ELISA法在診斷梅毒螺旋體感染中的臨床檢驗(yàn)價(jià)值

孫 楓

(山東省萊州市慢性病防治院 山東 煙臺(tái) 261400)

梅毒主要由蒼白(梅毒)螺旋體感染引起，是一種系統(tǒng)性的慢性的性傳播疾病，具有較高的傳染性，主要通過性行為、母嬰傳播和血液傳播[1]。該病具有全身蔓延的發(fā)展趨勢，會(huì)在病情發(fā)展的時(shí)候侵犯患者的皮膚、黏膜和許多組織器官。有相關(guān)的研究報(bào)道結(jié)果顯示，梅毒能夠?qū)颊叩闹袠猩窠?jīng)系統(tǒng)造成侵犯，危害到患者的心腦血管系統(tǒng)功能、骨骼功能等，最終患者會(huì)因?yàn)槿矶鄠€(gè)器官出現(xiàn)衰竭而死亡。WHO的報(bào)告結(jié)果也顯示[2]，全世界范圍內(nèi)每年均會(huì)新增加超過1060萬例感染梅毒的患者，其中有超過200萬感染梅毒的孕產(chǎn)婦，且有超過120萬的孕產(chǎn)婦會(huì)將梅毒傳染給下一代，且隨著社會(huì)的發(fā)展，梅毒的傳播率呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢。當(dāng)梅毒螺旋體侵襲患者機(jī)體之后，會(huì)進(jìn)一步生成一種具有非特異性的抗體，但是該抗體因?yàn)榫哂蟹翘禺愋?，大大增加了檢測的困難程度，不利于早期檢驗(yàn)，而且晚期梅毒的病毒量會(huì)逐漸減少，仍然無法進(jìn)行有效的檢驗(yàn)，因此，臨床應(yīng)尋找有效的方法提高診斷的準(zhǔn)確率。為了分析不同檢驗(yàn)方式對于梅毒螺旋體感染的檢出準(zhǔn)確率，本文對此進(jìn)行分析，如下：

1 資料與方法

1.1 一般性資料

選擇2019年1月到2021年1月期間到本院間到本院就診的疑似梅毒螺旋體感染患者共計(jì)50例納入研究對象，男26例，女24例；年齡20～58歲，平均年齡(29.17±3.46)歲；體質(zhì)量51～76kg，平均體重量(60.24±11.78)kg。所有患者均知曉研究內(nèi)容并自愿參與兩種檢驗(yàn)方式；本次研究經(jīng)過了院內(nèi)領(lǐng)導(dǎo)的批準(zhǔn)和院委會(huì)的審核。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并惡性腫瘤患者；合并嚴(yán)重HPV感染的患者；合并內(nèi)分泌疾病患者；肝腎功能障礙患者。

1.2 檢測方法

所有梅毒螺旋體感染患者均在采血前三天保持良好的作息和飲食，保證血液情況的穩(wěn)定，采血前常規(guī)禁食禁水，清晨采血2-5ml靜脈血液，震蕩后靜置送入檢驗(yàn)科，以3000r/min的速率離心5min，并分離出上層血清分別利用ELISA法和TRUST法進(jìn)行檢驗(yàn)。TRUST法使用上海榮盛生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的試劑盒檢驗(yàn)，ELISA法利用珠海麗珠生物公司生產(chǎn)的ELISA試劑盒進(jìn)行檢驗(yàn)，為了消除誤差，所有患者均測量三次，采取平均檢測結(jié)果，且試劑盒、試紙等器械均使用同一批次，保障數(shù)據(jù)的客觀性。

1.3 觀察指標(biāo)

