艾滋病抗體檢測(cè)中使用酶聯(lián)免疫法和膠體金法的效果

陳姣姣 田方

摘要：目的 研究酶聯(lián)免疫法、膠體金法在艾滋病抗體檢測(cè)中的運(yùn)用效果。方法 選擇54例艾滋病患者，在艾滋病抗體檢測(cè)中，實(shí)驗(yàn)組采用酶聯(lián)免疫法，對(duì)照組采用膠體金法，比較兩組患者的檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果 對(duì)比對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組準(zhǔn)確率略低，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，差異不大，P>0.05;實(shí)驗(yàn)組陽(yáng)性率略高于對(duì)照組，陰性率略低于對(duì)照組，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，差異不大，P>0.05。結(jié)論? 酶聯(lián)免疫法、膠體金法在艾滋病抗體檢測(cè)中運(yùn)用，兩者檢測(cè)結(jié)果相似，準(zhǔn)確率均高，值得臨床運(yùn)用。

關(guān)鍵詞：艾滋病抗體檢測(cè);酶聯(lián)免疫法;膠體金法;效果

近些年來，我國(guó)艾滋病發(fā)生概率逐年增加，分析原因，與性觀念開放有關(guān)，危及患者生命安全，主要病原是人類免疫缺陷病毒，由于目前臨床沒有特異性藥物治療艾滋病，死亡率高的情況下傳染率也高[1]。對(duì)艾滋病應(yīng)盡早診斷以及治療，從而改善患者預(yù)后。對(duì)于醫(yī)院或者疾控中心來說，首先應(yīng)采集患者血液標(biāo)本，然后將血清分離，開展HIV抗體初篩。檢測(cè)患者病情的金標(biāo)準(zhǔn)是抗體檢測(cè)，由于檢測(cè)方法以及試劑方面存在差異，實(shí)驗(yàn)室在檢測(cè)HIV抗體方面的結(jié)果存在誤差[2]。為了明確檢測(cè)的準(zhǔn)確性，此次實(shí)驗(yàn)研究酶聯(lián)免疫法以及膠體金法在艾滋病抗體檢測(cè)中運(yùn)用的效果。

1資料和方法

1.1 資料

選擇2020年9月～2021年8月在我院的54例艾滋病患者進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，隨機(jī)數(shù)字表法分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，各27例。其中，實(shí)驗(yàn)組：男17例、女10例，年齡22～76（46.5±10.0）歲;對(duì)照組：男18例、女9例，年齡21～77（46.4±10.1）歲。兩組患者的基礎(chǔ)資料對(duì)比得出P>0.05。

入組標(biāo)準(zhǔn)：有明確的疾病史;知情同意，配合檢測(cè)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：對(duì)檢測(cè)不能配合;認(rèn)知障礙、溝通能力差;處于哺乳期以及妊娠期;惡性腫瘤;自身原本免疫系統(tǒng)疾病。

1.2 方法

在艾滋病抗體檢測(cè)中，實(shí)驗(yàn)組采用酶聯(lián)免疫法，對(duì)照組采用膠體金法，依據(jù)對(duì)應(yīng)試劑盒說明書檢測(cè)患者血清標(biāo)本。使用人類免疫缺陷病毒抗體酶聯(lián)免疫法檢測(cè)試劑盒以及人類免疫缺陷病毒抗體膠體金法診斷試劑盒，用儀器涉及全自動(dòng)微孔洗板機(jī)、數(shù)碼恒溫水箱、酶標(biāo)儀。

清晨取空腹血液4 ml，在沒有抗凝劑的真空試管中存放，離心速度3000 r/min，離心時(shí)間10 min，分析血清后，對(duì)其進(jìn)行檢驗(yàn)[3]。判讀結(jié)果的2名醫(yī)師需要有豐富經(jīng)驗(yàn)。

1.3 觀察指標(biāo)、判定標(biāo)準(zhǔn)[4]

對(duì)比兩組患者的準(zhǔn)確率、陽(yáng)性率、陰性率。膠體金法陽(yáng)性：檢測(cè)區(qū)紫紅色條帶。酶聯(lián)免疫法陽(yáng)性：樣本結(jié)果中A值在Cut-off及以上。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS25.0軟件，以χ2檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)對(duì)比計(jì)數(shù)資料、計(jì)量資料，表示方式是百分率（%）、（±s）。P<0.05，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異存在。

