外周血微小核糖核酸-21、同型半胱氨酸水平變化與急性心肌梗死患者Gensini積分的關(guān)聯(lián)性及臨床意義

張桂花

河南省項城市第一人民醫(yī)院檢驗科 466200

急性心肌梗死(AMI)是臨床常見心腦血管疾病，在我國發(fā)生率、殘死率均較高，具有發(fā)病急驟、進(jìn)展迅速的特點(diǎn)，會嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量[1]。臨床多采用經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù)(PCI術(shù))及溶栓治療，但術(shù)后心血管不良事件(MACE)發(fā)生率較高，預(yù)后效果較差，是心血管疾病的重要致死原因[2]。因此，快速準(zhǔn)確評估病情程度及預(yù)后效果是挽救生命、降低病死率的關(guān)鍵。近年來，生化指標(biāo)檢測在多種心血管疾病中應(yīng)用廣泛，其中微小核糖核酸-21(miR-21)屬于小分子非編碼RNA，在血液循環(huán)中穩(wěn)定存在，其在心肌細(xì)胞中表達(dá)豐富，與心肌損傷、再灌注損傷等密切相關(guān)[3]。同型半胱氨酸(Hcy)屬于血管內(nèi)皮損傷標(biāo)志物，其水平升高會增加氧化應(yīng)激狀態(tài)，并促進(jìn)血小板聚集，導(dǎo)致動脈粥樣硬化斑塊的形成，是多種心血管疾病的危險因素[4]。本文選取我院AMI患者136例，旨在探討外周血miR-21、Hcy水平與Gensini積分的關(guān)聯(lián)性及臨床意義?，F(xiàn)報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，選取2019年6月—2020年6月我院AMI患者136例?；颊呔橛谐志眯浴⑼话l(fā)性、劇烈性心前區(qū)、胸骨后壓榨型疼痛；均發(fā)生室性心律失常、房室傳導(dǎo)阻滯；均經(jīng)冠狀動脈造影檢查≥1支冠脈閉塞；心肌損傷標(biāo)志物水平升高；均經(jīng)超聲心動圖、心電圖等輔助檢查確診為AMI；患者或家屬均簽署知情同意書。排除其他心臟疾病，如原發(fā)性肺動脈高壓、擴(kuò)張型心肌病、肥厚性心肌病、原發(fā)性心臟瓣膜?。蝗朐呵斑M(jìn)行溶栓、抗凝治療或既往接受過PCI術(shù)；合并血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤、急慢性感染疾??；合并肝、腎、肺等重要臟器功能障礙；伴有腦血管疾??；合并甲狀腺功能亢進(jìn)或嚴(yán)重結(jié)締組織疾病。

1.2 方法 (1)外周血miR-21、Hcy水平測定：所有患者均于術(shù)前、術(shù)后3d采集外周血5ml，置于枸櫞酸鈉抗凝管中，以3 000r/min的速度離心10min，分離血清與血漿，均置于-80℃下保存待測，miR-21檢測取400μl血漿，采用RNA提取液提取總miRNA，并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增，然后用2-ΔΔCt方法計算miR-21相對表達(dá)量；Hcy檢測取血清1ml，采用比色法測定，試劑盒購自山東博邁達(dá)生物科技有限公司[批準(zhǔn)文號：魯食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2012第2400312號]。(2)術(shù)前Gensini積分評估：給予所有患者冠狀動脈造影術(shù)，評估冠脈狹窄程度，①基本評分：總分1～32分，分?jǐn)?shù)越高，狹窄程度越嚴(yán)重，其中≤25%計1分，26%～50%計2分，51%～75%計4分，76%～90%計8分，91%～99%計16分，100%計32分。②評分系數(shù)：根據(jù)狹窄部位不同乘以不同系數(shù)(0.5～5)。Gensini評分=基本評分×評分系數(shù)。其中總分≤24分為輕度狹窄，25～49分為中度狹窄，≥50分為重度狹窄。(3)預(yù)后評估：所有患者均行經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù)(PCI術(shù))，并給予阿司匹林+氯吡格雷雙抗治療；根據(jù)術(shù)后6個月內(nèi)是否發(fā)生MACE(如惡性心律失常、復(fù)發(fā)性心絞痛再入院、心力衰竭、心源性死亡)分為預(yù)后不良組(n=27)與預(yù)后良好組(n=109)，統(tǒng)計兩組一般資料，包括年齡、性別、合并癥、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、Killip分級、心率(HR)、收縮壓(SBP)、病變支數(shù)、心肌損傷指標(biāo)[肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌鈣蛋白I(cTnI)]。

