2019－2020年邯鄲市艾滋病感染者抗病毒治療前HIV-1基因亞型和耐藥情況研究

白海軍 董利偉

摘要：目的：了解邯鄲市艾滋病感染者抗病毒治療（ART）前HIV-1耐藥基因型和耐藥株的流行水平。方法 采集2019年1-2020年12月邯鄲市開(kāi)始抗病毒治療前的129名新發(fā)現(xiàn)的 HIV 感染者血漿標(biāo)本，提取血漿RNA，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄和巢式PCR擴(kuò)增HIV-1 pol區(qū)基因，將測(cè)序結(jié)果提交美國(guó)斯坦福大學(xué)的網(wǎng)絡(luò)HIV數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行耐藥基因突變位點(diǎn)分析。結(jié)果 其中占比最多的基因型是CRF01_AE（35.40%，40/113），其次為B+C（34.51%，39/113）型，CRF07_BC（12.39%，，14/113）和B亞型（10.62%，12/113），其余（7.08%，8/113）。發(fā)現(xiàn)耐藥突變的比例為26.55%（30/113），耐藥基因突變主要與非核苷反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑（NNRTIs） （25.66%，29/113）有關(guān)。V179是其中較突出的突變位點(diǎn)，其次為E138。結(jié)論HIV耐藥株在邯鄲市新發(fā)現(xiàn)的艾滋病感染者中出現(xiàn)高度流行，因此應(yīng)引起警惕，制定針對(duì)性的預(yù)防措施，以減少原發(fā)耐藥毒株的產(chǎn)生和傳播。

關(guān)鍵詞：艾滋病;抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療;原發(fā)耐藥;耐藥基因突變

【中圖分類號(hào)】? R512.91【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1673-9026（2022）17--01

艾滋病是重大傳染病，它的流行對(duì)全球經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展構(gòu)成重大威脅，導(dǎo)致人類壽命和生活質(zhì)量嚴(yán)重下降。隨著世界各國(guó)抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療，通過(guò)有效抑制 HIV 感染者體內(nèi)病毒的復(fù)制導(dǎo)致 HIV-1 發(fā)病率和病死率大幅下降，使艾滋病成為慢性可治療的疾病。隨著我國(guó)艾滋病 ART 工作的快速推廣和 ART 人數(shù)的增長(zhǎng)，以及藥物的有限選擇下，HIV耐藥株的問(wèn)題已經(jīng)日益凸顯，特別是在邯鄲市長(zhǎng)期實(shí)施ART后，ART前的原發(fā)耐藥值得關(guān)注。所以本研究對(duì)2019年1-2020年12月邯鄲市ART前129名新發(fā)現(xiàn)的HIV感染者進(jìn)行耐藥檢測(cè)，對(duì)其HIV-1耐藥基因型和耐藥株的流行水平進(jìn)行分析，為控制 HIV耐藥株的流行提供參考依據(jù)。從而制定有效的預(yù)防和干預(yù)HIV-傳播的措施提供參考依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 2019年1-2020年12月邯鄲市18個(gè)縣市區(qū)，經(jīng)蛋白印跡實(shí)驗(yàn)確證為 HIV-1 抗體陽(yáng)性，既往未用過(guò)預(yù)防藥物，也未進(jìn)行過(guò) ART 的 HIV-I感染者，共計(jì)129例。

1.2 研究方法

1.2. 樣本采集與保存 在HIV-I感染者知情同意下，使用EDTA 抗凝采血管采集其外周靜脈血10 mL，測(cè)定首次CD4*T淋巴細(xì)胞細(xì)胞數(shù)，剩余全血6h內(nèi)離心，分離出血漿，-80℃超低溫冰箱保存，用于耐藥基因型檢測(cè)。