以TPPA結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，對ELISA法、TRUST法檢驗(yàn)梅毒螺旋體感染的診斷準(zhǔn)確率、特異度、敏感度進(jìn)行對比、分析，其中診斷準(zhǔn)確率=(真陰+真陽)÷總數(shù)×100%、特異度=真陰÷(真陰+假陽)×100%、敏感度=真陽÷(真陽+假陰)×100%。真陽性：所有結(jié)果陽性；假陽性：ELISA法、TRUST法檢驗(yàn)結(jié)果陽性，金標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果陰性；假陰性：ELISA法、TRUST法檢驗(yàn)結(jié)果陰性，金標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果陽性；真陰性：所有結(jié)果陰性。陽性為梅毒螺旋體感染，陰性為正常。

以TPPA結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，對比ELISA法、TRUST法對不同時(shí)期梅毒螺旋體感染的檢出情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究所有統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)均錄入SPSS21.00進(jìn)行數(shù)據(jù)處理、計(jì)算和分析，計(jì)量資料若服從正態(tài)分布則采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差描述，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用頻數(shù)或者百分比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，所有檢驗(yàn)均采用雙側(cè)檢驗(yàn)，以P<0.05則表示差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ELISA法、TRUST法對梅毒螺旋體感染的診斷準(zhǔn)確率、特異度、敏感度

ELISA法對梅毒螺旋體感染的診斷準(zhǔn)確率、敏感度高于TRUST法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；ELISA法對梅毒螺旋體感染的特異度稍高于TRUST法，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。如表1-2：

表1 ELISA法、TRUST法對梅毒螺旋體感染的診斷準(zhǔn)確率、特異度、敏感度[n]

表2 對比ELISA法、TRUST法對梅毒螺旋體感染的診斷準(zhǔn)確率、特異度、敏感度[%]

2.2 兩種檢驗(yàn)方法對不同時(shí)期的梅毒螺旋體感染的檢出情況的比較

ELISA法對Ⅰ期、Ⅱ期梅毒螺旋體感染檢出率高于TRUST法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；兩種檢驗(yàn)方法對Ⅲ期梅毒螺旋體感染檢出率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。如表3：

表3 對比兩種檢驗(yàn)方法對不同時(shí)期的梅毒螺旋體感染的檢出情況[n(%)]

3 討論

梅毒是臨床十分多見的性傳播疾病，主要由蒼白密螺旋體感染而全身發(fā)病，Ⅰ期、Ⅱ期的傳染性比較強(qiáng)，容易傳染給他人，Ⅲ期的破壞性比較大，如果損傷到中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管，還可能危及患者的生命，危害性極大，僅僅次于艾滋病[3]。梅毒已經(jīng)成為了全球關(guān)注的重點(diǎn)、難點(diǎn)公共衛(wèi)生安全問題。妊娠期女性合并梅毒更是威脅到孕婦、胎兒的嚴(yán)重傳染性疾病，可以通過性接觸的方式進(jìn)行水平傳播[4]，該傳播方式被稱為隱性梅毒，也可以通過胎盤的血液循環(huán)進(jìn)行垂直傳播，該傳播方式被稱為胎傳梅毒。近年來，隨著世界范圍內(nèi)的流行傳染病的發(fā)生率提高和人們性觀念的逐漸開放，梅毒螺旋體感染的發(fā)病率也出現(xiàn)了逐年增長的趨勢，嚴(yán)重威脅了人們的身心健康。由于梅毒螺旋體感染的早期發(fā)病沒有明顯的疾病特征和表現(xiàn)，僅僅依靠對患者的病歷資料、臨床表現(xiàn)和常規(guī)檢查無法確診，容易被患者忽視，可能會(huì)因?yàn)槁┰\而威脅到疾病預(yù)后，因此梅毒的檢驗(yàn)主要依靠血清學(xué)進(jìn)行診斷，因此針對患者進(jìn)行準(zhǔn)確的梅毒血清篩查十分重要。早重視、早篩查、早診斷、早治療是預(yù)防梅毒不良結(jié)局的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[5]。臨床診斷梅毒螺旋體感染的檢驗(yàn)方法較多，主要有血清學(xué)檢驗(yàn)、TPPA等，其中TPPA是診斷該病的金標(biāo)準(zhǔn)，但由于該檢驗(yàn)的操作步驟較為繁瑣，檢驗(yàn)的效率比較低，不利于大批樣本的檢驗(yàn)，因此，臨床?？紤]使用血清學(xué)檢驗(yàn)方式進(jìn)行診斷。

