防治玉米葉斑病高效藥劑篩選及藥劑減施增效技術(shù)

李聰聰 王亞嬌 栗秋生 吳玉星 王鵬 孔令曉

摘要 為有效防治玉米小斑病和彎孢葉斑病并減少化學(xué)農(nóng)藥使用量，本研究采用菌絲生長速率法從11種殺菌劑中選取抑菌效果較好的8種藥劑進(jìn)行田間小區(qū)藥效試驗(yàn)。同時選取對兩種葉部病害兼具防效的最佳藥劑再與中量元素水溶肥、腐植酸、氨基寡糖素、蕓苔素內(nèi)酯等產(chǎn)品混配開展田間藥效試驗(yàn)，確定該藥劑田間施用濃度和增效組合。結(jié)果顯示，各供試藥劑對2種病菌菌絲生長具有不同的抑制作用，其中25%丙環(huán)唑EC、25%戊唑醇WP、40%氟硅唑EC、30%氟菌唑WP、12.5%烯唑醇WP在供試各濃度下對2種病菌抑制率均為100%，田間小區(qū)藥效篩選測定中，25%戊唑醇WP防治效果最好，對玉米小斑病和彎孢葉斑病兩種葉部病害防效分別為81.07%和72.22%。田間試驗(yàn)中，25%戊唑醇WP防治玉米小斑病和彎孢葉斑病的最佳施用濃度為2 000倍液，防效分別為59.48%和53.96%。在減量50%情況下防效有所下降，配施氨基寡糖素后，防效可提高37.40百分點(diǎn)和22.98百分點(diǎn)，與最佳施用濃度防效相當(dāng)，達(dá)到了減藥增效的作用。

關(guān)鍵詞 殺菌劑篩選;玉米小斑病;彎孢葉斑病;減施增效

中圖分類號： S435.131

文獻(xiàn)標(biāo)識碼： B

DOI： 10.16688/j.zwbh.2021098

Abstract In order to effectively control Southern corn leaf blight and Curvularia leaf spot and reduce the use of chemical pesticides， eight fungicides with better inhibition effect were selected from 11 fungicides by mycelial growth rate method for field test. Meanwhile， the best fungicide for the two kinds of leaf diseases was mixed with medium elements， humic acid， amino-oligosaccharide， brassinolide and other products to determine the field application concentration and synergistic combination of the fungicide. The results showed that all the tested fungicides had different inhibitory effects on the mycelial growth of the two pathogens. The inhibition rates of propiconazol 25% EC， tebuconazole 25% WP， flusilazole 40% EC， triflumizole 30% WP and diniconazole 12.5% WP were all 100% at each tested concentration. Field trials demonstrated that tebuconazole 25% WP had the highest control effect with the efficacy of 81.07% and 72.22% on Southern corn leaf blight and Curvularia leaf spot， respectively. The optimum application concentration of tebuconazole 25% WP for Southern corn leaf blight and Curvularia leaf spot was 2 000 times， and the control efficacies were 59.48% and 53.96%， respectively. The control effect decreased when the dosage was reduced by 50%， and the control efficacy was increased by 37.40 percentage points and 22.98 percentage points by the combined application of amino-oligosaccharide， which was equivalent to that at the optimum application concentration， achieving the effect of fungicide reduction and synergism.

Key words fungicide screening;southern corn leaf blight;Curvularia leaf spot;reduce application and increase efficiency

