一種復(fù)合型抗光老化面霜的制備

潘筱婕， 申琳靖， 張立秋， 蔣碩， 許雲(yún)， 盧家樂(lè)， 施溯筠

(延邊大學(xué) 藥學(xué)院， 吉林 延吉 133002)

0 引言

研究表明，紫外線損傷可造成人體皮膚干燥、色斑和皺紋增多等皮膚老化問(wèn)題[1].近年來(lái)，一些富含天然植物提取物的市售防曬產(chǎn)品因具有抗衰老和光防護(hù)以及副作用小等優(yōu)點(diǎn)受到消費(fèi)者的青睞[2].現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明：金黃洋甘菊(chrysanthellumindicum)含有豐富的黃酮類(lèi)和三萜類(lèi)物質(zhì)，具有較強(qiáng)的抗氧化能力[3].乳木果油(shea butter)含有菠菜甾醇、肉桂酸酯等物質(zhì)，對(duì)皮膚具有良好的保濕、抗衰老及再生的功能[4].目前為止，尚未發(fā)現(xiàn)有利用這2種植物組合制成的抗光老化面霜，為此文本以金黃洋甘菊提取液和乳木果油為主要活性成分制備了一款抗光老化面霜，并通過(guò)試驗(yàn)測(cè)試了其有效性.

1 材料與儀器

1.1 材料

金黃洋甘菊全草干品，購(gòu)于延吉市北京同仁堂藥店(北京仟草中藥飲片有限公司)；乳木果，購(gòu)于延吉市友進(jìn)超市.

1.2 試劑

生育酚、卡波姆940、環(huán)五聚二甲基硅氧烷、PEG-60、合成角鯊?fù)?山東優(yōu)索化工科技有限公司)；乙醇(茂名市雄大化工有限公司)；正己烷(渥克化學(xué)上海有限公司)；甘油、肉豆蔻酸異丙酯(臨沂綠森有限公司)；山梨醇酐單硬脂酸脂(寧波王龍科技有限公司)； 1,3-丁二醇(日本Oxea有限公司)；乙二胺四乙酸二鈉(遼寧永強(qiáng)醫(yī)藥械化玻有限公司試劑廠)；苯氧乙醇(浙江圣效有限公司)； 1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH，北京華越樣生物有限公司).

1.3 儀器

FA-2004電子天平(上海良品儀器儀表有限公司)；HH-6型恒溫水浴鍋(金壇市科技儀器有限公司)；UV-2201型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(島津公司)； DHG-9023A型電熱恒溫鼓風(fēng)干箱(常州諾基儀器有限公司)； SK-Ш數(shù)字水分皮膚測(cè)試儀(深圳凱爾電子有限公司)； W-2100型智能皮膚分析儀(廣州魔奇美容儀器設(shè)備有限公司)； 1s斑試器(北京百億怡達(dá)科技開(kāi)發(fā)有限公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海申生科技有限公司)；超聲波清洗器(和科達(dá)超聲設(shè)備有限公司)；破碎機(jī)(世邦工業(yè)科技集團(tuán)).

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 藥材的提取過(guò)程

2.1.1金黃洋甘菊提取液的制備

參考文獻(xiàn)[5]的方法制備金黃洋甘菊提取液.準(zhǔn)確稱取剪碎金黃洋甘菊10.0 g，用體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇加熱回流提取1 h，料液比為1∶10 (g/mL)；離心提取液15 min (12 000 r/min)，取上清液過(guò)濾(濾紙)，濾液用體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇定容至25 mL；取溶液1 mL，用體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇將其定容至5 mL，所得溶液即為金黃洋甘菊提取液.

2.1.2乳木果油的制備

參考文獻(xiàn)[6]的方法制備乳木果油.將乳木果切開(kāi)取出其核洗凈，干燥，粉碎.稱取適量的乳木果粉置于燒杯中，加入正己烷，料液比為1∶25 (g/mL)；超聲提取52 min (50 ℃、320 W)，抽濾去除藥渣后濃縮濾液即得乳木果油.

