花粉過敏動(dòng)物模型的研究進(jìn)展

宋天園，肖 蘭，王 甜，夏建珍，魯碧楠，唐 麗*

（1.民族醫(yī)藥教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（中央民族大學(xué)），北京 100081；2.中央民族大學(xué) 藥學(xué)院，北京 100081；3.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 護(hù)理學(xué)院，北京 100144；4.中央民族大學(xué) 附屬校醫(yī)院，北京 100081）

過敏性疾病是一類變態(tài)反應(yīng)性常見病與多發(fā)病，呈現(xiàn)出全球高發(fā)的趨勢(shì)，嚴(yán)重影響人們的健康與生活質(zhì)量，被世界衛(wèi)生組織列為21世紀(jì)重點(diǎn)防治的三大疾病之一。已有大量研究表明，致敏性樹木和草本的花粉是重要的變應(yīng)原之一。隨著現(xiàn)代社會(huì)城市化建設(shè)迅速發(fā)展，城市綠地建設(shè)和生態(tài)環(huán)境改善的同時(shí)，植物種類及種植區(qū)域拓展，植物花粉變應(yīng)原也隨之增加，致敏植物花粉 飄散于空氣中，是季節(jié)性鼻炎、結(jié)膜炎、哮喘的觸發(fā)因素，也是特應(yīng)性皮炎的加重因素，近年來全球范圍內(nèi)花粉致敏引發(fā)的各類變態(tài)反應(yīng)疾病呈現(xiàn)逐年高發(fā)態(tài)勢(shì)。因此，對(duì)花粉誘發(fā)的變態(tài)反應(yīng)性疾病的發(fā)病機(jī)制、變應(yīng)原檢測(cè)、有效治療及其防控等的探索研究需求日益迫切，花粉過敏動(dòng)物模型的構(gòu)建是其中的一個(gè)關(guān)鍵因素和環(huán)節(jié)。依據(jù)2013年世界變態(tài)反應(yīng)組織白皮書，全球過敏性疾病的患病率為10% ～40%，其中有過敏性鼻炎患者4億人和支氣管哮喘患者3億人，開展花粉致敏相關(guān)基礎(chǔ)和應(yīng)用研究對(duì)保護(hù)人類健康、提高人們生活質(zhì)量具有重要意義。

文章圍繞近年來國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道的花粉過敏動(dòng)物試驗(yàn)研究，分別從花粉致敏模型動(dòng)物品系種類、模型構(gòu)建方法、繁育策略、檢測(cè)與評(píng)價(jià)指標(biāo)等方面進(jìn)行整理分析，闡述與評(píng)價(jià)各類動(dòng)物模型及其構(gòu)建方法和特點(diǎn)，旨在為花粉過敏動(dòng)物模型研究的深入開展提供可能的技術(shù)參考、為花粉過敏機(jī)制研究與有效治療及藥物發(fā)現(xiàn)提供一點(diǎn)啟發(fā)。

1 花粉過敏的類型及其主要發(fā)生機(jī)制

花粉過敏可引起多種臨床癥狀，花粉變應(yīng)原可誘發(fā)季節(jié)性過敏性鼻炎、過敏性哮喘、過敏性結(jié)膜炎及皮炎等變態(tài)反應(yīng)性疾病，通常主要涉及呼吸系統(tǒng)，出現(xiàn)鼻塞、鼻癢、打噴噴、大量流清水樣鼻涕、咽部不適等癥狀，嚴(yán)重可誘發(fā)哮喘，有時(shí)非常嚴(yán)重甚至危及生命。

