茵陳蒿湯對梗阻性黃疸肝膽濕熱證術(shù)后IL-6及免疫功能的調(diào)控作用分析

何守敏　傅軍　王梽　丁小鳳　吳大慶　王守銘

[摘要] 目的 觀察茵陳蒿湯對梗阻性黃疸肝膽濕熱證術(shù)后IL-6及免疫功能的影響，探討梗阻性黃疸術(shù)后更加合理的治療方案。 方法 采用隨機數(shù)表法將2020年1月至2021年9月福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬人民醫(yī)院普外科收治的60例梗阻性黃疸肝膽濕熱證術(shù)后患者分為兩組，每組各30例，對照組予以常規(guī)治療，觀察組在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上輔以茵陳蒿湯治療，每組均于術(shù)后第3天、第7天、第10天檢測血液中的炎癥因子IL-6及免疫功能指標T細胞亞群CD4⁺T細胞、CD8⁺T細胞及其比值。 結(jié)果 兩組在茵陳蒿湯干預(yù)前，即術(shù)后第3天IL-6，CD4⁺T細胞，CD8⁺T淋巴細胞比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;兩組在茵陳蒿湯干預(yù)后，即術(shù)后第7，10天IL-6，CD4⁺T細胞，CD8⁺T細胞即CD4⁺/CD8⁺比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 茵陳蒿湯能夠明顯降低梗阻性黃疸肝膽濕熱證術(shù)后的炎癥因子水平，提高免疫功能T淋巴細胞亞群水平，調(diào)控作用確切，值得應(yīng)用于臨床。

[關(guān)鍵詞] 茵陳蒿湯;梗阻性黃疸;肝膽濕熱證;白細胞介素-6;免疫功能

[中圖分類號] R657.4? ? ? ? ? [文獻標識碼] B? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2022）14-0143-03

Analysis of the regulatory effect of Yinchenhao Decoction on IL-6 and immune function after operation on obstructive jaundice with liver-gallbladder damp-heat syndrome

HE Shoumin? ?FU Jun? ?WANG Zhi? ?DING Xiaofeng? ?WU Daqing? ?WANG Shouming

Department of General Surgery， People′s Hospital Affiliated to Fujian University of Traditional Chinese Medicine，F(xiàn)uzhou 350004，China

[Abstract] Objective To observe the effect of Yinchenhao Decoction on IL-6 and immune function after operation on obstructive jaundice with liver-gallbladder damp-heat syndrome， and to explore a more reasonable postoperative treatment scheme for obstructive jaundice. Methods A total of 60 patients who had undergone operation on obstructive jaundice with liver-gallbladder damp-heat syndrome in the Department of General Surgery of our hospital from January 2020 to September 2021 were randomly divided into two groups，with 30 cases in each group. The control group was treated with routine treatment，and the observation group was treated with Yinchenhao Decoction on the basis of routine treatment. The inflammatory factor， interleukin-6 （IL-6） and immune function indexes，T cell subsets CD4⁺， CD8⁺and CD4⁺/CD8⁺Tcell ratio were detected on the 3 rd， 7th and 10 th day after operation. Results There was no significant difference in IL-6， CD4⁺T cells and CD8⁺T cells between the two groups before Yinchenhao Decoction intervention， that is， on the third day after operation （P>0.05）; There was significant difference in IL-6， CD4⁺T cells and CD8⁺T cells （CD4⁺/CD8⁺） between the two groups after Yinchenhao Decoction intervention， i.e. 7 and 10 days after operation （P<0.05）. Conclusion Yinchenhao Decoction can significantly reduce the level of inflammatory factors and improve the level of T cell subsets suggesting immune function after operation on obstructive jaundice with liver-gallbladder damp-heat syndrome. It has a definite regulatory effect and is worthy of clinical application.7BDA39BA-F8B1-4D78-A613-423869236A1E

[Key words] Yinchenhao Decoction; Obstructive jaundice; Liver-gallbladder damp-heat syndrome; Interleukin-6; Immune function

