張雨 ,陳愛華 *,吳楊平 ,許艷順 ,曹奕 ,陳素華 ,張志東
(1.江蘇省海洋水產(chǎn)研究所,江蘇 南通 226007;2.江南大學(xué),江蘇 無錫 214122)
文蛤(Meretrix meretrix)是我國沿海重要的經(jīng)濟(jì)貝類之一,其肉味鮮美,營養(yǎng)豐富,近年來隨著國內(nèi)外市場需求量的增加,養(yǎng)殖熱度不斷升高。但由于圍填海工程建設(shè)和沿海工業(yè)的發(fā)展,灘涂生境漸遭破壞,天然附苗場逐漸消失,“海上無苗”現(xiàn)象日益嚴(yán)重。文蛤具有獨(dú)特的濾食機(jī)制,不僅可以調(diào)控池塘養(yǎng)殖水環(huán)境,降低養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn),還可以作為產(chǎn)品獲得經(jīng)濟(jì)價(jià)值,是目前及今后一段時(shí)間池塘多元化養(yǎng)殖選擇搭配的“黃金”物種。我國自20 世紀(jì)七八十年代開始文蛤的全人工育苗試驗(yàn),并獲得成功。目前文蛤養(yǎng)殖企業(yè)主要采用人工苗種進(jìn)行養(yǎng)殖生產(chǎn),隨著文蛤野生種未經(jīng)改良、商品品相不佳、生長速度緩慢等問題日益顯現(xiàn),通過人工選育對(duì)文蛤進(jìn)行遺傳性狀改良,培育出生長快和品相好的新品種(系),將是文蛤養(yǎng)殖業(yè)的主要發(fā)展方向。
選擇育種是通過不斷地對(duì)群體進(jìn)行有計(jì)劃、有目的的反復(fù)高強(qiáng)度篩選淘汰,以達(dá)到提高和穩(wěn)定其主要經(jīng)濟(jì)性狀的目的。由于其操作方法簡單,且實(shí)現(xiàn)了品種的不斷改良,被廣泛應(yīng)用于貝類育種中。我國已成功選育出長牡蠣“海大3 號(hào)”(GS-01-007-2018)、方斑東風(fēng)螺“海泰 1 號(hào)”(GS-01-008-2018)、文蛤“萬里2 號(hào)”(GS-01-012-2017)和縊蟶“申浙 1 號(hào)”(GS-01-013-2017)等貝類新品種。目前關(guān)于文蛤新品種(系)的研究,多集中在功能基因挖掘與家系早期生長比較等方面,對(duì)文蛤優(yōu)良品種選育進(jìn)展及連續(xù)世代生化成分比較方面的研究鮮有報(bào)道?,F(xiàn)以“殼色+生長”為目標(biāo)性狀,采用連續(xù)多代選擇育種方法,同池養(yǎng)殖文蛤,比較其體形性狀、體成分和氨基酸成分等生化指標(biāo),為發(fā)掘文蛤新品種(系)優(yōu)良性狀、認(rèn)定推廣及養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供基礎(chǔ)資料。
江蘇省海洋水產(chǎn)研究所貝類團(tuán)隊(duì),于2007 年開始紅殼色文蛤的選育,以“殼色+生長”為目標(biāo)性狀,不斷的篩選繁育,至2018 年已選育出子五代(F)。2018 年以江蘇文蛤未選育群體、紅殼色文蛤原代群體以及紅殼色文蛤選育群體子1 代、子2 代、子3代、子4 代作為親本,在同一時(shí)間分別進(jìn)行催產(chǎn),開展不同群體的同期繁育,獲得未選育的對(duì)照群體F、選育群體(F、F、F、F、F,于 2019 年 4 月,將 6 個(gè)群體的苗種同池進(jìn)行養(yǎng)殖試驗(yàn)[圖 1(a)(b)],每 667 m放養(yǎng)50 萬粒。2019 年12 月,對(duì)同池養(yǎng)殖的6 個(gè)群體隨機(jī)取樣30 粒,轉(zhuǎn)移至實(shí)驗(yàn)室內(nèi)水族箱,用砂濾的海水暫養(yǎng)1~2 d,排空其消化道內(nèi)容物,用于后續(xù)體形性狀、體成分和氨基酸含量的檢測。
