CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞預(yù)測難治性肺炎支原體肺炎患兒塑型性支氣管炎的價(jià)值及意義*

王丹丹，王蘊(yùn)嫻

河北省衡水市第二人民醫(yī)院兒科，河北衡水 053000

難治性肺炎支原體肺炎(RMPP)是兒童常見的一種呼吸系統(tǒng)疾病，臨床治療難度大，當(dāng)并發(fā)塑型性支氣管炎(PB)時(shí)，可損害氣道上皮細(xì)胞功能，氣道黏液過度分泌，導(dǎo)致氣道堵塞及難以改善的低氧血癥，威脅患兒生命安全，因此早期預(yù)測PB的發(fā)生意義重大[1-2]。T淋巴細(xì)胞亞群包括CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞，其中CD3+T淋巴細(xì)胞是成熟T淋巴細(xì)胞，可反映細(xì)胞免疫功能狀態(tài)，CD4+T淋巴細(xì)胞是調(diào)控免疫反應(yīng)的重要樞紐細(xì)胞，CD8+T淋巴細(xì)胞是免疫反應(yīng)中直接殺傷性細(xì)胞，各亞群是宿主對肺炎支原體產(chǎn)生反應(yīng)的重要組成部分，所以三者與RMPP病情進(jìn)展有關(guān)，故推測可能參與了PB的發(fā)生，而現(xiàn)階段鮮見關(guān)于這方面的研究[3-4]?；诖?，本研究嘗試探討CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞預(yù)測RMPP患兒發(fā)生PB的價(jià)值及意義，以期為臨床預(yù)測PB的發(fā)生及早期干預(yù)提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年5月至2021年4月衡水市第二人民醫(yī)院收治的129例RMPP患兒進(jìn)行回顧性研究，其中女61例，男68例；年齡1～8歲，平均(4.40±1.65)歲。RMPP診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]：(1)伴有氣促、咳嗽、發(fā)熱等癥狀體征；(2)影像學(xué)檢查顯示肺部存在炎癥；(3)支氣管肺泡灌洗液和(或)鼻腔吸出物肺炎支原體-DNA陽性、血清肺炎支原體特異性免疫球蛋白M抗體陽性；(4)大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物治療≥7 d，臨床癥狀仍持續(xù)進(jìn)展。PB的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]：支氣管鏡檢查可見呼吸道黏膜水腫、充血、有較多的黏液性分泌物，部分或完全堵塞支氣管管腔，經(jīng)活檢鉗吸引、灌洗等過程取出置于鹽水中呈“樹枝樣”質(zhì)韌塑型物改變。根據(jù)是否發(fā)生PB分為PB組(24例)、無PB組(105例)。

1.2納入、排除標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn)：符合以上RMPP診斷標(biāo)準(zhǔn)及對應(yīng)的PB診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：病原學(xué)證實(shí)合并其他病原體感染者；自身免疫疾病者；伴有結(jié)核病者；咳血者；嚴(yán)重心肺功能不全者；嚴(yán)重心律失常者；合并其他急性疾病者。

1.3方法

1.3.1資料收集 收集年齡、性別、體質(zhì)量、身高、喘息、發(fā)熱、熱峰、熱程、C反應(yīng)蛋白水平、白細(xì)胞計(jì)數(shù)等臨床資料。

1.3.2各指標(biāo)檢測 入院時(shí)采集外周血5 mL，行血常規(guī)檢測，并采用流式細(xì)胞術(shù)檢測CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞。

1.4觀察指標(biāo) (1)比較兩組基線資料；(2)比較兩組CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞；(3)分析PB的相關(guān)影響因素；(4)分析CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞預(yù)測PB的價(jià)值；(5)比較不同CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞水平者PB發(fā)生率。

2 結(jié) 果

2.1兩組臨床資料比較 兩組年齡、性別、體質(zhì)量、身高、喘息、發(fā)熱、熱峰、白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；PB組熱程、C反應(yīng)蛋白水平高于無PB組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組臨床資料對比