2.2 DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)

按照文獻(xiàn)[7]的方法配置DPPH溶液，并將金黃洋甘菊提取液配制成質(zhì)量濃度為0.125、1、4、6、8 mg/L和10 mg/L的待測(cè)樣.參照文獻(xiàn)[8]中的溶液體系配置方法，將試驗(yàn)所需溶液配置成表1所列的3種體系.取4.0 mL待測(cè)樣加入4.0 mL 0.1 mmol/L的DPPH乙醇溶液中，混勻避光放置30 min后在波長(zhǎng)517 nm處測(cè)定溶液的吸光度，記為A1； 取4.0 mL不同質(zhì)量濃度的待測(cè)樣和4.0 mL 85%(體積分?jǐn)?shù))的乙醇混勻后在波長(zhǎng)517 nm處測(cè)定溶液的吸光度，記為A2； 取4.0 mL 0.1 mmol/L的DPPH乙醇溶液與4.0 mL 85%(體積分?jǐn)?shù))的乙醇混勻后在波長(zhǎng)517 nm處測(cè)定溶液的吸光度，記為A3.按式(1)計(jì)算各溶液的DPPH自由基清除率(R)：

R=[1-(A1-A2)/A3]×100%.

(1)

2.3 面霜的配制

根據(jù)文獻(xiàn)[9]中的配制方法和本文的預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果制定了如表2所示的面霜配方.

表2 面霜配方

參考文獻(xiàn)[10]的方法配制面霜，具體步驟為： ①將B相中的卡波姆940溶解后置于85 ℃(恒溫)水浴鍋中.②將A相和B相分別加熱至70～75 ℃，完全融化后恒溫放置30 min.③攪拌條件下將剩余的B相加入卡波姆940中，攪拌5 min后加入A相并再攪拌30 min.④將上述混合物自然冷卻至50 ℃時(shí)加入C相，低速攪拌下冷卻至室溫并放置24 h.

2.4 單因素實(shí)驗(yàn)

2.4.1增稠劑環(huán)五聚二甲基硅氧烷用量的選擇

在乳化劑PEG-60的用量為0.6%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))、保濕劑甘油的用量為12.8%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))的情況下，以環(huán)五聚二甲基硅氧烷為單因素進(jìn)行試驗(yàn).試驗(yàn)中環(huán)五聚二甲基硅氧烷的用量分別選取6.0%、7.0%、8.0%、9.0%、10.0%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))，并以此確定最佳的環(huán)五聚二甲基硅氧烷用量.

2.4.2乳化劑PEG-60用量的選擇

在環(huán)五聚二甲基硅氧烷的用量為8.0%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))、保濕劑甘油的用量為12.8%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))的情況下，以PEG-60為單因素進(jìn)行試驗(yàn).試驗(yàn)中PEG-60的用量分別選取0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))，并以此確定最佳的PEG-60用量.

2.4.3保濕劑甘油用量的選擇

在環(huán)五聚二甲基硅氧烷的用量為8.0%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))、PEG-60的用量為0.6%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))的情況下，以甘油為單因素進(jìn)行試驗(yàn).試驗(yàn)中甘油的用量分別選取4.8%、6.8%、8.8%、0.8%、12.8%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))，并以此確定最佳的甘油用量.

2.5 正交實(shí)驗(yàn)

基于預(yù)實(shí)驗(yàn)，正交實(shí)驗(yàn)選取影響面霜質(zhì)量較大的油相配比(A)、水相配比(B)、乳化劑配比(C)及主藥與輔料的配比(D)作為考察因素.每個(gè)因素各取3個(gè)水平，并按正交實(shí)驗(yàn)因素水平表(表3)配制面霜.配制完面霜后(共9份)，從外觀、耐寒、耐熱、離心實(shí)驗(yàn)等方面對(duì)其進(jìn)行綜合性評(píng)分,以此篩選最佳的制備工藝.評(píng)分方法為:綜合評(píng)分滿分為100分, 其中外觀狀態(tài)總分為15分，耐熱試驗(yàn)總分為15分，耐寒試驗(yàn)總分為20分，離心試驗(yàn)總分為50分[11].