梗阻性黃疸作為肝膽外科的常見疾病，常因膽總管下段結(jié)石所致，極易并發(fā)急性膽管炎，影響全身多個器官，起病迅速，病情危重。手術(shù)是解除急性結(jié)石性膽管炎合并梗阻性黃疸的有效手段，可以解除病因，將感染的膽汁引流，但術(shù)后血液中仍有大量細菌殘留，仍可繼發(fā)膿毒癥乃至全身炎癥反應(yīng)。梗阻性黃疸患者術(shù)后的炎癥反應(yīng)及免疫功能調(diào)控，是術(shù)后患者能否快速康復(fù)的關(guān)鍵問題。中醫(yī)中藥作為治療梗阻性黃疸傳統(tǒng)且有效的方法，在術(shù)后調(diào)控炎癥反應(yīng)及免疫功能的作用正越來越引起廣泛重視。茵陳蒿湯出自《傷寒論》，是治療梗阻性黃疸尤其是肝膽濕熱證的常用方劑。研究觀察茵陳蒿湯對梗阻性黃疸肝膽濕熱證患者術(shù)后T淋巴細胞亞群及炎癥因子白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）的反應(yīng)，探討對免疫功能及炎癥因子的調(diào)控作用，研究梗阻性黃疸更加合理的治療方案，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬人民醫(yī)院普外科2020年1月至2021年9月收治的梗阻性黃疸患者，均為膽總管下段結(jié)石導(dǎo)致，且符合中醫(yī)辨證分型為肝膽濕熱證，共60例。對照組和觀察組按隨機數(shù)表分組，每組各30例。對照組中男16例，女14例，平均年齡（55.40±5.05）歲，平均病程（11.10±2.21）d。觀察組中男17例，女13例，平均年齡（54.37±5.78）歲，平均病程（10.97±2.65）d。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究經(jīng)筆者醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會評審?fù)ㄟ^。

1.2 診斷標準

西醫(yī)診斷標準：①病史、癥狀、體征：均有膽道疾病史，常有右上腹或中上腹悶痛不適或寒戰(zhàn)、高熱，查體常有右中上腹部壓痛。②實驗室檢查：C-反應(yīng)蛋白、降鈣素原或白細胞升高，肝功能受損（直接膽紅素、總膽紅素水平上升，谷丙及谷草轉(zhuǎn)氨酶升高）。③影像學(xué)檢查：腹部CT或MRCP明確診斷為膽總管結(jié)石引起的梗阻性黃疸。中醫(yī)辨證標準：梗阻性黃疸肝膽濕熱證參照2016年中國中醫(yī)藥出版社出版的《中西醫(yī)結(jié)合外科學(xué)》中的標準，證候表現(xiàn)為身目黃染、脅肋脹痛，陰癢、帶下黃臭，舌紅苔黃膩，脈弦數(shù)[1]。

1.3 納入標準

納入標準為此次試驗自行設(shè)定的標準，愿意接受此次實驗及符合相關(guān)診斷標準的患者，是觀察組與對照組均需要符合的本次實驗室標準，減少實驗誤差，無相關(guān)文獻佐證。①簽署本研究知情同意書，本研究愿意參與，同意接受術(shù)后隨訪;②要同時符合肝膽濕熱證中醫(yī)辨證標準及梗阻性黃疸診斷標準;③年齡18～75歲;④愿意接受手術(shù)治療，無手術(shù)禁忌證;⑤同意在術(shù)后采取中藥輔助治療。

1.4 排除標準

排除標準為此次實驗自行設(shè)定的標準，存在以下疾病及因素者會影響實驗結(jié)果，是觀察組與對照組均需要排除的本次實驗室標準，排除實驗誤差，無相關(guān)文獻佐證。①影像學(xué)檢查證實為惡性腫瘤或硬化性膽管炎引起的梗阻性黃疸;②嚴重的原發(fā)性腎、心功能不全，或嚴重影響生存的疾病者（如腫瘤），傳染病如（艾滋病）等;③哺乳期或妊娠期婦女;④對中藥茵陳蒿湯中任一成分過敏者;⑤風(fēng)濕免疫系統(tǒng)及血液系統(tǒng)疾病患者。