玉米是我國種植面積最大的糧食作物之一，同時也是我國重要的飼料作物和經(jīng)濟(jì)作物，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和經(jīng)濟(jì)發(fā)展中占有重要地位。由Bipolaris maydis引起的玉米小斑病和由Curvularia lunata引起的彎孢葉斑病是黃淮海夏玉米產(chǎn)區(qū)主要的葉部病害[1-2]。玉米小斑病可在整個生育期內(nèi)發(fā)生，但在抽雄、灌漿期發(fā)病尤為嚴(yán)重，主要危害玉米葉片，最初侵染植株的下部葉片，并逐漸向上部葉片蔓延，在玉米抽穗灌漿期時病斑最多，嚴(yán)重時導(dǎo)致葉片枯萎死亡，嚴(yán)重影響玉米的產(chǎn)量[3-4]。玉米彎孢葉斑病在玉米抽雄后發(fā)展蔓延迅速，流行頻率高，主要侵染穗上葉片，病斑密集，嚴(yán)重的致使葉片枯死，一般減產(chǎn)20%～30%，嚴(yán)重地塊可減產(chǎn)50%[5-6]，因此有必要加強(qiáng)對玉米小斑病和彎孢葉斑病的監(jiān)測與防控。0CCA675A-14BD-4466-BF23-80721BCE3575

目前培育抗性品種和化學(xué)藥劑是防治玉米葉部病害的主要方法[7]?？共∑废涤N周期長，加之長時間種植單一的抗病品種，致使生理小種多變，抗性易喪失，因此化學(xué)藥劑防治對玉米葉部病害占有不可或缺的地位。當(dāng)前用于玉米葉部病害防治的化學(xué)藥劑較多，主要有腐霉利、百菌清、春雷霉素、異菌脲、代森錳鋅、氟啶胺、腈苯唑等[8-9]，但存在的主要問題是用藥雜亂、藥量大和防治時間不準(zhǔn)確，篩選高效藥劑及混施的增效產(chǎn)品可以減少田間施藥量、延緩病原菌的抗藥性，是玉米綠色生產(chǎn)的需要也是保護(hù)環(huán)境和生態(tài)安全的重要措施。

與化學(xué)藥劑混施的增效產(chǎn)品有植物生長調(diào)節(jié)劑、葉面肥、誘抗劑等。作為植物生長調(diào)節(jié)劑的蕓苔素、速效胺鮮酯等具有滲透性強(qiáng)、內(nèi)吸快的特點(diǎn)，能有效增加葉綠素含量，提高光合作用效率，提高作物的抗寒、抗旱、抗鹽堿等抗逆性，顯著減少病害的發(fā)生[10]。葉面肥，如中量元素和腐植酸等，具有緩釋、高效、環(huán)保等特點(diǎn)，能夠補(bǔ)充營養(yǎng)促進(jìn)植物生長[11-12]。誘抗劑，如寡糖·鏈蛋白、氨基寡糖素等，能夠誘導(dǎo)激活植物的免疫系統(tǒng)，提高植物對病害的誘導(dǎo)抗病性[13]。目前對于玉米葉部病害防控增效產(chǎn)品的篩選鮮有報道。因此，本研究通過菌絲生長速率法及田間小區(qū)藥效試驗(yàn)從常用的11種殺菌劑中篩選防治效果較好的化學(xué)藥劑，并通過田間藥效試驗(yàn)明確其適宜的最佳施用濃度，在此基礎(chǔ)上減施50%并混配增效產(chǎn)品，以期達(dá)到農(nóng)藥減量增效的目的，為科學(xué)合理防治玉米葉部病害提供技術(shù)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試玉米品種：‘先玉335。

供試菌株：玉米小斑病菌B.maydis、彎孢葉斑病菌C.lunata均由河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所真菌病害實(shí)驗(yàn)室分離保存。

供試藥劑：25%丙環(huán)唑乳油（EC），新加坡利農(nóng)有限公司;25%戊唑醇可濕性粉劑（WP），青島瀚生生物技術(shù)股份有限公司;40%氟硅唑乳油（EC），上海杜邦農(nóng)化有限公司;30%氟菌唑可濕性粉劑（WP），上海生農(nóng)生化制品股份有限公司;12.5%烯唑醇可濕性粉劑（WP），江蘇建農(nóng)農(nóng)藥化工有限公司;25%吡唑醚菌酯微乳劑（ME），青島泰生生物技術(shù)有限公司;10%苯醚甲環(huán)唑水分散顆粒劑（WG），先正達(dá)蘇州作物保護(hù)有限公司;25%咪鮮胺水乳劑（EW），河南新農(nóng)化工有限公司;70%甲基硫菌靈可濕性粉劑（WP），江蘇龍燈化學(xué)有限公司;80%多菌靈可濕性粉劑（WP），河北冠龍農(nóng)化有限公司;50%咯菌腈可濕性粉劑（WP），先正達(dá)蘇州作物保護(hù)有限公司。

