免费看十八禁软件| 波多野结衣av一区二区av| 看免费av毛片| 色精品久久人妻99蜜桃| 91成人精品电影| 一级毛片女人18水好多| av超薄肉色丝袜交足视频| 此物有八面人人有两片| 国产在线精品亚洲第一网站| 99国产精品一区二区蜜桃av| 久久久久亚洲av毛片大全| 天堂影院成人在线观看| 国产伦人伦偷精品视频| 黄色 视频免费看| 久久伊人香网站| 香蕉丝袜av| 亚洲一区二区三区色噜噜| 午夜福利成人在线免费观看| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 在线观看免费视频日本深夜| 中出人妻视频一区二区| 久久久国产精品麻豆| 亚洲电影在线观看av| 中出人妻视频一区二区| 久久精品人人爽人人爽视色| 久久精品91蜜桃| 成人三级做爰电影| 免费高清在线观看日韩| 身体一侧抽搐| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 日日夜夜操网爽| 日本 欧美在线| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国产精品电影一区二区三区|