圖1 文蛤6 個(gè)群體養(yǎng)殖池塘
參照文獻(xiàn)[12]的方法,將樣品放入烘箱中,烘干至恒質(zhì)量,根據(jù)烘干前后質(zhì)量的變化計(jì)算出水分的含量。采用《食品中灰分的測定方法》(GB/T 5009.4—1985)中馬弗爐550 ℃灼燒法測定灰分含量;采用《食品中脂肪的測定方法》(GB/T 5009.6—1985)中索氏抽提法測定粗脂肪含量;采用《食品中蛋白質(zhì)的測定方法》(GB/T 5009.5—1985)中凱氏定氮法測定粗蛋白含量,蒽酮比色法測定糖原含量。
稱取待測樣品,加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的三氯乙酸,用均質(zhì)機(jī)均質(zhì)并定容至25 mL,超聲提取20 min后靜置2 h,用雙層濾紙過濾,吸取1 mL 過濾液,離心 10 min(4 ℃,10 000 r/min),吸取上清液,采用高效液相色譜儀測定氨基酸組成和含量。采用廣陸電子數(shù)顯游標(biāo)卡尺(精度±0.01 mm)測量殼長、殼高和殼寬;采用電子天平(精度±0.01 g)稱量其粒質(zhì)量;打開貝殼,取軟體部,以吸水紙吸干表面游離水分,采用電子天平(精度±0.01 g)稱濕質(zhì)量;將貝殼及軟體部置于80 ℃的恒溫干燥箱中烘干12 h 以上至恒質(zhì)量,稱軟體部干質(zhì)量。出肉率和肥滿度采用以下公式計(jì)算。
采用SPSS 17.0 對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差(ANOVA)分析,結(jié)果均以(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)表示。
不同群體殼色文蛤體形分析結(jié)果見表1。由表1 可見,F(xiàn)—F的殼長、殼寬、殼高、粒質(zhì)量均顯著>F(P<0.05),且顯示出逐代增高的趨勢,其中F的粒質(zhì)量(25.92±5.31)g 相較于 F的粒質(zhì)量(17.58±3.74)g,增長了47.44%,說明經(jīng)過選育,大大提高了選育系的生長速度。在出肉率、肥滿度方面,F(xiàn)—F均顯著>F(P<0.05),其中,F(xiàn)的出肉率比F提高了10.14%,F(xiàn)的肥滿度比F提高了12.82%,說明經(jīng)過選育之后,選育群體相較于未選育群體具有比較明顯的性狀特征。
表1 不同群體殼色文蛤體形分析①
不同群體文蛤體成分分析見表2。由表2 可見,F(xiàn)—F和F之間水分、灰分含量雖存在差異,但差異不大;F—F的粗脂肪含量與F之間存在差異,且F顯著小于F—F(P<0.05),表明文蛤經(jīng)過選育后,粗脂肪含量有了提高;相較于 F,F(xiàn)—F、F粗蛋白含量并未有顯著提高(P>0.05);隨著系代的累積,F(xiàn)的糖原含量顯著高于F—F(P<0.05),表明F在食用營養(yǎng)上具有一定的優(yōu)勢。
表2 不同群體文蛤體成分分析①
