雙歧桿菌三聯(lián)活菌膠囊對(duì)代謝相關(guān)脂肪性肝病患者腸道菌群的影響

覃屹 謝榕 唐少波(通信作者)

530022南寧市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科，廣西南寧

脂肪肝是由多種原因引起的肝細(xì)胞內(nèi)脂肪堆積過多的一種常見病變，近年來其發(fā)病率有明顯上升趨勢(shì)[1]。代謝相關(guān)脂肪性肝病(MAFLD)是比較常見的一類脂肪肝，是除外酒精和其他特定損害肝臟因素所致的臨床病理綜合征。近年來，其發(fā)病率逐漸增高且呈低齡化發(fā)展，目前其發(fā)病機(jī)制尚未明確，隨著“腸-肝軸”的提出，有研究發(fā)現(xiàn)MAFLD 腸道菌群失調(diào)、菌群移位和腸源性內(nèi)毒素血癥是導(dǎo)致MAFLD 的重要因素，因此在治療方面為微生態(tài)制劑治療MAFLD 奠定了理論基礎(chǔ)[2-4]。雙歧桿菌三聯(lián)活菌膠囊是由長(zhǎng)型雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、糞腸球菌經(jīng)適當(dāng)配合而成的活菌制劑，這些益生菌能夠改善腸道菌群，維持腸道微生態(tài)平衡，減輕全身炎性反應(yīng)。為探討雙歧桿菌三聯(lián)活菌膠囊對(duì)MAFLD 患者腸道菌群失調(diào)的影響，本研究收集72例MAFLD 患者作為研究對(duì)象，現(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法

收集南寧市第一人民醫(yī)院2018年1月-2020年12月治療的72例MAFLD患者，隨機(jī)分成觀察組和對(duì)照組，各36 例。觀察組男21 例，女15 例；年齡19～72 歲，平均(49.5±4.6)歲；病程1～8個(gè)月，平均(4.11±1.45)個(gè)月；體重指數(shù)(BMI)23.2～26.6 kg/m2，平均(24.88±0.63)kg/m2。對(duì)照組男20 例，女16 例；年齡18～71歲，平均(49.4±4.3)歲；病程1～7 個(gè)月，平均(4.09±1.43)個(gè)月；BMI 23.1～26.4 kg/m2，平均(24.66±0.62)kg/m2。兩組患者基本資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)經(jīng)臨床表現(xiàn)及彩色超聲示脂肪肝并經(jīng)肝功能生物化學(xué)檢查確診，均符合2010年修訂的《代謝相關(guān)脂肪性肝病診療指南》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。②無飲酒史或男性攝入酒精＜140 g/周，女性攝入酒精＜70 g/周。③臨床資料完整。④患者知情并簽字認(rèn)可。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①酒精性肝炎者。②合并精神障礙者。③合并腫瘤或全身感染性疾病。④近1個(gè)月內(nèi)使用過抗生素、益生菌等影響結(jié)果的藥物。⑤對(duì)藥物過敏者。

方法：兩組患者均能生活自理，均進(jìn)行MAFLD健康教育，低糖低脂飲食，有氧運(yùn)動(dòng)快走每周＞4次，運(yùn)動(dòng)時(shí)心率控制在(220-年齡)×0.6～(220-年齡)×0.7，累計(jì)每周運(yùn)動(dòng)時(shí)間≥150 min。對(duì)照組口服復(fù)方甘草酸苷片(秋山片劑株式會(huì)社生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：J20130077)治療，2片/次，每片含甘草酸苷25 mg、蛋氨酸25 mg、甘氨酸25 mg，飯后口服，3次/d。觀察組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上口服雙歧桿菌三聯(lián)活菌膠囊(晉城海斯制藥有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：S19993065)，420 mg/次，3 次/d。兩組患者均連續(xù)治療30 d，兩組患者在治療期間禁止食用酸奶，不使用降血脂、降血糖及其他保肝藥物，禁止使用其他抗生素、微生態(tài)制劑。抽取患者空腹靜脈血5 mL，3 500 r/min(r=10 cm) 離心5 min分離血清，采用羅氏COBAS 8000 全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定ALT、AST。收集所有研究對(duì)象排便后4 h 內(nèi)的糞便置于密閉避光的糞便儲(chǔ)存器內(nèi)作為糞便標(biāo)本待檢測(cè)，隨機(jī)迅速將裝有糞便標(biāo)本的糞便儲(chǔ)存器置于-80℃的低溫冰箱內(nèi)保存后送廣州金域公司檢測(cè)，從糞便樣本中提取細(xì)菌總DNA，然后進(jìn)行16 S 靶向擴(kuò)增、高通量測(cè)序、物種注釋及豐度分析。

觀察指標(biāo)：比較患者治療前后腸道菌群變化及肝功能谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)指標(biāo)。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析系統(tǒng)展開數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料用(±s)表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用[n(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)；以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

兩組患者治療前后腸道菌群變化比較(16S rDNA高通量測(cè)序)：治療前梭菌屬、擬桿菌屬、長(zhǎng)雙歧桿菌、糞球菌屬、嗜酸乳桿菌屬比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；治療后觀察組梭菌屬明顯下降，擬桿菌屬、長(zhǎng)雙歧桿菌、糞球菌屬、嗜酸乳桿菌屬明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組患者治療前后腸道菌群變化比較(±s，×10-1)