本次研究顯示，ELISA法對梅毒螺旋體感染的診斷準(zhǔn)確率為80.00%、敏感度為80.00%，均高于TRUST法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；ELISA法對梅毒螺旋體感染的特異度為為80.00%，稍高于TRUST法，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。ELISA法對Ⅰ期、Ⅱ期梅毒螺旋體感染檢出率高于TRUST法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；兩種檢驗(yàn)方法對Ⅲ期梅毒螺旋體感染檢出率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。提示ELISA法對梅毒螺旋體感染的診斷準(zhǔn)確率比TRUST法更高，這一結(jié)果與高亞春[6]等人的研究具有一致性。ELISA法、TRUST法是臨床常用的血清學(xué)檢驗(yàn)方法，傳統(tǒng)的TRUST法主要使用活化的心磷脂卵磷脂膽固醇進(jìn)行檢驗(yàn)，將VDRL抗原懸浮于含有甲苯胺紅的溶液中，和梅毒螺旋體感染患者血清中的反應(yīng)素反應(yīng)，導(dǎo)致粉紅色的凝集。有研究[7]顯示，TRUST法檢驗(yàn)的準(zhǔn)確率、敏感性均比較低，而且在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類分濕性關(guān)節(jié)炎和瘧疾患者中可能會(huì)引起假陽性，使梅毒檢測結(jié)果出現(xiàn)誤檢。ELISA法是通過將梅毒特異性抗體固定在微孔板上，采取雙抗原夾心法進(jìn)行測定，具有操作簡單、成本低廉、試劑穩(wěn)定等特點(diǎn)，比較容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化結(jié)果判讀和實(shí)驗(yàn)操作，有利于大批量樣本的結(jié)果追溯以及檢測，被廣泛應(yīng)用于臨床梅毒螺旋體感染檢測中。ELISA法可以把抗原抗體反應(yīng)的特異性以及酶化學(xué)反應(yīng)的敏感性進(jìn)行有效的結(jié)合，因此該種方法不但敏感，而且具有比較高的特異性[8]。ELISA法具有較高的催化反應(yīng)轉(zhuǎn)化率以及較高的酶純度，并且性質(zhì)比較穩(wěn)定，專一性較強(qiáng)，對梅毒的靈敏度明顯高于凝集反應(yīng)。ELISA法能同時(shí)測量研究對象血清內(nèi)梅毒抗體IgM和IgG，對于梅毒抗體弱陽性的標(biāo)本也可以檢測出。ELISA檢測方法的準(zhǔn)確率、敏感度相對更高，能夠顯著提高診斷的準(zhǔn)確率，但仍然不是百分百準(zhǔn)確的檢驗(yàn)方法，因此臨床對于梅毒螺旋體感染的檢查仍然需要充分結(jié)合癥狀表現(xiàn)，進(jìn)一步進(jìn)行綜合的分析和確診。由于本次研究的樣本量不足，研究的結(jié)果具有一定的局限性，尤其是針對不同時(shí)期梅毒螺旋體感染的檢出情況的對比中，希望今后能有更大量樣本的研究，提供更為全面的結(jié)果。

綜上所述，ELISA法在診斷梅毒螺旋體感染中的準(zhǔn)確率、特異度、敏感度均比較高，且顯著高于TRUST法，值得進(jìn)一步使用推廣，但該方法仍然不是百分百準(zhǔn)確的檢驗(yàn)方式，隨著現(xiàn)代醫(yī)療事業(yè)的不斷進(jìn)步和創(chuàng)新，臨床需要進(jìn)一步加強(qiáng)對于梅毒螺旋體感染的研究，尋找更加準(zhǔn)確的檢驗(yàn)方法、為廣大患者的治愈提供希望。