1.3 觀察指標(biāo) (1)比較兩組一般資料、外周血miR-21、Hcy水平及Gensini積分。(2)采用Pearson分析術(shù)前外周血miR-21、Hcy水平與Gensini積分的關(guān)聯(lián)性。(3)采用Logistic分析AMI患者預(yù)后不良的影響因素。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料、外周血miR-21、Hcy水平及Gensini積分 兩組年齡、性別、合并癥、BMI、HR、SBP比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；不同預(yù)后AMI患者Killip分級、病變支數(shù)、cTnI、CK-MB、miR-21相對表達(dá)量、Hcy、Gensini積分比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組一般資料、外周血miR-21、Hcy水平及Gensini積分比較

2.2 術(shù)前外周血miR-21、Hcy水平與Gensini積分的關(guān)聯(lián)性 經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，AMI患者術(shù)前外周血miR-21、Hcy水平與Gensini積分呈正相關(guān)(r1=0.621，P1=0.035；r2=0.547，P2=0.048)。

2.3 AMI患者預(yù)后不良影響因素 經(jīng)Logistic回歸分析顯示，Killip分級、病變支數(shù)、術(shù)后3d cTnI、CK-MB、miR-21相對表達(dá)量、Hcy均為AMI患者預(yù)后不良的重要影響因素(P<0.05)。見表2。

表2 AMI患者預(yù)后不良影響因素

3 討論

AMI發(fā)病機(jī)制為冠狀動脈阻塞，導(dǎo)致心肌持續(xù)性缺血缺氧，引發(fā)心肌損傷壞死，且預(yù)后效果較差[5]。臨床應(yīng)積極采取措施準(zhǔn)確評估病情及預(yù)后，為治療方案的制定及調(diào)整提供指導(dǎo)意見。

近年來，隨著臨床檢驗技術(shù)的進(jìn)步發(fā)展，基因分子、生化標(biāo)志物的異常變化均能準(zhǔn)確反映AMI病情，為臨床診斷治療提供新方向。心血管疾病中微小RNA研究普遍，在心肌細(xì)胞中表達(dá)明確，與再灌注損傷、心律失常、心肌肥厚等多種心臟疾病密切相關(guān)[6]?；诖?，本文中對AMI患者miR-21水平進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示預(yù)后不良外周血miR-21相對表達(dá)量明顯更高，且與Gensini積分相關(guān)，是發(fā)生MACE的重要影響因素。分析其原因為，miR-21屬于跨膜蛋白基因，在進(jìn)化上高度保守，參與心房顫動與纖維化的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程，機(jī)體發(fā)生AMI后，miR-21會富集于成纖維細(xì)胞，促進(jìn)心血管系統(tǒng)的纖維化及AMI的進(jìn)展[7]。在AMI早期，miR-21表達(dá)豐富可能通過促進(jìn)炎癥反應(yīng)參與心肌損傷，與冠狀動脈狹窄程度及Gensini積分密切相關(guān)[8]；而經(jīng)PCI術(shù)治療后，miR-21水平會有所降低，狹窄程度減小，但對于預(yù)后不良患者，miR-21仍參與冠狀動脈粥樣硬化進(jìn)程，且會影響其穩(wěn)定性，增加MACE發(fā)生風(fēng)險。

另外，相關(guān)研究指出，Hcy水平與AMI患者心室重構(gòu)嚴(yán)重程度密切相關(guān)，可輔助臨床預(yù)測預(yù)后[9]。據(jù)此，本研究對AMI患者Hcy因子進(jìn)行檢測，不同預(yù)后Hcy水平具有一定差異，且與MACE的發(fā)生密切相關(guān)。其原因可能為以下幾點(diǎn)：(1)Hcy水平升高會引起自由基的產(chǎn)生及炎癥因子的釋放，對心肌細(xì)胞具有一定損傷，導(dǎo)致心肌重塑，加速AMI的病情進(jìn)展[10]；(2)Hcy會促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增殖，抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌抗炎因子，并激活凝血因子Ⅳ的活性，促進(jìn)血小板聚集，參與動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展；(3)Hcy水平升高會降低阿司匹林抗血小板聚集作用，增加再次血運(yùn)重建風(fēng)險。因此，Hcy可評估AMI患者預(yù)后的重要危險因素，具有一定檢測價值。

綜上所述，AMI患者外周血miR-21、Hcy水平異常升高，且與Gensini積分、預(yù)后效果密切相關(guān)，具有較高臨床檢測價值。