復(fù)方甘草酸苷干預(yù)肝硬化小鼠對(duì)肝功能的影響

摘要：目的：探討復(fù)方甘草酸苷干預(yù)肝硬化小鼠對(duì)肝功能指標(biāo)影響。方法：選取100只雄性小鼠，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組、模型組、復(fù)方甘草酸苷低、中、高劑量組，每組20只小鼠。除對(duì)照組使用0.9% NaCl注射液外，其余小鼠進(jìn)行每周2次的皮下注射CCl4（1.0mg/kg）構(gòu)建肝硬化模型，2個(gè)月后，復(fù)方甘草酸苷低、中、高劑量組分別持續(xù)灌胃復(fù)方甘草酸苷5ml/kg、10ml/kg、15ml/kg，2次/d，持續(xù)1個(gè)月。記錄所有小鼠肝功能指標(biāo)。結(jié)果：谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）水平在模型組、復(fù)方甘草酸苷低劑量、中劑量、高劑量組、對(duì)照組依次降低（P<0.05）。白蛋白（ALB）、總膽紅素（TBIL）水平，模型組、復(fù)方甘草酸苷低劑量、中劑量組的均高于對(duì)照組（P<0.05），復(fù)方甘草酸苷高劑量組低于復(fù)方甘草酸苷低劑量、中劑量組（P<0.05），復(fù)方甘草酸苷高劑量組和對(duì)照組以及模型組和復(fù)方甘草酸苷低劑量組差異不明顯（P>0.05）。結(jié)論：高濃度的復(fù)方甘草酸苷能有效降低小鼠血清肝功能。

關(guān)鍵詞：復(fù)方甘草酸苷;小鼠;肝硬化;肝功能

肝硬化是臨床常見的慢性進(jìn)行性肝病，由一種或多種病因長(zhǎng)期或反復(fù)作用形成的疾病，具有彌漫性[1]。復(fù)方甘草酸苷是一種以甘草酸為主的藥物，對(duì)花生四烯酸的代謝有一定抑制作用，具有良好的抗炎和護(hù)肝功能，早期被廣泛應(yīng)用于肝硬化治療中[2-4]。目前，研究復(fù)方甘草酸苷對(duì)人類酒精性肝硬化肝功能和肝硬化影響較多，而關(guān)于小鼠的研究較少，本研究采用肝硬化小鼠為動(dòng)物模型，檢測(cè)不同濃度復(fù)方甘草酸苷對(duì)小鼠體內(nèi)肝功能如谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Alanine transaminase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（Aspartate transaminase，AST）、白蛋白（Albumin，ALB）、總膽紅素（Total bilirubin，TBIL）等的影響。

1資料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1藥物及器材

復(fù)方甘草酸苷（國(guó)藥準(zhǔn)字H20080677，濰坊中獅制藥有限公司），CCl4（批號(hào)20130329，成都市科龍化工試劑廠），NaCl注射液（貨號(hào)：YJ-12259R，上海雅吉生物科技有限公司），全自動(dòng)生化分析儀（貨號(hào)：Selectra E Chemistry Analyzer，上海玉研科學(xué)儀器有限公司），HA小鼠酶聯(lián)免疫試劑盒、LN小鼠酶聯(lián)免疫試劑盒、PCⅢ小鼠酶聯(lián)免疫試劑盒、CG小鼠酶聯(lián)免疫試劑盒。

1.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

Balb/c小鼠（貨號(hào)：CS-004，遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)股份有限公司）100只，均為雄性，體重（36.1±1.5）g，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組、模型組、復(fù)方甘草酸苷低（5ml/kg）、中（10ml/kg）、高劑量組（15ml/kg），每組20只小鼠。由于CCl4毒性較大，可能致使小鼠死亡，最終每組均保留15只小鼠數(shù)據(jù)。

1.2模型建立及檢測(cè)方法

1.2.1肝硬化小鼠模型建立

模型組、復(fù)方甘草酸苷低、中、高劑量組小鼠進(jìn)行每周2次的皮下注射CCl4（1.0mg/kg）構(gòu)建肝硬化模型，2個(gè)月后復(fù)方甘草酸苷低、中、高劑量組分別持續(xù)灌胃復(fù)方甘草酸苷5ml/kg、10ml/kg、15ml/kg，300μL，2次/d，持續(xù)1個(gè)月。期間對(duì)照組給予0.9% NaCl注射液，所有小鼠飲食自由。

1.2.2檢測(cè)方法及標(biāo)準(zhǔn)

肝功能指標(biāo)檢測(cè)：肝硬化小鼠模型建立并給藥完成，第3個(gè)月后取小鼠血液離心后的血漿，使用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)小鼠肝功能指標(biāo)ALT、AST、ALB、TBIL的變化，嚴(yán)格按照操作說(shuō)明進(jìn)行。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 23.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料采用（xˉ±s）表示，行t檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1各組小鼠肝功能指標(biāo)比較

模型組、復(fù)方甘草酸苷低劑量、中劑量、高劑量組的ALT、AST均高于對(duì)照組，復(fù)方甘草酸苷低劑量、中劑量、高劑量組低于模型組，復(fù)方甘草酸苷高劑量組低于復(fù)方甘草酸苷低劑量、中劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。模型組、復(fù)方甘草酸苷低劑量、中劑量組的ALB、TBIL均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），復(fù)方甘草酸苷高劑量組和對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），模型組和復(fù)方甘草酸苷低劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），復(fù)方甘草酸苷高劑量組低于復(fù)方甘草酸苷低劑量、中劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

3討論

病理組織學(xué)上有廣泛的肝細(xì)胞壞死、殘存肝細(xì)胞結(jié)節(jié)性再生，結(jié)締組織增生與纖維隔形成，導(dǎo)致肝小葉結(jié)構(gòu)破壞和假小葉形成，肝臟逐漸變形，變硬而發(fā)展為肝硬化[5]。肝硬化不僅導(dǎo)致肝功能異常，影響人類正常代謝，而且嚴(yán)重影響肝臟微循環(huán)，使門脈阻力增加[1]。因此，治療肝硬化重點(diǎn)在于抗纖維化治療、改善肝臟功能[6，7]。

復(fù)方甘草酸苷由甘草根莖中提取，主要成分有甘草酸、半胱氨酸以及甘氨酸，不僅通過(guò)抑制磷酸酯酶 A2以及炎性因子的活性發(fā)揮抗炎作用[2，8]，還可通過(guò)調(diào)節(jié)花生四烯酸代謝過(guò)程，使磷脂酶激活，增強(qiáng)糖皮質(zhì)激素的抑制作用發(fā)揮抗炎作用，調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞抑制病毒增殖，達(dá)到保護(hù)肝細(xì)胞膜作用[9，10] 。本研究顯示，ALT、AST水平在模型組、復(fù)方甘草酸苷低劑量、中劑量、高劑量組、對(duì)照組依次降低，且有明顯差異，表明復(fù)方甘草酸苷可保護(hù)小鼠肝功能，劑量越高效果越好。綜上所述，高濃度的復(fù)方甘草酸苷能有效降低小鼠血清ALT、AST、TBIL水平，有效治療小鼠肝硬化。

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第一作者：王劍，（1984--）男，漢族，陜西渭南人，碩士，講師，渭南職業(yè)技術(shù)學(xué)院，主要從事生理、藥理教學(xué)工作。

課題名稱：陜西省教育廳專項(xiàng)科研計(jì)劃項(xiàng)目（復(fù)方甘草酸苷對(duì)肝硬化患者治療作用的臨床研究）

課題編號(hào)：19JK0303