花粉過敏的發(fā)生機(jī)制復(fù)雜，雖然對(duì)引起主要病理變化的免疫機(jī)制已有所了解，但其免疫病理反應(yīng)的具體啟始途徑等環(huán)節(jié)尚未完全闡明?；ǚ圻^敏是由接觸變應(yīng)原花粉而引發(fā)的變態(tài)反應(yīng)，在花粉過敏患者血清中同時(shí)可檢測(cè)到特異性IgE和IgG，其中以由IgE介導(dǎo)的Ⅰ型超敏反應(yīng)（即速發(fā)型超敏反應(yīng)）為主。易感者接觸花粉變應(yīng)原后產(chǎn)生免疫反應(yīng)，肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞發(fā)生脫顆?，F(xiàn)象，生成過量的IgE，并激活釋放一系列炎性介質(zhì)，引發(fā)各種過敏反應(yīng)，致敏機(jī)制涉及嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)、肥大細(xì)胞脫顆粒、抗原特異性IgE產(chǎn)生、Th細(xì)胞活化、Th1／Th2失衡等環(huán)節(jié)，可分為致敏階段和效應(yīng)階段。

T細(xì)胞在IgE介導(dǎo)的Ⅰ型過敏反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。T細(xì)胞表面有多種特異性抗原，其中CD4代表T輔助細(xì)胞（helper T cell，Th），當(dāng)與抗原相遇，Th細(xì)胞可分泌細(xì)胞因子Th1和Th2。Th1主要分泌白介素（IL）和干擾素（IFN），主要有IL-2、IFN-γ和TNF-α，負(fù)責(zé)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。Th2與速發(fā)型超敏反應(yīng)關(guān)系密切，主要分泌IL-4、IL-5、IL-10和IL-13，能夠有效激活B細(xì)胞產(chǎn)生IgE抗體。當(dāng)易感者首次接觸花粉變應(yīng)原后，花粉進(jìn)入機(jī)體并釋放出一種復(fù)雜的由過敏性和非過敏蛋白質(zhì)及其他生物活性分子組成的親水混合物，誘導(dǎo)有利于Th2極化的炎癥環(huán)境激發(fā)抗體反應(yīng)，變應(yīng)原選擇性激活Th并誘發(fā)其分泌細(xì)胞因子，使Th2／Th1比例失調(diào)，誘導(dǎo)產(chǎn)生IgE抗體。IgE與嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞膜表面特定高親和力受體FcεRI結(jié)合，成為致敏靶細(xì)胞，使機(jī)體處于對(duì)該變應(yīng)原的致敏狀態(tài)。當(dāng)機(jī)體再次接觸相同變應(yīng)原花粉時(shí)，變應(yīng)原與靶細(xì)胞表面的IgE發(fā)生特異性結(jié)合，肥大細(xì)胞與嗜堿性粒細(xì)胞被活化并釋放組胺、前列腺素和白三烯等血管活性介質(zhì)，啟動(dòng)Ⅰ型過敏反應(yīng)的效應(yīng)階段。即上述活性介質(zhì)作用于器官和效應(yīng)組織，引起局部或全身過敏反應(yīng)，表現(xiàn)出鼻塞、鼻堵、流涕、打噴嚏等急性炎癥癥狀，繼而產(chǎn)生小血管擴(kuò)張、通透性增加、平滑肌收縮、支氣管收縮等變態(tài)反應(yīng)，從而引發(fā)過敏反應(yīng)。

2 花粉過敏動(dòng)物模型的種類和特點(diǎn)

近年來國(guó)內(nèi)外用于建立過敏動(dòng)物模型的方法主要是基于使變應(yīng)原進(jìn)入機(jī)體，與致敏靶細(xì)胞上的IgE發(fā)生特異性結(jié)合而引發(fā)變態(tài)反應(yīng)基本原理，模型動(dòng)物主要采用嚙齒類動(dòng)物，也有少量應(yīng)用非嚙齒類動(dòng)物模型的研究。由于花粉致敏引發(fā)各類變態(tài)反應(yīng)疾病發(fā)病機(jī)制的復(fù)雜性，因此目前還未見某一種動(dòng)物模型能夠完整評(píng)價(jià)花粉的致敏性及其深入的致敏機(jī)制，單獨(dú)一種動(dòng)物模型均難以達(dá)到探究花粉過敏機(jī)制的目的，往往需要依據(jù)模型特點(diǎn)、試驗(yàn)?zāi)康暮途唧w要求有針對(duì)性地選用不同的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來構(gòu)建相應(yīng)的過敏模型。

