硬顆粒料和膨化料對草魚形體指標及肝臟組織結構的影響

文/萬新生 趙敏，2 李洪琴，2 劉天驥 李彬斌 宋明 顧夕章 郭楓

本文旨在評估草魚硬顆粒料和膨化料對草魚各項形體指標及肝臟組織結構的影響。跟蹤取樣分析發(fā)現(xiàn)，投喂膨化料的草魚，其肥滿度、臟體指數(shù)、肝體指數(shù)以及腸系脂肪比含量均顯著高于硬顆粒料組（＜0.05），與此同時膨化料組草魚肝臟組織中肝細胞出現(xiàn)空泡變性、核偏移和細胞質(zhì)消失現(xiàn)象也較嚴重。因此，在草魚養(yǎng)殖過程中除了追求其生長速度外，也要關注所選用飼料對草魚相關形體指標及肝臟組織結構的影響。本研究為草魚養(yǎng)殖過程中適宜飼料類型選用提供了參考。

草魚（）是我國水產(chǎn)養(yǎng)殖范圍最廣、總產(chǎn)量最高的淡水魚品種。當前草魚養(yǎng)殖飼料分膨化料和硬顆粒料，膨化料因顆粒容重不同分為浮性料和沉性料，膨化浮性顆粒料在水中穩(wěn)定性和浮性較好，而且膨化工藝可破壞飼料原料中的有害物質(zhì)及抗營養(yǎng)因子，提高飼料營養(yǎng)物質(zhì)的可消化性。然而膨化料對魚體健康、形體指標及品質(zhì)有較大影響，對養(yǎng)殖效益、流通成本及市場銷售影響較大。養(yǎng)殖戶為了追求快速生長，若長時間投喂膨化魚料，忽略了形體指標及肝臟結構，可能會損害魚體健康及品質(zhì)。本文跟蹤評估了全程投喂草魚膨化料、全程投喂硬顆粒料及兩者搭配投喂的草魚養(yǎng)殖數(shù)據(jù)，分析相關形體指標及肝臟組織結構差異，以期為草魚養(yǎng)殖過程中適宜飼料類型選用提供參考。

一、材料與方法

（一）調(diào)研設計

2019年3月20日在長江流域（南昌市、九江市、合肥市、池州市、安慶市等）開展草魚池塘調(diào)研，篩選出水域條件、水質(zhì)狀況、池塘面積、管理水平、草魚種放養(yǎng)規(guī)格和品質(zhì)、放養(yǎng)密度基本一致的池塘，全程跟蹤和指導養(yǎng)殖期內(nèi)草魚飼料的投喂管理（量、質(zhì)及次數(shù)等）、水質(zhì)調(diào)控、病害防治等，確保養(yǎng)殖過程中養(yǎng)殖技術措施及管理水平等基本一致。全年用硬顆料投喂的草魚組編為Ⅰ組，使用硬顆粒料搭配膨化料的編為Ⅱ組，全年使用膨化料的編為Ⅲ組。

（二）樣品采集和分析

經(jīng)過6個月的養(yǎng)殖跟蹤和技術指導，于2019年9月20日～30日集中Ⅰ組七個批次樣本，Ⅱ組四個批次樣本，Ⅲ組三個批次樣本。每個批次隨機抽取體質(zhì)量相近的草魚30尾，稱取體質(zhì)量，測量體長，計算肥滿度，稱取每條魚的內(nèi)臟質(zhì)量、肝臟質(zhì)量以及腸系膜周邊脂肪質(zhì)量。

