鹽脅迫對大豆種子萌發(fā)過程中子葉超微結(jié)構(gòu)的影響

廖珍鳳， 王劍， 宋西嬌， 陳光， 沈夢夢， 苗瑞祥， 徐盛春

(浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 公共實驗室，浙江 杭州 310021)

大豆含有豐富的蛋白質(zhì)和油脂，是重要的糧食、經(jīng)濟(jì)作物[1-2]，也是異黃酮、維生素、纖維和礦物質(zhì)的重要來源[3]。目前，全球?qū)Υ蠖沟男枨笳诔掷m(xù)增加，但是大豆品質(zhì)和產(chǎn)量受溫度、水分、鹽堿化等非生物脅迫的影響日益顯著[4]。鹽脅迫是長期制約作物生長的主要逆境之一。全球超過6 000萬 hm2的耕地遭受不同程度鹽堿化的威脅，約占世界灌溉土地總面積的20%[3]。鹽脅迫易引起作物組織滲透失衡、過度離子毒害，抑制細(xì)胞分裂和增殖，甚至導(dǎo)致植物死亡[3,5]。

目前，國內(nèi)外對鹽脅迫下大豆生長形態(tài)、生理生化、產(chǎn)量和品質(zhì)等各方面進(jìn)行了大量研究。大豆、苦豆萌芽期經(jīng)鹽脅迫處理后，胚根的抗氧化酶含量和活性均發(fā)生變化。幼苗期出現(xiàn)發(fā)黃和萎蔫、根系生長狀況差等現(xiàn)象，當(dāng)鹽處理濃度達(dá)到0.9%時，幼苗甚至出現(xiàn)干枯死亡的情況[6]。此外，在不同類型鹽堿脅迫下，大豆單株莢數(shù)、單株粒數(shù)、百粒重等多個性狀均呈下降趨勢，直接造成大豆產(chǎn)量的減少[7]。種子萌發(fā)是植物成苗的關(guān)鍵時期，亦是植物生命周期中對鹽脅迫最敏感的時期。研究[8-10]表明，鹽脅迫處理顯著降低水稻、油菜、玉米等種子發(fā)芽率和活力。種子萌發(fā)所需蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等能量物質(zhì)主要集中在子葉細(xì)胞中的蛋白質(zhì)貯藏液泡、油體中[11-12]，但相關(guān)研究較少。細(xì)胞內(nèi)研究主要集中在葉綠體、線粒體等細(xì)胞器受鹽脅迫的影響，且多集中在幼苗或成熟植株時期。高濃度鹽脅迫下，野大麥、玉米的葉肉細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)發(fā)生嚴(yán)重病理變化，葉綠體的基粒類囊體片層結(jié)構(gòu)消失，線粒體腫脹，細(xì)胞器膜都受到不同程度的破壞[13-14]。

目前，鹽脅迫對大豆種子萌發(fā)期影響的研究多集中在生理生化水平，而對大豆萌發(fā)過程中鹽脅迫影響子葉細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的研究甚少。鑒于此，本研究利用電鏡技術(shù)，結(jié)合有關(guān)生理指標(biāo)的測定，研究鹽溶液脅迫下，大豆萌發(fā)過程中子葉細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)和形態(tài)的動態(tài)變化，簡析蛋白質(zhì)貯藏液泡、油體、質(zhì)體及其他細(xì)胞器的降解轉(zhuǎn)化過程。

1 材料與方法

1.1 材料

供試大豆品種為浙農(nóng)6號，由浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所提供。

1.2 方法

1.2.1 大豆萌發(fā)期鹽脅迫試驗

挑選籽粒飽滿、種皮無破損、無病斑的大豆種子(浙農(nóng)6號)，用無菌水沖洗數(shù)次后用于萌發(fā)試驗。用不同濃度鹽溶液潤濕的雙層長方形濾紙(20 cm×30 cm)墊底，將種子置于濾紙距離上下邊緣3 cm處，每排為9粒種子，按間隔1.5 cm依次平鋪在濾紙上，放置兩排，再將一層潤濕濾紙覆蓋于鋪好的種子上，從左至右將夾有種子的3層濾紙卷起，放入帶蓋水桶中(20 cm×20 cm)，桶內(nèi)加少量不同濃度鹽溶液保持濕潤，設(shè)3組重復(fù)。將準(zhǔn)備萌發(fā)的大豆種子置于培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)條件：25 ℃/25 ℃(晝/夜)，相對濕度70%，分為對照組(蒸餾水)，50、100和150 mmol·L-1NaCl進(jìn)行萌發(fā)實驗，每24 h更換1次相應(yīng)濃度的鹽溶液。