2結(jié)果

實(shí)驗(yàn)組患者準(zhǔn)確率略低，對(duì)比對(duì)照組患者，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，差異不大，P>0.05;實(shí)驗(yàn)組患者陽(yáng)性率略高于對(duì)照組患者，陰性率略低于對(duì)照組患者，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，差異不大，P>0.05。

3討論

艾滋病又稱獲得性免疫缺陷綜合征，傳播渠道眾多，包括性傳播、母嬰傳播、血液傳播，有極高的感染率，會(huì)嚴(yán)重危害公民健康。病因是機(jī)體感染艾滋病病毒，出現(xiàn)病毒血癥，導(dǎo)致細(xì)胞病變。隨著病毒不斷在肝細(xì)胞中復(fù)制，數(shù)量不斷增加，會(huì)攻擊人體免疫系統(tǒng)，破壞CD4T淋巴細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，使得免疫系統(tǒng)功能下降甚至喪失，進(jìn)而機(jī)體容易被各種病原體、病毒以及細(xì)菌侵襲;病毒還會(huì)在肝臟細(xì)胞中表達(dá)，導(dǎo)致肝臟毒性反應(yīng)發(fā)生，導(dǎo)致患者肝功能下降。在病癥后期，患者容易因發(fā)生惡性腫瘤，導(dǎo)致全身器官衰竭而死亡。

艾滋病患者在早期表現(xiàn)為疲乏無力、頻繁感冒、體溫上升以及食欲降低等癥狀，隨著病情進(jìn)展，會(huì)出現(xiàn)黏膜、皮膚皰疹、紫斑以及淤血斑等。當(dāng)疾病對(duì)患者內(nèi)臟器官造成威脅時(shí)，患者會(huì)出現(xiàn)持續(xù)性高熱，嚴(yán)重情況下發(fā)生心血管系統(tǒng)疾病以及神經(jīng)系統(tǒng)疾病?；颊甙l(fā)病初期癥狀不明顯，癥狀進(jìn)展之后，會(huì)有上述明顯表現(xiàn);在晚期，患者甚至?xí)霈F(xiàn)便血、胸痛以及呼吸困難等，威脅生命安全。

相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，目前我國(guó)攜帶HIV病毒的人群數(shù)量較多[5]，由于人口流動(dòng)性加快，導(dǎo)致傳播疾病速度增加，新增病例數(shù)量逐年增加。因此，給予患者實(shí)施有效、及時(shí)診斷，對(duì)阻斷疾病傳染具有重要意義。在具體的預(yù)防策略上，強(qiáng)調(diào)對(duì)疾病進(jìn)行早期診斷，強(qiáng)化宣教疾病知識(shí)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)疾病，合理控制患者的病情進(jìn)展和機(jī)體損傷。

研究發(fā)現(xiàn)[6]，由于艾滋病患者體內(nèi)病毒長(zhǎng)時(shí)間潛伏，往往在機(jī)體免疫力降低時(shí)發(fā)病，在疾病發(fā)展后期，可出現(xiàn)全身器官衰竭，死亡率較高。然而，該病在防治過程中難度較大，因?yàn)榛颊邥?huì)發(fā)生病毒血癥，病毒在肝臟細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，對(duì)細(xì)胞內(nèi)大分子的正常合成產(chǎn)生干擾，異常增加溶酶體膜通透性，導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生病變。而艾滋病病毒數(shù)量增加[7]，會(huì)加劇肝臟細(xì)胞損傷，降低肝臟功能。為了對(duì)此病進(jìn)行防治，應(yīng)給予艾滋病患者實(shí)施早期篩查處理。目前，我國(guó)政府針對(duì)艾滋病遏制已經(jīng)采取了相關(guān)措施，但是尚未健全防控體系，在干預(yù)HIV技術(shù)能力方面尚不夠先進(jìn)。為了有效檢驗(yàn)患者的艾滋病抗體，從而發(fā)現(xiàn)潛伏期內(nèi)患者的艾滋病抗體，臨床進(jìn)行了探討，以便能夠及時(shí)為患者實(shí)施針對(duì)性治療。