肝臟樣品采集與制作：完成上述形體指標檢測后，分別采取肝臟組織固定于Bouin氏液，石蠟包埋，切片厚度為5μm，H.E.染色顯微鏡觀察、取圖。

將飼料樣品烘干（105℃）至恒重，采用凱式定氮法測定粗蛋白含量，索氏抽提法測定脂肪含量，失重法測定灰分含量。

肥滿度（CF，%）=100×（體質(zhì)量/體長）；

臟體指數(shù)（VSI，%）＝100×（內(nèi)臟質(zhì)量/體質(zhì)量）；

肝體指數(shù)（LSI，%）＝100×（肝臟質(zhì)量/體質(zhì)量）；

腸系脂肪比（%）=100×（腸系膜脂肪質(zhì)量/體質(zhì)量）

（三）數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用平均值±標準差（mean±SD）表示，應用SPSS Statistics 20生物數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析軟件進行方差和顯著性分析，以（＜0.05）為差異性顯著，當差異達到顯著水平（＜0.05）則進一步通過Duncan氏法進行多重比較分析。

二、結果

（一）草魚硬顆粒料和膨化料的相關營養(yǎng)指標

抽取江西贛中北及安徽南部區(qū)域主流的14家飼料企業(yè)生產(chǎn)的同規(guī)格草魚硬顆粒料（7種）和膨化料（7種），檢測其常規(guī)營養(yǎng)指標（見表1）。由表1看出，膨化料與硬顆粒料水分、鈣、磷含量無顯著性差異（＞0.05），膨化料粗蛋白含量顯著高于硬顆粒料1.66%（＜0.05），粗灰分、脂肪含量顯著低于硬顆粒料1.62%、1.64%（＜0.05）。

表1 市場抽樣的草魚硬顆粒料和膨化料常規(guī)營養(yǎng)指標

（二）硬顆粒料和膨化料對草魚形體指標的影響

硬顆粒料和膨化料對草魚形體指標的影響如表2所示。Ⅰ組中第5組草魚肥滿度顯著高于其他六組（＜0.05），Ⅱ組中第11組顯著高于其他三組（＜0.05），其他三組與Ⅰ組差異不顯著（＞0.05），Ⅲ組中第14組顯著高于Ⅰ組中7項數(shù)據(jù)（＜0.05），也高于Ⅱ組中的除第11組外的其他三組，從中可發(fā)現(xiàn)草魚肥滿度隨著膨化料的使用呈上升的趨勢。

表2 硬顆粒料和膨化料對草魚形體指標的影響

臟體指數(shù)方面，Ⅰ組中除第5組顯著高于其他組（＜0.05），及第1組顯著低于其他組外（＜0.05），其他組別差異不顯著（＞0.05），Ⅱ組之間、Ⅲ組之間差異顯著（＞0.05），但顯著高于硬顆粒料組Ⅰ組（＜0.05），從中發(fā)現(xiàn)草魚臟體指數(shù)也隨著膨化料的使用呈上升的趨勢。肝體指數(shù)隨著膨化料的使用呈上升趨勢，膨化料Ⅲ組整體上顯著高于顆粒料Ⅰ組（＜0.05）。腸系脂肪比中，膨化料Ⅲ組整體上顯著高于硬顆粒料Ⅰ組（＜0.05）。

（三）投喂硬顆粒料和膨化料的草魚肝臟組織結構的差異

投喂不同類型配合飼料的草魚肝臟組織結構見圖1、圖2、圖3（均為草魚肝臟切片400倍光學顯微鏡下結構圖）。圖1硬顆料Ⅰ組的草魚肝臟組織結構中肝細胞排列均勻規(guī)則、核位于肝細胞中央；Ⅱ組膨化料與顆粒料搭配組的草魚肝臟中有少許肝細胞出現(xiàn)核偏移和空泡變性現(xiàn)象；Ⅲ組膨化料組肝臟組織切片有大量肝細胞出現(xiàn)空泡變性、核偏移和細胞質(zhì)消失現(xiàn)象。

