不同獻(xiàn)血間隔期對(duì)單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血者外周血細(xì)胞水平變化的研究

王慧 范恩勇 孫海英 黃文杰 許守廣

[摘要] 目的 了解不同獻(xiàn)血間隔期對(duì)單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血者外周血細(xì)胞水平變化的影響。方法? 所有樣本均來(lái)自江蘇省揚(yáng)州市中心血站2012年3月至2017年12月單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血者，年齡18～55周歲，平均41.5歲，按照獻(xiàn)血間隔期的不同，分為4周、3個(gè)月、6個(gè)月三組，分別在獻(xiàn)血者獻(xiàn)血前及獻(xiàn)血間隔期滿后檢測(cè)獻(xiàn)血者外周血細(xì)胞水平。利用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)，主要測(cè)定項(xiàng)目包括WBC、RBC、Hb、Hct、PLT、RET等指標(biāo)。結(jié)果? 同一獻(xiàn)血間隔期、同性別獻(xiàn)血前、后比較，WBC、RBC、Hb、Hct、PLT等指標(biāo)獻(xiàn)血前、后差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。間隔期4周女性獻(xiàn)血者RET指標(biāo)較獻(xiàn)血前明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論? 對(duì)單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血者獻(xiàn)血間隔期的確定，建議男性不少于4周、女性不少于3個(gè)月。制訂科學(xué)、合理的單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血間隔期，既能保證單采粒細(xì)胞產(chǎn)品的質(zhì)量，又能最大限度地保護(hù)獻(xiàn)血者的身體健康受到傷害。

[關(guān)鍵詞] 無(wú)償獻(xiàn)血者;單采粒細(xì)胞;外周血細(xì)胞;獻(xiàn)血間隔期

[中圖分類號(hào)] R457.1? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-9701（2022）12-0020-03

[Abstract] Objective To understand the effect of different blood donation intervals on the changes of peripheral blood cell levels in apheresis granulocyte donors. Methods All samples were collected from apheresis granulocyte donors from March 2012 to December 2017 in Yangzhou Central Blood Station in Zhejiang Province， aged 18 to 55 years， with an average age of 41.5 years. They were divided into three groups according to different blood donation intervals： 4-week group， 3-month group， and 6-month group. The peripheral blood cell levels of blood donors were measured before the blood donation and after the expiration of the blood donation interval. Blood cell count was performed using an automatic hematology analyzer， and the main measurement items included WBC， RBC， Hb， Hct， PLT， and RET. Results There was no significant difference in WBC， RBC， Hb， Hct， PLT and other indicators before and after blood donation between the same blood donation interval and the same gender （P>0.05）. The RET parameters of female blood donors at 4-week intervals were significantly increased compared with those before blood donation， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion For the determination of blood donation interval of apheresis granulocyte donors， it is recommended to be not less than four weeks for males and not less than three months for females. Establishing a scientific and reasonable interval for apheresis granulocyte blood donation can ensure the quality of apheresis granulocyte products and maximize the protection of the health of blood donors from harm.

[Key words] Voluntary blood donors; Apheresis granulocytes; Peripheral blood cells; Blood donation interval

