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    高效液相色譜法測定雞精中谷氨酸鈉的含量

    2022-06-19 02:53:06劉亞方張治云姜鷹雁國璐路楊琪
    醫(yī)學(xué)概論 2022年8期
    關(guān)鍵詞:谷氨酸鈉雞精含量測定

    劉亞方 張治云 姜鷹雁 國璐路 楊琪

    摘要:目的 建立一種高效液相色譜法定量檢測雞精中谷氨酸鈉含量的方法。方法 采用Ultimate XB-NH2色譜柱,柱溫35 ℃;以0.01 mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)pH至3.3)-乙腈為流動相,流速:2.0 ml/min;檢測波長:210 nm。結(jié)果 谷氨酸鈉濃度在50.36~2014.40 ?g/ml范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系(r=0.9997),平均加樣回收率為99.71 %,RSD為1.18 %(n=9),檢出限為15.11 μg/ml。結(jié)論 該方法操作簡便,專屬性強(qiáng),準(zhǔn)確度高,可用于雞精中谷氨酸鈉的定量檢測。

    關(guān)鍵詞:高效液相色譜法;谷氨酸鈉;雞精;含量測定

    谷氨酸鈉,化學(xué)名α-氨基戊二酸一鈉,是雞精中的主要呈味劑,是反映產(chǎn)品鮮度的主要物質(zhì)[1],因此研究雞精中谷氨酸鈉含量測定方法具有一定的實用價值。谷氨酸鈉含量測定可采用高氯酸滴定法、旋光法、酸度計法和凱氏定氮法[2-4],但雞精中除含有谷氨酸鈉外,成分中還含有食鹽、白砂糖、香精等添加劑,由于干擾物質(zhì)較多,采用上述檢測方法測定其谷氨酸鈉專屬性差。本文采用HPLC法對雞精中的谷氨酸鈉進(jìn)行分離檢測,可有效消除產(chǎn)品中各添加劑的干擾,準(zhǔn)確定量,專屬性強(qiáng)。

    1 儀器與試藥

    1.1 儀器

    Waters e2695高效液相色譜儀;Mettler-Toledo XS205電子分析天平;Mettler-Toledo Seven Excellence pH計。

    1.2 試藥

    L-谷氨酸單鈉鹽一水合物(Sigma-Aldrich);磷酸二氫鉀(分析純);磷酸(優(yōu)級純);乙腈(色譜純);鹽酸(分析純);水為超純水。雞精:品牌A,B,C均為市售產(chǎn)品。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 色譜條件

    色譜柱:Ultimate XB-NH2(4.6×250 mm,5 ?m);流動相:0.01 mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)pH至3.3)-乙腈(27:73);流速:2.0 ml/min;柱溫:35 ℃;檢測波長:210 nm;進(jìn)樣體積:10 ?l。

    2.2 溶液制備

    2.2.1 對照品溶液 精密稱取谷氨酸鈉202.86 mg置100 ml量瓶中,加溶劑溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為貯備液;精密量取上述貯備液2.5 ml置10 ml量瓶中,加溶劑稀釋至刻度,搖勻。

    2.2.3 供試品溶液 取雞精25 mg,精密稱定,置25 ml量瓶中,加溶劑適量,超聲10 min,用溶劑稀釋至刻度,搖勻,用濾膜過濾,取續(xù)濾液備用。

    2.2.4 溶劑 0.1 mol/L鹽酸溶液。

    2.3專屬性研究

    分別精密量取溶劑和對照品溶液各10 μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖。試驗結(jié)果表明,空白溶液無干擾峰,表明本法專屬性強(qiáng)。

    2.4 線性和范圍

    精密量取“2.2.1”項下對照品貯備液0.25,1.0,2.5,1,1.5,2.0 ml分別置10 ml量瓶中,加溶劑稀釋至刻度,搖勻,作為線性溶液,依法測定,記錄色譜圖。以峰面積A對濃度C繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。進(jìn)行線性回歸,得回歸方程為Y=164.39X-1298.6(r=0.9997)。結(jié)果表明,谷氨酸鈉在50.36~2014.40 ?g/ml濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