供試增效產(chǎn)品：0.004%蕓苔素內(nèi)酯水劑（AS），云南云大科技農(nóng)化有限公司;35.4%中量元素水溶肥料水劑（AS），德國阿格魯肯特殊肥料有限公司;4%腐植酸水劑（AS），保定市根地高工貿(mào)有限公司;2%氨基寡糖素水劑（AS），河北冠龍農(nóng)化有限公司。

1.2 方法

1.2.1 防治玉米小斑病、彎孢葉斑病藥劑抑菌率測定

采用生長速率法對11種殺菌劑進(jìn)行了室內(nèi)篩選，將各種藥劑與PDA培養(yǎng)基混合配制成推薦劑量及1/2推薦劑量的含藥平板培養(yǎng)基，每處理4次重復(fù);用直徑為6 mm的打孔器打取預(yù)先培養(yǎng)的玉米小斑病菌和彎孢葉斑病菌菌餅，分別接種于各處理平板培養(yǎng)基中央，25℃恒溫培養(yǎng)箱黑暗條件下培養(yǎng)， 5 d 后測量菌落直徑，以無藥劑的小斑病菌和彎孢葉斑病菌PDA培養(yǎng)基為對照，按照下列公式計算抑菌率。抑菌率=[（對照菌落直徑-菌餅直徑）-（處理菌落直徑-菌餅直徑）]/（對照菌落直徑-菌餅直徑）×100%。

1.2.2 殺菌劑對玉米小斑病及彎孢葉斑病田間藥效測定

試驗(yàn)于2018年在河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所內(nèi)進(jìn)行，共設(shè)2個小區(qū)，每小區(qū)長3.5 m，寬9.5 m，每行15株，每處理3行。利用高粱粒培養(yǎng)基擴(kuò)繁玉米小斑病菌和玉米彎孢病菌，分別制備濃度為1×104個/mL和1×105個/mL的分生孢子懸浮液。待玉米長到13葉期，參照供試藥劑推薦劑量均勻噴施于植株葉片，施藥24 h后，采用葉面噴霧法，分別接種2種病菌分生孢子懸浮液，清水噴霧為對照，10 d后調(diào)查發(fā)病級別，按下列方法計算病情指數(shù)和防治效果。病情指數(shù)=Σ（各級病株數(shù)×病級）/（調(diào)查總株數(shù)×最高病級）×100;防治效果=（對照病情指數(shù)-處理病情指數(shù)）/對照病情指數(shù)×100%。

1.2.3 25%戊唑醇WP田間施用技術(shù)

試驗(yàn)于2018年和2019年在河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所農(nóng)場進(jìn)行，于夏播時期正常播種，行距60 cm，株距25 cm，小區(qū)面積24 m2，3次重復(fù)，正常肥水管理。將25%戊唑醇WP分別稀釋1 500倍液、2 000倍液及2 500倍液，于玉米13葉期進(jìn)行葉面噴霧，藥后24 h分別接種濃度為1×104個/mL玉米小斑病菌及1×105個/mL彎孢病菌分生孢子懸浮液，20 d充分發(fā)病后調(diào)查發(fā)病情況，并根據(jù)1.2.2方法計算防治效果，確定適宜的藥劑施用濃度。

