氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜測定芹菜中毒 氟磷殘留

鞏凡 郝莉花 潘鵬云 黃君婷

摘 要：研究建立了氣相色譜串接三重四極桿質(zhì)譜法測定芹菜菜中毒氟磷殘留。芹菜經(jīng)粉碎，乙腈提取，氯化鈉鹽析，有機相經(jīng)石墨化碳黑氨基復(fù)合柱凈化后上機測定，毒氟磷經(jīng)DB-1701柱分離，采用多反應(yīng)監(jiān)測（Multiple Reaction Monitoring，MRM）模式進行檢測，外標(biāo)法定量。毒氟磷在0.005～0.500 μg/mL

線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 9;方法的檢出限為0.003 mg/kg，定量限為0.01 mg/kg，回收率為92.4%～

121.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.29%～9.12%，方法準(zhǔn)確性和精密度良好。該方法簡便、快速、準(zhǔn)確，可應(yīng)用于蔬菜中毒氟磷農(nóng)藥殘留的檢測。

關(guān)鍵詞：毒氟磷;氣相色譜串接質(zhì)譜法;農(nóng)藥殘留

Determination of Dufulin Residue in Celery by Gas Chromatography-Triple Quadrupole Tandem Mass Spectrometry

GONG Fan1， HAO Lihua1*， PAN Pengyun1， HUANG Junting2

（1.Henan Institute of Product Quality Supervision and Inspection， Zhengzhou 450047， China; 2.College of Light Industry and Food， Zhongkai Agricultural and Engineering University， Guangzhou 510000， China）

Abstract： In this study， a gas chromatography tandem triple quadrupole mass spectrometry method was established for the determination of dufulin residue in celery. Celery was crushed， extracted with acetonitrile， and salted out with sodium chloride. The organic phase was purified by graphitized carbon black-amino composite column and then determined by the gas chromatography tandem triple quadrupole mass spectrometry; dufulin was separated by DB-1701 column， detected by multiple reaction monitoring （MRM） mode， and quantified by external standard method. The linear range of dufulin is 0.005～ 0.500 μg/mL， correlation coefficient R2=0.999 9; the detection limit of the method was 0.003 mg/kg， the quantification limit was

0.01 mg/kg， the recovery rate was 92.4%～121.0%， and the relative standard deviations was 2.29%～9.12%， so the accuracy and precision of the method were good. The method is simple， rapid and accurate， and can be applied to the detection of dufulin residue in vegetable.

Keywords： dufulin; gas chromatography tandem mass spectrometry; pesticide residues

我國作為農(nóng)業(yè)大國，農(nóng)藥使用量位居世界首位，有機磷類農(nóng)藥使用量占農(nóng)藥總使用量的60%以上[1]。其中，毒氟磷是我國創(chuàng)制的植物免疫誘導(dǎo)抗病毒劑，對煙草、黃瓜、番茄病毒病具有良好的防治效果，市場前景良好[2]。因具有高效、低毒等優(yōu)勢，被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)[3]。目前，GB 2763—2021對蔬菜中毒氟磷規(guī)定了限量值但未指定檢測方法，因此有必要建立毒氟磷的檢測方法并開展監(jiān)測。

目前，關(guān)于毒氟磷的檢測方法主要包括氣相色譜-質(zhì)譜法（Gas Chromatography Tandem Mass Spectrometry，GC-MS）[4]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（Liquid Chroma-tography-Triple Quadrupole Tandem Mass Spectrometry，LC-MS/MS）[5-6]。LC-MS/MS檢測毒氟磷前處理過程雖然簡單，但檢測要求前處理方法復(fù)雜，儀器維護成本高。氣相色譜-質(zhì)譜法使用單四極桿質(zhì)譜，定性能力弱，容易出現(xiàn)假陽性。而氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（Gas Chromatography-Triple Quadrupole Tandem?Mass Spectrometry，GC-MS/MS）法不僅分離度好，抗基質(zhì)抗干擾能力很強，具有高靈敏性和專屬性及精確性更高的優(yōu)點，因此建立有效的GC-MS/MS法測定果蔬中毒氟磷的殘留量很有必要。

本研究采用氣相色譜三重四極桿質(zhì)譜建立蔬菜中毒氟磷檢測方法，以芹菜為基質(zhì)，通過優(yōu)化氣相色譜和串聯(lián)質(zhì)譜等測試條件建立了靈敏度高、重現(xiàn)性好的果蔬中毒氟磷檢測方法。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

芹菜：市售。毒氟磷標(biāo)準(zhǔn)品（100 μg/mL，安譜）;石墨化碳黑氨基復(fù)合柱（1 200 mg，納普）;乙腈（色譜純，美國Honeywell）;氯化鈉（分析純，恒興試劑）;實驗用水：GB/T 6682—2008中規(guī)定的三級水。