2.1 嚙齒類動(dòng)物

構(gòu)建花粉致敏動(dòng)物模型常用的嚙齒類動(dòng)物有小鼠、大鼠、豚鼠和新型動(dòng)物（如轉(zhuǎn)基因小鼠和人源化小鼠），其中小鼠模型應(yīng)用最為普遍，各類動(dòng)物的生理特點(diǎn)各有不同。

2.1.1 小鼠 小鼠具有免疫遺傳背景較清楚、品系較純、來源廣等優(yōu)點(diǎn)，各種不同品系的小鼠具有不同特性。小鼠應(yīng)用于過敏模型的建立有逐年增加的趨勢(shì)，常 用 的 品 系 有BALB／c、C57BL／6、C3H／HeJ、BDF-1和KM小鼠等，應(yīng)根據(jù)不同的研究目的選擇合適品系的小鼠建立模型。其中BALB／c小鼠屬于近交高IgE應(yīng)答品系，優(yōu)先產(chǎn)生Th2型免疫應(yīng)答和IgE抗體，尤其適用于細(xì)胞因子水平研究，也可作為篩選潛在蛋白潛在致敏性的有效模型，并且較容易獲得，應(yīng)用最為廣泛。文獻(xiàn)報(bào)道，應(yīng)用臭椿、樺樹、楊樹、樟樹、雪松、蒿、豚草、莧、葎草、藜、葫蘆花和軟葉針葵等花粉建立BALB／c品種小鼠致敏模型的相關(guān)研究較為豐富，也有采用其他品系小鼠建立豚草和柳樹等花粉致敏動(dòng)物模型的報(bào)道。小鼠動(dòng)物模型的品系種類、構(gòu)建方法及特點(diǎn)見表1。2.1.2 大鼠 大鼠品系純、來源廣，遺傳性狀穩(wěn)定，嗅覺靈敏，對(duì)環(huán)境中的花粉、粉塵和氣體等敏感，易誘發(fā)出過敏性鼻炎和哮喘等過敏疾病癥狀，針對(duì)吸入性變應(yīng)原易產(chǎn)生特異性IgE抗體，從而介導(dǎo)免疫應(yīng)答，對(duì)抗原的反應(yīng)性較為一致；同時(shí)，大鼠的體型比小鼠和豚鼠大，且兼有小鼠和豚鼠模型的優(yōu)點(diǎn)，更容易對(duì)過敏性疾病的典型特征進(jìn)行有效評(píng)價(jià)；此外，大鼠的相關(guān)分子生物學(xué)試劑種類及選擇性更豐富，便于獲得。目前，常用于制備花粉過敏模型的大鼠品種有SD大鼠和BN大鼠。研究人員應(yīng)用梧桐花粉和日本雪松花粉成功建立SD大鼠和BN大鼠致敏模型。大鼠動(dòng)物模型的品系種類、構(gòu)建方法及特點(diǎn)見表1。

表1 嚙齒類動(dòng)物花粉致敏模型的品系種類、構(gòu)建方法及特點(diǎn)Tab.1 Species，methods and characteristics of pollen allergic rodent model

續(xù)表1

2.1.3 豚鼠 豚鼠具有易感性，對(duì)多種變應(yīng)原具有良好的敏感性，是速發(fā)型過敏性呼吸道疾病和過敏性休克的良好動(dòng)物模型，也是在花粉致敏性預(yù)測(cè)與

評(píng)價(jià)中應(yīng)用的過敏動(dòng)物模型之一。研究人員應(yīng)用豚草、艾蒿、楊樹和日本雪松花粉成功建立了豚鼠致敏模型，見表1。但是相比于小鼠等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，豚鼠的敏感性過強(qiáng)，個(gè)體反應(yīng)差異大，在利用花粉變應(yīng)原造模過程中容易出現(xiàn)明顯反應(yīng)甚至死亡；此外用于豚鼠的檢測(cè)試劑較少，豚鼠Ⅰ型過敏反應(yīng)預(yù)測(cè)模型主要靠主觀評(píng)價(jià)進(jìn)行結(jié)果判斷，只能定性，不容易定量，容易產(chǎn)生誤差；另外豚鼠操作難度較大，特別是注射難度較大，影響因素較多，對(duì)結(jié)果的客觀性容易產(chǎn)生影響。目前采用豚鼠作為過敏模型的研究已呈減少的趨勢(shì)。