1.2.2 大豆萌發(fā)相關(guān)性狀指標(biāo)測定

大豆種子分別用NaCl處理，設(shè)50、100和150 mmol·L-13個濃度梯度，以蒸餾水為對照，設(shè)3組重復(fù)，每組重復(fù)18粒大豆種子。試驗期間每天記錄發(fā)芽數(shù)，以萌發(fā)大豆胚根長1 cm為萌發(fā)臨界點統(tǒng)計發(fā)芽率。統(tǒng)計一直持續(xù)8 d，并每天測定下胚軸與根的長度。統(tǒng)計大豆種子在不同濃度NaCl溶液處理后的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、下胚軸與根的長度以及側(cè)根數(shù)量。計算發(fā)芽率、發(fā)芽勢。

1.2.3 透射電子顯微鏡樣品制備

在大豆萌發(fā)0 h、12 h、2 d、5 d、8 d時，對處理組和對照組進(jìn)行透射電鏡樣品取樣。以大豆胚軸為中心點，取去掉種皮的子葉中間部位切下1 mm×1 mm×2 mm小條，每個處理組取相同部位，重復(fù)取樣3次。樣品放入3.5%戊二醛溶液中固定，并且真空抽沉，將固定的樣品用1%鋨酸二次固定，乙醇梯度脫水，spurr樹脂滲透、包埋。制好的包埋塊用Leica UC6型超薄切片機(jī)進(jìn)行超薄切片，醋酸雙氧鈾和檸檬酸鉛雙重染色，Hitachi H7650型透射電子顯微鏡觀察、拍照。

1.2.4 掃描電子顯微鏡樣品觀察

在大豆種子萌發(fā)5 d、8 d時進(jìn)行掃描電鏡樣品取樣。以種臍為中心點，用雙面刀片將子葉切成2 mm的薄片，每個處理組取相同部位，重復(fù)取樣3次。樣品放入3.5%戊二醛溶液中固定，并且真空抽沉，將固定的樣品用1%鋨酸二次固定，乙醇梯度脫水，乙酸異戊酯過渡，經(jīng)Quorum K850臨界點干燥儀干燥，離子濺射儀噴金，用日立Hitachi Regulus 8100掃描電鏡觀察，拍照。

2 結(jié)果與分析

2.1 鹽脅迫對大豆萌發(fā)的影響

用50、100和150 mmol·L-1NaCl 3個鹽濃度處理萌發(fā)大豆后，發(fā)現(xiàn)隨著鹽濃度的增加，大豆種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢、根長、側(cè)根數(shù)量等均呈下降趨勢(圖1、圖2、表1)。對照組的發(fā)芽率在4 d后與最終發(fā)芽率一致，鹽處理組的種子萌發(fā)持續(xù)時間隨鹽濃度升高而延長，并且隨鹽濃度的升高，大豆的發(fā)芽率、發(fā)芽勢均降低(圖1、圖2)。50 mmol·L-1和100 mmol·L-1NaCl溶液處理時，發(fā)芽率、發(fā)芽勢與對照相比差異不顯著，說明低鹽溶液對大豆種子萌發(fā)抑制作用較低。150 mmol·L-1NaCl脅迫下，大豆種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢顯著低于對照組，說明高濃度的鹽脅迫顯著抑制種子萌發(fā)(圖1、圖2)。與發(fā)芽率相比，胚根、下胚軸及側(cè)根的生長對鹽脅迫更加敏感，生長受抑制較為嚴(yán)重。50、100和150 mmol·L-1NaCl溶液處理時，胚根、下胚軸長度以及側(cè)根數(shù)均顯著小于對照組。當(dāng)鹽濃度達(dá)到150 mmol·L-1時，胚根基本無側(cè)根生長(表1)。