粒細(xì)胞輸注（GTX）曾被作為一種輔助的治療手段一度應(yīng)用于臨床，取得一定療效，治療原理主要是其含有的大量粒細(xì)胞[約（1.5～3.0）×1010個(gè)/袋）]，可增強(qiáng)患者的抗感染能力;盡管大量的臨床研究顯示其有助于清除感染、延長(zhǎng)患者的生存時(shí)間、提高危重患者的生存率，但在臨床應(yīng)用中也暴露出一些問(wèn)題，如粒細(xì)胞抗原性強(qiáng)，輸注容易產(chǎn)生同種免疫反應(yīng);產(chǎn)品中?；煊写罅坑忻庖呋钚缘牧馨图?xì)胞，免疫功能低下的患者輸注后可能導(dǎo)致輸血相關(guān)移植物抗宿主?。═A-GVHD）。臨床醫(yī)療機(jī)構(gòu)隨后便逐步放棄對(duì)中性粒細(xì)胞過(guò)低的患者采用預(yù)防性粒細(xì)胞輸注，治療性粒細(xì)胞輸注呈日益減少的趨勢(shì)[1-2]。但近年來(lái)，隨著細(xì)胞免疫研究的不斷推進(jìn)和發(fā)展，人們對(duì)中性粒細(xì)胞（neutrophil）的免疫功能又有了全新的認(rèn)識(shí)，越來(lái)越多的研究顯示，粒細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境中的促腫瘤、抗腫瘤及在腫瘤免疫治療中均發(fā)揮著重要作用[3-4]，單采粒細(xì)胞（apheresis granulocytes）產(chǎn)品又開(kāi)始被臨床醫(yī)療機(jī)構(gòu)重視起來(lái)，并逐漸重新應(yīng)用于臨床?，F(xiàn)行的《全血及成分血質(zhì)量要求》（GB 18469-2012）[5]和《血液儲(chǔ)存要求》（WS 399-2012）[6]等國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)單采粒細(xì)胞的質(zhì)量及儲(chǔ)存要求都做出明確規(guī)定，但現(xiàn)行的《獻(xiàn)血者健康檢查要求》（GB 18467-2011）[7]和《血站技術(shù)操作規(guī)程》（2019版）[8]對(duì)單采粒細(xì)胞采集間隔及捐獻(xiàn)周期均未有明確規(guī)定和統(tǒng)一要求。本研究旨在探討不同獻(xiàn)血間隔期對(duì)單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血者血細(xì)胞指標(biāo)變化的影響，摸索更為科學(xué)、合理的單采粒細(xì)胞采集間隔及捐獻(xiàn)周期，既保證單采粒細(xì)胞產(chǎn)品的質(zhì)量，更要保護(hù)粒細(xì)胞獻(xiàn)血者的身體健康，從而促進(jìn)無(wú)償獻(xiàn)血事業(yè)持續(xù)、健康、穩(wěn)定發(fā)展。

揚(yáng)州市中心血站自2012年3月開(kāi)展單采粒細(xì)胞采集，采集間隔期參考美國(guó)血庫(kù)協(xié)會(huì)（American Association of Blood Banks，AABB）[9]對(duì)單采粒細(xì)胞的采集標(biāo)準(zhǔn)，并結(jié)合國(guó)內(nèi)目前單采血小板的采集標(biāo)準(zhǔn)，取得較好的效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

所有標(biāo)本均來(lái)自江蘇省揚(yáng)州市中心血站2012年3月至2017年12月單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血者，年齡18～55周歲，平均38.54歲。獻(xiàn)血者均符合《獻(xiàn)血者健康檢查要求》，單采粒細(xì)胞捐獻(xiàn)者還應(yīng)同時(shí)滿足血細(xì)胞比容（Hct）≥0.36，采前白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）在3.5×109/L～9.5×109/L范圍內(nèi)。所有獻(xiàn)血者在捐獻(xiàn)前均在《公民無(wú)償獻(xiàn)血登記表》中“獻(xiàn)血者知情同意書(shū)”一欄中簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

按照獻(xiàn)血間隔期的不同，分為4周、3個(gè)月、6個(gè)月三組，分別在獻(xiàn)血者獻(xiàn)血前及獻(xiàn)血間隔期滿后檢測(cè)獻(xiàn)血者外周血細(xì)胞水平。檢測(cè)方法：留取EDTA-2K抗凝血樣各2 ml，利用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)，主要測(cè)定項(xiàng)目包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、血紅蛋白濃度（Hb）、血細(xì)胞比容（Hct）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）、網(wǎng)織紅細(xì)胞（reticulocyte，RET）等。

