利福平耐藥實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增技術(shù)在肺結(jié)核臨床路徑中的應(yīng)用效果分析

張傳藝

結(jié)核病是一種由于結(jié)核分枝桿菌(MTB)感染引發(fā)的慢性傳染疾病,而PTB 是指結(jié)核發(fā)病部位位于肺組織、氣管、支氣管、胸膜的疾病,該疾病患病人數(shù)占據(jù)了各器官結(jié)核疾病的80%～90%［1,2］。基于此,本研究將對(duì)PTB 臨床路徑中應(yīng)用Xpert 技術(shù)的效果及意義進(jìn)行分析,試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本院2020 年4 月～2021 年3 月收治的649 例疑似PTB 患者,隨機(jī)分為觀察組(327 例)及對(duì)照組(322 例)。觀察組患者男170 例,女157 例；年齡19～74 歲,平均年齡(46.50±27.50)歲；初治182 例,復(fù)治145 例。對(duì)照組患者男168 例,女154 例；年齡20～75 歲,平均年齡(46.32±28.50)歲；初治171 例,復(fù)治151 例。兩組患者的一般資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。

1.2 方法 兩組均進(jìn)行相同預(yù)先處理,標(biāo)本采集：叮囑患者進(jìn)行牙齒清潔后,將氣管深部咳出的第1 口痰液廢棄,將第2、3 口痰液收集到無菌容器中,無法咳出痰液者可以采取誘導(dǎo)吐痰方法(霧化吸入溫度為45℃的15%氯化鈉及10%甘油混合溶液)。

對(duì)照組應(yīng)用BD960 液體培養(yǎng)技術(shù)檢測(cè)。使用全自動(dòng)快速分枝桿菌培養(yǎng)儀進(jìn)行培養(yǎng)分析。取患者痰液標(biāo)本5～50 ml 置入離心試管中。其后向試管中加入NALC-NaOH 前期處理液(2%),使用強(qiáng)力旋渦進(jìn)行振蕩處置,振蕩時(shí)間控制為20 s。完成振蕩,于室溫下靜置10～15 min。完成靜置后,加入無菌PBS(pH=6.8),其后進(jìn)行離心處置,控制離心時(shí)間為15 min,離心速度為3000 轉(zhuǎn)/min。完成離心處置后,倒掉上清液,再次加入PBS,混勻后接入MGIT(5 ml),使用培養(yǎng)機(jī)進(jìn)行檢測(cè)。

觀察組應(yīng)用Xpert 系統(tǒng)(美國(guó)Cepheid 公司)進(jìn)行檢測(cè),采集1 ml 痰液樣本放置于離心管中,加入樣本試劑處理液蓋好蓋子,螺旋震蕩10～20 次,于室溫狀態(tài)下靜置15 min。將液化樣品吸入無菌移液管中,并將其緩慢加入反應(yīng)盒中,放置于Xpert 檢測(cè)模塊,進(jìn)行自動(dòng)檢測(cè),根據(jù)循環(huán)閾值(CT)判斷耐藥性及陽(yáng)性,采用6 個(gè)信號(hào)探針檢測(cè),陽(yáng)性即CT≤38,5 個(gè)信號(hào)探針檢測(cè)時(shí)顯示≥2 個(gè)探針的CT≤38 判斷為檢測(cè)到MTB。耐藥性分為3 個(gè)量級(jí)：耐藥［△CT 值＞3.5(△CT 值=特異性分子信標(biāo)早期-晚期CT 值)］、敏感(△CT 值≤3.5)、不確定(早期CT 值＞34.5,晚期CT 值＞38)。

觀察組、對(duì)照組分別根據(jù)Xpert、BD960 結(jié)果制定治療方案給予標(biāo)準(zhǔn)治療。

1.3 觀察指標(biāo) 對(duì)比兩組的診斷效能、診斷時(shí)間及臨床診療路徑指標(biāo)。診斷效能指標(biāo)包括敏感度、特異度、陰性預(yù)測(cè)值及陽(yáng)性預(yù)測(cè)值,其中敏感度=真陽(yáng)性/(真陽(yáng)性+假陰性)×100%、特異度=真陰性/(真陰性+假陽(yáng)性)×100%、陰性預(yù)測(cè)值=真陰性/(真陰性+假陰性)×100%、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值=真陽(yáng)性/(真陽(yáng)性+假陽(yáng)性)×100%。臨床診療路徑指標(biāo)包括初治、復(fù)治、MDR-TB 患者的住院天數(shù)、治療周期、檢測(cè)費(fèi)用。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組的診斷效能比較 觀察組的敏感度、特異度、陰性預(yù)測(cè)值及陽(yáng)性預(yù)測(cè)值均高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組的診斷效能比較(n,%)

2.2 兩組的診斷時(shí)間比較 觀察組的診斷時(shí)間為(2.13±0.26)h,明顯短于對(duì)照組的(324.57±102.32)h,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=56.986,P=0.000＜0.05)。

2.3 兩組的臨床診療路徑指標(biāo)比較 觀察組的初治、復(fù)治、MDR-TB 患者住院天數(shù)、治療周期均短于對(duì)照組,檢測(cè)費(fèi)用均低于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2 兩組的臨床診療路徑指標(biāo)比較()

表2 兩組的臨床診療路徑指標(biāo)比較()

注：與對(duì)照組同類患者比較,aP＜0.05

3 討論

我國(guó)是結(jié)核疾病高負(fù)擔(dān)的國(guó)家之一,而結(jié)核疾病傳染源為結(jié)核患者,經(jīng)飛沫傳播結(jié)核菌微粒,其中PTB患病率極高,遠(yuǎn)高于其他器官結(jié)核［3］。目前還未研究出更加有效、安全的結(jié)核疫苗,因此加強(qiáng)潛伏期PTB感染防治、診斷研究是有必要的［4-6］。臨床路徑即關(guān)鍵性路徑,PTB 臨床路徑是由醫(yī)療機(jī)構(gòu)多學(xué)科專業(yè)人員共同制定,針對(duì)PTB 疾病的標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃,將符合診斷標(biāo)準(zhǔn)PTB 患者納入路徑中,以縮短住院時(shí)間,提高治療經(jīng)濟(jì)效益,為患者安排最理想的治療護(hù)理方案,規(guī)范診療操作,減少不必要且不合理的治療行為,提高診療活動(dòng)目的性、計(jì)劃性。

Xpert 技術(shù)屬于快速診斷試驗(yàn)技術(shù),其作用原理是以實(shí)時(shí)熒光定量(PCR)為原理的全自動(dòng)分子診斷方法,通過核酸提取、擴(kuò)增等核酸擴(kuò)增技術(shù)(NAAT),可以在2 h 內(nèi)檢測(cè)出MTB、RIF 耐藥情況,具有敏感度較高、用時(shí)少優(yōu)勢(shì),可以指導(dǎo)臨床快速識(shí)別MDR-TB 患者,以便針對(duì)性合理用藥,提高治療效果。

綜上所述,Xpert 技術(shù)應(yīng)用于PTB 臨床路徑中臨床效果顯著,具有較高敏感度、特異度,且可以縮短檢測(cè)時(shí)間,降低檢測(cè)費(fèi)用,縮短住院時(shí)間及治療周期,值得臨床推廣。