相同萌發(fā)時間不同處理間無相同小寫字母者表示組間差異達(dá)顯著水平(P<0.05)。圖2同。圖1 不同濃度NaCl處理對種子發(fā)芽率的影響

圖2 不同濃度NaCl處理對種子發(fā)芽勢的影響

表1 NaCl脅迫對大豆胚根和下胚軸生長的影響

2.2 透射電鏡觀察鹽處理對萌發(fā)子葉細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響

為觀察不同鹽濃度處理下，大豆種子萌發(fā)過程中子葉細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化，本試驗對不同萌發(fā)時間的大豆子葉進(jìn)行透射電鏡觀察。結(jié)果顯示，未萌發(fā)的大豆種子子葉細(xì)胞中分布著大量大小、形狀不一的蛋白質(zhì)貯藏液泡和油體。細(xì)胞內(nèi)僅含1～2個質(zhì)體，極少細(xì)胞器存在(圖3)。

PSV，蛋白質(zhì)貯藏液泡；OB，油體；SG，淀粉粒；P，質(zhì)體；CW，細(xì)胞壁；圖a-1為圖a的局部放大圖，字母-1為相應(yīng)字母的局部放大圖，圖4～6同。圖3 未萌發(fā)大豆子葉細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的透射電鏡照片

種子萌發(fā)12 h時，對照組質(zhì)體內(nèi)淀粉顆粒增多，周圍已形成少量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(圖4中a、a1)，而鹽溶液處理組尚未觀察到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或其他細(xì)胞器(圖4中b～d1)。鹽溶液處理組子葉細(xì)胞基質(zhì)電子密度加深，油體數(shù)量較對照組增多，并且與蛋白質(zhì)貯藏液泡膜接觸的油體直徑小于遠(yuǎn)離液泡膜的油體(圖4中b1、c1、d1)。種子萌發(fā)2 d時，對照組大豆子葉細(xì)胞內(nèi)，蛋白質(zhì)貯藏液泡聚集融合成大的電子密度較淺的貯藏液泡，質(zhì)體數(shù)量增加，尚未形成片層結(jié)構(gòu)(圖4中e、e1)。鹽溶液處理組，子葉細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)貯藏液泡體積均小于對照組，而油體數(shù)量較萌發(fā)12 h時減少，并被擠到細(xì)胞壁邊緣(圖4中f～h1)。50 mmol·L-1NaCl溶液處理時，油體數(shù)量與對照組相差不大，當(dāng)鹽濃度達(dá)到100和150 mmol·L-1時，大量油體密集分布在胞質(zhì)中，細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)電子密度也明顯加深(圖4中g(shù)1、h1)。150 mmol·L-1NaCl溶液處理下，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)壁出現(xiàn)輕微分離(圖4中h1)，基質(zhì)中分布大量小的空泡化結(jié)構(gòu)，蛋白質(zhì)貯藏液泡和質(zhì)體的膜結(jié)構(gòu)也遭到破壞(圖4中h1)。

