慢性牙周炎患者光動(dòng)力治療對(duì)齦溝液中IL-1β、IL-8 水平變化研究

余方方

（平頂山學(xué)院附屬口腔醫(yī)院 平頂山市口腔醫(yī)院牙周黏膜科，河南 平頂山 467000）

光動(dòng)力療法是治療慢性牙周炎（Chronic periodontitis，CP） 的常用方法之一， 通過冷光化學(xué)反應(yīng)，促使組織、細(xì)胞吸收外加的光敏劑，并利用光波局部照射激活光敏劑，產(chǎn)生活性氧簇類，促使牙周微生物細(xì)胞損傷、凋亡，達(dá)到治療目的[1-2]。 但部分患者光動(dòng)力療法治療效果較差， 臨床癥狀改善并不顯著，預(yù)后較差。 因此，尋找對(duì)CP 患者光動(dòng)力療法治療效果具有影響的臨床指標(biāo)， 對(duì)制定有效的治療措施，提高治療效果具有重要臨床意義。 白細(xì)胞介素（Interleukin，IL）-1β 是介導(dǎo)CP 發(fā)生、進(jìn)展的重要調(diào)節(jié)因子， 可誘發(fā)牙周炎癥反應(yīng)的發(fā)生并加重炎癥反應(yīng)程度[3]。 IL-8 對(duì)巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞等具有趨化活性， 在白細(xì)胞黏附過程中起到重要作用，與CP 炎癥反應(yīng)程度密切相關(guān)[4]。 結(jié)合IL-1β、IL-8 的機(jī)制， 推測(cè)二者可能對(duì)CP 患者光動(dòng)力療法治療效果存在一定影響。 基于此，本研究就慢性牙周炎患者光動(dòng)力療法治療療效與齦溝液IL-1β、IL-8 水平的關(guān)系做以下分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2019年2月至2021年2月期間在平頂山學(xué)院附屬口腔醫(yī)院 （平頂山市口腔醫(yī)院）經(jīng)光動(dòng)力療法治療治愈的53 例CP 患者，納入治愈組； 收集同期在醫(yī)院經(jīng)光動(dòng)力療法治療未治愈的53 例CP 患者，納入未治愈組。 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）CP 符合《口腔科學(xué)》[5]中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，且嚴(yán)重程度為中、重度；（2）全部患者在行超聲潔治術(shù)與齦下刮治術(shù)治療的基礎(chǔ)上接受光動(dòng)力療法治療；（3）臨床資料、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果完善。 排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并高血壓、糖尿病等內(nèi)科疾病；（2）合并惡性腫瘤；（3）近期內(nèi)接受過抗炎藥物治療；（4）既往有CP 病史，接受過相關(guān)治療；（5）合并牙髓炎等其他口腔疾?。唬?）妊娠或哺乳期女性。 兩組基線資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），有可比性。見表1。

1.2 方法

1.2.1 基線資料收集方法 查閱患者病歷資料，詳細(xì)記錄患者年齡、性別（男、女）、體重指數(shù)[體重指數(shù)=體重/身高的平方（kg/cm2）]、吸煙史（吸煙指數(shù)＞0.5；吸煙指數(shù)=每日吸煙支數(shù)×年限）、大量飲酒史（男性≥40 g/d，女性≥20 g/d）、每日刷牙次數(shù)、每次刷牙時(shí)間、病情嚴(yán)重程度。 依據(jù)《口腔科學(xué)》[5]對(duì)病情進(jìn)行評(píng)估，中度：牙齦探診出血4～6 mm、附著喪失3～5 mm；重度：牙齦探診深度超過6 mm，附著喪失超過5 mm。

1.2.2 牙周檢查指標(biāo) 查閱病歷資料記錄患者牙周檢查指標(biāo)。 于患者入院當(dāng)日進(jìn)行牙周檢查， 包括（1）探診深度（Probing depth，PD）：使用探針測(cè)量齦緣至袋底或齦溝底的距離。 （2）附著喪失（Attachment loss，AL）： 使用探針測(cè)量釉牙骨質(zhì)界至袋底的距離。 （3）牙齦出血指數(shù)（Bleeding index，BI）：根據(jù)探診及視診進(jìn)行評(píng)估， 包括0 為牙齦無出血及炎癥；1 為牙齦探診不出血，但有顏色改變；2 為探診后可見點(diǎn)狀出血；3 為探診可見牙齦邊緣出血擴(kuò)散；4 為探診可見齦溝內(nèi)明顯溢血；5 為未探診自動(dòng)出血。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法 收集患者齦溝液中IL-1β、IL-8 表達(dá)水平，具體檢測(cè)方法：于患者入院當(dāng)日采集患者齦溝液， 將患者牙齦表面的菌斑清除后， 使用濾紙條采集患者PD≥5 mm 處位點(diǎn)的齦溝液，將濾紙條插入牙周袋內(nèi)停止30 s 后取出，放置在離心管中待檢（-70℃）；向離心管內(nèi)加入磷酸鹽緩沖液1 mL，震蕩30 min（室溫），隨后離心分離10 min（轉(zhuǎn)速3000 r/min、半徑8 cm），留取上層清液待檢； 采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定齦溝液IL-1β、IL-8 水平，試劑盒購自賽默飛世爾科技有限公司。

