低聚木糖對慢性腹瀉癥狀的改善作用

王沁玥，仝艷軍，劉登洋，吳順紅，劉二停，舒香玲，楊瑞金,*

（1.江南大學(xué)食品學(xué)院，江蘇 無錫 214122；2.江南大學(xué)附屬醫(yī)院，江蘇 無錫 214041；3.河南益常青生物科技有限公司，河南周口 466000）

腹瀉是一種常見的消化系統(tǒng)疾病，而腹瀉癥狀持續(xù)超過4周或反復(fù)發(fā)作時即為慢性腹瀉[1-2]。慢性腹瀉多見于慢性腸炎、腹瀉型腸易激綜合征、炎癥性腸病、腸道惡性腫瘤等腸道疾病，以急性感染性腹瀉病未徹底治療、遷延不愈最為常見。慢性腹瀉在老年人群中的發(fā)病率約為7%～14%[3]，兒童、免疫力低下患者亦為腹瀉的高危人群。糞菌移植（fecal microbiota transplantation，F(xiàn)MT）是將健康宿主糞便中的功能菌群，通過口服、灌腸等方式移植到患病宿主腸道內(nèi)，從而調(diào)節(jié)腸道菌群失衡，具備治療腸內(nèi)外疾病的應(yīng)用前景[4]，已被用于難辨梭狀芽孢桿菌感染、炎癥性腸病、頑固性便秘和代謝病等多種疾病的探索性研究和臨床治療[5-7]。

低聚木糖（xylooligosaccharides，XOS）是一類通過促進腸道有益微生物生長或活動從而維持宿主健康狀態(tài)的益生元，一般由2～7 個木糖分子通過β-1,4-糖苷鍵聚合而成[8]。XOS和其他的低聚糖相比，最大的優(yōu)勢是穩(wěn)定性強、耐酸耐熱，進入人體后不影響血糖濃度，適合糖尿病、高血壓患者服用[9]。XOS增殖雙歧桿菌的效果是低聚異麥芽糖、低聚果糖等益生元的20 倍，可以改善腸道動力[10]。XOS還具有抑制腫瘤壞死因子（tumour necrosis factor，TNF）-α、白細胞介素（interleukin，IL）-6等炎癥因子的產(chǎn)生、改善腸道健康等作用[11]。畜牧業(yè)領(lǐng)域，XOS已經(jīng)用于動物腹瀉癥狀的改善，如斷奶仔豬[12]和牛犢等；臨床研究中發(fā)現(xiàn)，XOS可以緩解孕婦便秘，改善老年人胃腸功能[8]。因XOS應(yīng)用于臨床慢性腹瀉的研究還存在許多空白，本研究擬通過隨機雙盲平行對照臨床試驗，對3 組患者分別用麥芽糊精、低劑量XOS、高劑量XOS進行干預(yù)。30 d后，分析各組患者各項生化指標的變化，隨后用3 組患者的糞菌液灌胃3 組小鼠，分析灌胃24 d后小鼠的相關(guān)情況，從而評估XOS對慢性腹瀉的效果，為慢性腹瀉癥狀的治療和預(yù)防打開新的思路。

1 材料與方法

1.1 動物、材料與試劑

6周齡雄性SPF級的昆明小鼠（體質(zhì)量30～35 g）購買于北京斯貝福公司，動物生產(chǎn)許可證號為SCXK（京）2019-0010。

XOS（純度為96.95%）、安慰劑 河南益常青生物科技有限公司；實驗動物飼料 江蘇省協(xié)同醫(yī)藥生物工程有限責(zé)任公司；無水乙醇、無水乙醚、乙酸（色譜級）、丁酸（色譜級） 國藥集團化學(xué)試劑有限公司；TNF-α、IL-10、閉鎖小帶蛋白（zonula occludens-1，ZO-1）、緊密連接蛋白Occludin和D-乳酸（D-lactic acid，D-LA）酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑盒 南京森貝佳公司；糞便DNA提取試劑盒 美國Omega Bio-tek公司。

1.2 儀器與設(shè)備

JXFSTPRP-L型全自動樣品快速研磨儀 上海凈信公司；Mastercycle nexus GSX1聚合酶鏈式反應(yīng)擴增儀 德國Eppendorf公司；NovaSeq高通量測序儀 美國Illumina公司；AU5800 Clinical Chemistry System全自動生化分析儀美國Beckman Coulter公司；GC-2010PLUS氣相色譜儀（配有全自動液體/頂空進樣器和氫火焰離子化檢測器）?日本島津公司。