    2.5 定量限和檢出限

    定量限:精密量取“2.2.2”項下標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0 ml置10 ml量瓶中,加溶劑稀釋至刻度,搖勻,依法測定,所得谷氨酸鈉峰信噪比約為10:1,即谷氨酸鈉定量限為50.36 μg/ml。該濃度溶液連續(xù)測定6次峰面積RSD為2.53 %。

    檢出限:精密量取定量限溶液3.0 ml置10 ml量瓶中,加溶劑稀釋至刻度,搖勻,依法測定,所得谷氨酸鈉峰信噪比約為3:1,即谷氨酸鈉檢出限為15.11 μg/ml。

    2.6 重復(fù)性試驗

    按“2.2.3”項下方法配制6份A品牌雞精供試品溶液,依法測定谷氨酸鈉含量,結(jié)果谷氨酸鈉含量的平均值為44.68 %,RSD為0.91 %,表明方法測定樣品的重復(fù)性良好。

    2.7 回收率試驗

    取9只25 ml量瓶,分別精密加入A品牌雞精12mg,平均分為3組,取“2.2.1”項下的對照品貯備液,第一組加入2.5 ml,第二組加入3.75 ml,第三組加入5.0 ml,分別加空白溶液適量,超聲10 min,并用溶劑稀釋至刻度,搖勻,用濾膜過濾,依法測定,,計算谷氨酸鈉回收率。結(jié)果表明,谷氨酸鈉的平均回收率為99.71 %,RSD為1.18 %,表明該方法準(zhǔn)確度良好。

    2.8 樣品測定

    取3種市售雞精樣品,按“2.2.3”項下分別配制3份供試品溶液,依法測定,記錄色譜圖,按外標(biāo)法以峰面積計算供試品溶液中谷氨酸鈉含量,結(jié)果見表1。

    3 討論

    谷氨酸鈉分子結(jié)構(gòu)中含有氨基和羧基,屬于兩性化合物,極性較大,實驗過程中,曾嘗試采用不同色譜柱進(jìn)行分離,結(jié)果谷氨酸鈉均流出較快,與溶劑峰不能完全分離,不能準(zhǔn)確定量。氨基柱以氨基丙基硅烷鍵合硅膠為填充劑,適合于測定極性較大的化合物,本文采用氨基柱對雞精中谷氨酸鈉進(jìn)行分離,得到了理想的結(jié)果。在供試品溶液制備過程中,分別采用不同溶液進(jìn)行提取,結(jié)果顯示溶劑用水和流動相時,所得谷氨酸鈉峰拖尾嚴(yán)重,采用0.1 mol/L鹽酸溶液進(jìn)行提取,所得谷氨酸鈉峰對稱性良好,回收率高,最終確定溶劑為0.1 mol/L鹽酸溶液。文中建立的檢測方法,采用常規(guī)流動相洗脫,紫外檢測器檢測,無需進(jìn)行衍生化處理,操作簡便、準(zhǔn)確度高,可用于雞精中谷氨酸鈉的定量檢測。

    參考文獻(xiàn):

    [1]汪輝,徐睿鑫,李晰暉,等. 蒸發(fā)光散射-親水作用色譜法測定味精和雞精中的谷氨酸鈉[J].中國食品衛(wèi)生雜志,2015,27(3):262-264.

    [2]韓曉林.味精中谷氨酸鈉含量的測定[J].中國井礦鹽, 2010(05):39-40.

    [3]張君.味精中谷氨酸鈉含量三種試驗方法的比較[J]. 新農(nóng)業(yè), 2018(9):7-8.

    [4]胡玉赭.關(guān)于味精中谷氨酸鈉含量測定方法的探討[J].科技信息,2011,(21):620.42E6533B-1F45-4BD0-8191-6ED5CD3CBB93

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