氣相色譜法測定小麥中辛硫磷的方法研究

李 鵬，李 峰，馬宏偉

（山西省糧油科學研究所有限公司，山西太原 030024）

儲糧害蟲的防治，目前主要以化學防治為主。國內(nèi)常用的磷化鋁、馬拉硫磷、敵敵畏等已出現(xiàn)一定抗性問題[1]。辛硫磷（Phoxim） 又名腈肟磷、肟磷，屬低毒、廣譜、高效的有機磷類殺蟲劑，主要用于花生、小麥、水稻、棉花、玉米等作物的害蟲防治[2]。其對人畜低毒，對米象、玉米象、鋸谷盜、長角谷盜、書虱，麥蛾及鱗翅目幼蟲都有很好的防治效果，對印度谷螟、粉斑螟等幼蟲的毒力比甲基嘧啶磷還高。

目前，國內(nèi)普遍以其代替毒死蜱等高毒有機磷農(nóng)藥，由此也帶來辛硫磷殘留問題[3]。我國食品中農(nóng)藥最大殘留限量標準規(guī)定：稻谷、麥類、旱糧類（玉米、鮮食玉米除外） 和雜糧類均為0.05 mg/kg，玉米、鮮食玉米為0.1 mg/kg[4]。

辛硫磷殘留測定方法主要有氣相色譜法和高效液相色譜法兩大類。其中，液相色譜法由于靈敏度低等原因，導致測定結(jié)果并不理想。而谷物測定的國家標準推薦方法為填充柱氣相色譜法，由于谷物基質(zhì)干擾嚴重、填充柱靈敏度不高等原因，導致測定難度較大。該方法采用毛細管柱氣相色譜法對小麥中辛硫磷進行測定，結(jié)果理想，可滿足檢測要求，可以進行推廣使用[5]。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 儀器與設備

GC-2030 型氣相色譜儀、配置火焰光度檢測器，日本島津公司產(chǎn)品；TP-213 型電子天平（感量0.001 g），北京賽多利斯儀器有限公司產(chǎn)品；3100型粉碎磨（細度可達0.5 mm），瑞典波通儀器公司提供；K-D 濃縮器B 型，用來濃縮低沸點成分。

1.1.2 主要試劑

辛硫磷標準物質(zhì)：編號為GBW（E） 082463，質(zhì)量濃度為100 μg/mL，純度≥99%，規(guī)格為1.2 mL，溶劑為甲醇，儲存條件為-18 ℃，置于陰涼處儲存，壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司提供；丙酮（色譜純），賽默飛世爾科技（中國） 有限公司提供；石油醚（分析純），沸程為30~60 ℃，天津市風船化學試劑科技有限公司提供；無水硫酸鈉（分析純），450 ℃下干燥4 h 后使用，天津市風船化學試劑科技有限公司提供。

1.1.3 色譜條件

KB-pesticides A 型毛細管色譜柱，10 m×0.53 mm（內(nèi)徑） ×1 μm（膜厚）；進樣口溫度190 ℃；柱溫80 ℃（保持1 min） 15 ℃/min→220 ℃（保持5 min）；檢測器溫度250 ℃；載氣：氮氣，純度≥99.99%，流速80 mL/min；空氣、氫氣流速60 mL/min，進樣量1 μL，采用不分流方式進樣。

1.2 試驗方法

1.2.1 樣品前處理

取小麥試樣，經(jīng)粉碎磨粉碎后，過20 目篩，制備小麥試樣。稱取試樣20 g，精確至0.001 g，置于250 mL 具塞錐形瓶中，加入50 mL 石油醚，避光浸提5 h，抽濾，殘渣用100 mL 石油醚分3 次洗滌，合并濾液過無水硫酸鈉，于K-D 濃縮器上濃縮，定容至2.5 mL，待氣相色譜分析。

1.2.2 校準曲線繪制

1 μg/mL 標準儲備液的配制：準確吸取100 μL辛硫磷標準物質(zhì)，用丙酮稀釋至10 mL，待用。

分別吸取標準儲備液50，100，200，300，400，500 μL，丙酮定容至1 mL，得到質(zhì)量濃度分別為0.05，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50 μg/mL 的辛硫磷系列工作液，在1.1.2 色譜條件下依次進入氣相色譜儀進行測定。以辛硫磷質(zhì)量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制校準曲線。