1.3 方法

1.3.1 臨床試驗對象的篩選

1.3.1.1 倫理審查及研究對象

實驗依據(jù)江南大學(xué)食品學(xué)院和江南大學(xué)附屬醫(yī)院倫理委員會的要求，撰寫倫理審查報告，報送至倫理委員會審議通過（倫理審查批號為LS2019030）。以2019年6ü12月在江南大學(xué)附屬醫(yī)院消化內(nèi)科門診診斷有慢性腹瀉癥狀的患者作為研究對象。

1.3.1.2 納入標準

1）符合慢性腹瀉根據(jù)羅馬IV的診斷標準[13]：a）病程4周～2.5 年，平均（3.5f2.6）個月；b）有排便急迫感、排便頻率每日大于3 次，排便后腹部癥狀有所緩解；c）糞便性質(zhì)稀?。S便性狀主要為Bristol5、6、7型）；d）平均最大腹痛嚴重程度為≥4。2）就診前已通過相關(guān)檢查確定無胃腸道等器官病變。3）慢性腹瀉非繼發(fā)于其他疾病。4）年齡≥18 歲。5）研究前至少一周內(nèi)沒有進行相關(guān)治療以及沒有同時參加其他臨床研究。6）自愿參加本課題研究，簽署知情同意書并獲得醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準。

1.3.1.3 排除標準

1）檢查發(fā)現(xiàn)為炎癥性腸病患者；2）患有I型或II型糖尿病、甲狀腺功能異常、嚴重抑郁癥、自身免疫性疾病、有癌癥或胃腸手術(shù)史、藥物或酒精濫用史、精神疾病史、嚴重傳染病等；3）近3 個月內(nèi)服用抗生素3 d以上，或長期服用益生菌制品（包括食用酸奶和益生菌飲料）；4）腹瀉時有黑便、脂肪便、黏液便或血便，腹瀉時伴有發(fā)熱癥狀；5）近3 個月內(nèi)做過胃腸鏡或其他腸道手術(shù)；6）對研究產(chǎn)品過敏的個體、孕婦、備孕期間的女性或哺乳期女性。

1.3.1.4 研究對象剔除和脫落

研究過程中服用抗生素、益生菌、結(jié)腸清潔藥物等3 d或以上；依從性差，未能遵循醫(yī)囑治療或在本課題研究期間參了加其他臨床研究；中途自行退出本課題研究；因各種原因失訪等。以上原因會使得研究對象被剔除。

1.3.2 臨床試驗對象分組與干預(yù)

本研究中慢性腹瀉患者隨機分為對照組（CK）、低劑量干預(yù)組（3X）、高劑量干預(yù)組（6X），其中CK組7 人，3X組8 人，6X組7 人，各組患者的基本信息均無明顯差異（表1），干預(yù)周期為30 d。每位患者入組后，由另外的工作人員（非研究人員）發(fā)放XOS或安慰劑。安慰劑主要含有糊精和少量的葡萄糖、麥芽糖。XOS和安慰劑均為白色或微黃色粉末，味微甜，均使用不透明無標識包裝袋密封包裝。對照組患者每人每天服用3 g安慰劑；低劑量干預(yù)組患者每人每天服用3 g XOS；高劑量干預(yù)組患者每人每天服用6 g XOS，每日晚餐后服用。每組患者在初入組（干預(yù)前）和干預(yù)結(jié)束時接受糞便和靜脈血樣采集，采集時詢問患者飲食、運動、排便情況，干預(yù)過程中跟蹤每位患者的動態(tài)（是否服用XOS/安慰劑、是否有不良反應(yīng)、是否攝入抗生素）。入組患者和研究人員在整個干預(yù)期間保持雙盲狀態(tài)直到數(shù)據(jù)分析。

表1 各組患者的基本信息Table 1 Basic information of three groups of patients

1.3.3 臨床指標檢測

1.3.3.1 問卷調(diào)查評分

由患者個人在干預(yù)前和干預(yù)結(jié)束后根據(jù)腹痛癥狀、糞便形狀、胃口、排便次數(shù)、睡眠、口氣6 個方面進行0～3 分的程度評分，評分越高，癥狀越嚴重。