不同群體文蛤游離氨基酸含量(以干基計(jì))見表3。由表3 可見,不同群體文蛤的游離氨基酸含量各不相同,且與系代并無相關(guān)性。單獨(dú)從谷氨酸含量、鮮味氨基酸總含量、游離氨基酸總量來看,F(xiàn)—F顯著高于F(P<0.05)。其中,F(xiàn)的每100 g 谷氨酸含量為(822.22±19.92)mg,相較于 F的每 100 g 谷氨酸含量(709.03±0.48)mg,提高了 15.96%;F鮮味每100 g 氨基酸總含量為(3 892.64±90.01)mg,相較于 F的每 100 g 氨基酸總含量(3 414.16±3.16)mg,提高了14.01%;F每 100 g 游離氨基酸總量為(5 109.89±110.47)mg,相較于 F的每 100 g 游離氨基酸總量(4 750.45±11.73)mg,提高了 7.57%。
表3 不同群體文蛤游離氨基酸含量(以干基計(jì))①
續(xù)表
試驗(yàn)結(jié)果表明,F(xiàn)—F的生長速度顯著快于F,其體形性狀(殼長、殼高、殼寬、粒質(zhì)量)與 F存在顯著差異。通過對(duì)殼色和生長性狀不斷的定向選擇,使紅殼色和生長的相關(guān)基因得到純化,其后代可獲得高純度殼色和較快的生長速度。郭紅軍等對(duì)引進(jìn)后的池蝶蚌(Hyriopsis Schlegelii)原種及其選育后代的形態(tài)和生長性狀進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)經(jīng)過3 代的良種選育后,池蝶蚌的生長狀態(tài)良好,殼的厚度值大,適合育珠。鄧岳文等以廣西北海潿洲島收集的馬氏珠母貝(Pinctada martensi)野生子一代為基礎(chǔ)群體,以殼寬和殼長為選育指標(biāo),采用群體選育輔以家系選育技術(shù),經(jīng)連續(xù)5 代選育,獲得了馬氏珠母貝“海選1 號(hào)”。在相同養(yǎng)殖條件下,與未經(jīng)選育的馬氏珠母貝選育指標(biāo)相比,2 齡殼寬和殼長分別提高21.2%和20.8%,育珠期間母貝的留核率、珠層厚度和珍珠產(chǎn)量分別提高22.3%,22.2%和24.7%,與該試驗(yàn)結(jié)果相似。
該試驗(yàn)中,在文蛤“殼色+殼長”的定向選育過程中,選育群體F—F的出肉率和肥滿度比F的要高,其中F的出肉率比F提高了10.14%;F5 的肥滿度比F提高了12.82%。說明經(jīng)過選育之后,F(xiàn)—F的性狀相指標(biāo)較F有明顯的提高,這可能是因?yàn)樵趯?duì)殼長和粒質(zhì)量等性狀的連續(xù)選擇中,間接地對(duì)肥滿度這一性狀進(jìn)行了選育積累。
試驗(yàn)分析了蛋白質(zhì)、脂肪含量以及糖原等指標(biāo),比較了F—F不同群體文蛤主要呈味物質(zhì)的差異變化。結(jié)果表明,F(xiàn)—F的脂肪含量相較于F得到顯著提高,其原因可能是F—F較F生長優(yōu)勢顯著,脂肪累積量相對(duì)更大。F糖原含量顯著高于F,表明紅殼色文蛤F—F在食用品質(zhì)特性中存在優(yōu)勢。雖然F—F的蛋白質(zhì)含量與F之間沒有顯著差異,但在氨基酸組成方面差異較大。游離氨基酸 Ala、His、Gly、Glu、Arg,以及鮮味氨基酸總含量、游離氨基酸總量F—F均顯著高于F,且呈現(xiàn)出隨著選育代次的增加,呈味強(qiáng)度整體呈上升趨勢,表明選育出來的紅殼色文蛤新品系具有富含呈鮮物的特性。鄭懷平等以“色澤金黃+生長”為選育目標(biāo),經(jīng)過連續(xù)3 代的選育,選育出的華貴櫛孔扇貝“南澳1 號(hào)”新品種,具有富含類胡蘿卜素以及具有抗氧化能力的特點(diǎn),與該研究結(jié)果類似。