基于對兩種病害最佳藥劑施用濃度的篩選結(jié)果，將中量元素水溶肥、腐植酸、氨基寡糖素、蕓苔素內(nèi)酯按照藥劑用量減少50%進(jìn)行混配，以單劑最佳施用濃度為藥劑對照，清水為空白對照，各處理小區(qū)設(shè)計同上述方法，并計算防治效果，明確具有增效作用的最佳混配組合。

1.3 調(diào)查標(biāo)準(zhǔn)

玉米小斑病分級標(biāo)準(zhǔn)[14]為0級：免疫，不發(fā)病;1級：葉片上有零星病斑，病斑面積≤5%;3級：穗下葉片有少量病斑，占葉面積的6%～10%，穗上葉片有零星病斑;5級：穗下葉片上病斑較多，占葉面積的11%～30%，穗上葉片有少量病斑;7級：穗下葉片和穗上葉片有大量病斑，占葉面積的31%～70%;9級：全部葉片基本被病斑覆蓋，葉片枯死。

玉米彎孢葉斑病分級標(biāo)準(zhǔn)[15]：0級：免疫，不發(fā)病;1級：僅在下部葉片上有少量病斑，病斑面積≤10%;3級：植株下部葉片有一定量病斑，占葉面積的11%～30%;5級：植株上部葉片有少量病斑，下部葉片病斑較多，占葉面積的31%～50%;7級：植株上部葉片和下部葉片均有大量病斑，占葉面積的51%～70%;9級：全部葉片基本被病斑覆蓋，葉片枯死。0CCA675A-14BD-4466-BF23-80721BCE3575

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用Excel 2007基礎(chǔ)性數(shù)據(jù)分析，SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，Duncan氏新復(fù)極差法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試藥劑對玉米小斑病菌和彎孢葉斑病菌抑制作用

采用菌絲生長速率法測定了11種殺菌劑對玉米小斑病菌及彎孢葉斑病菌菌絲生長的抑制作用，結(jié)果表明（表1），各供試藥劑對2種病菌菌絲生長具有不同的抑制作用，25%丙環(huán)唑EC、25%戊唑醇WP、40%氟硅唑EC、30%氟菌唑WP、12.5%烯唑醇WP在供試各濃度下對2種供試病原菌抑制率均為100%，能夠完全抑制2種病菌菌絲的生長，其中40%氟硅唑EC的有效成分用量最低，為50～100 mg/L，25%丙環(huán)唑EC的有效成分用量較高，為250～500 mg/L。 其次為25%咪鮮胺EW 3 000倍液和1 500倍液，對玉米小斑病菌和彎孢葉斑病菌的抑菌率分別為83.89%～93.12%和84.24%～87.80%，而70%甲基硫菌靈WP和80%多菌靈WP抑菌效果相對較差。

2.2 殺菌劑對玉米小斑病及彎孢葉斑病的田間防治效果

選取平皿抑制效果較好的8種殺菌劑，測定了常規(guī)推薦濃度對玉米小斑病及彎孢葉斑病的田間防治效果，結(jié)果顯示（表2），供試藥劑對兩種葉部病害都有顯著的防治效果，對玉米小斑病防效在32.4%～81.07%之間，對彎孢葉斑病的防治效果為41.41%～72.22%。

對玉米小斑病，25%戊唑醇WP 2 000倍液防效最高，為81.07%，顯著高于其他殺菌劑;其次為25%丙環(huán)唑EC 1 000倍液、40%氟硅唑EC 8 000倍液及25%吡唑醚菌酯ME 1 000倍液，防治效果分別為64.55%、63.53%和61.99%;30%氟菌唑WP 2 000倍液、10%苯醚甲環(huán)唑WG 600倍液、25%咪鮮胺EW 2 000倍液和12.5%烯唑醇WP 2 000倍液防治效果相對較差，防效為32.24%～55.29%。