1.3.3.2 血清生化指標檢測

收集每位患者在干預(yù)前和干預(yù)后的靜脈血于惰性分離膠/促凝管，每管抽取約3～4 mL的血液并充分混勻，采用1 500hg、20 ℃，10 min的程序及時離心，隨后將血清分裝到0.5 mL離心管中。干預(yù)前后臨床樣本血清中總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）在全自動生化分析儀上檢測。

1.3.3.3 糞便中短鏈脂肪酸測定

糞便中SCFAs的提取和分析方法參考文獻[14]。稱取凍干后的50 mg糞便，用500 μL飽和NaCl溶液重懸，加入40 μL 10%（質(zhì)量分數(shù)）H2SO4酸化；加入1 000 μL無水乙醚，振蕩混勻，提取脂肪酸，然后12 000 r/min離心15 min；取上層乙醚相，加入0.25 g無水硫酸鈉進行干燥；靜置15 min后，12 000 r/min離心15 min，取上層乙醚相，裝入氣相小瓶中。采用氣相色譜法進行分析，根據(jù)標準品溶液含量通過外標法計算各樣品中乙酸和丁酸的含量。

1.3.3.4 糞便中總DNA的提取、擴增、測序

收集每位入組患者干預(yù)開始前和干預(yù)結(jié)束后的糞便樣本，冷凍保存在－80 ℃冰箱中，最后放置在干冰中運輸至上海宏序生物信息公司（中國）進行DNA提取、擴增、測序。

1.3.3.5 生物信息分析流程

為了提高分析結(jié)果的質(zhì)量，在序列充足的同時，也要保證序列的質(zhì)量，因此，分析前要先對原始數(shù)據(jù)進行過濾處理，得到優(yōu)化序列。然后在去除嵌合體序列后進行操作分類單元（operational taxonomic unit，OTU）聚類分析，對OTU的代表序列作分類學(xué)分析?；贠TU聚類分析結(jié)果，可以對OTU進行多種多樣性指數(shù)分析，也可進行一系列群落結(jié)構(gòu)變化的可視性分析。

線性判別分析（linear discriminant analysis effect size，LEfSe）即LDA Effect Size，是尋找組間存在統(tǒng)計學(xué)差異的關(guān)鍵物種的方法。通過對標記出的組間特征物種豐度進行統(tǒng)計學(xué)分析，篩選出具有統(tǒng)計學(xué)差異的物種，再進行組間分析而得到不同水平的具有顯著性差異的物種。

1.3.4 糞菌移植小鼠實驗

采集臨床試驗患者干預(yù)30 d后的糞便樣品，置于滅菌的糞便采集管中。將每組患者的糞便混合后溶于0.01 mol/L、pH 7.2磷酸鹽緩沖液中，制成200 mg/mL的FMT混懸液。剩下的樣品凍藏于－80 ℃冰箱。6周齡雄性SPF級的昆明小鼠飼養(yǎng)于江南大學(xué)實驗動物中心SPF級屏障設(shè)施中。小鼠隨機分為對照組（F-CK）、低劑量干預(yù)組（F-3X）、高劑量干預(yù)組（F-6X），每組6只，每只小鼠每日灌胃0.3 mL對應(yīng)組別患者的FMT混懸液，共灌胃24 d。動物實驗倫理審查批號為JN.No20191230k0600630。

1.3.5 小鼠組織樣本采集

FMT混懸液共灌胃24 d，實驗第25天小鼠禁食12 h，眼眶取血后（室溫靜置2 h）血液于冷凍離心機中4 ℃、2 000 r/min條件下離心15 min，收集血清并分裝。小鼠采用頸椎脫臼法處死后，迅速解剖取出結(jié)腸、盲腸。其余組織臟器分裝后，保存在－80 ℃冰箱中備用。

1.3.6 小鼠結(jié)腸組織勻漿液細胞因子的測定

將小鼠結(jié)腸里的內(nèi)容物清理干凈，取0.1 g結(jié)腸組織，剪碎后置于2 mL的無酶離心管，加入2 顆氧化鋯珠和1 mL的RIPA裂解液（含蛋白酶抑制劑），放入組織研磨儀中以65 Hz研磨45 s，研磨3 次至結(jié)腸組織呈流狀。結(jié)腸組織破碎完全后，在4 ℃、2 000 r/min條件下離心30 min。離心完成后取上清液作為待測樣本。全程冰浴操作，組織研磨儀的研磨模具需提前放入4 ℃冰箱中預(yù)冷。采用相應(yīng)酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑盒檢測TNF-α、IL-10、ZO-1、Occludin和D-LA水平，總蛋白含量用考馬斯亮藍法進行測定。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

