法醫(yī)毒物檢驗中毒物的快速篩查與檢測

周偉

摘要：社會生物體出現(xiàn)損害或變異物質(zhì)而產(chǎn)生較小劑量的外源物質(zhì)，稱為中毒。目前，中毒和毒品類的事故比例明顯上升，其中不良事故所牽涉的物質(zhì)問題更加廣泛，而通過法醫(yī)對毒品的快速篩查和檢驗也是目前中國毒品檢測項目的核心內(nèi)容，對其追查的速度和準(zhǔn)確率也提出了更高的要求。

關(guān)鍵詞：法醫(yī);中毒物;檢驗;篩查

隨著臨床中毒物種類的復(fù)雜多樣，目前主要以堿性藥物、酸性藥物及常見的農(nóng)藥物為主要篩查內(nèi)容，進(jìn)而采取準(zhǔn)確性和速度時效性更高的篩查技術(shù)【1】，現(xiàn)階段，固相萃取-色譜與質(zhì)譜聯(lián)合檢測法、免疫檢測法以及常見未知物篩查法均屬于當(dāng)前毒物檢驗的常見手段【2】，本文將針對以上三種方法進(jìn)行深入的研究分析，為檢驗學(xué)的發(fā)展提供借鑒意義。

1.不同毒物的篩查方式

1.1堿性藥物

臨床調(diào)查顯示，堿性藥物是毒物出現(xiàn)的重要影響因素。通常，堿性藥物中存在的羥基和氨基會與一般固相萃取柱或硅膠基質(zhì)中的化學(xué)鍵，與填充物的固定位相發(fā)生相互作用，從而產(chǎn)生了難以脫離和吸附或保留的現(xiàn)象。隨著人們對堿性藥物萃取工藝的深入研究，在過去以陽離子交換柱又或者反相柱或固相萃取柱都可高效提取堿性藥物，例如：HLB或C十八的提取方法，而且操作簡便，有較大的回收率;在對堿性藥物的固體提取時，要著重于適宜的PH值，而相同類藥物則可保證較高的疏水性，有利于后期的回收。

1.2酸性藥物

處于強(qiáng)酸條件下的游離狀態(tài)藥品屬強(qiáng)酸藥品，與此同時，堿式制劑則易溶于有機(jī)溶劑但卻不能溶于水中。如巴比妥類和斑蝥素等受堿性環(huán)境的影響，使之形成鈉鹽而可溶于水中。當(dāng)對堿式制劑進(jìn)行固相濃度提取之后，就必須盡可能的調(diào)節(jié)PH值進(jìn)而防止化合物帶電荷;然后通過固相濃度提取、液相色譜-質(zhì)譜法對飼料中的巴比妥制劑給予測定，具體過程是：首先通過三氯甲烷以進(jìn)行飼料的提取，通過氮以將提取溶液予以吹凈，使用磷酸鹽緩沖液以給予殘渣溶液進(jìn)行溶解，最后通過百分之二的高濃度甲醇溶液以順序淋洗，并進(jìn)行空氣抽干和通過二氯甲烷給予洗脫;實驗數(shù)據(jù)顯示，巴比妥藥物的溶液濃度值處于0.010至0.200μg/mL區(qū)間，具有良好的線性，其中，最小的定量限值為50μg/kg，且RSD低于8.5%。

1.3農(nóng)藥（殺蟲劑）

中國屬于殺蟲劑應(yīng)用與制造的國家，其中對于殺蟲劑的產(chǎn)品的品種相當(dāng)多且產(chǎn)量相當(dāng)大，有關(guān)研究統(tǒng)計表明，有機(jī)磷殺蟲劑的種類超過400種;與此同時，殺蟲劑也屬于我國食物中毒案件發(fā)生率的主要影響因素，由于殺蟲劑品種產(chǎn)量的多樣化，其生化特性和殺蟲劑的構(gòu)造特性顯得越來越復(fù)雜，所以，針對其環(huán)保、農(nóng)殘和食用等領(lǐng)域，因此，分析我國常見農(nóng)藥類別的檢驗和篩查屬于法醫(yī)領(lǐng)域研究的重要內(nèi)容，

2.中毒物的快速篩查技術(shù)與方式

2.1固相萃取-色譜與質(zhì)譜聯(lián)合檢測法

隨著毒物篩查技術(shù)的不斷提高，固相萃取屬于常見的樣品前處理技術(shù)的其中一種，其主要目的是將生物樣品進(jìn)行分離和富集，比如說：將生物檢材內(nèi)的目標(biāo)待檢測物品與雜質(zhì)進(jìn)行組分分離操作，進(jìn)而取得更高的回收率，并且容易操作，處理流程比較快;在法庭的科學(xué)領(lǐng)域，可通過生物檢材的特征，選取相對應(yīng)的固相萃取方式，與此同時，根據(jù)目標(biāo)待檢驗物品的酸堿性，來確定適合的固相萃取方式。