1.2.4 療效評(píng)估方法 治療后6 周時(shí)，參照《臨床疾病診斷與療效判斷標(biāo)準(zhǔn)》[6]評(píng)估患者臨床治療效果，治愈：牙周疾病停止進(jìn)展，牙齦顏色、形態(tài)恢復(fù)正常，附著關(guān)系正常，牙齒穩(wěn)固、無牙周袋，咀嚼功能恢復(fù)正常；X 線檢查提示牙槽骨停止吸收， 骨硬板恢復(fù)正常。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)， 采用Shapiro-Wilk 正態(tài)分布檢驗(yàn)計(jì)量資料正態(tài)性，±s 表示符合正態(tài)分布的計(jì)量資料， 組間行獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)； 偏態(tài)分布計(jì)量資料用[M（P25，P75）]表示，組間行Mann-Whitney U 檢驗(yàn)；n（%）表示計(jì)數(shù)資料，用χ2檢驗(yàn)；采用logistic 回歸分析檢驗(yàn)治療前齦溝液IL-1β、IL-8 水平對(duì)CP 患者光動(dòng)力療法治療效果的影響；繪制ROC 曲線，并計(jì)算曲線下面積（AUC），分析治療前齦溝液IL-1β、IL-8 水平對(duì)CP 患者光動(dòng)力療法治療效果的預(yù)測(cè)價(jià)值，AUC＜0.5 無價(jià)值，0.5≤AUC＜0.7 價(jià)值較低，0.7＜AUC≤0.9 價(jià)值中等，AUC＞0.9 價(jià)值高；P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基線資料、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)相關(guān)結(jié)果 未治愈組重度CP 占比高于治愈組，AL 及齦溝液IL-1β、IL-8水平高于治愈組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；組間其他資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見表1。

表1 基線資料、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

2.2 治療前齦溝液IL-1β、IL-8 水平對(duì)CP 患者經(jīng)光動(dòng)力療法療效的回歸分析 將CP 患者經(jīng)光動(dòng)力療法治療效果作為因變量（1=未治愈，0=治愈），將結(jié)果2.1 中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的變量作為自變量（變量賦值見表2），經(jīng)單項(xiàng)logistics 回歸分析后，將P 值放寬至＜0.1， 納入符合條件的因素， 行多項(xiàng)logistics 回歸分析結(jié)果顯示， 治療前AL 及齦溝液IL-1β、IL-8 水平高是CP 患者經(jīng)光動(dòng)力療法治療效果的危險(xiǎn)因素（OR＞1，P＜0.05）。 見表3。

表2 主要自變量分析

表3 治療前齦溝液IL-1β、IL-8 水平對(duì)CP 患者經(jīng)光動(dòng)力療法治療效果的回歸分析

2.3 治療前齦溝液IL-1β、IL-8 水平對(duì)CP 患者光動(dòng)力療法治療效果的預(yù)測(cè)價(jià)值 將治療前齦溝液IL-1β、IL-8 水平作為檢驗(yàn)變量，將CP 患者經(jīng)光動(dòng)力療法治療效果作為狀態(tài)變量 （1=未治愈，0=治愈），繪制ROC 曲線，見圖1。結(jié)果顯示，治療前齦溝液IL-1β、IL-8 水平單獨(dú)及聯(lián)合預(yù)測(cè)CP 患者經(jīng)光動(dòng)力療法治療效果的AUC＞0.70，具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值。 見表4。

