武昌魚(yú)脂肪酸的氣相色譜-質(zhì)譜分析

刁全平，侯冬巖，郭華，洪學(xué)蓮，回瑞華

(鞍山師范學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，遼寧鞍山114007)

武昌魚(yú)(M．a(chǎn)mblycephala Yih)，屬鯉形目，鯉科，鲌亞科，魴屬，主產(chǎn)于長(zhǎng)江中下游，以湖北為最多，多產(chǎn)在5～8月．武昌魚(yú)體扁側(cè)，呈菱形，背色深，腹色淺．武昌魚(yú)肉細(xì)嫩肥美，具有補(bǔ)虛、益脾、養(yǎng)血、祛風(fēng)、健胃之功效，可以預(yù)防貧血癥、低血糖、高血壓和動(dòng)脈血管硬化等疾?。?/p>

目前關(guān)于武昌魚(yú)繁育養(yǎng)殖及加工生產(chǎn)方面的研究較多，而有關(guān)有效化學(xué)活性成分的研究較少，李陽(yáng)等對(duì)武昌魚(yú)的揮發(fā)性成分進(jìn)行了分析［1］．本文采用Bligh-Dyer提取法提取武昌魚(yú)中的脂肪油［2］，然后進(jìn)行甲酯化處理，再利用GC-MS對(duì)其進(jìn)行分析測(cè)定［3］，分離鑒定其中的脂肪酸成分，并測(cè)定其含量，尋求其成分與功效之間的關(guān)系，為武昌魚(yú)的進(jìn)一步深度開(kāi)發(fā)提供一定的支持．

1 材料與方法

1．1 材料與試劑

武昌魚(yú)購(gòu)自鞍山大潤(rùn)發(fā)超市，氯仿、甲醇、氫氧化鉀、正己烷、硫酸鈉等均為分析純，水為自制二次蒸餾水．

1．2 儀器與設(shè)備

HP6890GC/5973MS型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)惠普公司);RE-52C型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠);85-1型恒溫磁力攪拌器(常州國(guó)華電器有限公司);80-2B臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠);KQ-250B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)．

1．3 方法

1．3．1 脂肪油的提取 取武昌魚(yú)一條，用剪刀從其背部取樣，剪碎后，用四分法稱取樣品14．05 g置于250 mL錐形瓶中，加入氯仿140 mL，甲醇70 mL，再加入生理鹽水42 mL，磁力攪拌器攪拌20 h，抽濾，分液，取下層有機(jī)相，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收氯仿，得黃色油狀液體2．03 g．

1．3．2 脂肪油的甲酯化 用8 mL正己烷將魚(yú)油溶解，加入2 mL濃度為0．5 mol/L的氫氧化鉀-甲醇溶液在70℃水浴中回流20min，冷卻后加入10mL蒸餾水，超聲振蕩5min，然后以3 000 r/min離心10 min，取上層正己烷溶液用無(wú)水硫酸鈉干燥后，待GC/MS分析備用．

1．3．3 脂肪酸的分析鑒定

色譜條件:色譜柱為HP-5彈性石英毛細(xì)管柱(25 m×0．20 mm×0．33μm);進(jìn)樣口溫度300℃;

程序升溫:100℃→200℃升溫速率為10℃/min，200℃→280℃升溫速率為5℃/min，280℃保持5 min．;分流比 100 ∶1，溶劑延遲 3 min．

質(zhì)譜條件:全掃描，四級(jí)桿質(zhì)量分析器，掃描范圍為20～500 m/z;離子源為電子轟擊源，離子源溫度為230℃;電離電壓為70 eV;電子倍增器電壓為1 988 V;發(fā)射電流為34．6μA;接口溫度為230℃．

定性分析:取經(jīng)1．3．2項(xiàng)處理過(guò)的樣品0．4μL，用GC/MS進(jìn)行分析鑒定．通過(guò)G1701BA化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，檢索NIST98譜圖庫(kù)，確定樣品中各個(gè)化學(xué)成分．

