健脾潤腸顆粒制備工藝及其對脾虛便秘的作用研究

張琬迎，麥釗源，劉 暉，劉清瑋

（吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院中藥學(xué)院·吉林 吉林·132101）

脾虛便秘是指脾胃虛弱，水谷精微吸收功能不足，精微物質(zhì)不能運(yùn)到全身各處，從而導(dǎo)致氣虛，影響大腸的推動作用，從而導(dǎo)致便秘。健脾潤腸組方來源于《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》，此方以山藥、枸杞、黃芪、雞內(nèi)金、生麥芽、玄參、天花粉、天冬、白芍、桂枝、生姜、大棗為組成。久服無弊，臨床常用劑型為湯劑。但湯劑的療效受原料的質(zhì)量、煎煮條件、炮制技術(shù)等多方面因素影響，并且湯劑不易攜帶、口感不佳，本研究此方改良成中藥顆粒劑，制作方法簡單，成本低廉，攜帶方便，以提高人們服藥的便利，發(fā)揚(yáng)古方[1]。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

小鼠（吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院）。

1.2 儀器

FYS02 10、80、100目標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)篩（安平縣沃東絲網(wǎng)制品有限公司）；CP114型電子天平(奧豪斯儀器（上海）有限公司)；DHG-9140A型恒溫鼓風(fēng)干燥箱（常州諾基儀器有限公司）；DL-T222A型電磁爐（中山市金杞電器科技有限公司）；12#55mm小鼠灌胃針（上海玻利鴿工貿(mào)有限公司）；水浴鍋；中藥粉碎機(jī)。

1.3 藥品及試劑

淮山藥（河北祁新中藥顆粒飲片有限公司）；枸杞等10味中藥（均購自河北金草藥業(yè)有限公司）；生理鹽水；純凈水；淀粉；糊精；蔗糖；無水乙醇。

1.4 健脾潤腸顆粒劑的制備

1.4.1 制備工藝

選料→處理→提取→濃縮→制?！稍铩！b。

1.4.2 前處理

按健脾潤腸湯處方稱取藥材，用12倍水浸泡煎煮2次（2 h/次）進(jìn)行提取，紗布濾過，合并提取液[2-3]。提取液經(jīng)蒸發(fā)濃縮成稠浸膏后，置于60℃烘箱中干燥至數(shù)值不再變化，粉碎備用。

計(jì)算提取物的提取得率=浸膏質(zhì)量/藥材總質(zhì)量×100%[4]

1.4.3 綜合評分

綜合評分的目的是為了綜合利用三個指標(biāo)，根據(jù)評分的高低來確定顆粒劑質(zhì)量的好壞，采用以下評分計(jì)算公式[2]：

綜合評分標(biāo)準(zhǔn)為：吸濕率值/最大吸濕率值×50+成型率值/最大成型率值×25+溶化率值/最大溶化率值×25

以顆粒的吸濕率、成型率和溶化率作為評價(jià)指標(biāo)綜合評分優(yōu)選出最佳比例、最佳體積分?jǐn)?shù)和最適溫度。

1.4.3.1 成型率測定

取健脾潤腸顆粒分別過一號篩（10目）和五號篩（80目），以能過一號篩且不能過五號篩的顆粒為合格顆粒，以合格顆粒量除以總顆粒量即為成型率[4]。

1.4.3.2 吸濕率的測定

稱1g健脾潤腸顆粒置恒重的稱量瓶中，放入烘箱干燥至恒重后精密稱重，最后置于干燥器中，48 h后取出稱重，計(jì)算吸濕率

吸濕率(%)=(吸濕后重量-吸濕前重量）/吸濕前重量×100%[5]

1.4.3.3 溶化率的測定

取干燥至恒定重量的5ml離心管數(shù)支，放入精密稱定的健脾潤腸顆粒0.25g。精密稱取熱水5ml，振搖5分鐘。放入離心機(jī)中3000轉(zhuǎn)離心15 min，除去上清液，取殘?jiān)?0℃下烘干至恒定質(zhì)量后精密稱定，計(jì)算顆粒溶化率。

1.5 單因素試驗(yàn)

通過文獻(xiàn)研究和預(yù)實(shí)驗(yàn)，選定糊精為輔料[6]，并初步設(shè)定浸膏粉與糊精比例為（1：0.5、1：1、1：1.5、1：2、1：2.5），潤濕劑的用量為（乙醇濃度75%、80%、85%、90%、95%），烘干溫度為（50℃、55℃、60℃、65℃、70℃）。