1.3 質(zhì)量抽檢

按照《全血及成分血質(zhì)量要求》對(duì)所采集的單采粒細(xì)胞產(chǎn)品進(jìn)行外觀、容量、中性粒細(xì)胞含量、血細(xì)胞比容、無(wú)菌試驗(yàn)等指標(biāo)檢測(cè)，由揚(yáng)州市中心血站質(zhì)量技術(shù)科檢測(cè)。

1.4 主要儀器

MEK-7222K全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（日本光電公司生產(chǎn)），CS-3000plus血細(xì)胞分離機(jī)（美國(guó)百特公司生產(chǎn)），CK40倒置顯微鏡（日本OLYMPUS公司生產(chǎn)），BD9050全自動(dòng)細(xì)菌培養(yǎng)系統(tǒng)（美國(guó)BD公司生產(chǎn)）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料采用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 檢測(cè)結(jié)果

不同獻(xiàn)血間隔期單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血者獻(xiàn)血前及滿間隔期后外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果統(tǒng)計(jì)。見(jiàn)表1。

2.2 產(chǎn)品質(zhì)量抽檢

不同獻(xiàn)血周期單采粒細(xì)胞產(chǎn)品質(zhì)量抽檢情況。見(jiàn)表2。

3 討論

中性粒細(xì)胞是在瑞氏（Wright）染色血涂片中，胞質(zhì)呈無(wú)色或極淺的淡紅色，有許多彌散分布的細(xì)小的（0.2～0.4 μm）淺紅或淺紫色的特有顆粒，正常成人 PMN 數(shù)量為 （4～10）×109/L;來(lái)源于骨髓，具有分葉形或桿狀的核，胞漿內(nèi)含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細(xì)顆粒，這些顆粒多是溶酶體，內(nèi)含髓過(guò)氧化酶、溶菌酶、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類，與細(xì)胞的吞噬和消化功能有關(guān)。中性粒細(xì)胞具有的趨化、吞噬和殺菌等功能使其在固有免疫中發(fā)揮十分重要的作用，并處于機(jī)體抵御細(xì)菌、真菌等病原微生物的第一線[10]。近年來(lái)的研究不斷發(fā)現(xiàn)，中性粒細(xì)胞可分泌多種細(xì)胞因子發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，中性粒細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)功能越來(lái)越受到國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)界的普遍重視[11]，其在自身免疫疾病發(fā)病機(jī)制中具有重要作用。與此同時(shí)，中性粒細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境中也具有雙重作用，其在致癌過(guò)程中表現(xiàn)出一系列的促腫瘤和抗腫瘤作用，且與微環(huán)境中細(xì)胞因子的種類和數(shù)量密切相關(guān)[12-13]。特別是近幾年的多項(xiàng)研究報(bào)道已證實(shí)，癌細(xì)胞是粒細(xì)胞的靶細(xì)胞，粒細(xì)胞抗癌有望成為人類抗癌的又一重要方法[14-23]，粒細(xì)胞成分的應(yīng)用可能會(huì)越來(lái)越受到臨床醫(yī)療機(jī)構(gòu)的重視，單采粒細(xì)胞也有望成為采供血機(jī)構(gòu)的又一重要血液產(chǎn)品。因此，探索單采粒細(xì)胞的采集間隔及捐獻(xiàn)周期也就顯得尤為重要和必要。目前，本站對(duì)單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血者，每次采集1個(gè)治療量的粒細(xì)胞，容量為200 ml，產(chǎn)品中除含有大量的中性粒細(xì)胞外，還含有少量紅細(xì)胞（<30 ml）、血小板等成分，或多或少會(huì)對(duì)獻(xiàn)血者機(jī)體免疫水平產(chǎn)生一定的影響，可引起獻(xiàn)血者機(jī)體“平衡-失衡-再平衡”的狀態(tài)和過(guò)程。