對(duì)表1的內(nèi)容從花粉變應(yīng)原種類、模型構(gòu)建方法、優(yōu)點(diǎn)和不足等特點(diǎn)進(jìn)行分析，結(jié)果提示：遺傳背景在誘導(dǎo)花粉過敏模型中起著重要的影響，不同品系的嚙齒類動(dòng)物對(duì)花粉變應(yīng)原多樣性存在不同的反應(yīng)，這與為何只有部分人群對(duì)花粉引發(fā)過敏反應(yīng)的情況相似；不同的致敏／激發(fā)途徑等致敏方式差異在致敏動(dòng)物模型構(gòu)建方法中也產(chǎn)生重要影響。研究結(jié)果提示相同品系嚙齒類動(dòng)物給予相同的花粉變應(yīng)原但致敏方式不同，也可能得到不同的模型。

基于上述分析，花粉致敏的嚙齒類動(dòng)物，尤其小鼠模型方法的選擇可以依據(jù)研究者的目的及條件來合理化地設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。一般為了進(jìn)一步驗(yàn)證或說明實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，研究者會(huì)采用不同動(dòng)物模型、動(dòng)物模型和細(xì)胞模型結(jié)合或是動(dòng)物或細(xì)胞模型與體外其他實(shí)驗(yàn)方法結(jié)合來完成一個(gè)試驗(yàn)?zāi)康?。例如，朱敬敬等采用BALB／c小鼠和豚鼠2種不同動(dòng)物模型評(píng)價(jià)豚草花粉誘導(dǎo)過敏性結(jié)膜炎及藥物干預(yù)作用，說明了不同遺傳背景的嚙齒類動(dòng)物模型對(duì)研究結(jié)果的影響。這些研究結(jié)果及其他相關(guān)研究結(jié)果說明，盡管人類和嚙齒類動(dòng)物（如小鼠）的免疫系統(tǒng)非常相似，但是對(duì)于不同物種之間的先天性免疫系統(tǒng)和獲得性免疫系統(tǒng)的差異是必須要考慮的，選擇不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及品系、依據(jù)其特點(diǎn)建立適合評(píng)價(jià)花粉過敏反應(yīng)的動(dòng)物模型是Ⅰ型過敏反應(yīng)機(jī)制基礎(chǔ)研究中關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。

2.2 非嚙齒類動(dòng)物

迄今建立的花粉誘導(dǎo)的非嚙齒類過敏反應(yīng)模型主要有艾蒿花粉誘導(dǎo)的兔過敏反應(yīng)模型。其他種類的非嚙齒類動(dòng)物有應(yīng)用于食物過敏、藥物過敏等的研究報(bào)道，但是針對(duì)花粉過敏的研究極為有限。原因主要是非嚙齒類動(dòng)物的品種差異比嚙齒類動(dòng)物大，各類動(dòng)物的免疫應(yīng)答不僅以IgE介導(dǎo)為主，對(duì)花粉變應(yīng)原反應(yīng)的一致性難于評(píng)價(jià)，同時(shí)也缺乏品種齊全的各類商業(yè)性相關(guān)免疫試劑，此外非嚙齒類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)更容易引發(fā)倫理及道德爭(zhēng)議，故很難將非嚙齒類動(dòng)物應(yīng)用于花粉致敏性評(píng)價(jià)及潛在安全性評(píng)估中的常規(guī)測(cè)試。

