雜交構(gòu)樹青貯對湖羊生長性能和血液指標(biāo)的影響

范 玥，黃越川，馬亦珩，王 炳，李鶴瓊，宛 博，羅海玲*

（1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，動物營養(yǎng)學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193；2.臨清潤林牧業(yè)有限公司，山東臨清 252600）

隨著人民生活水平的提高，人們對羊肉的需求量逐漸加大，刺激了養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展。據(jù)國家統(tǒng)計(jì)局，2020年我國羊肉產(chǎn)量492.31 萬t，較2010 年增加了86.29 萬t，達(dá)到歷史最高水平。但是，我國飼料資源短缺，豆粕等蛋白飼料過度依賴于進(jìn)口，傳統(tǒng)的飼草資源難以滿足養(yǎng)羊業(yè)快速發(fā)展的需求。構(gòu)樹作為一種非常規(guī)飼料，分布廣、適應(yīng)性強(qiáng)，具有粗蛋白質(zhì)含量高的優(yōu)點(diǎn)，其葉粗蛋白質(zhì)含量為28.7%，高于苜蓿草粉（22.0%），構(gòu)樹枝葉粉的粗蛋白質(zhì)含量亦能達(dá)到17.0%。因此，開發(fā)構(gòu)樹的飼草資源潛力能夠緩解我國飼料短缺的矛盾，并在一定程度上減少豆粕等蛋白飼料的使用，減輕我國畜牧業(yè)對進(jìn)口飼料的依賴。此外，構(gòu)樹富含黃酮類化合物等生物活性物質(zhì)，能夠調(diào)節(jié)血脂、抗炎抗菌和抗氧化，存在潛在調(diào)控反芻動物健康的作用，近年來備受養(yǎng)殖業(yè)關(guān)注和應(yīng)用。而血液指標(biāo)可反映動物機(jī)體各項(xiàng)機(jī)能的變化，包括動物的代謝水平、免疫力和抗應(yīng)激能力。但目前關(guān)于構(gòu)樹對綿羊（特別是多羔綿羊品種）生長性能和血液指標(biāo)的影響及其在綿羊飼糧中的利用技術(shù)缺乏系統(tǒng)研究。因此，本試驗(yàn)旨在研究不同比例雜交構(gòu)樹青貯全混合飼糧對綿羊生長性能及血液指標(biāo)的影響，篩選雜交構(gòu)樹青貯在飼糧中的適宜比例，以期更好地開發(fā)構(gòu)樹飼草資源并為其在生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 雜交構(gòu)樹采伐高度約120 cm，留茬高度約20 cm，莖葉全株采伐，粉碎長度小于2 cm（無揉絲），制成裹包青貯，每包重量約85 kg，具體營養(yǎng)成分見表1。

表1 雜交構(gòu)樹青貯營養(yǎng)成分含量（干物質(zhì)基礎(chǔ)） %

1.2 試驗(yàn)動物與試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)于2020 年8 月20 日至12 月1 日在山東省臨清潤林牧業(yè)有限公司育肥羊場進(jìn)行。選取60 只健康狀況良好、約90 日齡、體重（21.09±2.09）kg 的湖羊（多羔綿羊）斷奶公羔，隨機(jī)分為4 組，每組15 只，分別飼喂雜交構(gòu)樹青貯占飼糧（干物質(zhì)基礎(chǔ)）的0%（T0 組，對照組）、10%（T10 組）、20%（T20 組）和30%（T30 組）的試驗(yàn)飼糧。4 組飼糧等能等氮，基于NRC（2007）標(biāo)準(zhǔn)配制，滿足該階段肉羊營養(yǎng)需求。飼糧組成和營養(yǎng)成分見表2。預(yù)試期14 d，正試期90 d。

表2 飼糧組成及營養(yǎng)成分（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)羊單欄飼養(yǎng)，單獨(dú)飼喂，自由飲水。每日09:00 和15:00 飼喂，每次飼喂前清槽。飼喂量根據(jù)試驗(yàn)羊每日的采食情況及時調(diào)整，保證每日有剩料。試驗(yàn)羊舍定期殺菌消毒，按時清掃，保證羊舍和路面的清潔和衛(wèi)生。

1.4 樣品收集及測定

1.4.1 生長性能 試驗(yàn)開始前用四分法分別收集飼料原料樣品，隨后測定各樣品營養(yǎng)成分含量。試驗(yàn)期間每日記錄每只試驗(yàn)羊的飼喂量、剩料量，計(jì)算采食量，并根據(jù)飼糧原料成分的干物質(zhì)含量及飼糧組成比例計(jì)算平均干物質(zhì)采食量（ADMI）。于正試期開始對所有試驗(yàn)羊稱重，記錄初始體重。試驗(yàn)結(jié)束后，對所有試驗(yàn)羊稱量終末體重，計(jì)算平均日增重（ADG）以及耗料增重比。

