血清CTRP3水平對(duì)2型糖尿病周圍神經(jīng)病變的作用*

徐園園 魏迎鳳 盧學(xué)超 任亞麗 解其華 王春華 紀(jì)易斐

2型糖尿病周圍神經(jīng)病變(Diabetic Peripheral Neuropathy，DPN)是糖尿病常見(jiàn)的神經(jīng)病變，其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。隨著病情的進(jìn)展，DPN患者的生活質(zhì)量較差，發(fā)生潰瘍和截肢率高[1]?，F(xiàn)有的治療方法雖有一定的效果，但很多患者的病情仍持續(xù)進(jìn)展。目前認(rèn)為導(dǎo)致DPN的致病因素包括代謝功能障礙、炎癥和氧化應(yīng)激等[2]。補(bǔ)體C1q/腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白3(C1q/Tumour Necrosis Factor-Related Protein-3， CTRP3)是新型脂肪因子，研究表明CTRP3有增加胰島素敏感性、抗炎、抗氧化等作用[3]。已有研究提示CTRP3與糖尿病及糖尿病腎病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變相關(guān)[4-6]，但CTRP3與DPN的關(guān)系未見(jiàn)研究報(bào)道。本文主要檢測(cè)分析DPN患者血清CTRP3水平變化及對(duì)DPN的影響。

1 資料與方法

1.1 對(duì)象和分組

選取2018-01-2020-06于南通市第三人民醫(yī)院住院的2型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus，T2DM)患者148例，其中男77例，女71例，年齡35歲-77歲，平均(61.28±10.22)歲。根據(jù)是否合并DPN分為T2DM組(n=82例)和DPN組(n=66例)。T2DM 和DPN的診斷均依據(jù)2017年中國(guó)2型糖尿病防治指南[7]。T2DM診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)典型糖尿病癥狀，隨機(jī)血糖≥11.1mmol/L；(2)禁食8小時(shí)的空腹血糖≥7.0mmol/L，需改日復(fù)查；(3)葡萄糖負(fù)荷后2小時(shí)血糖≥11.1mmol/L，需改日復(fù)查。3項(xiàng)中符合1項(xiàng)。DPN診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)明確的糖尿病病史；(2)診斷糖尿病時(shí)或之后出現(xiàn)的神經(jīng)病變；(3)臨床癥狀和體征與DPN的表現(xiàn)相符；(4)有臨床癥狀 ( 疼痛、麻木、感覺(jué)異常等 ) 者，5 項(xiàng)檢查 ( 踝反射、針刺痛覺(jué)、震動(dòng)覺(jué)、壓力覺(jué)、溫度覺(jué) ) 中任 1 項(xiàng)異常；無(wú)臨床癥狀者，5 項(xiàng)檢查中任 2 項(xiàng)異常。排除標(biāo)準(zhǔn)有：與周圍神經(jīng)病變有關(guān)的全身疾病(營(yíng)養(yǎng)不良、酒精性神經(jīng)病、腎功能衰竭)；腦梗死；頸腰椎疾病；神經(jīng)肌肉疾病如肌病、慢性多發(fā)性神經(jīng)病或格林-巴利綜合征；神經(jīng)毒素、金屬、藥物、外傷等影響神經(jīng)傳導(dǎo)的因素。選擇同期在該院體檢健康者作為對(duì)照組(n=30)，男14例，女16例，年齡35歲-80歲，平均(59.53±10.92)歲。三組基線資料如性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)(BMI)的分布差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，表1)。本研究經(jīng)該院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，研究對(duì)象均知情同意。

表1 三組基線資料比較

1.2 臨床和實(shí)驗(yàn)室檢查

1.2.1 臨床資料: 患者入院后詳細(xì)記錄其性別、年齡、體重、身高、高血壓病病史、冠心病病史及T2DM病程，并計(jì)算BMI。

1.2.2 血清CTRP3和血糖、血脂指標(biāo)檢查：所有患者入院當(dāng)日空腹12h，于次日清晨抽取肘前靜脈血，分離血清。采用ELISA測(cè)定CTRP3水平，試劑盒購(gòu)自武漢默沙克生物科技有限公司(批號(hào)：M20200713-241)，酶標(biāo)儀為上?？迫AST360酶標(biāo)儀。使用AU2700全自動(dòng)生化分析儀及配套試劑按常規(guī)方法測(cè)定血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C) 、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)、糖化血紅蛋白(HbA1c)水平。根據(jù)公式計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)=FBG×FINS/22.5。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 三組臨床資料和實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