種子萌發(fā)5 d時，對照組子葉細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)貯藏液泡融合形成大液泡，極少量的油體顆粒分布在細(xì)胞壁周圍。質(zhì)體數(shù)量增多，基質(zhì)中出現(xiàn)稀疏的片層結(jié)構(gòu)，線粒體結(jié)構(gòu)還比較簡單，沒有形成嵴膜(圖5中a、a1)。鹽溶液處理組，子葉細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)貯藏液泡聚集在一起，形成大小、形狀不規(guī)則的大液泡，而油體的數(shù)量，隨鹽濃度的升高而增加。這表明種子萌發(fā)過程中，蛋白質(zhì)和脂質(zhì)降解轉(zhuǎn)化速度受到鹽脅迫的影響而延緩。細(xì)胞內(nèi)質(zhì)體的數(shù)量隨著鹽濃度增加而減少，基質(zhì)均為無定形基質(zhì)，無片層結(jié)構(gòu)，淀粉粒幾乎充滿整個質(zhì)體(圖5中b～d1)。種子萌發(fā)8 d時，對照組子葉細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)貯藏液泡與油體都已消耗殆盡，形成中央大液泡。質(zhì)體內(nèi)形成基粒類囊體片層結(jié)構(gòu)，發(fā)育轉(zhuǎn)化為葉綠體，基質(zhì)內(nèi)的淀粉粒并未增加反而減少。線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)大量分布在胞質(zhì)中，線粒體的基質(zhì)區(qū)逐漸變小，嵴膜逐漸密集(圖5中e、e1)。50 mmol·L-1NaCl溶液處理組，質(zhì)體內(nèi)基粒片層結(jié)構(gòu)稀疏，少量線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分布在胞質(zhì)中(圖5中f、f1)。隨著NaCl濃度的升高，100 mmol·L-1NaCl溶液處理時，胞質(zhì)中分布著大量未完全降解轉(zhuǎn)化的油體顆粒，液泡內(nèi)含大量絮狀蛋白質(zhì)。2個處理組均未形成完整的葉綠體，且鹽濃度越高，質(zhì)體轉(zhuǎn)化成葉綠體的程度越低，線粒體內(nèi)也只有連成片的網(wǎng)狀膜和較大的基質(zhì)區(qū)。當(dāng)NaCl溶液濃度達(dá)到150 mmol·L-1時，胞質(zhì)中含大量形狀不規(guī)則的油體顆粒，質(zhì)體膜結(jié)構(gòu)受損，基質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)空泡化結(jié)構(gòu)，未觀察到線粒體及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(圖5中g(shù)～h1)。

2.3 掃描電鏡觀察鹽處理對萌發(fā)子葉細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響

種子萌發(fā)5 d時，對照組子葉細(xì)胞內(nèi)含大量質(zhì)體內(nèi)的淀粉顆粒，未觀察到蛋白質(zhì)貯藏液泡與油體(圖6中a、a1)。而鹽溶液處理組，子葉細(xì)胞內(nèi)分布著大量蛋白質(zhì)貯藏液泡，表明蛋白質(zhì)和脂質(zhì)降解轉(zhuǎn)化速度延緩(圖6中b～d1)。萌發(fā)8 d時，鹽處理組細(xì)胞內(nèi)的淀粉顆粒隨NaCl濃度增加而減少(圖6中e～h1)，這與透射電鏡觀察結(jié)果一致。

圖a～d1，大豆萌發(fā)12 h；a、b、c、d分別為對照組(蒸餾水)、50、100和150 mmol·L-1 NaCl處理組。圖e～h1，大豆萌發(fā)2 d；e、f、g、h分別為對照組(蒸餾水)、50、100和150 mmol·L-1 NaCl處理組。白色箭頭指示質(zhì)體，黃色箭頭指示質(zhì)壁分離處。PSV，蛋白質(zhì)貯藏液泡；OB，油體；SG，淀粉粒；P，質(zhì)體，CW，細(xì)胞壁；M，線粒體；ER，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。圖4 萌發(fā)12 h和2 d時大豆子葉細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的透射電鏡照片

圖a～d1，大豆萌發(fā)5 d；a、b、c、d分別為對照組(蒸餾水)、50、100和150 mmol·L-1 NaCl處理組。圖e～h1，大豆萌發(fā)8 d；e、f、g、h分別為對照組(蒸餾水)、50、100和150 mmol·L-1 NaCl處理組。PSV，蛋白質(zhì)貯存液泡；OB，油體；SG，淀粉粒；P，質(zhì)體；CW，細(xì)胞壁；Ch，葉綠體；M，線粒體；ER，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)；N，細(xì)胞核。圖5 萌發(fā)5 d和8 d時大豆子葉細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的透射電鏡照片