組別n發(fā)熱[n(%)]無有熱峰(℃,x±s)熱程[d,M(P25,P75)]C反應(yīng)蛋白(mg/L,x±s)白細(xì)胞計(jì)數(shù)(×109/L,x±s)PB組242(8.33)22(91.67)39.62±0.4711(8,18)70.96±21.577.68±2.11無PB組1056(5.71)99(94.29)39.50±0.588(5,14)48.05±15.738.05±2.49χ2/t/Z0.0010.9444.8015.9780.674P0.9910.347<0.001<0.0010.501

2.2兩組各檢測指標(biāo)比較 PB組CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞水平低于無PB組，CD8+T淋巴細(xì)胞水平高于無PB組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組各檢測指標(biāo)比較

2.3PB發(fā)生情況的多因素Logistic回歸分析 以是否發(fā)生PB為因變量(未發(fā)生=0，發(fā)生=1)，納入兩組比較P<0.05的指標(biāo)作為自變量，多因素Logistic回歸分析顯示，調(diào)整了熱程、C反應(yīng)蛋白水平后，CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞水平仍與PB發(fā)生獨(dú)立相關(guān)(P<0.05)。見表3。

表3 影響PB發(fā)生的多因素Logistic回歸分析

2.4各檢測指標(biāo)預(yù)測PB的ROC曲線分析 以PB組各檢測指標(biāo)為陽性樣本，以無PB組各檢測指標(biāo)為陰性樣本，繪制ROC曲線，結(jié)果顯示，CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞水平聯(lián)合CD8+T淋巴細(xì)胞水平預(yù)測PB的AUC最大，見表4。

表4 ROC曲線分析結(jié)果

2.5各檢測指標(biāo)不同水平者PB發(fā)生率比較 以ROC曲線分析獲得的cut-off值為分界，將患者分為CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞高水平與低水平者，結(jié)果顯示，CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞高水平者PB發(fā)生率低于低水平者，CD8+T淋巴細(xì)胞高水平者PB發(fā)生率高于低水平者(P<0.05)。見表5。

表5 各檢測指標(biāo)不同水平者PB發(fā)生情況比較[n(%)]

3 討 論

宿主免疫反應(yīng)特點(diǎn)與能力可影響RMPP的病情轉(zhuǎn)歸和可能發(fā)生的肺內(nèi)、肺外并發(fā)癥。CD3+T淋巴細(xì)胞水平可反映宿主細(xì)胞免疫功能狀態(tài)，其水平越高，提示機(jī)體細(xì)胞免疫功能越強(qiáng)[6-7]。LI等[8]研究顯示，與普通肺炎支原體肺炎比較，RMPP患兒CD3+T淋巴細(xì)胞水平降低，對RMPP的發(fā)生具有一定預(yù)測價(jià)值。本研究顯示，PB組CD3+T淋巴細(xì)胞水平低于無PB組，調(diào)整了混雜因素后，CD3+T淋巴細(xì)胞仍與PB的發(fā)生獨(dú)立相關(guān)，提示CD3+T淋巴細(xì)胞可作為預(yù)測PB的一個(gè)標(biāo)志物。CD3+T淋巴細(xì)胞水平越低，RMPP患兒細(xì)胞免疫功能越弱，對肺炎支原體抵抗效應(yīng)越低，為肺炎支原體呼吸道定植與繁殖提供了便利條件，隨著入侵病原菌數(shù)量增多，呼吸道炎性反應(yīng)逐漸增強(qiáng)，氣道損傷逐漸加重，氣道黏液分泌逐漸增多，從而增加PB發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[9-10]?？梢妼MPP患兒，應(yīng)重視其CD3+T淋巴細(xì)胞水平的監(jiān)測，若患兒CD3+T淋巴細(xì)胞水平較低，建議給予相關(guān)干預(yù)，增強(qiáng)免疫功能，以預(yù)防PB的發(fā)生。當(dāng)CD3+T淋巴細(xì)胞為50.38%時(shí)，預(yù)測PB的AUC為0.837，靈敏度為91.67%，特異度為63.81%，具有一定預(yù)測價(jià)值，能為臨床預(yù)測RMPP患兒發(fā)生PB的風(fēng)險(xiǎn)提供參考。