本研究結(jié)果顯示，獻(xiàn)血前女性獻(xiàn)血者與男性獻(xiàn)血者比較，WBC、PLT水平無(wú)變化，而RBC、Hb、HCT、RET較男性獻(xiàn)血者則顯著降低，存在性別差異。對(duì)同一獻(xiàn)血周期、同性別的獻(xiàn)血者的獻(xiàn)血前、后比較，WBC、RBC、Hb、Hct、PLT等指標(biāo)的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。獻(xiàn)血間隔期為4周的女性獻(xiàn)血者，獻(xiàn)血后RET較獻(xiàn)血前明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），究其原因，可能與女性獻(xiàn)血者自身早期的生理性、周期性失血，及自身免疫負(fù)反饋調(diào)節(jié)而耐受等有關(guān)，今后還需對(duì)女性獻(xiàn)血者繼續(xù)進(jìn)行跟蹤調(diào)查[24]。對(duì)同性別的、但不同獻(xiàn)血周期的獻(xiàn)血者進(jìn)行比較，4周、3個(gè)月、6個(gè)月等不同獻(xiàn)血間隔期捐獻(xiàn)單采粒細(xì)胞，獻(xiàn)血前、后WBC、RBC、Hb、Hct、PLT等指標(biāo)的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。除了獻(xiàn)血間隔期為4周的女性獻(xiàn)血者獻(xiàn)血后RET較獻(xiàn)血前有明顯升高以外，其他獻(xiàn)血間隔期的獻(xiàn)血者均能得到較好的恢復(fù)。

本研究結(jié)果同時(shí)顯示，不同獻(xiàn)血間隔期所采集的單采粒細(xì)胞產(chǎn)品均能符合《全血及成分血質(zhì)量要求》。分析其原因，可能與采供血機(jī)構(gòu)對(duì)單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血者進(jìn)行的獻(xiàn)血前血液篩查有關(guān)，在血細(xì)胞分離機(jī)參數(shù)設(shè)置準(zhǔn)確、采集時(shí)間正常的前提下，只要獻(xiàn)血者在獻(xiàn)血前的各項(xiàng)指標(biāo)都符合采集要求，就能采集到符合國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的單采粒細(xì)胞產(chǎn)品。但是，獻(xiàn)血間隔期為4周的女性獻(xiàn)血者，獻(xiàn)血后的RET指標(biāo)還未完全恢復(fù)到獻(xiàn)血前狀態(tài)，說(shuō)明如果剛滿4周獻(xiàn)血間隔期，就立即再對(duì)女性獻(xiàn)血者進(jìn)行下一次的單采粒細(xì)胞成分采集，或多或少會(huì)對(duì)她們的身體健康造成一定的傷害。另外，單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血者的獻(xiàn)血間隔期不能只是單純參照單采血小板獻(xiàn)血者的獻(xiàn)血間隔期，因?yàn)閷?duì)單采血小板獻(xiàn)血者而言，捐獻(xiàn)出的僅僅是血小板，其他有效成分均會(huì)回輸?shù)将I(xiàn)血者體內(nèi);而對(duì)單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血者而言，除了采集出足夠量的單采粒細(xì)胞以外，還會(huì)采集出少量的紅細(xì)胞、血小板、淋巴細(xì)胞等成分，勢(shì)必或多或少會(huì)對(duì)獻(xiàn)血者的身體健康造成一定的影響。因此，有必要考慮延長(zhǎng)單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血者、特別是女性獻(xiàn)血者的獻(xiàn)血間隔期，以進(jìn)一步觀察和分析其外周血細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)的變化[25]。

綜上所述，對(duì)單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血者間隔期的確定，除了參考美國(guó)血庫(kù)協(xié)會(huì)（AABB）標(biāo)準(zhǔn)要求以外，結(jié)合本研究的結(jié)果，提出如下建議：男性獻(xiàn)血間隔期不少于4周、女性獻(xiàn)血間隔期不少于3個(gè)月。因此，制訂科學(xué)、合理的單采粒細(xì)胞獻(xiàn)血間隔期，既能保證單采粒細(xì)胞產(chǎn)品的質(zhì)量，又能最大限度地保護(hù)獻(xiàn)血者的身體健康受到傷害。

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（收稿日期：2021-04-12）