1.4.2 血樣采集 于試驗(yàn)正試期中期（第48 天）及末期（第88 天）對所有試驗(yàn)羊進(jìn)行頸靜脈采血，血樣靜置后3 000 r/min 離心10 min，取上清分裝入1.5 mL 離心管中，液氮保存，待測。血樣送至北京金?？朴缟锟萍及l(fā)展有限公司進(jìn)行檢測。血樣中葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）含量采用生化法測定，試劑盒來源于上海科華生物工程股份有限公司；非酯化脂肪酸（NEFA）、-羥丁酸（BHBA）、胰島素（INS）、脂聯(lián)素（ADPN）、瘦素（LEP）含量采用ELISA（雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）法檢測，試劑盒來源于北京金海科隅生物科技發(fā)展有限公司；免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）采用生化比色法檢測，試劑盒來源于北京金?？朴缟锟萍及l(fā)展有限公司（IgG、IgA）和南京建成生物技術(shù)研究所（MDA、GSH-Px）。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel（2016）初步統(tǒng)計(jì)，再采用SAS 9.2 中的MIXED 模型進(jìn)行單因素方差分析，正交多項(xiàng)式對比（線性和二次）用于統(tǒng)計(jì)不同比例構(gòu)樹青貯的線性或二次性變化。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以最小二乘均值和標(biāo)準(zhǔn)誤（SEM）的形式表示，以<0.05 為存在顯著差異的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例對湖羊生長性能的影響如表3 所示，隨著飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例增加，湖羊的終末體重、ADMI、ADG 存在顯著差異和線性增加趨勢（<0.05），耗料增重比不存在顯著差異。

表3 飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例對湖羊生長性能的影響

2.2 飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例對湖羊血液營養(yǎng)代謝指標(biāo)的影響 由表4 可知，飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例（即處理）對湖羊血液中的GLU、BUN、CRE 存在顯著影響，對其余營養(yǎng)代謝指標(biāo)無顯著影響。T10 組的GLU含量低于T20、T30 組（<0.05）。隨著飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例增加，湖羊血液中BUN 含量呈線性增加（<0.05），CRE 含量呈線性和二次曲線增加（<0.05）。雜交構(gòu)樹青貯不同比例和采血時間對湖羊血液中的NEFA、BHBA、CRE、INS、ADPN、LEP 含量存在交互作用（<0.05），對其他營養(yǎng)代謝指標(biāo)不存在交互作用（>0.05）。由圖1 可知，試驗(yàn)中期，隨著飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例增加，NEFA 含量降低（<0.05）；試驗(yàn)?zāi)┢?，各組的NEFA 含量無顯著差異。BHBA、INS、ADPN 含量的變化與NEFA 類似。LEP 含量在試驗(yàn)中期的變化與NEFA 類似，試驗(yàn)?zāi)┢陔S著飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例增加，LEP 含量升高（<0.05）。試驗(yàn)中期時，T0 組CRE 含量低于其他三組（<0.05），而在試驗(yàn)?zāi)┢?，T0 組的CRE 含量與T10 組無顯著差異，低于T20、T30 組（<0.05）。

圖1 雜交構(gòu)樹青貯不同比例對湖羊血液營養(yǎng)代謝指標(biāo)的影響

表4 飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例對湖羊血液營養(yǎng)代謝指標(biāo)的影響

2.3 飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例對湖羊免疫和抗氧化指標(biāo)的影響 由表5 可知，構(gòu)樹青貯不同比例、采血時間對湖羊的IgG、IgA、MDA、GSH-Px 含量存在顯著影響，隨著飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例增加，IgG、MDA含量線性降低（<0.05），IgA、GSH-Px 含量線性增加（<0.05）。雜交構(gòu)樹青貯不同比例和采血時間對湖羊的IgG、IgA、MDA、GSH-Px 含量均存在交互作用（<0.05）。由圖2 可知，試驗(yàn)中期，隨著飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例的增加，IgG 和MDA 含量呈先升高后降低（<0.05）；而在試驗(yàn)?zāi)┢?，隨著飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例增加，IgG 和MDA 含量均呈先降低后升高（<0.05）。IgA 和GSH-Px 含量的 變化與IgG 和MDA 含量的變化相反。

圖2 雜交構(gòu)樹青貯不同比例對湖羊免疫和抗氧化指標(biāo)的影響

表5 飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例對湖羊免疫和抗氧化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例對湖羊生長性能的影響Tao 等研究發(fā)現(xiàn)，以15% 的雜交構(gòu)樹青貯替代原有TMR 飼料，可增加肉牛的ADG 等生長性能；而構(gòu)樹對育肥肉羊、湘沙豬配套系商品豬或育肥豬的生長性能無不良影響，說明構(gòu)樹能夠部分替代傳統(tǒng)飼料用于畜禽養(yǎng)殖且對其生長性能無不利影響。本試驗(yàn)中，隨著飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例增加，湖羊的ADMI 增加，原因可能是構(gòu)樹青貯適口性好，羊喜食，ADG、終末體重也隨之增加。

3.2 飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例對湖羊血液營養(yǎng)代謝指標(biāo)的影響