3 討論

隨著全球土壤鹽堿化面積的逐年增加，鹽脅迫已經(jīng)成為限制作物產(chǎn)量的主要非生物脅迫之一[15]。作物在種子萌發(fā)期和幼苗期對鹽分最敏感，鹽脅迫引起的滲透脅迫和過度離子毒害，造成作物發(fā)育遲緩，抑制組織的分化和生長[5]。種子萌發(fā)期間，子葉內(nèi)各種酶被激活，促進(jìn)貯藏物質(zhì)降解成小分子，保證自身的呼吸作用，并轉(zhuǎn)運到胚根或胚芽等生長點，促進(jìn)下胚軸和胚根的生長發(fā)育[16-17]。本研究結(jié)果表明，NaCl處理組的種子萌發(fā)持續(xù)時間隨NaCl濃度升高而延長，發(fā)芽率、發(fā)芽勢隨鹽濃度升高而降低。NaCl濃度為50、100 mmol·L-1時，大豆種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢與對照組差異不顯著，直至NaCl濃度達(dá)到150 mmol·L-1時，大豆種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢均顯著低于對照組。說明低鹽濃度對大豆種子萌發(fā)沒有明顯的抑制作用，高鹽濃度的脅迫強(qiáng)烈抑制種子活力，降低種子的萌發(fā)率，這與前人的研究結(jié)果一致[18-19]。種子萌發(fā)受抑制程度隨鹽濃度增加而加劇，這種現(xiàn)象應(yīng)該是鈉離子和氯離子對萌發(fā)種子的毒性作用可以隨鹽處理濃度的升高得到積累[20]，另一方面，高鹽離子產(chǎn)生的滲透壓也可以阻止水分的吸收，從而影響種子的萌發(fā)[21]。根系是植物吸收土壤中營養(yǎng)物質(zhì)的主要器官，鹽脅迫下水稻、油菜種子萌發(fā)主根長和側(cè)根數(shù)等生長性狀均受到顯著抑制[22-23]。這與本試驗中，鹽溶液處理組的胚根、下胚軸長度以及側(cè)根數(shù)量均顯著小于對照組的結(jié)果一致。