實驗結(jié)果采用平均值±標準差表示。采用GraphPad Prism 8.0軟件進行數(shù)據(jù)分析和作圖。采用單因素方差分析比較組間差異，采用t檢驗進行顯著性分析，P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著，P＜0.001表示差異高度顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 患者腹瀉癥狀評分變化

最終符合標準的慢性腹瀉患者中，CK組隨機分入7 人，3X組隨機分入8 人，6X組隨機分入7 人。在共計4周的干預(yù)過程中，3X組有1 人中途退出、6X組有1 人因服用了抗生素而被剔除，最后CK組7 人，3X組7 人，6X組6 人，共計20 人完成干預(yù)并計入最終分析。

根據(jù)干預(yù)前后的腹瀉癥狀評分（圖1），發(fā)現(xiàn)3X組和6X組在干預(yù)后的腹瀉癥狀評分均顯著下降（P＜0.05），安慰劑CK組也有下降，但無顯著性差異。故初步判斷XOS的干預(yù)使得腹瀉癥狀有所減輕。

圖1 干預(yù)前后患者腹瀉癥狀評分的變化Fig. 1 Changes in diarrhea symptom score of patients before and after intervention

2.2 患者血清生化指標變化

脂質(zhì)代謝紊亂與腸道菌群失調(diào)密切相關(guān)，這種相關(guān)性腹瀉可能是因為過量脂肪酸刺激腸道造成的[15]，而TC、TG與脂肪酸的調(diào)節(jié)密切相關(guān)。陳麗雄等[16]等研究發(fā)現(xiàn)飼喂黃芪多糖后，繁殖獼猴的腹瀉數(shù)量下降，血清TC濃度從（2.60f0.88）mmol/L升至（2.91f0.58）mmol/L（P＞0.05）。何萍等[17]采用黃連素治療伴高脂血癥的腹瀉患者，干預(yù)后患者血清TG含量降低。如圖2所示，經(jīng)過干預(yù)，CK組TC和TG濃度變化較小，XOS干預(yù)組TC濃度有升高趨勢，TG濃度呈下降趨勢，干預(yù)前后均無顯著性差異（P＞0.05），推測XOS有改善慢性腹瀉患者脂代謝的效果，但效果不顯著（P＞0.05）。

圖2 干預(yù)前后患者血清TC（A）和TG（B）濃度的變化Fig. 2 Changes in serum total cholesterol (A) and triglycerides (B)levels of patients before and after intervention

2.3 患者糞便短鏈脂肪酸含量變化

短鏈脂肪酸作為腸道菌群主要的代謝產(chǎn)物之一，對宿主代謝有重要的調(diào)節(jié)作用。普遍研究認為短鏈脂肪酸對宿主代謝的影響利大于弊，但一些特定情況下短鏈脂肪酸產(chǎn)量過高會危害宿主[18]。對患者干預(yù)前后的糞便短鏈脂肪酸進行分析，如圖3所示，XOS進行干預(yù)后，糞便中丁酸含量有上升趨勢，乙酸含量有下降趨勢，但均無顯著性差異。作為腸上皮細胞能量來源，丁酸可以滿足結(jié)腸黏膜上皮細胞的能量供給需要。而干預(yù)前患者的乙酸含量高于干預(yù)后，可能原因為慢性腹瀉患者腸道內(nèi)發(fā)酵異常導(dǎo)致乙酸含量升高[19]。Ringel-Kulka等[20]研究發(fā)現(xiàn)腸內(nèi)氣體增加和腸腔內(nèi)pH值降低可能與腹痛癥狀產(chǎn)生有關(guān)，表明慢性腹瀉患者可能存在乙酸吸收障礙。

圖3 干預(yù)前后患者糞便中乙酸（A）和丁酸（B）含量的變化Fig. 3 The changes in acetic acid (A) and butyric acid (B) contents in feces of the patients before and after intervention