2? 結(jié)果

2.1 調(diào)查對(duì)象的基本特征 2019年1-2020年12月邯鄲市18個(gè)縣市區(qū)新發(fā)現(xiàn) HIV感染者 129例。其中納入對(duì)象性別比為119/10（男/女），年齡18～84 歲，平均（40.55士15.23）歲。調(diào)查時(shí)CD4+T淋巴細(xì)胞≤200個(gè)/uL占31.01%（40/129），201～350個(gè)/μL占27.13%（35/129），351～500個(gè)/μL占18.61%（24/129），>500個(gè)/uL占23.26%（30/129）?；橐鰻顩r，未婚者占24.03%（31/129），已婚或同居者占52.71%（68/129），離婚或喪偶者占23.26%（30/129）。傳播途徑以同性性傳播為主（71.32，92/129），同性傳播占28.68%（37/129）。

2.2 研究對(duì)象HIV-1基因亞型的分布情況 在得到的113份pol區(qū)基因片段中，發(fā)現(xiàn)7種HIV-1基因型，其中占比最多的基因型是占比最多的基因型是CRF01_AE（35.40%，40/113），其次為B+C（34.51%，39/113）型，CRF07_BC（12.39%，14/113）和B亞型（10.62%，12/113），其他（7.08%，8/113）。

2.3 研究對(duì)象HIV-1耐藥發(fā)生情況 發(fā)現(xiàn)耐藥突變的比例為26.55%（30/113），耐藥基因突變主要與非核苷反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑（NNRTIs） （25.66%，29/113）有關(guān)。V179（18/113，15.93%）是其中較突出的突變位點(diǎn)，其次為E138（11/113，9.74%）。EFV耐藥占6.20%（7/113）、NVP耐藥占7.08%（8/113）; NRTIs耐藥突變1.77%（2/113）;PIs耐藥突變占0.89%（1/113）。發(fā)生NRTIs和NNRTIs和PIs交叉耐藥分別占0.89%（1/113）。

3討論

本研究發(fā)現(xiàn)有7種基因亞型毒株在邯鄲市轄區(qū)內(nèi)流行，其中CRF01_AE和B+C型為主，占到全部檢測(cè)人數(shù)的百分之六十多，與全國(guó)其他地市的疫情不同。CRFO1_AE 在國(guó)內(nèi)是最主要流行毒株，但是我市比例明顯降低，A、B、C 三種單純亞型毒株明顯低于河北省報(bào)道的數(shù)據(jù)。新型重組毒株流行率比例明顯上升。我市艾滋病感染者以男性同性戀人群為主。艾滋病病毒重組幾率較高。病毒變異率較高。容易產(chǎn)生新的耐藥毒株。耐藥突變的比例為26.55%， 明顯高于北京（4.7%）、全國(guó)耐藥水平（3.6%）和WHO設(shè)定的中等耐藥預(yù)警線（5.0%）。Meta分析顯示，我國(guó)PIS、NRTIS和NNR- TIs原發(fā)耐藥率分別是1.4%、1.8%和2.3%，河北省NNRTIs 耐藥發(fā)生率為4.35%、PIs（1.09%）和NRTIs（0.36%）。本研究顯示邯鄲市耐藥水平明顯偏高，尤其是NNRTIs（25.66%）耐藥突變發(fā)生率更高，NRTIs耐藥突變1.77%;PIs耐藥突變占0.89%，與本省和全國(guó)總體流行形式基本一致。分析本次研究耐藥情況，筆者推斷EFV、NVP耐藥毒株可能通過(guò)與服用過(guò)這些藥物的患者發(fā)生性行為而感染。河北省自2003 年啟動(dòng)免費(fèi)抗病毒治療以來(lái)，一直以依非韋倫和奈韋拉平作為核心藥物，本研究發(fā)現(xiàn)NNRTIs耐藥率已經(jīng)達(dá)到四分之一，不能作為基本藥物應(yīng)用，應(yīng)該及時(shí)更換蛋白酶抑制劑和整合酶抑制劑作為核心藥物。因此應(yīng)適時(shí)在邯鄲市內(nèi)全面開(kāi)展治療前的耐藥監(jiān)測(cè)，以減少原發(fā)耐藥毒株的產(chǎn)生和傳播。

作者簡(jiǎn)介：白海軍（1971— ），男，河北邯鄲市人，副主任醫(yī)師，主要從事性病艾滋病防治工作。