在玉米彎孢葉斑病防效測定中，25%戊唑醇WP 2 000倍液、25%丙環(huán)唑EC 1 000倍液、25%吡唑醚菌酯ME 1 000倍液的防治效果顯著優(yōu)于其他藥劑，防治效果分別為72.22%、69.06%和68.73%，其次為12.5%烯唑醇WP 2 000倍液和40%氟硅唑EC 8 000倍液，防治效果為60.91%和54.98%，10%苯醚甲環(huán)唑WG 600倍液、30%氟菌唑WP 2 000倍液、25%咪鮮胺EW 2 000倍液防治效果較差。

綜合分析25%戊唑醇WP 2 000倍液對玉米小斑病和彎孢葉斑病的防治效果最佳，且有效成分用量相對較少。

2.3 25%戊唑醇WP田間減施增效施用技術(shù)

2.3.1 葉面噴霧防治玉米小斑病及彎孢葉斑病的用藥適宜濃度

在玉米的13葉期測定不同濃度25%戊唑醇WP對玉米小斑病及彎孢葉斑病防治效果，結(jié)果表明（表3），25%戊唑醇WP對玉米小斑病及彎孢葉斑病的防效均隨施藥濃度增加而提高。25%戊唑醇WP 1 500倍液和2 000倍液對玉米小斑病的防效分別為62.28%和59.48%，兩者之間無顯著差異，但均顯著高于2 500倍液的防效39.57%;對玉米彎孢葉斑病，25%戊唑醇WP戊唑醇1 500倍液和2 000倍液的防效差異不顯著，分別為61.83%和53.96%，均顯著高于2 500倍液的防效41.21%。綜合分析，25%戊唑醇WP 2 000倍液田間防治兩種玉米葉部病害的防效高且藥劑有效成分用量低，是防治玉米小斑病及彎孢葉斑病的適宜濃度。

2.3.2 減藥增效產(chǎn)品選擇及田間防治效果

采用25%戊唑醇WP 4 000倍液分別與中量元素、腐植酸、氨基寡糖素、蕓苔素內(nèi)酯等混配，田間接種測定對玉米小斑病及彎孢葉斑病的防治效果。結(jié)果顯示（表4），25%戊唑醇WP 4 000倍液與4種增效產(chǎn)品混配后均能使其對玉米小斑病及彎孢葉斑病的防效提高。在玉米小斑病防效測定中，25%戊唑醇WP 4 000倍液與氨基寡糖素、蕓苔素、腐植酸混配后防效均達(dá)到50%以上，其中與氨基寡糖素混配后防效最高，為63.80%，相比單劑25%戊唑醇WP 4 000倍液防治效果提高了37.40百分點(diǎn)，與單劑25%戊唑醇WP 2 000倍液防治效果無顯著差異。

在玉米彎孢葉斑病的防效測定中，仍然是25%戊唑醇WP 4 000倍液與氨基寡糖素混配后防效最高，為64.10%，其次為25%戊唑醇WP 4 000倍液與腐植酸混配，防效為58.40%，相比單劑戊唑醇WP 4 000倍液的防效分別提高了22.98百分點(diǎn)和17.28百分點(diǎn)，與單劑戊唑醇WP 2 000倍液的防效無顯著性差異。

由此可見，25%戊唑醇WP用量減少50%同時配施氨基寡糖素，能提高對玉米小斑病和彎孢葉斑病兩種葉部病害的防效，與單劑25%戊唑醇WP 2 000 倍液相比，防效差異不顯著，但降低了藥劑的有效成分用量50%，達(dá)到了減藥增效的防治效果。