2.4 患者腸道菌群分析結(jié)果

2.4.1 腸道菌群的α多樣性變化

α多樣性通常表征腸道菌群的數(shù)量、種類、均勻度及進化關(guān)系，常用Shannon指數(shù)、Simpson指數(shù)進行表征。XOS對慢性腹瀉患者腸道菌群α多樣性的影響如圖4所示。其中Shannon指數(shù)越大表明群落多樣性和豐度越高。CK組在干預(yù)前后兩個階段的結(jié)果相近，未發(fā)生較大改變，而3X和6X組有較明顯變化趨勢。慢性腹瀉患者在XOS干預(yù)之后的腸道菌群多樣性增加，說明XOS有抑制腹瀉患者腸道菌群進一步失調(diào)的可能。

圖4 干預(yù)前后患者腸道菌群α多樣性指數(shù)的變化Fig. 4 Change in α diversity index of gut microbiota in patients before and after intervention

2.4.2 患者腸道菌群變化

如圖5A所示，在門水平上3 組患者腸道菌群仍以Firmicutes（厚壁菌門）、Bacteroidetes（擬桿菌門）、Actinobacteriota（放線菌門）以及Proteobacteria（變形菌門）為優(yōu)勢菌門，不同個體間的各菌門的相對豐度存在一定差異。經(jīng)過XOS干預(yù)后，3X組和6X組腸道中Firmicutes/Bacteroidetes比例提高，安慰劑干預(yù)后CK組反而上升。在對乳糜瀉兒童的研究中，將短雙歧桿菌作為飲食添加劑3 個月后，宿主體內(nèi)Firmicutes/Bacteroidetes的比例從減少到恢復(fù)，Actinobacteria相對豐度增加，腸道菌群結(jié)構(gòu)相對穩(wěn)定[21]，與3X組的結(jié)果類似。在屬水平上，干預(yù)后3X組中Blautia、Megamonas、Bifidobacterium、Lachnospiraceae_unclassified相對豐度增加，Subdoligranulum相對豐度減??；干預(yù)后6X組中Blautia相對豐度增加，Escherichia-Shigella、Prevotella、Ruminococcus_gnavus_group相對豐度減小。Prevotella是人腸道微生物三大腸型代表菌之一，同時也是人腸道微生物的核心菌屬之一。相對研究表明，Blautia具有抗炎作用[22]，Ruminococcus_gnavus_group在炎癥性腸病患者腸道中富集[23]，Bifidobacterium作為益生菌可以調(diào)節(jié)腸內(nèi)環(huán)境，由此可知，XOS可以增加腸道內(nèi)的有益菌相對豐度，減少致病菌相對豐度，調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)。

如圖5B、C所示，根據(jù)LEfSe結(jié)果計算lg LDA值并繪制分布柱狀圖，LDA值表示差異物種的影響程度，故物種的影響越大，對應(yīng)直方柱的長度越長。3X組干預(yù)前的關(guān)鍵物種有Peptostreptococcaceae，6X組干預(yù)前的關(guān)鍵物種為Lachnospira；3X組干預(yù)后的關(guān)鍵物種有Actinobacteriota、Solobacterium、Mogibacterium、Saccharimonadales、Patescibacteria、Saccharimonadia、Abiotrophia，共7 個；6X組干預(yù)后的關(guān)鍵物種為Romboutsia。相關(guān)研究表明，厚壁菌門中Solobacterium顯示與結(jié)直腸癌風(fēng)險降低相關(guān)[24]，Peptostreptococcaceae是與炎癥相關(guān)的物種[25]，Actinobacteriota作為產(chǎn)丁酸鹽物種可以減輕結(jié)腸炎癥[26]，Romboutsia與益生菌引起的腸道變化有關(guān)，有益生作用，可減輕大鼠的急性胰腺炎癥狀[27]。綜上所述，推測XOS可以通過調(diào)節(jié)腸道菌群來緩解結(jié)腸炎癥。

圖5 干預(yù)前后患者腸道菌群在門、屬水平的組成和LEfSe結(jié)果Fig. 5 Composition of gut microbiota in patients in different groups at phylum and genus level and LEfSe analysis

2.5 糞菌移植小鼠腸道通透性變化

D-LA是細菌發(fā)酵的代謝產(chǎn)物，當腸道屏障功能發(fā)生損傷時，腸道通透性增加，腸道黏膜絨毛上皮脫落，腸道細菌產(chǎn)生的大量D-LA通過受損黏膜，導(dǎo)致血清D-LA水平升高。與F-CK組相比，F(xiàn)-6X組血清中D-LA水平極顯著降低（圖6A）（P＜0.01），腸道通透性和損傷程度相比于F-CK組有所緩解，并且高劑量組干預(yù)效果更好。