2.3 新型動(dòng)物

隨著過敏動(dòng)物模型、基因工程小鼠和人源化小鼠等新型動(dòng)物模型研究的深入，近年來國(guó)外學(xué)者逐漸關(guān)注應(yīng)用基因工程小鼠和人源化小鼠等新型動(dòng)物構(gòu)建過敏動(dòng)物模型，其在花粉致敏性評(píng)價(jià)及過敏機(jī)制研究中表現(xiàn)出了一定的優(yōu)勢(shì)。

2.3.1 基因工程動(dòng)物新型模型 基因工程動(dòng)物的

構(gòu)建主要是通過插入、敲除或修飾靶基因等基因工程技術(shù)方法，改變動(dòng)物原有基因或者對(duì)其基因組加以修飾，從而得到具有特定表型或者表現(xiàn)某些病理特征的動(dòng)物，是現(xiàn)代基因功能和人類疾病研究中的一類重要?jiǎng)游锬Ｐ?。其中以基因工程小鼠?yīng)用最為普遍。普遍采用的基因工程技術(shù)主要包括基因敲除或敲入、轉(zhuǎn)基因或定點(diǎn)轉(zhuǎn)基因、基因過表達(dá)及人源化等方法。已有研究報(bào)道將基因工程小鼠和人源化小鼠模型應(yīng)用于構(gòu)建花粉致敏動(dòng)物模型，這類新型動(dòng)物模型在一定程度能更有針對(duì)性和目的性地表達(dá)致敏特征，但是其免疫細(xì)胞和相應(yīng)因子與人類及常規(guī)動(dòng)物相比還存在缺乏系統(tǒng)性改變等問題，仍很難模仿人類花粉癥過敏性疾病的主要病理過程。同時(shí)該類新型模型的致敏可重復(fù)性及構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)也有待進(jìn)一步探索。

2.3.2 新型動(dòng)物繁育策略 目前基因工程動(dòng)物的構(gòu)建和繁育多采用129 S和C57BL／6遺傳背景小鼠，在應(yīng)用上既要滿足實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡男枨螅瑫r(shí)也要達(dá)到繁殖建系的功能要求，因此對(duì)一個(gè)基因工程動(dòng)物品系的構(gòu)建和繁育兼有遺傳特性和生存質(zhì)量?jī)蓚€(gè)方面的明確要求，同時(shí)也對(duì)其具體的繁育策略與技術(shù)提出了相應(yīng)的要求。通常基因工程小鼠基本保留其原有品系背景的生理習(xí)性，構(gòu)建過程的第一代能得到的陽性動(dòng)物數(shù)量普遍很少（多為3～5只），很難滿足實(shí)驗(yàn)要求，這就需要通過適宜的繁育策略與技術(shù)來增加該特定基因型小鼠的數(shù)量，一般是通過將構(gòu)建的基因型小鼠與野生型小鼠交配，再對(duì)其進(jìn)行鑒定，選擇其中攜帶基因突變或特定基因的后代。繁育種鼠的選擇：基因工程小鼠繁育生產(chǎn)的目標(biāo)是快速地繁育且能生產(chǎn)出足夠數(shù)量的子代小鼠以供篩選，選擇繁育種鼠是首要環(huán)節(jié)，在配繁前，首先需要確認(rèn)繁育種鼠的遺傳背景和基因型，除特殊實(shí)驗(yàn)需求之外，一般使用同背景小鼠進(jìn)行配繁?；蛐∈蟮姆N類：近年來國(guó)外應(yīng)用于致敏動(dòng)物模型研究的基因工程小鼠種類主要有轉(zhuǎn)基因小鼠、KO／KI（knockout／knockin）小鼠、CKO（conditional knockout）小鼠和人源化小鼠。在明確相應(yīng)的靶基因基礎(chǔ)上，采用的繁育技術(shù)主要有基于DNA原核顯微注射的轉(zhuǎn)基因繁育、基于ES打靶技術(shù)構(gòu)建的KO／KI和CKO繁育、基于CRISPR／Cas 9技術(shù)構(gòu)建的KO／KI和CKO繁育等。經(jīng)常出現(xiàn)的繁育問題主要包括小鼠打架、小鼠脫毛、雌鼠食仔、品系污染、無法得到純合子等。