1.2 儀器與設(shè)備

電子天平（0.1 mg，ME104E）、臺式冷凍離心機（VElocity 18R，德國Dynamica）、氣相色譜儀-串接三重四極桿質(zhì)譜儀（7890-7000，美國Agilent）。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品前處理

稱取10 g芹菜于50 mL離心管中，加入10 mL乙腈，渦旋混勻30 s，用濾紙過濾，收集濾液，加入3.0 g氯化鈉，振蕩提取1 min，靜置，待乙腈相與水相分層，分離出的乙腈相經(jīng)無水硫酸鈉干燥后待凈化。

凈化：石墨化碳黑氨基復(fù)合柱經(jīng)活化后，上樣1 mL，乙腈沖洗，收集流出液約10 mL，氮氣吹干后乙腈定容至1 mL，過0.45 μm濾膜，待測。

1.3.2 檢測條件

（1）氣相色譜條件。色譜柱：DB-1701毛細管柱（30 m×320 μm，0.25 μm）。進樣口溫度：250 ℃;進樣體積：1 μL，不分流進樣。升溫程序：初始溫度60 ℃，保持1 min，以40 ℃/min升至170 ℃，然后以10 ℃/min升至310 ℃保持3 min。

（2）質(zhì)譜條件。離子源：EI源;離子源溫度：230 ℃;傳輸線溫度：270 ℃;采集模式：多反應(yīng)監(jiān)測（Multiple Reaction Monitoring，MRM）模式。

（3）定性定量方法。以待測組分的保留時間和定性離子對作為定性依據(jù)，定量離子峰面積外標(biāo)法定量。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

取毒氟磷標(biāo)準(zhǔn)品1 mL定容至10 mL，獲得10 μg/mL毒氟磷中間液。將中間液用空白樣品基質(zhì)梯級稀釋為0.005 μg/mL、0.010 μg/mL、0.020 μg/mL、0.100 μg/mL和0.500 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

2 結(jié)果與分析

2.1 儀器分析參數(shù)的確定

用1.3.2的檢測條件，采用前級質(zhì)譜SCAN掃描，扣除背景后得到毒氟磷質(zhì)譜圖，見圖1。

從圖1毒氟磷質(zhì)譜圖可以看出，m/z=408.0是毒氟磷的分子離子峰，其中響應(yīng)最高的碎片m/z為270.9，因此選擇響應(yīng)較好的270.9為母離子，進行產(chǎn)物離子研究。

通過對270.9采用5 V、15 V、25 V、35 V和45 V電壓碰撞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)子離子251.1、244.1、175、

148和123.1具有較高響應(yīng)。子離子的響應(yīng)見表1。

由表1可知，251.1、244.1、175在15 V條件下響應(yīng)達到最高，148、123.1在35 V條件下響應(yīng)達到最高，考慮到大多數(shù)化合物在高碰撞能條件下較難獲得穩(wěn)定產(chǎn)物，因此子離子148、123.1在35 V條件下更具有應(yīng)用價值，因此選擇270.9→251.1（15 V）定量，270.9→148（35 V）和270.9→123.1（35 V）定性。

2.2 檢出限、線性范圍、精密度和回收率

（1）在芹菜中添加毒氟磷標(biāo)準(zhǔn)品，按照1.3實驗方法進行測定，根據(jù)3倍信噪比計算方法檢出限，10倍信噪比計算定量限。最終得到毒氟磷檢出限為0.003 mg/kg，定量限為0.01 mg/kg。

（2）將1.3.3配制的標(biāo)準(zhǔn)工作液按照1.3.2分析條件進樣，以定量離子豐度響應(yīng)為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線并進行線性回歸，毒氟磷在0.005～0.500 μg/mL線性關(guān)系良好，線性相關(guān)系數(shù)R2=0.999 9。

（3）稱取10 g陰性樣品，分別在標(biāo)準(zhǔn)曲線低、中、高3種濃度進行加標(biāo)實驗，添加含量分別為0.005 mg/kg、0.020 mg/kg、0.500 mg/kg，每個添加水平平行測定6次，計算回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。毒氟磷農(nóng)藥的回收率在92.4%～121.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）為2.29%～9.12%，回收率和精密度良好。

3 結(jié)論

研究建立了氣相色譜串接三重四極桿質(zhì)譜法測定芹菜中毒氟磷殘留。毒氟磷在0.005～0.500 μg/mL線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 9;方法的檢出限為0.003 mg/kg，定量限為0.01 mg/kg，回收率為92.4%～121.0%，RSD為2.29%～9.12%，方法準(zhǔn)確性和精密度良好。該方法簡便、快速、準(zhǔn)確，可應(yīng)用于市售蔬菜中毒氟磷農(nóng)藥殘留的檢測。

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作者簡介：鞏凡（1987—），男，河南鄭州人，碩士，工程師。研究方向：食品質(zhì)量與安全、食品分析檢測等。

通信作者：郝莉花（1979—），女，山西晉中人，博士，高級工程師。研究方向：食品檢驗。E-mail：15903684712@126.com。