表1 兩組患者治療前后腸道菌群變化比較(±s，×10-1)

注：與對(duì)照組治療后比較，#P＜0.05

組別 n 擬桿菌屬(×10-1) 嗜酸乳桿菌屬(×10-2) 糞球菌屬(×10-1) 梭菌屬(×10-1) 長(zhǎng)雙歧桿菌(×10-1)觀察組 治療前 36 3.151±0.322 0.191±0.035 0.388±0.045 8.084±1.018 0.036±0.012治療后 36 5.445±1.124# 1.089±0.231# 1.086±0.573# 4.989±0.914# 1.489±0.411#t 2.113 9.118 9.462 3.278 6.532 P 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000對(duì)照組 治療前 36 3.511±0.331 0.192±0.041 0.378±0.064 8.075±1.091 0.038±0.012治療后 36 4.045±1.002 0.654±0.124 0.867±01.515 7.243±1.028 0.562±0.121 t 1.022 3.445 3.012 1.023 9.234 P 0.011 0.000 0.000 0.010 0.000

兩組患者治療前后肝功能指標(biāo)變化比較：兩組患者治療前肝功能指標(biāo)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；治療后觀察組ALT、AST 各指標(biāo)均明顯下降，觀察組明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2 兩組患者治療前后肝功能指標(biāo)變化比較(±s，U/L)

表2 兩組患者治療前后肝功能指標(biāo)變化比較(±s，U/L)

注：與對(duì)照組治療后比較，*P＜0.05

組別 n ALT AST觀察組 治療前 36 119.88±21.22 89.69±21.28治療后 36 36.59±9.22* 34.21±11.12*t 34.334 43.449 P 0.000 0.000對(duì)照組 治療前 36 118.23±22.24 89.21±20.19治療后 36 56.35±18.96 51.23±10.89 t 45.632 30.223 P 0.000 0.000

兩組患者經(jīng)30 d治療后肝功能復(fù)常率比較：觀察組肝功能復(fù)常率明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表3。

表3 兩組患者經(jīng)30 d治療后肝功能復(fù)常率比較[n(%)]

討 論

MAFLD 是一種與胰島素抵抗及遺傳易感性密切相關(guān)的代謝應(yīng)激性肝損傷，發(fā)病機(jī)制尚未明確，胰島素抵抗引起的肝內(nèi)脂質(zhì)沉積、肝細(xì)胞發(fā)生脂肪變性、各種原因所致的氧化應(yīng)激及脂質(zhì)過氧化使肝細(xì)胞發(fā)生非特異性炎性損傷，引起MAFLD，肝細(xì)胞反復(fù)出現(xiàn)炎癥壞死及再生，最終發(fā)展為肝纖維化和肝硬化，甚至肝癌[5]。有研究顯示，腸道菌群失調(diào)及腸源性內(nèi)毒素血癥在MAFLD 的發(fā)病中起著重要的作用[6]。腸道菌群數(shù)量龐大，根據(jù)腸道菌群對(duì)人體作用的不同，可將其分為有益菌、有害菌和中性菌，各菌群間按一定比例組合，形成生態(tài)平衡，構(gòu)成了腸黏膜的重要生物屏障及免疫屏障，保持腸黏膜的完整性，防止腸腔內(nèi)的毒性物質(zhì)入侵機(jī)體[7]。對(duì)于MAFLD患者，當(dāng)腸道內(nèi)有害菌異常增加、腸道菌群紊亂時(shí)，內(nèi)毒素產(chǎn)生增多，微生物屏障受到損傷，大量腸腔內(nèi)毒素移位進(jìn)入門脈系統(tǒng)，引起腸源性內(nèi)毒素血癥，內(nèi)生性乙醇增加，導(dǎo)致肝細(xì)胞損害，更重要的是激活庫(kù)普弗細(xì)胞釋放死因子-α、白細(xì)胞介素1、白細(xì)胞介素6及血栓素等炎性介質(zhì)，擴(kuò)大炎性反應(yīng)，引起肝細(xì)胞的凋亡和壞死。

本組資料MAFLD 患者雙歧桿菌和乳桿菌較少，與楊林輝等[8]報(bào)告的結(jié)果基本一致，提示MAFLD 患者腸道微生態(tài)失衡可能參與了MAFLD 的發(fā)生發(fā)展，因此，糾正腸道菌群失調(diào)是治療MAFLD的重要手段。本組資料采用雙歧桿菌三聯(lián)活菌膠囊進(jìn)行治療，患者的菌群發(fā)生了很多大變化，主要表現(xiàn)為梭菌屬明顯下降，擬桿菌屬、長(zhǎng)雙歧桿菌、糞球菌屬、嗜酸乳桿菌屬明顯升高，肝功能ALT、AST 指標(biāo)恢復(fù)正常。由此可見，雙歧桿菌三聯(lián)活菌膠囊能夠調(diào)節(jié)MAFLD 患者腸道菌群失調(diào)狀況，改善肝功能，提高臨床療效，值得臨床推廣。