3 花粉過敏動(dòng)物模型的檢測(cè)與評(píng)價(jià)指標(biāo)

花粉過敏動(dòng)物模型的評(píng)價(jià)一般根據(jù)動(dòng)物的整體反應(yīng)特點(diǎn)和相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)來確定，一般包括癥狀觀察、特異性抗體檢測(cè)、組織病理形態(tài)和輔助檢測(cè)分析。

3.1 癥狀觀察與評(píng)分

花粉過敏動(dòng)物的過敏反應(yīng)并不局限在局部，變應(yīng)性鼻炎、過敏性哮喘及過敏性結(jié)膜炎等可視為全身過敏反應(yīng)的局部表現(xiàn)。癥狀觀察是在對(duì)花粉致敏模型動(dòng)物經(jīng)抗原激發(fā)后進(jìn)行體征和典型癥狀觀察，時(shí)間約30 min，主要通過觀察致敏動(dòng)物的呼吸系統(tǒng)及其他典型癥狀表現(xiàn)進(jìn)行評(píng)分，總體評(píng)價(jià)動(dòng)物過敏反應(yīng)的程度。如呼吸系統(tǒng)過敏反應(yīng)癥狀可觀察到小鼠有撓鼻、流涕、打噴嚏等過敏性鼻炎癥狀，咳嗽、喘息等過敏性哮喘癥狀，局部可觀察到結(jié)膜水腫、結(jié)膜充血、眼瞼腫脹、流淚等過敏性結(jié)膜炎癥狀，陰性表現(xiàn)為無癥狀，可依據(jù)各種癥狀出現(xiàn)的頻次和程度進(jìn)行評(píng)分。通過癥狀觀察與評(píng)分可初步判斷花粉過敏的程度，但判斷可能有一定的主觀性和局限性。為增加結(jié)果的準(zhǔn)確性，一般結(jié)合具體、可重復(fù)和可定量的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)與驗(yàn)證。

3.2 抗體檢測(cè)及特異性IgE水平測(cè)定

花粉導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生Ⅰ型過敏反應(yīng)時(shí)，IgE與肥大細(xì)胞結(jié)合導(dǎo)致肥大細(xì)胞脫顆粒，釋放多種活性物質(zhì)，客觀定量檢測(cè)血清中花粉特異性IgE水平是其病理生理機(jī)制研究的主要評(píng)價(jià)指標(biāo)。一般多應(yīng)用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清和酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）檢測(cè)血清中花粉特異性IgE水平。

3.3 組織病理形態(tài)學(xué)檢測(cè)

花粉過敏誘發(fā)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)生IgE依賴的過敏反應(yīng)的局部組織病理變化可通過對(duì)動(dòng)物的鼻黏膜、肺、結(jié)膜等組織取材進(jìn)行檢測(cè)。一般對(duì)組織切片染色后在400倍光學(xué)顯微鏡下觀測(cè)，檢測(cè)組織間質(zhì)有無明顯的以淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞或中性粒細(xì)胞為主的細(xì)胞浸潤(rùn)炎癥病變、出現(xiàn)水腫滲出及組織間隔增厚等炎癥性表現(xiàn)?？刹捎秒S機(jī)觀察或電腦視頻計(jì)數(shù)，對(duì)視野中隨機(jī)200個(gè)細(xì)胞中嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)、肥大細(xì)胞總數(shù)和肥大細(xì)胞脫顆粒數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算肥大細(xì)胞脫顆粒百分比。上述檢測(cè)指標(biāo)能客觀和定量地反映花粉過敏反應(yīng)的組織炎癥性病變和血管通透性增高病理特征。

3.4 其他輔助檢測(cè)指標(biāo)