定量分析:通過(guò)G1701 BA化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，按峰面積歸一化法進(jìn)行定量分析，分別求得各化學(xué)成分的相對(duì)百分含量:

2 結(jié)果與討論

2．1 武昌魚(yú)脂肪酸甲酯總離子流譜圖

按照步驟1．3．3進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，得武昌魚(yú)脂肪酸甲酯總離子流譜圖如圖1所示，并將樣品中的脂肪酸種類及其相對(duì)百分含量列于表1．

表1 武昌魚(yú)脂肪油中脂肪酸(以酯表示)的組成及相對(duì)含量

對(duì)表1進(jìn)行分析，從武昌魚(yú)中鑒定出14種脂肪酸，其中飽和脂肪酸5種，相對(duì)百分含量占總檢出量的28．46%;不飽和脂肪酸9種，相對(duì)百分含量占總檢出量的71．27%．

十六碳烷酸(棕櫚酸)具有一定的提高血清膽固醇作用，弱于月桂酸，強(qiáng)于油酸［4］，在武昌魚(yú)中含量較高，為18．05%．9-十六碳烯酸(棕櫚油酸)具有預(yù)防老年人心腦血管疾病等功能［5］，武昌魚(yú)中含量為4．38%．9-十八碳烯酸(油酸)為低血脂性脂肪酸，有降低膽固醇和低密度脂蛋白的作用［6］，是一種良性脂肪酸，在武昌魚(yú)中的含量為28．12%．9，12-十八碳二烯酸(亞油酸)能降低血液膽固醇，預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化，人體不能合成亞油酸，必須通過(guò)食物攝入，武昌魚(yú)中含量為21．07%．5，8，11，14，17-二十碳五烯酸(EPA)和4，7，10，13，16，19-二十二碳六烯酸(DHA)被稱為“腦黃金”，能夠?qū)π哪X血管疾病起到預(yù)防作用［7］，武昌魚(yú)中含量分別為 3．21%和 7．23%．

2．2 討論

對(duì)樣品脂肪酸的提取中，通常采用索氏提取法［8］，筆者認(rèn)為不飽和脂肪酸特別是多不飽和脂肪酸化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，索氏提取溫度較高，容易使脂肪酸變性．本文采用Bligh-Dyer法在室溫下對(duì)武昌魚(yú)中脂肪油進(jìn)行提取，盡量避免不飽和脂肪酸在提取過(guò)程中發(fā)生變性，提高武昌魚(yú)中脂肪酸分析的準(zhǔn)確度．武昌魚(yú)中的脂肪酸組成豐富，不飽和脂肪酸含量高，具有預(yù)防心血管病等疾病的功效，具有很高的藥用價(jià)值，本文的研究為武昌魚(yú)資源的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)提供一定的依據(jù)．

［1］李陽(yáng)，汪超，胡建中，等．武昌魚(yú)中揮發(fā)性成分的HS-SPME和GC-MS分析［J］．湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，53(4):907－912．

［2］劉安軍，楊書(shū)文，曹東旭，等．兩種魚(yú)中各部位脂肪酸的GC分析［J］．天津科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，1:3－7．

［3］回瑞華，侯冬巖，李鐵純，等．棉籽油中脂肪酸不同的酯化方法與氣相色譜-質(zhì)譜分析［J］．質(zhì)譜學(xué)報(bào)，2005，26(2):90－92．

［4］森．月桂酸，棕櫚酸．油酸對(duì)膽固醇影響比較［J］．糧食與油脂，1998，12(4):56－56．

［5］王維群．營(yíng)養(yǎng)學(xué)［M］．北京:高等教育出版社，2005．

［6］徐華順，羅玉萍，李思光．產(chǎn)棕櫚油酸酵母發(fā)酵條件的研究［J］．中國(guó)油脂，1999，24(6):53－55．

［7］陳麗花，肖作兵，周培根．中國(guó)對(duì)蝦的脂肪酸分析及其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)［J］．上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，19(1):125－129．

［8］邢曉燕，回瑞華，侯冬巖，等．幾種稻米中脂肪酸的研究［J］．鞍山師范學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，8(4):43－45．