1.6 正交實(shí)驗(yàn)

根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行正交優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，選擇原輔料比(A)、乙醇濃度(B)、烘干溫度(C)為考察因素，以顆粒的吸濕率、成型率和溶化率作為評價(jià)指標(biāo)綜合評分，進(jìn)行L9(33)正交實(shí)驗(yàn)，確定健脾潤腸顆粒制備的最佳工藝。

1.7 健脾潤腸顆粒的藥劑學(xué)檢查

1.7.1 外觀

顆粒干燥，均勻，棕黃色，色澤一致，無吸潮、結(jié)塊、潮解等現(xiàn)象。

1.7.2 粒度

根據(jù)《中華人民共和國藥典》2020年版附錄IXE雙篩分法操作，取健脾潤腸顆粒5袋，秤定質(zhì)量，分別過1號篩、5號篩，5袋不能通過1號 篩與能通過5號篩的總和未超過供試量的15%，符合《中華人民共和國藥典》顆粒劑項(xiàng)下的要求。

1.7.3 水分

按照0832水分測定法測定，取健脾潤腸顆粒2g平鋪于干燥至重量不再變化的稱量瓶中，厚度不超過0.5cm，精密稱定，放入烘箱中，5h后對其進(jìn)行精密恒定，再在烘箱中放置1h稱定，兩次重量相差少于5mg，計(jì)算水分。要求低于8%。

1.7.4 溶化性

按照溶化性測定法操作，取健脾潤腸顆粒10 g，加熱水200 mL，攪拌5分鐘，觀察顆粒的溶化狀況，可溶性顆粒應(yīng)全部溶化或輕微渾濁，但不能有異物。

1.8 健脾潤腸顆粒的藥理試驗(yàn)

1.8.1 脾虛便秘小鼠試驗(yàn)?zāi)Ｐ偷闹苽?/p>

1.8.1.1 小鼠分組

將40只體重在20±2g的小白鼠隨機(jī)分成4組，第1組為空白組，第2組為模型對照組，第3組為湯劑組，第4組為顆粒劑組。適應(yīng)性喂養(yǎng)2天后開始造模。

1.8.1.2 建造脾虛便秘模型

挑選40只體重在18～22g的小白鼠，性別不影響，雌雄均可，10只作為空白對照組，剩下的30只小鼠根據(jù)查找文獻(xiàn)使其飲食失節(jié)從而導(dǎo)致脾虛，中醫(yī)認(rèn)為的脾虛氣血不足使腸道推進(jìn)無力致便秘，按每天0.5 mL/只喂飼小鼠純精煉豬油2次，豬油的純度為100%，連續(xù)8d，期間飼喂正常[7]。

1.8.2 給藥劑量

根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算出湯劑和顆粒劑的比例，一份湯劑大概可以做出符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的顆粒7.7g。根據(jù)人與動物給藥換算出小鼠劑量。

按照單位體重的劑量來算，小鼠的等效劑量相當(dāng)于人的9.1倍。

即一只小鼠一天的服用量約為0.84g

1.8.3 顆粒劑的沖泡與喂藥

顆粒劑與湯劑均每天灌喂兩次為1/4（0.21g）其余3/4當(dāng)水放在鼠籠中，模擬“當(dāng)水飲用”?？瞻捉M和模型對照組每天分別灌喂兩次同等的清水。鼠籠中同樣放入清水供小鼠飲用。

1.8.4 小鼠排便量評價(jià)

根據(jù)原方記載服用五天即可。小鼠喂藥5天，中途每天兩次記錄小鼠排便量（g）。

1.9 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 19.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件對有關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)做相應(yīng)的數(shù)據(jù)處理和分析。

2 結(jié)果

2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1.1 原輔料比對綜合評分的影響

如表2-1所示，隨著原輔料比的增加，綜合評分呈現(xiàn)先上漲后下降的趨勢，在原輔料為1：1處，綜合評分達(dá)到最高（91.23分），綜合評分在1：1～1：1.5處開始降低可能是因?yàn)檩o料過多對顆粒成型率造成影響。此外，在原輔料比為1：1的時候，綜合評分最高，健脾潤腸顆粒外觀效果最好。