CD4+T淋巴細(xì)胞是人體免疫系統(tǒng)的重要樞組細(xì)胞，可指揮宿主對入侵微生物產(chǎn)生抵抗行為，增強(qiáng)吞噬細(xì)胞介導(dǎo)的抗感染作用，并能增強(qiáng)B細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答[11-12]。呂靜[13]的研究結(jié)果顯示，肺炎支原體患兒CD4+T淋巴細(xì)胞水平低于門診健康體檢兒童，提示RMPP患兒CD4+T淋巴細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)降低。蔡利紅等[14]報(bào)道，與單純肺炎患兒比較，并發(fā)PB患兒CD4+T淋巴細(xì)胞水平明顯降低，并成為肺炎患兒發(fā)生PB的一個(gè)相關(guān)影響因素，本研究觀點(diǎn)與之相似，證明了CD4+T淋巴細(xì)胞在PB發(fā)病及預(yù)測中的應(yīng)用價(jià)值。在上述研究基礎(chǔ)上，本研究還進(jìn)行了ROC曲線分析，結(jié)果顯示，CD4+T淋巴細(xì)胞預(yù)測PB的AUC為0.809，cut-off值為41.78%，靈敏度為83.33%，特異度為71.43%，有望成為預(yù)測PB發(fā)生的一個(gè)標(biāo)志物，為臨床早期預(yù)防性干預(yù)提供重要參考信息。同時(shí)，CD4+T淋巴細(xì)胞高水平者PB發(fā)生率低于低水平者，證實(shí)CD4+T淋巴細(xì)胞水平越高，PB發(fā)生率越低，這與CD4+T淋巴細(xì)胞高水平者對肺炎支原體的抵抗能力更強(qiáng)，減輕了呼吸道炎性反應(yīng)與黏液分泌有關(guān)。因此，采取相關(guān)措施提高RMPP患兒CD4+T淋巴細(xì)胞水平有助于增強(qiáng)患兒對入侵病原菌的抵抗能力，預(yù)防疾病的進(jìn)展。

機(jī)體維持正常的免疫功能狀態(tài)有賴于T淋巴細(xì)胞亞群維持一定的比例，其中CD8+T淋巴細(xì)胞在活化后能分化為細(xì)胞毒性T細(xì)胞，特異性作用于靶細(xì)胞，若CD8+T淋巴細(xì)胞功能亢進(jìn)，則可導(dǎo)致免疫抑制效應(yīng)[15-16]。本研究顯示，PB組CD8+T淋巴細(xì)胞水平高于無PB組(P<0.05)，提示CD8+T淋巴細(xì)胞水平升高可能與RMPP患兒并發(fā)PB有關(guān)。多因素分析證實(shí)，CD8+T淋巴細(xì)胞水平是PB發(fā)生的獨(dú)立影響因素。分析其原因，CD8+T淋巴細(xì)胞水平升高對CD4+T淋巴細(xì)胞具有抑制作用，可降低CD4+T淋巴細(xì)胞水平，影響CD4+T淋巴細(xì)胞的“指揮中樞”作用，降低免疫功能，使入侵的肺炎支原體不易被消滅而迅速增殖，導(dǎo)致RMPP患兒病情惡化與氣道上皮細(xì)胞損傷，從而影響PB的發(fā)生[17-18]。CD8+T淋巴細(xì)胞預(yù)測PB的AUC為0.698，cut-off值為28.60%，對應(yīng)的靈敏度為50.00%，特異度為85.71%，具有一定的預(yù)測價(jià)值。同時(shí)，CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞聯(lián)合CD8+T淋巴細(xì)胞預(yù)測PB的AUC最大，說明三者聯(lián)合檢測較單一指標(biāo)預(yù)測PB更準(zhǔn)確，且采集一次標(biāo)本即可完成三者的檢測，所以建議臨床聯(lián)合應(yīng)用，以提高預(yù)測的可靠性。

綜上所述，CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞是RMPP患兒發(fā)生PB的相關(guān)影響因素，聯(lián)合檢測可預(yù)測PB的發(fā)生，為臨床早期治療提供客觀的參考信息。