表4 治療前齦溝液IL-1β、IL-8 水平對(duì)CP 患者光動(dòng)力療法治療效果的預(yù)測(cè)價(jià)值

圖1 治療前齦溝液IL-1β、IL-8 水平預(yù)測(cè)CP 患者光動(dòng)力療法治療效果的ROC 曲線

3 討論

光動(dòng)力療法雖然可有效殺滅CP 患者牙周袋內(nèi)致病微生物，但部分患者治療效果有限，可導(dǎo)致患者牙齦牙槽骨被破壞，影響患者咀嚼功能，嚴(yán)重可導(dǎo)致感染擴(kuò)散，進(jìn)一步導(dǎo)致消化道疾病的發(fā)生，嚴(yán)重影響患者預(yù)后[7-8]。 因此尋找客觀的指標(biāo)對(duì)CP患者光動(dòng)力療法治療效果進(jìn)行預(yù)測(cè)評(píng)估， 并采取有效的治療措施，對(duì)改善患者預(yù)后至關(guān)重要。

AL 為臨床評(píng)估CP 嚴(yán)重程度的常用指標(biāo)，可反映牙周組織的破壞程度，AL 值越高提示患者病情越嚴(yán)重，相應(yīng)的臨床治療效果越差[9]。但AL 的測(cè)量受多種因素影響，如牙齦腫脹明顯，易導(dǎo)致探針無法探及釉牙骨質(zhì)界， 且探針測(cè)量易對(duì)牙周組織造成一定損傷[10]。 因此AL 在臨床評(píng)估CP 治療效果中存在一定局限。 IL-1β 具有多種生物學(xué)活性，可促進(jìn)免疫應(yīng)答的發(fā)生，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，參與牙周組織破壞[11]。 IL-8 為常見的促炎因子，主要由單核巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的水解具有促進(jìn)作用，已被證實(shí)與CP 患者病情嚴(yán)重程度有關(guān)[12]。結(jié)合IL-1β、IL-8 的機(jī)制，推測(cè)二者可能對(duì)CP 患者光動(dòng)力療法治療效果存在一定影響。 本研究結(jié)果顯示，未治愈組治療前齦溝液IL-1β、IL-8 水平高于治愈組， 初步推測(cè)CP 患者光動(dòng)力療法治療效果可能受齦溝液IL-1β、IL-8 水平的影響，且進(jìn)一步經(jīng)回歸分析證實(shí)。 分析原因在于，IL-1β水平升高可加重牙周炎癥程度， 進(jìn)而促使B 淋巴細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞增殖活化， 對(duì)中性粒細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用，破壞牙周組織，使臨床治療效果受到影響[13]。 此外，IL-1β 水平升高后可促使破骨細(xì)胞生成，并釋放基質(zhì)金屬蛋白酶、膠原酶等炎性效應(yīng)分子釋放，促使膠原降解，進(jìn)而導(dǎo)致牙槽骨吸收，影響患者治療效果[14]。IL-8 水平升高可激活白細(xì)胞并促使其聚集，釋放溶酶菌，進(jìn)而導(dǎo)致吞噬效應(yīng)的發(fā)生，加重CP 患者炎癥反應(yīng)程度，并損傷牙周局部組織，導(dǎo)致臨床治療效果降低[15-16]。 同時(shí)齦溝液中IL-8 水平升高可促進(jìn)炎性因子侵入感染部位，并促使黏附分子在細(xì)胞表面黏附， 生成活性氧代謝產(chǎn)物，進(jìn)而破壞牙周纖維，對(duì)光動(dòng)力療法治療效果造成影響[17]。

經(jīng)繪制ROC 曲線結(jié)果顯示， 治療前齦溝液IL-1β、IL-8 水平預(yù)測(cè)CP 患者經(jīng)光動(dòng)力療法治療效果的AUC＞0.7，具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值，且當(dāng)二者cut-off 值分別取211.150 pg/mL、23.350 pg/μL 時(shí)，可達(dá)最佳預(yù)測(cè)價(jià)值。 這進(jìn)一步說明可根據(jù)齦溝液IL-1β、IL-8 水平對(duì)CP 患者光動(dòng)力療法治療效果進(jìn)行預(yù)測(cè)。 因此，臨床可早期對(duì)CP 患者齦溝液中IL-1β、IL-8 水平進(jìn)行檢測(cè)， 并根據(jù)檢測(cè)結(jié)果制定或更改治療方案。 對(duì)IL-1β、IL-8 水平表達(dá)異常的CP 患者，可聯(lián)合使用鹽酸米諾環(huán)素軟膏、布洛芬緩釋凝膠等藥物治療，或使用中成藥制劑，如清熱抑菌軟膏、知柏地黃丸等，有利于提高患者臨床治療效果，改善患者預(yù)后。

綜上所述，CP 患者光動(dòng)力療法治療效果可能受治療前齦溝液IL-1β、IL-8 水平的影響，且可根據(jù)二者水平對(duì)患者療效進(jìn)行預(yù)測(cè)， 并采取相應(yīng)的治療措施，提高患者臨床療效。