子葉是種子重要的貯存器官，細(xì)胞中的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)分別貯存于蛋白質(zhì)貯藏液泡和油體內(nèi)。豆類的蛋白質(zhì)貯藏液泡是由磷脂雙分子層包裹的囊泡，囊泡內(nèi)主要含大豆球蛋白[11]，而油體是由單層磷脂分子和鑲嵌于其中的油體膜蛋白組成，核心是三酰甘油[24]。大豆萌發(fā)時，大豆蛋白酶C1誘導(dǎo)子葉貯藏蛋白液泡內(nèi)的蛋白水解產(chǎn)生游離氨基酸，為生長提供重要的氮源、碳源和硫源[25]，油體則在脂肪氧化酶、脂肪分解酶等作用下，被分解為甘油、脂肪酸并生成碳水化合物，參與到體內(nèi)物質(zhì)轉(zhuǎn)化和能量代謝過程中[26-27]。目前，鹽脅迫對大豆種子萌發(fā)時期子葉營養(yǎng)成分變化的研究多集中在生理生化水平，而對大豆種子萌發(fā)過程中鹽脅迫影響子葉細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的研究甚少。多數(shù)研究表明，大豆種子發(fā)芽過程中，蛋白質(zhì)、脂質(zhì)含量會明顯減少，游離氨基酸含量顯著增加[28-29]。本研究通過透射電鏡和掃描電鏡觀察可知，正常萌發(fā)大豆，隨著發(fā)芽天數(shù)延長，蛋白質(zhì)貯藏液泡逐漸聚合增大，變成電子密度較淺的大液泡，油體的數(shù)目也隨發(fā)芽天數(shù)的延長逐漸減少。說明貯藏蛋白質(zhì)被酶解成小分子肽運送出細(xì)胞，三酰甘油也逐漸被消耗提供能量，支持胚根、胚芽的生長，這與王慧等[11,28-29]的研究結(jié)果一致。通過比較對照組和鹽處理組，發(fā)現(xiàn)種子萌發(fā)5 d時，對照組子葉細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)貯藏液泡融合形成大液泡，僅剩極少量的油體顆粒分布在細(xì)胞壁周圍。鹽溶液處理組，子葉細(xì)胞內(nèi)還存有大量未降解轉(zhuǎn)化的蛋白質(zhì)貯藏液泡和油體。萌發(fā)8 d時，對照組子葉細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)貯藏液泡與油體都已消耗殆盡，而鹽處理組液泡內(nèi)含大量絮狀蛋白質(zhì)，油體顆粒也未完全降解。這說明鹽溶液處理下，大豆種子蛋白質(zhì)貯藏液泡和油體水解轉(zhuǎn)化速度要比對照組緩慢，并且隨著鹽濃度的增加，延緩效應(yīng)越明顯。這種現(xiàn)象可能是鹽離子對細(xì)胞代謝產(chǎn)生毒性，破壞了蛋白酶、肽酶、脂肪氧化酶等相關(guān)水解酶的活性和功能，抑制了子葉細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)貯藏液泡和油體降解成小分子參與到合成其他物質(zhì)的過程，導(dǎo)致根長、下胚軸長以及側(cè)根數(shù)量等生長性狀受到不同程度的影響，最終抑制大豆的發(fā)芽率。鹽脅迫可以通過破壞絲氨酸蛋白酶活性延緩腰果萌發(fā)時子葉中蛋白質(zhì)的水解和轉(zhuǎn)運，限制游離氨基酸的釋放，破壞其與組織生長過程中物質(zhì)供給之間的平衡關(guān)系，抑制種子的萌發(fā)[30-31]。在玉米和向日葵種子萌發(fā)過程中，鹽脅迫還會延緩子葉內(nèi)油脂的分解，從而降低種子的發(fā)芽率[32-33]。已有的研究表明，乙醛酸途徑在大多數(shù)油料作物種子萌發(fā)過程中，將儲存的脂質(zhì)轉(zhuǎn)化為可溶性糖時起著至關(guān)重要的作用。然而，鹽脅迫會抑制乙醛酸循環(huán)中一些重要酶的活性，如過氧化氫酶、蘋果酸合酶和異檸檬酸裂解酶[34]。大豆萌發(fā)12 h和2 d時，透射電鏡觀察還發(fā)現(xiàn)鹽處理組子葉細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)電子密度明顯加深。鹽濃度達(dá)到150 mmol·L-1時，萌發(fā)2 d的子葉細(xì)胞出現(xiàn)輕微的質(zhì)壁分離，基質(zhì)中分布大量小的空泡化結(jié)構(gòu)，蛋白質(zhì)貯藏液泡的膜結(jié)構(gòu)也遭到破壞。這可能是高濃度鈉離子一方面引起細(xì)胞滲透失衡，產(chǎn)生滲透壓阻止水分的吸收，另一方面破壞生物膜表面膜蛋白導(dǎo)致膜系統(tǒng)紊亂等。本研究中150 mmol·L-1鹽溶液處理組，最終無法形成葉綠體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器，這應(yīng)該是高鹽脅迫下一系列生理反應(yīng)的累積，包括酶活性受到抑制、膜系統(tǒng)紊亂、活性氧產(chǎn)生等[5,35]。

圖a～d1，大豆萌發(fā)5 d；a、b、c、d分別為對照組(蒸餾水)、50、100和150 mmol·L-1 NaCl處理組。圖e～h1，大豆萌發(fā)8 d；e、f、g、h分別為對照組(蒸餾水)、50、100和150 mmol·L-1 NaCl處理組。PSV，蛋白質(zhì)貯存液泡；SG，淀粉粒；CW，細(xì)胞壁。圖6 萌發(fā)5 d和8 d時大豆子葉細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的掃描電鏡照片

綜上所述，NaCl處理對大豆的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、根長、下胚軸長以及側(cè)根數(shù)量等性狀的抑制作用隨著濃度的增加而升高。不同鹽濃度處理下，蛋白質(zhì)貯藏液泡和油體降解轉(zhuǎn)化速度都明顯延緩，葉綠體、液泡、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體等細(xì)胞器形成速度也隨鹽濃度增加而變慢。但本試驗僅是模擬鹽脅迫條件，探討了一種鹽分對大豆種子萌發(fā)的影響。實際鹽土都是復(fù)合鹽堿成分，試驗光照、氣溫等與田間環(huán)境也存在差異。因此，實際生產(chǎn)中的鹽堿脅迫對大豆萌發(fā)的影響機(jī)制還有待進(jìn)一步研究探討。