診斷艾滋病時(shí)，考慮患者的主要感染源是HIV，因此應(yīng)開展HIV抗體檢測(cè)，這是臨床應(yīng)用價(jià)值較高的重要診斷手段?，F(xiàn)階段，臨床主要利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)、致病性感染病原體檢驗(yàn)方式、艾滋病抗體檢驗(yàn)方式、免疫功能檢查方式對(duì)艾滋病病毒進(jìn)行檢驗(yàn)[8]。其中，常用兩種檢測(cè)手段，一種是酶聯(lián)免疫法;一種是膠體金法。對(duì)膠體金法進(jìn)行臨床探討[9]，分析其原理，在鞣酸、白磷等還原劑作用下，產(chǎn)生聚合反應(yīng)，氯金酸會(huì)將一定大小金顆粒形成，利用靜電作用，形成穩(wěn)定膠體狀態(tài)，即膠體金，作為較好免疫標(biāo)記物，可以良好標(biāo)記艾滋病抗體;然后分析膠體金，對(duì)當(dāng)前存在艾滋病抗體與否以及其性質(zhì)進(jìn)行判定，取得良好診斷效果。臨床研究得出，運(yùn)用膠體金技術(shù)，有較高特異性、強(qiáng)敏感性，結(jié)果較為準(zhǔn)確，且穩(wěn)定性較強(qiáng)，操作較為簡(jiǎn)便。在完成檢驗(yàn)后，容易判讀結(jié)果，臨床醫(yī)師不需要參與長(zhǎng)期培訓(xùn)，可在基層醫(yī)院中普及。分析酶聯(lián)免疫法是通過特殊試劑分析，檢驗(yàn)液體中包含微量物質(zhì)，利用ELISA檢測(cè)分離處理之后的血清標(biāo)本，靜置30 min收集的血液標(biāo)本，有利于血液凝集，針對(duì)血清進(jìn)行有效檢驗(yàn);逐漸加入血清以及質(zhì)控品后，進(jìn)行1 h孵育，運(yùn)用機(jī)洗板、加底物等處理，避光30 min，然后判定結(jié)果。

分析原理，通過結(jié)合抗體或者抗原以及固相載體表面，在此期間，應(yīng)保證抗原活性。同時(shí)，酶連接抗體或者抗原，形成酶標(biāo)抗原/酶標(biāo)抗體。運(yùn)用此種辦法，保留酶活性，保留免疫活性。測(cè)定期間，在固相載體表面，酶標(biāo)抗原或者酶標(biāo)抗體與檢驗(yàn)標(biāo)本會(huì)產(chǎn)生反應(yīng)，完成洗滌，將底物加入后，發(fā)揮酶催化反應(yīng)，將有色產(chǎn)物形成。分析這一類產(chǎn)物的顏色深以及顏色淺，相關(guān)抗體或者抗原的量，若量多，酶多，顏色更深，應(yīng)對(duì)顏色進(jìn)行觀察，對(duì)抗體以及抗原的量進(jìn)行分析。在酶聯(lián)免疫法使用期間，酶的催化頻率高，反應(yīng)效果提升，有較高敏感度。

為了確保以上結(jié)果準(zhǔn)確，應(yīng)嚴(yán)格按照相關(guān)流程操作。對(duì)比酶聯(lián)免疫法、膠體金法的檢測(cè)價(jià)值，結(jié)果有較高的一致性，提示在艾滋病患者診斷過程中應(yīng)用均有一定價(jià)值，可以將其作為防治疾病的重要手段。

李琦[10]等人報(bào)道提出，運(yùn)用酶聯(lián)免疫法、膠體金法，敏感性均高，運(yùn)用在艾滋病抗體檢測(cè)中，效果均良好。針對(duì)受檢人員實(shí)施血清檢驗(yàn)，診斷陽(yáng)性率高，兩者相似，且操作簡(jiǎn)單，在基層醫(yī)院可以廣泛應(yīng)用。這與本文實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)果一致。本組實(shí)驗(yàn)得出：實(shí)驗(yàn)組準(zhǔn)確率略低，對(duì)比對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，差異不大，P>0.05;實(shí)驗(yàn)組陽(yáng)性率略高于對(duì)照組，陰性率略低于對(duì)照組，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， P>0.05。

綜上所述，在艾滋病抗體檢測(cè)中運(yùn)用酶聯(lián)免疫法、膠體金法，檢測(cè)結(jié)果相似，均有較高準(zhǔn)確率，臨床上值得運(yùn)用以及推廣。

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