圖1 Ⅰ組肝臟組織結構

圖2 Ⅱ組肝臟組織結構

圖3 Ⅲ組肝臟組織結構

三、討論

膨化料生產(chǎn)過程中飼料原料調(diào)質(zhì)后溫度在95℃左右，進入膨化腔后加熱最高溫度可達110℃，物料在膨化腔內(nèi)被加熱至一定溫度后擠出模板，壓力驟降水分汽化從而形成膨化料；硬顆粒料生產(chǎn)過程中原料調(diào)質(zhì)過程中的溫度為80℃～90℃，在環(huán)模中壓輥作用下擠壓形成硬顆粒料。比較兩種制粒過程便可發(fā)現(xiàn)，兩者都是通過擠壓和摩擦作用形成顆粒，但濕法擠壓膨化工藝中膨化環(huán)節(jié)高溫可達110℃以上，對維生素會造成極為嚴重的破壞，溫度越高損失越大，尤其是對溫度較為敏感的V及V、V等都會受到較大程度的破壞，膨化料中V的保留率為79.18%，而硬顆粒料經(jīng)過調(diào)質(zhì)、混合和制粒后V的保留率為86.04%。據(jù)相關研究表明，膨化與非膨化兩種生產(chǎn)工藝生產(chǎn)造成飼料中脂溶性維生素總損失率在14.46%～39.52%，硬顆粒料的損失要低于膨化料工藝，差值在11.81%～16.73%。維生素是脂類代謝中的關鍵活性物質(zhì)，或者是此類物質(zhì)的合成前體，或者為此類物質(zhì)的合成提供活性因子。大量研究表明，維生素或維生素類物質(zhì)缺乏都會造成肝臟的脂肪積累，進而導致過量的肝臟脂肪沉積。

魚類肝臟細胞較大、呈多角形、細胞界線清晰，核位于肝細胞中央，細胞排列均勻規(guī)則。研究表明，中、高水平糖組的肝細胞多發(fā)生腫脹和空泡化，部分肝細胞膜破裂，肝細胞核多移至細胞邊位。本試驗膨化料組樣本肝臟組織切片有大量肝細胞出現(xiàn)空泡變性、核偏移和細胞質(zhì)消失現(xiàn)象。膨化料加硬顆粒料組樣本也有少許肝細胞出現(xiàn)核偏移和空泡變性現(xiàn)象，表明膨化料飼喂組中，高能量的攝入對魚類肝臟組織發(fā)育有一定的營養(yǎng)脅迫，而飼喂硬顆粒料組樣本肝細胞排列均勻規(guī)則、核位于肝細胞中央。

綜上所述，膨化料中碳水化合物水平較高，由于魚類對糖類的天生不耐受性，過量增加碳水化合物比例，非但不能加快魚類長時間的生長速度，反而會促進魚類將糖類向脂類轉(zhuǎn)化，從而在肝臟等各組織中積累大量脂肪。脂肪雖然能在短期內(nèi)促使魚類快速生長，但是這種快速生長，卻是以脂肪在體內(nèi)，尤其是在肝臟內(nèi)大量積累，從而對魚體造成長期的代謝損傷為代價。同時蛋白質(zhì)也是一種能量營養(yǎng)素，過高的蛋白攝入也會轉(zhuǎn)化為脂肪在魚體內(nèi)蓄積。與此同時，膨化料的生產(chǎn)工藝導致維生素的損失較高，而維生素或者維生素類物質(zhì)的缺乏都會造成肝臟的脂肪積累。以上幾方面都對魚體的肥滿度、臟體比、肝體比以及脂肪比產(chǎn)生影響，導致膨化料組草魚肝細胞多發(fā)生腫脹和空泡化、部分肝細胞膜破裂、肝細胞核多移至細胞邊位，影響魚類健康發(fā)育。

四、結論

從綜合養(yǎng)殖效益、養(yǎng)殖對象自身健康及其良好的形體指標等方面考慮，草魚使用硬顆粒料飼喂效果更佳?？紤]到草魚適度生長速度的需要和養(yǎng)殖水體狀況，采用硬顆粒料搭配部分膨化料投喂草魚，在保持草魚良好生長性能的同時，可減少水體富營養(yǎng)化。此外，草魚在高溫季節(jié)及過冬前的低溫時期肝臟負荷能力較大時，建議不用膨化料，但開春后在做好保健的前提下可投喂一段時間草魚膨化料，促進草魚攝食和生長。