1.5 方法

入院后完善相關(guān)檢查，無明顯手術(shù)禁忌證，于患者進醫(yī)院后第4天，全麻下實施腹腔鏡下膽總管切開取石⁺膽道鏡探查⁺T管引流術(shù)，術(shù)后兩組同樣給予常規(guī)抗感染治療3 d，輔以常規(guī)保肝、維持水電解質(zhì)及酸堿平衡等治療，待排氣后可以清淡流質(zhì)飲食。對照組在術(shù)后進行常規(guī)西醫(yī)對癥治療，觀察組在此基礎(chǔ)上，在術(shù)后第3天開始服用茵陳蒿湯：茵陳18 g，梔子12 g，大黃6 g（茵陳蒿湯為福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬人民醫(yī)院中藥房自行配置，經(jīng)過嚴格質(zhì)量控制制備，茵陳蒿湯的各種成分茵陳、大黃、梔子為中藥，不是西藥及新藥，無明確的生產(chǎn)廠商、國藥準字、批號等），由筆者醫(yī)院中藥房代煎后制成中藥制劑包100 ml，每日2劑，連續(xù)7 d。免疫調(diào)節(jié)藥物在本研究過程中被禁止使用。

1.6 觀察指標及測定方法

患者抽取空腹靜脈血，檢測血液炎癥因子白介素-6（IL-6）及血清T淋巴細胞亞群CD4⁺T細胞、CD8⁺T細胞及其比值。

1.6.1 血液炎癥因子IL-6的檢測? 血液標本檢測方法為酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。儀器：Sunrise 酶標儀生化（瑞士TECAN 公司），漩渦震蕩儀來源于江蘇康健醫(yī)療用品有限公司，低速離心機來源于安徽嘉文儀器裝備有限公司，器材：試管架、移液槍（德國Eppendorf 公司）。試劑：人白細胞介素6（IL-6）試劑盒（上海聯(lián)碩生物科技有限公司）。按試劑盒說明進行檢測。

1.6.2 免疫功能指標T細胞亞群的檢測? 流式細胞術(shù)方法檢測T淋巴細胞亞群。儀器：漩渦震蕩儀品牌為江蘇康健醫(yī)療用品有限公司，流式細胞儀品牌為美國BD公司的BD FACSCalibur，低速離心機品牌為安徽嘉文儀器裝備有限公司。器材：試管架、移液槍（德國Eppendorf公司），流式上樣管（美國BD公司）。美國BD公司配套T淋巴細胞亞群計數(shù)試劑盒。實驗操作嚴格參照試劑盒。

1.7 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 27.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，采用t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組的IL-6水平比較

兩組在茵陳蒿湯干預(yù)前，即術(shù)后第3天IL-6值比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;兩組在茵陳蒿湯干預(yù)后，即術(shù)后第7天，第10天，IL-6值比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果顯示，茵陳蒿湯治療梗阻性黃疸肝膽濕熱證術(shù)后患者，觀察組血液中IL-6水平較對照組明顯下降。見表1。7BDA39BA-F8B1-4D78-A613-423869236A1E

2.2 兩組CD4⁺T細胞、CD8⁺T細胞及其比值水平比較

兩組在茵陳蒿湯干預(yù)前，即術(shù)后第3天，CD4⁺T細胞、CD8⁺T細胞及其比值水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;兩組在茵陳蒿湯干預(yù)后，即術(shù)后第7天，第10天，CD4⁺T細胞、CD8⁺T細胞及其比值水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果顯示，茵陳蒿湯治療梗阻性黃疸肝膽濕熱證術(shù)后患者，觀察組免疫功能水平較對照組明顯上升。見表2。