色譜法也適用于微生物的分離與分析。主要是通過將物質(zhì)分類并在不同的環(huán)境條件下實現(xiàn)相態(tài)的選擇性分配，使混合物中的各個部分根據(jù)其特性的差異而給予隔離。色譜法中對樣品萃取、凈化和濃縮過程的待處理要求也更為嚴(yán)苛，由此來防止了在篩查過程中出現(xiàn)基質(zhì)干擾和偽陽性的問題，而且，由于色譜分析法柱中對目標(biāo)物質(zhì)的隔離還需要相當(dāng)?shù)臅r間，因而，以上流程也無法達(dá)到快速檢測的要求。

上述二個方法加以結(jié)合，可把二個檢測方法的優(yōu)勢加以整合，克服缺陷性，從而實現(xiàn)了對復(fù)雜基體中的特殊毒物和非特殊毒物得到更高效的萃取、凈化以及檢驗，節(jié)省檢材的消耗，時效快且具有較高的靈敏度，更適用于法醫(yī)對于中毒物的篩查。

2.2免疫檢測法

免疫學(xué)法中的放射免疫法、酶聯(lián)免疫學(xué)分析、免疫膠體以及熒光偏振免疫的分析法屬于法醫(yī)檢驗毒物的常用方式。

RIA法具有特異性強(qiáng)、便攜性、敏感度高和節(jié)約檢材的優(yōu)勢，對生物堿嗎啡、苯妥英鈉、慶大霉素、氯丙臻等藥的測查也有著積極效果，其對血漿中生物堿嗎啡的測定限可處于0.3ng/mL。但在此過程中，會出現(xiàn)交叉反應(yīng)或偽陽性結(jié)構(gòu)，如果對組織樣本不能進(jìn)行科學(xué)處理，其未被滅活的可降解蛋白質(zhì)、鹽，以及pH值都會對測定結(jié)果正確程度產(chǎn)生一定的負(fù)面影響，同時受放射性元素的影響，在實驗者的體內(nèi)也會產(chǎn)生相應(yīng)的生物危害性，從而逐步被熒光免疫分析法所取代。

熒光免疫分析法，主要是利用熒光基團(tuán)可以代替輻射性同位素為標(biāo)志物質(zhì)的研究方法，它可以進(jìn)行多次應(yīng)用，而且敏感性高度、特異性也和色譜分析的方法比較相似，進(jìn)而有效進(jìn)行自動化的篩選方式。上述所有方法的研究，都廣泛適用小分子結(jié)構(gòu)的物質(zhì)測定。

免疫膠體金科技主要指使用膠質(zhì)金進(jìn)行標(biāo)識，并運(yùn)用在與抗原抗體反映的免疫學(xué)標(biāo)記技術(shù)上，由于容易使用而且檢測速度快，因此更有利于現(xiàn)場的實際操作;現(xiàn)階段，法醫(yī)毒品研究實驗室所使用的巴比妥、氯胺酮、苯環(huán)己哌啶、可卡因和對甲苯二氮卓等精神類藥物快速檢測的儀器盒，均使用了免疫膠體金工藝，其檢出濃度約為200至3000ng/mL;但與此同時，用在免疫技術(shù)的儀器盒和儀器檢出精度低下更適用于毒物的初篩。

2.3常見的未知物篩查法

法醫(yī)在對毒品的檢驗工作中常會對一般未知物質(zhì)和多目標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行篩選。其中，多目標(biāo)物質(zhì)主要是指社會上頻繁應(yīng)用且濫用的中毒品，因此對數(shù)據(jù)的處理說明也比較簡潔;但它僅僅屬于毒物的一小部分，而無法解決對大批尚未被高頻應(yīng)用的毒物篩選需求。所以高分辨率質(zhì)譜科技的存在，就可以實現(xiàn)對物質(zhì)的精確測量，對大批尚未被高頻應(yīng)用的毒物篩選進(jìn)行參考。針對常用的不明毒物可以在高分辨率質(zhì)譜技術(shù)的前提下，將不明毒物予以識別，但在實踐中會生成巨量的復(fù)雜數(shù)據(jù)，因此必須通過更高級化的軟件簡化過程并在譜庫內(nèi)進(jìn)行查詢，將與其相匹配的物質(zhì)進(jìn)行報告說明。

3、結(jié)束語

法醫(yī)毒物的包含種類和檢材種類繁多，而隨著新毒物的不斷出現(xiàn)，需要進(jìn)行快速且針對性較高的篩查【3】，滿足實際檢驗的需求;而對于固相萃取-色譜與質(zhì)譜聯(lián)合檢測法、免疫檢測法以及常見未知物篩查法等方式進(jìn)行不斷的優(yōu)化和提高，可以提出檢驗技術(shù)的新手段【4】，有助于法醫(yī)毒物檢驗工作的順利進(jìn)行。

參考文獻(xiàn)：

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[2] 李健. 佐匹克隆的法醫(yī)毒物動力學(xué)研究和組織病理學(xué)觀察[D]. 河南：河南科技大學(xué)，2019.

[3] 袁桂艷. 急性農(nóng)藥中毒檢測和百草枯中毒代謝組學(xué)及其肺損傷藥物干預(yù)研究[D]. 山東：山東大學(xué)，2021.

[4] 王樂樂. 地西泮中毒標(biāo)志物的法醫(yī)毒物動力學(xué)研究[D]. 山西：山西醫(yī)科大學(xué)，2020.