表3 正交實(shí)驗(yàn)的因素水平

2.5.1面霜穩(wěn)定性測(cè)試

1)耐寒耐熱性測(cè)試.取等量的面霜分別置于3個(gè)25 mL的燒杯中，用保鮮膜封口后分別將其在-10 ℃的冰箱和25 ℃、40 ℃的恒溫箱中放置24 h，恢復(fù)室溫后觀察面霜是否產(chǎn)生分層、泛粗、變色等現(xiàn)象.

2)離心測(cè)試.取等量的面霜分別置于3個(gè)25 mL的離心管中并離心(轉(zhuǎn)速分別為1 000、2 000、3 000 r/min) 10 min.離心結(jié)束后，觀察面霜是否產(chǎn)生分層、泛粗、變色等現(xiàn)象.

2.6 人體皮膚刺激性測(cè)試

依據(jù)《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》[12]進(jìn)行人體斑貼試驗(yàn).選取年齡為18～30歲的5名男性和5名女性作為受試者(無(wú)皮膚疾病和無(wú)醫(yī)源性皮膚敏感).斑貼試驗(yàn)在受試者的前臂內(nèi)側(cè)和耳后進(jìn)行.耳后斑貼試驗(yàn)在試驗(yàn)30 min后去除受試物斑試器，前臂內(nèi)側(cè)斑貼試驗(yàn)分別在試驗(yàn)0.5、12、24 h后去除受試物斑試器.完成試驗(yàn)后觀察皮膚反應(yīng)，并參考表4[13]進(jìn)行評(píng)價(jià).

表4 皮膚斑貼試驗(yàn)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

2.7 面霜成品的功效測(cè)試

選取5名受試者測(cè)試，受試者的條件為：年齡為37～45歲,平時(shí)有使用護(hù)膚品的習(xí)慣，無(wú)皮膚疾病和無(wú)醫(yī)源性皮膚敏感，眼周有肉眼可見(jiàn)的細(xì)紋、皺紋以及色素沉著.測(cè)試采用半臉測(cè)試，即受試者每天在左側(cè)半臉早晚使用1次面霜，連續(xù)8周(在試驗(yàn)期間不使用其他類(lèi)護(hù)膚品).試驗(yàn)過(guò)程中分別在第0、2、4、6、8周隨訪1次.每次隨訪時(shí)，在受試者左眼周取3個(gè)點(diǎn)，分別為距外眥0.5 cm處[14]和距外眥與內(nèi)眥連線中點(diǎn)0.5 cm處的上瞼、下瞼[15]，然后利用智能皮膚分析儀進(jìn)行數(shù)據(jù)采集(每次采集每名受試者均重復(fù)3次).采集的數(shù)據(jù)為水分、油份、紋理、膚色、色素、敏感性和毛孔的數(shù)值.數(shù)據(jù)采集完成后，計(jì)算各項(xiàng)指標(biāo)均值，并對(duì)第0周與第8周進(jìn)行單因素方差分析，以此評(píng)估使用產(chǎn)品前后眼周皮膚的改善情況.測(cè)試前，受試者需清洗晾干面部，并在溫度為(25±1) ℃、相對(duì)濕度為(60±1)%的環(huán)境下靜坐0.5 h.

3 結(jié)果與分析

3.1 DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)

圖1為不同質(zhì)量濃度的金黃洋甘菊提取液對(duì)DPPH自由基的清除率實(shí)驗(yàn)結(jié)果.由圖可以看出，金黃洋甘菊提取液對(duì)DPPH自由基具有較強(qiáng)的清除能力.金黃洋甘菊的質(zhì)量濃度在0.125～8.0 mg/mL范圍時(shí)，其提取液對(duì)DPPH自由基的清除率隨提取液質(zhì)量濃度的增加而增加，且質(zhì)量濃度為8.0 mg/mL時(shí)，其對(duì)DPPH自由基的清除率達(dá)到最高值(85.35%)；當(dāng)金黃洋甘菊的質(zhì)量濃度大于8.0 mg/mL時(shí)，其提取液對(duì)DPPH自由基的清除率趨于平穩(wěn).趨于平穩(wěn)的原因是隨著金黃洋甘菊提取液質(zhì)量濃度的增加，其對(duì)DPPH自由基的清除能力接近飽和.