3 討論

梗阻性黃疸又稱外科性黃疸，是臨床較常見的病理狀態(tài)，常導(dǎo)致膽管內(nèi)壓升高，炎癥反應(yīng)、免疫功能及肝腎功能的改變，對機體的正常功能造成嚴重的影響[1]。梗阻性黃疸時膽管壓力大，當(dāng)超過肝膽汁分泌壓，含有大量細菌和內(nèi)毒素的膿性膽汁入血，導(dǎo)致血液中的促炎因子如白介素-6（IL-6）等的大量分泌，進而繼發(fā)全身性炎癥反應(yīng)（SIRS），從而導(dǎo)致膿毒癥、感染性休克甚至多臟器衰竭[2]。外科膽道引流術(shù)是治療梗阻性黃疸的重要方法，可以解除病因，將感染的膽汁引流，但術(shù)后黃疸消退速度緩慢，病程遷延，有研究認為術(shù)后血液中仍持續(xù)存在的炎癥因子及免疫功能受損是減黃預(yù)后差的重要因素[3]。膽道外科快速康復(fù)的核心理念是減少過度炎癥反應(yīng)，促進患者術(shù)后加速康復(fù)[4]。近年來，中醫(yī)中藥在梗阻性黃疸術(shù)后炎癥反應(yīng)及免疫功能調(diào)控方面起著越來越重要的作用[5-7]。

有研究表明，肝膽濕熱證為梗阻性黃疸常見證型，治療應(yīng)以通腑瀉熱、利濕退黃為大法[8]。茵陳蒿湯出自《傷寒論》，為治療陽黃濕熱證的代表方劑，中西醫(yī)結(jié)合外科學(xué)也明確指出茵陳蒿湯是治療梗阻性黃疸肝膽濕熱證的經(jīng)典方[9]。茵陳湯為治療黃疸之陽黃的首選方劑，具有清熱、利濕、退黃之功，尤其適于濕熱之陽黃。本方主要由茵陳、梔子、大黃組成，方中重用茵陳蒿為君藥，苦寒降泄，擅能清利肝膽脾胃濕熱，乃至黃疸第一要藥;臣以梔子清熱降火，清利三焦?jié)駸?，助茵陳引濕熱從小便而?佐以大黃泄熱逐瘀，通利大便，導(dǎo)瘀熱從大便而下[10]。臨床常用于急性病毒性或藥物性肝炎、急性膽囊炎、膽石癥、溶血癥、鉤端螺旋體病等所致黃疸，證屬濕熱者。

內(nèi)毒素血癥及高膽紅素血癥是梗阻性黃疸患者術(shù)后免疫功能受到明顯抑制的主要原因。內(nèi)毒素可刺激巨噬細胞產(chǎn)生大量IL-6、TNF-α，可激活中性粒細胞產(chǎn)生大量炎癥介質(zhì)。炎癥反應(yīng)一方面可抑制T淋巴細胞增殖及T淋巴細胞亞群的激活，降低NK細胞活性;另一方面，可促進細胞毒性T細胞活化，攻擊和破壞肝細胞，導(dǎo)致大量肝細胞壞死或凋亡，肝功能受到明顯抑制，造成機體免疫功能降低[11]。

在臨床報道中，茵陳蒿湯在改善梗阻性黃疸患者的癥狀及黃疸指數(shù)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶等生化指標，提高免疫功能，降低炎癥因子水平，減少并發(fā)癥及加速康復(fù)等方面取得了確切的療效[12-14]。在動物實驗方面，茵陳蒿湯能夠保護梗阻性黃疸大鼠模型肝臟功能及顯著降低血液中IL-6、TNF-α等促炎因子的水平，以此發(fā)揮抗炎作用，減輕機體炎癥反應(yīng)及免疫損傷[15-16]。

本研究中，梗阻性黃疸肝膽濕熱證術(shù)后患者經(jīng)過茵陳蒿湯干預(yù)后，血液中促炎因子水平IL-6較對照組明顯下降，T淋巴細胞亞群水平較對照組明顯上升。表明茵陳蒿湯在降低炎癥因子水平，提高免疫功能方面發(fā)揮重要的調(diào)控作用，效果理想，但具體的干預(yù)機制及信號通路方面有待于進一步研究探索。本研究為中醫(yī)藥對梗阻性黃疸術(shù)后患者的炎癥調(diào)控及免疫干預(yù)提供了很好的借鑒作用，為中醫(yī)藥對梗阻性黃疸術(shù)后的快速康復(fù)提供了新的思路。

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（收稿日期：2021-09-27）7BDA39BA-F8B1-4D78-A613-423869236A1E