緊密連接位于上皮細胞頂層及側(cè)邊的膜表面，形成細胞旁路密封層，可以調(diào)節(jié)離子、溶劑的進出，并維持細胞極性。對于維持腸道屏障完整性，細胞間的緊密連接和腸道黏液發(fā)揮了重要作用。而腸道屏障完整性缺失導(dǎo)致細菌抗原易位增加，刺激腸道黏膜的炎癥反應(yīng)[28]。FMT小鼠結(jié)腸勻漿液中Occludin和ZO-1含量如圖6B、C所示。與F-CK組相比，F(xiàn)-3X和F-6X的ZO-1和Occludin含量有所增加，其中F-3X的ZO-1的含量顯著上升（P＜0.05），Occludin含量有增加趨勢（P＞0.05）。研究表明，腸道屏障功能相關(guān)蛋白ZO-1、Occludin的表達增加時會改善腸道屏障[29]。Yin Jie等[30]研究發(fā)現(xiàn)仔豬經(jīng)XOS飼喂后，回腸中ZO-1表達量增加，腸黏膜通透性趨于正常，進一步說明XOS能使腸道黏膜功能和生物屏障趨于穩(wěn)定狀態(tài)。

圖6 小鼠腸道通透性水平Fig. 6 Intestinal permeability level of mice

2.6 糞菌移植小鼠結(jié)腸炎癥因子變化

腹瀉患者體內(nèi)的炎癥因子水平可以體現(xiàn)出腹瀉癥狀的嚴重程度，例如可調(diào)節(jié)腸道炎癥及嚴重程度[31]的TNF-α。IL-10作為抗炎因子，可下調(diào)菌群定植介導(dǎo)產(chǎn)生的黏膜炎癥因子[32]。血管生成素（angiopoiet，Ang）是一種腸道分泌的抗菌肽，浙江大學(xué)一院研究團隊發(fā)現(xiàn)Ang1可以調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，維持腸道穩(wěn)態(tài)，緩解結(jié)腸炎癥[33]。故本實驗結(jié)合3?種細胞因子的水平進行綜合分析，判斷FMT小鼠的腸道炎癥因子水平。

FMT小鼠的結(jié)腸炎癥因子水平的影響如圖7所示。與F-CK組相比，F(xiàn)-3X、F-6X組小鼠的結(jié)腸IL-10含量顯著增加（P＜0.01、P＜0.05）；Ang1質(zhì)量濃度從（33.37f11.43）pg/mL分別增加至（71.14f22.91）、（57.03f20.72）pg/mL；TNF-α含量明顯下降，F(xiàn)-CK組與F-3X組差異顯著（P＜0.05）。由此可知，接受FMT后的小鼠腸道輕度炎癥得到緩解，其中F-3X組的改善效果更明顯。

圖7 小鼠結(jié)腸炎癥因子水平Fig. 7 Inflammatory factor contents in colon tissue of mice

3 結(jié) 論

本研究探討了XOS對慢性腹瀉的干預(yù)作用。攝入XOS后，腹瀉患者的腹瀉癥狀評分下降，脂代謝水平改善，糞便中丁酸含量增加，腸道菌群多樣性增加，有益菌的相對豐度增加，致病菌相對豐度減小。隨后將XOS干預(yù)后患者的糞菌液灌胃小鼠，發(fā)現(xiàn)小鼠的腸道屏障穩(wěn)態(tài)趨于穩(wěn)定，與F-CK組相比，F(xiàn)-3X、F-6X組小鼠結(jié)腸中IL-10和Ang1水平明顯增加，TNF-α含量明顯下降，輕微炎癥癥狀被緩解，腸道通透性相關(guān)指標D-LA質(zhì)量濃度顯著降低（P＜0.05、P＜0.01），緊密連接蛋白ZO-1的表達水平明顯上升，Occludin含量有增加趨勢（P＞0.05）。上述結(jié)果表明，XOS可以維持人體腸道屏障趨于穩(wěn)定狀態(tài)，下調(diào)結(jié)腸炎癥水平，患者每天攝入3 g XOS對慢性腹瀉的改善效果相對更好。本研究為慢性腹瀉癥狀治療和預(yù)防打開新的思路，然而對具體的代謝產(chǎn)物和通路的確認還需運用代謝組學(xué)進行深入研究。