3 結(jié)論與討論

據(jù)報道，戊唑醇和烯唑醇對玉米小斑病菌的抑制作用最強(qiáng)，EC50分別為0.201 8 μg/mL和0.273 5 μg/mL，甲基硫菌靈對玉米彎孢葉斑病菌菌絲生長幾乎沒有抑制作用[8，16]。本研究采用菌絲生長速率法和田間小區(qū)藥效測定相結(jié)合的方法開展了不同殺菌劑對玉米小斑病菌、彎孢葉斑病菌的抑制作用和病害田間防治效果研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在抑制菌絲生長方面，三唑類殺菌劑效果較好，能夠完全抑制玉米小斑病菌和彎孢葉斑病菌的菌絲生長，而70%甲基硫菌靈WP和80%多菌靈WP抑制作用較差，抑菌率低于30%;25%戊唑醇WP對兩種病害的田間防治效果最高，防效分別為81.07%和72.22%。戊唑醇是具有獨(dú)特作用機(jī)制的三唑類殺菌劑，除了存在與其他三唑類相同的作用位點(diǎn)外，還能夠抑制真菌麥角甾醇生物合成，同時還能夠引起病原菌細(xì)胞膜透性發(fā)生改變，導(dǎo)致細(xì)胞壁加厚，抑制病原菌菌絲的生長并對菌絲形態(tài)和結(jié)構(gòu)有致畸作用[17]，本試驗(yàn)結(jié)果表明，25%戊唑醇WP對玉米小斑病和彎孢葉斑病兩種夏玉米葉部病害防治效果較好。0CCA675A-14BD-4466-BF23-80721BCE3575

化學(xué)藥劑葉面噴霧是防治玉米葉部病害的主要手段，但是，生產(chǎn)上存在盲目用藥和用藥量過大等問題，因此改善常規(guī)的農(nóng)藥施用方法，是增加防效、降低成本和減輕環(huán)境污染的重要措施[18]。氨基寡糖素是一種植物功能調(diào)節(jié)劑，也是一種新型生物農(nóng)藥，具有活化植物細(xì)胞、促進(jìn)植物生長、調(diào)節(jié)植物抗性、激活植物防御反應(yīng)、啟動抗病基因表達(dá)等作用[19]。有研究表明，5%氨基寡糖素AS 50.0～83.3 mg/L 與25%丙環(huán)唑EC 225.0～250.0 mg/L 混配，對香蕉褐緣灰斑病的防效達(dá)到了79.65%～86.94%，高于兩個單劑單獨(dú)使用的防治效果[20]。余中蓮[21]利用氨基寡糖素與枯草芽胞桿菌桶混后對荔枝霜疫霉病的防治效果為58.08%，相比單劑分別提高了3.03百分點(diǎn)和25.66百分點(diǎn)。從本研究結(jié)果來看，25%戊唑醇WP用量減少50%并配施2%氨基寡糖素AS，能提高對玉米小斑病和彎孢葉斑病兩種葉部病害的防效，與25%戊唑醇WP 2 000倍液的防效無顯著性差異，達(dá)到了減藥增效的防治效果。同時與常規(guī)施藥法相比，本研究不僅減少了農(nóng)民在整個生育期內(nèi)防治玉米葉斑病所使用的農(nóng)藥施用量和施藥次數(shù)，還在一定程度上降低了成本，減輕了環(huán)境污染。畢秋燕等[22]用40%氟硅唑EC與50%醚菌酯WG和助劑0.1% NF-100協(xié)同減量進(jìn)行混配后對梨樹褐斑病持效期可達(dá)50 d，田間防效能夠達(dá)到70%以上?？梢姡侠砝脧?fù)配劑能夠取得更好的防治效果，可以提高減藥增效技術(shù)實(shí)施的應(yīng)用性。

隨著人們對生態(tài)環(huán)境和食品安全意識的提高，特別是在當(dāng)前提倡“藥肥雙減”的背景下，本研究仍需結(jié)合田間管理、了解產(chǎn)量變化等因素多方面分析，進(jìn)一步探索更加合理、高效的田間藥劑防治技術(shù)，以期為生產(chǎn)上科學(xué)合理防治玉米主要病害制定更具現(xiàn)實(shí)指導(dǎo)性的綜合防控體系，最終實(shí)現(xiàn)減量不減效的目的。

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（責(zé)任編輯：田 喆）0CCA675A-14BD-4466-BF23-80721BCE3575