除上述評(píng)價(jià)指標(biāo)外，還可以進(jìn)行免疫細(xì)胞相關(guān)表型、相關(guān)細(xì)胞因子種類及濃度水平、外周血抗體和補(bǔ)體水平檢測(cè)、氣道高反應(yīng)性及過繼傳輸激發(fā)實(shí)驗(yàn)等輔助評(píng)價(jià)，主要檢測(cè)指標(biāo)有IL-10和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）等。細(xì)胞因子IL-10和VEGF與Ⅰ型過敏反應(yīng)特異性抗體IgE密切關(guān)聯(lián)，均由與速發(fā)型超敏反應(yīng)關(guān)系密切的Th2細(xì)胞所分泌，能有效激活B細(xì)胞產(chǎn)生IgE，從而引發(fā)效應(yīng)組織和器官Ⅰ型過敏反應(yīng)。

4 小結(jié)與展望

花粉致敏存在著特異性和不可預(yù)測(cè)性，不同種類花粉變應(yīng)原所引發(fā)的過敏性疾病表現(xiàn)及其發(fā)病機(jī)制存在著一定差異，花粉變應(yīng)原及致敏蛋白種類、花粉吸入途徑、遺傳特點(diǎn)、免疫狀態(tài)等因素均與花粉過敏的發(fā)生有關(guān)，同時(shí)由于個(gè)體差異的復(fù)雜性和多樣性，不同個(gè)體接觸花粉變應(yīng)原后存在機(jī)體的敏感性差異，從而表現(xiàn)出各種不同的臨床癥狀，因此花粉過敏性疾病的種類、病理癥狀及其表現(xiàn)程度均不盡相同。

盡管近年來花粉致敏動(dòng)物模型研究已取得了較為豐富的結(jié)果，在一定程度上能夠較好地揭示相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)、信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)等信息，但是，品種有限的花粉過敏動(dòng)物模型（主要集中在嚙齒類動(dòng)物模型）和單一的模型構(gòu)建方式（一般多采用抗原系統(tǒng)性致敏，再隨后進(jìn)行局部激發(fā)）仍是目前存在的主要限制因素，在一定程度上制約著對(duì)花粉過敏的流行病學(xué)、變應(yīng)原分析、致敏機(jī)制和病理發(fā)展等方面的深入研究。因此，適宜的花粉過敏動(dòng)物模型選擇和構(gòu)建是花粉致敏性評(píng)價(jià)、病理機(jī)制和脫敏治療等研究的重要手段。特征穩(wěn)定和確切有效的花粉過敏動(dòng)物模型，可為研究各種花粉變應(yīng)原的致敏性、揭示花粉過敏疾病的致敏機(jī)制及病理過程、評(píng)估花粉過敏風(fēng)險(xiǎn)等提供基礎(chǔ)，也可為預(yù)測(cè)各類花粉及其變應(yīng)原的潛在致敏性提供方法和思路。

目前國(guó)內(nèi)外已有的各類花粉致敏模型各自存在一定的局限性，對(duì)各類花粉致敏的動(dòng)物模型構(gòu)建和評(píng)價(jià)方法還有必要進(jìn)一步加強(qiáng)重復(fù)性驗(yàn)證和標(biāo)準(zhǔn)化研究，以使其在花粉致敏性評(píng)價(jià)及其致敏機(jī)制研究中發(fā)揮更重要的作用?；蚪M學(xué)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)等現(xiàn)代生物技術(shù)的研究日益深入，一些與變態(tài)反應(yīng)相關(guān)的靶基因及其表達(dá)調(diào)控機(jī)制也相應(yīng)被揭示，為建立有針對(duì)性的、穩(wěn)定高效的花粉過敏新型動(dòng)物提供了前景，可通過構(gòu)建特定靶基因調(diào)控的花粉過敏新型動(dòng)物模型，為花粉過敏疾病及其機(jī)制研究提供準(zhǔn)確的證據(jù)。隨著信息技術(shù)和數(shù)據(jù)分析平臺(tái)的發(fā)展，通過結(jié)合變應(yīng)原結(jié)構(gòu)信息數(shù)據(jù)分析，花粉過敏動(dòng)物模型的選擇與構(gòu)建研究也可為花粉變應(yīng)原預(yù)測(cè)及其致敏風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供參考，為花粉過敏性疾病的綜合防控提供有效的方法和手段。