圖1 不同質(zhì)量濃度的金黃洋甘菊提取液對(duì)DPPH自由基的清除率

3.2 單因素實(shí)驗(yàn)

3.2.1增稠劑含量的篩選

圖2為不同質(zhì)量濃度的環(huán)五聚二甲基硅氧烷對(duì)面霜基質(zhì)外觀形態(tài)的評(píng)分影響.由圖可以看出，環(huán)五聚二甲基硅氧烷的質(zhì)量濃度為8.0%時(shí)，面霜外觀形態(tài)的評(píng)價(jià)分?jǐn)?shù)最高，即此時(shí)面霜外觀形態(tài)表現(xiàn)為最好，因此本文將環(huán)五聚二甲基硅氧烷的使用量確定為8.0%.

圖2 不同質(zhì)量濃度的環(huán)五聚二甲基硅氧烷對(duì)面霜基質(zhì)外觀形態(tài)的評(píng)分影響

3.2.2乳化劑含量的篩選

圖3為不同質(zhì)量濃度的PEG-60對(duì)面霜基質(zhì)延展性的評(píng)分影響.由圖可以看出， PEG-60的質(zhì)量濃度為0.6%時(shí)，面霜延展性的評(píng)價(jià)分?jǐn)?shù)最高，即此時(shí)面霜延展性表現(xiàn)為最好，因此本文將PEG-60的使用量確定為0.6%.

圖3 不同質(zhì)量濃度的PEG-60對(duì)面霜基質(zhì)延展性的評(píng)分影響

3.2.3保濕劑含量的篩選

圖4為不同質(zhì)量濃度的甘油對(duì)皮膚角質(zhì)層含水量的影響.由圖可以看出，甘油的質(zhì)量濃度為12.8%時(shí)，皮膚角質(zhì)層的含水量表現(xiàn)為最好，因此本文將甘油的使用量確定為12.8%.

3.3 正交實(shí)驗(yàn)

表5為不同因素配比對(duì)面霜理化性質(zhì)的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果.由表5可知，試驗(yàn)序號(hào)7的綜合評(píng)分最高(為95.6分)，因此面霜制備工藝的最佳組合為A3B1C3D2.由表6可以看出：影響乳劑穩(wěn)定性的4個(gè)因素的主次順序?yàn)? C(乳化劑)> D(主藥與輔料)> B(水相)> A(油相).綜合表5和表6可得面霜的最佳組合配比，如表7所示.

圖4 不同質(zhì)量濃度的甘油在180 min內(nèi)對(duì)皮膚角質(zhì)層含水量的影響

表5 面霜的正交試驗(yàn)結(jié)果

表6 乳劑穩(wěn)定性因素的方差分析結(jié)果

3.4 人體刺激性試驗(yàn)

對(duì)受試者進(jìn)行皮膚的斑貼試驗(yàn)顯示，10名受試者的斑貼試驗(yàn)結(jié)果均為陰性，由此表明本文制備的面霜對(duì)人體無(wú)明顯的刺激性和致敏性，即安全性能良好.

3.5 面霜成品功效測(cè)試

表8為受試者使用面霜成品后對(duì)皮膚的改善效果.由表可以看出，受試者使用面霜后其皮膚在水分、紋理、膚色、色素等指標(biāo)方面均有顯著改善，且其使用時(shí)間越長(zhǎng)改善效果越好.油份、敏感性、毛孔等指標(biāo)未出現(xiàn)明顯改善，這可能與試驗(yàn)周期較短有關(guān)，今后需增加試驗(yàn)周期來(lái)進(jìn)一步確認(rèn).

表7 面霜最終配方的配比

表8 皮膚指標(biāo)值的變化情況

4 結(jié)論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本文基于金黃洋甘菊提取液與乳木果油制備的面霜的理化指標(biāo)符合中華人民共和國(guó)輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(QB/T1857—2013)中的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，且具有抗光老化功效；因此，本文制備的抗光老化面霜具有良好的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值.