1.2.3 方法檢出限測定

由于小麥基質(zhì)中空白響應值過低，因此通過小麥基質(zhì)加標使其辛硫磷含量為0.006 mg/kg，平行測定20 次得到標準偏差（S），3 倍標準變差除以校準曲線斜率b，得到該方法的檢出限。對于已制定最高殘留限量的辛硫磷，方法檢出限加上限量處標準偏差的3 倍不應超過該限量值。

1.2.4 精密度及回收率測定

通過在小麥基質(zhì)中添加不同量的辛硫磷標準溶液，使辛硫磷質(zhì)量濃度分別為0.010，0.025，0.050 mg/kg 的3 個樣品，每個樣品進行6 平行測定，計算得到不同質(zhì)量濃度下精密度和加標回收率。

2 結(jié)果與分析

2.1 校準曲線

按照1.1.2 儀器條件，分別進1 μL 下列質(zhì)量濃度的標準品于氣相色譜中測定。以標準溶液峰面積為Y軸，以標準溶液質(zhì)量濃度為X軸繪制標準曲線，外標法峰面積定量，得到一次線性回歸方程為：Y=561 278X+970.24，相關(guān)系數(shù)R2=0.998 8。

辛硫磷校準曲線見圖1，0.5 μg/mL 辛硫磷標準色譜圖見圖2。

圖1 辛硫磷校準曲線

圖2 辛硫磷氣相色譜圖

由圖2 可知，相對保留時間為8.388 min。

2.2 方法檢出限

通過小麥基質(zhì)加標使其辛硫磷含量為0.006 mg/kg，通過平行測定20 次得到標準偏差（S），通過3 倍標準變差除以校準曲線斜率（b），得到該方法的檢出限（c） 為0.002 mg/kg。

對于已制定最高殘留限量的辛硫磷，方法檢出限加上限量處標準偏差的3 倍不應超過該限量值，該結(jié)果均符合要求。

辛硫磷方法檢出限測定見表1。

表1 辛硫磷方法檢出限測定

2.3 精密度及回收率

通過在小麥基質(zhì)中添加不同量的辛硫磷標準溶液，使辛硫磷含量為0.010，0.025，0.050 mg/kg 的3 個質(zhì)量濃度樣品，每個樣品進行6 平行測定，計算得到不同質(zhì)量濃度下精密度和加標回收率。

辛硫磷精密度與回收率見表2。

表2 辛硫磷精密度與回收率

根據(jù)國標GB/T 27404—2008 附錄F 的要求，當被測組分含量≤0.1 mg/kg 時，實驗室內(nèi)變異系數(shù)≤15%。由表2 可知，當辛硫磷含量分別為0.010，0.025，0.050 mg/kg 3 個質(zhì)量濃度時，精密度分別為4.54%，6.88%，5.00%，均滿足該要求。

當加標含量≤0.1 mg/kg 時，回收率范圍應在60%~120%，試驗當加標含量分別為0.010， 0.025，0.050 mg/kg 時，加標回收率分別為102.5%，94.0%，86.4%，均滿足該要求。

3 結(jié)論

采用氣相色譜法配合毛細管柱測定小麥中的辛硫磷含量，樣品粉碎、過篩后經(jīng)石油醚避光浸提后，殘渣用石油醚洗滌后合并過無水硫酸鈉，使用K-D濃縮器濃縮后定容，外標法定量。該方法在0.05~0.50 μg/mL 范圍內(nèi)線性良好，線性回歸方程為Y=561 278X+970.24，相關(guān)系數(shù)R2=0.998 8。辛硫磷在小麥中的方法檢測低限為0.002 mg/kg。加標回收試驗結(jié)果表明，辛硫磷在小麥中平均回收率為86.4%~102.5%，精密度為4.54%~6.88%，該方法在校準曲線范圍、方法檢出限、精密度和加標回收率等方面均符合國標要求。

該方法前處理較為簡單、重復性好、成本較低，技術(shù)指標滿足農(nóng)藥殘留檢測的相關(guān)要求，比目前國標采用填充柱氣相色譜方法測定辛硫磷在谷物中殘留量的方法檢出限更低、穩(wěn)定性更好，具有廣泛的適用性，該方法可為測定其他谷物中辛硫磷含量提供參考。