3.2.1 飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例對湖羊血液糖脂代謝指標(biāo)的影響 本試驗(yàn)中期時，湖羊的INS 含量隨雜交構(gòu)樹青貯比例的增加而降低。黃酮類物質(zhì)具有增強(qiáng)INS 敏感性的作用，而構(gòu)樹富含黃酮類物質(zhì)，1 kg 構(gòu)樹葉中含有15.31 g 總黃酮。因此，本試驗(yàn)中期時，構(gòu)樹中的黃酮類化合物可能增強(qiáng)了機(jī)體的INS 敏感性，單位INS 的效果提高，導(dǎo)致構(gòu)樹青貯組的INS 分泌減少，但具體機(jī)制仍需進(jìn)一步研究證實(shí)。ADPN 是INS 增敏激素，與血脂含量呈負(fù)相關(guān)，具有降糖、降血脂和抗氧化等作用。LEP 能夠作用于下丘腦從而抑制食欲、增加能量消耗。GLU 含量增加在一定程度上是由能量攝入量增加引起。本研究中各組飼糧等能等氮，隨著飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例增加，湖羊的采食量增加，攝入能量增多，這可能是導(dǎo)致GLU 升高的原因。也有研究發(fā)現(xiàn)構(gòu)樹青貯對畜禽血清GLU 含量無顯著影響。NEFA 和BHBA 是反映機(jī)體脂類代謝情況的重要指標(biāo)，二者含量呈正相關(guān)關(guān)系。本試驗(yàn)中期，構(gòu)樹青貯組的NEFA 含量降低，與之類似，研究表明桑葉多糖或桑葉黃酮能夠降低糖尿病大鼠的血液游離脂肪酸濃度。試驗(yàn)結(jié)束時，不同構(gòu)樹青貯比例對湖羊的INS、ADPN、NEFA、BHBA 含量均無顯著影響，說明隨著飼喂時間延長，湖羊?qū)?gòu)樹產(chǎn)生適應(yīng)性，構(gòu)樹對其糖脂代謝無太大影響。

3.2.2 飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例對湖羊其他營養(yǎng)代謝指標(biāo)的影響 BUN 增高的原因之一是飼糧中蛋白質(zhì)含量充足，已可滿足動物的蛋白質(zhì)需要。Hua 等以不同比例的構(gòu)樹替代玉米青貯飼喂山羊后其尿氮排泄量和氮貯留量增加。CRE 是肌肉代謝產(chǎn)物，隨著飼糧中構(gòu)樹青貯比例及湖羊體重增加，可能導(dǎo)致湖羊的肌肉絕對量增加，這可能是雜交構(gòu)樹青貯組CRE 含量升高的原因。

3.3 飼糧中雜交構(gòu)樹青貯比例對湖羊免疫、抗氧化指標(biāo)的影響 免疫球蛋白是反映機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)。黃偉等發(fā)現(xiàn)，構(gòu)樹總黃酮能夠改善免疫抑制小鼠的IgG 合成和分泌；司丙文等、張生偉等研究發(fā)現(xiàn)，在肉羊飼料中添加構(gòu)樹青貯能夠顯著增加肉羊血清中IgG、IgA 和IgM 含量；關(guān)于構(gòu)樹對奶牛或仔豬影響的研究表明，構(gòu)樹或其提取物能夠提高畜禽的IgG 和IgA含量，提高動物的免疫功能。而本試驗(yàn)中，隨著雜交構(gòu)樹青貯比例的增加，湖羊的IgG 含量線性下降，這可能是雜交構(gòu)樹的比例、營養(yǎng)物質(zhì)含量或加工方式不同造成的試驗(yàn)結(jié)果差異，其具體機(jī)制需要后續(xù)研究來進(jìn)一步探明。組織氧化損傷程度與抗自由基能力呈正比，當(dāng)自由基含量超過身體系統(tǒng)的抗氧化能力時就會發(fā)生氧化應(yīng)激，對動物的生長發(fā)育產(chǎn)生負(fù)面影響。黃酮類化合物能夠中和氧自由基，去除過氧化氫和超氧離子，達(dá)到控制氧化應(yīng)激的目的。羅影等發(fā)現(xiàn)，葛花總黃酮能夠增強(qiáng)I 型糖尿病大鼠的抗氧化能力。構(gòu)樹富含黃酮類化合物，這可能是其提高畜禽抗氧化能力的原因之一。Chen 等發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加構(gòu)樹葉提取物能夠增強(qiáng)仔豬的抗氧化能力。與之類似，本試驗(yàn)中，T30 組即飼糧中含30% 雜交構(gòu)樹青貯能夠最大程度地提高湖羊的GSH-Px 含量，降低MDA 含量，提高了湖羊的抗氧化能力。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，飼糧中不同比例雜交構(gòu)樹青貯能夠提高湖羊的采食量、生長性能，可提高湖羊的抗氧化能力。在本試驗(yàn)條件下，飼糧含30% 雜交構(gòu)樹青貯的飼喂效果較佳。