表2 -1 原輔料比綜合評分表

2.1.2 乙醇濃度對綜合評分的影響

如表2-2所示，乙醇濃度在75%～85%之間，隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的上升，綜合評分也逐漸上漲，當(dāng)乙醇濃度達(dá)到85%的時候，綜合評分達(dá)到最高（89.67分），之后逐漸下降，可能是因?yàn)橐掖紳舛冗^高，水分太少，從而導(dǎo)致成型率太低。

表2 -2 乙醇濃度綜合評分表

2.1.3 烘干溫度對綜合評分的影響

如表2-3所示，隨著溫度的上升，綜合評分呈現(xiàn)先上升后下降趨勢，當(dāng)溫度達(dá)到55℃的時候，綜合評分達(dá)到最高（86.58分），之后逐漸下降。結(jié)果顯示，在溫度為55℃的時候，綜合評分最高，產(chǎn)品總體效果最好。

表2 -3 溫度綜合評分表

2.2 健脾潤腸顆粒制備工藝參數(shù)的優(yōu)化

依據(jù)單因素結(jié)果，設(shè)定正交實(shí)驗(yàn)因素水平表，見表2-4。

表2 -4正交實(shí)驗(yàn)因素水平表

表2 -5 L9(33)正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果與極差分析

由表2-5中的R值可以看出，3個因素對健脾潤腸顆粒制備的產(chǎn)品綜合評分的大小順序依次為A＞C＞B，即原輔料比＞烘干溫度＞乙醇濃度。根據(jù)K值得知原輔料比A2＞A1＞A3，乙醇濃度B2＞B3＞B1，烘干溫度

C2＞C1＞C3。

由表2-5可以看出最佳組合為A2B2C2。即原輔料比1：1.5，乙醇濃度90%，烘干溫度55℃。此條件下做出來的顆粒顏色均勻，軟硬適中，容易成型，溶化性好。顆粒藥香濃郁，無黏連。

表2 -6小鼠排便量（g）

2.3 顆粒劑的質(zhì)量檢查

2.3.1 外觀

本顆粒劑外觀干燥、顏色均勻，呈黃棕色，顆粒之間疏松干燥，符合要求[9]。

2.3.2 粒度

不能通過一號篩和能通過五號篩的總和為9.14%。符合《中華人民共和國藥典》對顆粒劑粒度的要求。

2.3.3 水分

健脾潤腸顆粒的水分為5.11%。符合藥典要求。

2.3.4 溶化性

按照方法中檢查本顆粒，全部溶化僅輕微渾濁，溶液呈微黃棕色。符合要求。

經(jīng)過各項(xiàng)檢查得知本健脾潤腸顆粒各項(xiàng)理化檢驗(yàn)均符合《中華人民共和國藥典》要求。

2.4 藥理試驗(yàn)結(jié)果與分析

如表所示，空白組小鼠排便正常，基本上每天24h排便趨于穩(wěn)定狀態(tài)，大概平均在2.8g左右，顆顆分明，表面不光滑。模型對照組小鼠糞便干結(jié)含水量低，排便次數(shù)少。湯劑試驗(yàn)組小鼠第一天排便與模型對照組相差無幾，糞便含水量少，但是經(jīng)過逐漸給藥，小鼠飲食正常，到第4天大概達(dá)到空白對照的水平，顏色次數(shù)相對持平，持續(xù)給藥使小鼠排便次數(shù)增多，糞便較軟。顆粒劑試驗(yàn)組小鼠排便次數(shù)少，糞便干結(jié)。根據(jù)服藥時間增加，小鼠排便次數(shù)逐漸增加，飲食也恢復(fù)正常。

相對來說，湯劑給藥治療了小鼠的脾虛便秘，顆粒劑治療效果不如湯劑治療效果好，但是顆粒劑與模型對照相比又有大大地提高與改善。顆粒劑試驗(yàn)組也與空白組相差不多。

3 結(jié)論與討論

健脾潤腸顆粒從湯劑藥效到對湯劑的改良，通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)篩選出最優(yōu)方案：原輔料配比1：1.5，乙醇體積分?jǐn)?shù)90%，顆粒劑干燥溫度55℃。通過此方案制作出的顆粒符合《中華人民共和國藥典》對顆粒劑的質(zhì)量要求。

把成品健脾潤腸顆粒飼喂造模小鼠，在規(guī)定的劑量下可使小鼠排便正常，由此可見，健脾潤腸顆粒與原湯劑具有相同的治療效果。