三組間高血壓病史、冠心病病史占比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，T2DM病程差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，DPN組明顯長(zhǎng)于T2DM組(t=7.001，P<0.01)。CTRP3水平三組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；DPN組及T2DM組低于對(duì)照組(t=-11.152，-4.268，P<0.01)，DPN組比T2DM組更低(t=-9.374，P<0.01)。血糖指標(biāo)三組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；DPN組及T2DM組FBG、HbA1c、HOMA-IR均較對(duì)照組升高(tFBG=14.685、16.474，tHbA1c=12.503、12.460，tHOMA-IR=11.088、7.561，P<0.01)，DPN組HbA1c、HOMA-IR高于T2DM組(tHbA1c=3.105，tHOMA-IR=3.945，P<0.01)。血脂指標(biāo)中，除三組TC比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>005)外，其他指標(biāo)三組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05或P<0.01)。DPN組及T2DM組TG、LDL-C均較對(duì)照組升高(tTG=2.431、2.817，tLDL-C=4.471、3.342，P<0.05)，HDL-C均較對(duì)照組降低(t=-4.694、-3.342，P<0.01)。見(jiàn)表2。

表2 三組患者臨床和CTRP3、血糖血脂指標(biāo)比較

2.2 DPN影響因素的單因素及多因素Logistic回歸分析

在T2DM組和DPN組患者中，以DPN為因變量，先將T2DM病程、高血壓病史、冠心病病史、CTRP3、FBG、HbA1c、HOMA-IR、TG、TC、HDL-C、LDL-C分別與因變量行單因素Logistic回歸，P>0.10為剔除標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果顯示T2DM病程、HbA1c、HOMA-IR、CTRP3均P≤0.10，余指標(biāo)均P>0.10。見(jiàn)表3。再將T2DM病程、HbA1c 、HOMA-IR 、CTRP3進(jìn)入多因素logistic回歸，結(jié)果表明T2DM病程、CTRP3是DPN的影響因素(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表3 DPN單因素Logistic回歸分析

表4 DPN多因素Logistic回歸分析

2.3 血清CTRP3水平對(duì)DPN的臨床診斷價(jià)值

將T2DM組和DPN組資料作為研究樣本，以血清CTRP3水平建立ROC分析模型。ROC曲線結(jié)果顯示，血清CTRP3水平對(duì)DPN有較好的臨床診斷價(jià)值：AUC為0.855，95%CI為0.793-0.916，P=0.000，最佳截?cái)嘀?88.02ng/ml，敏感度0.756，特異度0.803，約登指數(shù)0.559。見(jiàn)圖1。

圖1 血清CTRP3水平診斷DPN的ROC曲線

3 討 論

DPN是DM患者常見(jiàn)的并發(fā)癥之一，起病隱匿，臨床癥狀常不典型，患者常常錯(cuò)過(guò)最佳治療時(shí)機(jī)[8]。且目前DPN缺乏針對(duì)性的治療，即使采取綜合的治療措施，很多患者仍以一定的速度進(jìn)展，故早期識(shí)別延緩DPN進(jìn)程的相關(guān)因素顯得十分重要[9]。

CTRP3是一種新近發(fā)現(xiàn)的脂肪因子，是脂聯(lián)素的一個(gè)旁系。CTRP3過(guò)表達(dá)對(duì)糖代謝有積極作用，可抑制TG在肝臟的合成，從而降低肝臟脂質(zhì)含量，改善高脂飲食誘導(dǎo)的肝臟胰島素抵抗[10]，還可減少糖異生和葡萄糖輸出，以及通過(guò)抑制脂肪細(xì)胞炎癥，增加胰島素敏感性[11]。此外，CTRP3還能增加磷酸肌醇3激酶和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4的磷酸化，進(jìn)一步促進(jìn)胰島素敏感性[3]。CTRP3對(duì)DM部分并發(fā)癥亦有積極意義，如對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變，CTRP3能減少高糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞系A(chǔ)RPE-19細(xì)胞凋亡，降低參與腺苷酸激活蛋白激酶通路的人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞中高糖和高脂誘導(dǎo)的血管-細(xì)胞黏附分子-1的表達(dá)[6]； CTRP3還可能是糖尿病腎病的治療靶點(diǎn)，因其可能通過(guò)抑制Janus激酶/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子與轉(zhuǎn)錄激活子3途徑抑制高糖誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖和細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生[4]。另外，Wang等[12]研究表明，CTRP3可以通過(guò)激活蛋白激酶B-哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白途徑減少炎癥因子的產(chǎn)生和高糖誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損失，可能在DM相關(guān)的內(nèi)皮功能障礙中發(fā)揮作用。已有研究[13]報(bào)道T2DM時(shí)，CTRP3水平降低，本研究結(jié)果進(jìn)一步驗(yàn)證了這一結(jié)果。但CTRP3與DPN的關(guān)系研究尚未見(jiàn)報(bào)道。有關(guān)文獻(xiàn)多為顯示CTRP3對(duì)病理性神經(jīng)損害的積極成果，如Rehorst等[14]研究脊髓性肌萎縮癥小鼠模型發(fā)現(xiàn)，CTRP3可通過(guò)哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白途徑增強(qiáng)脊髓性肌萎縮癥運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的軸突生長(zhǎng)和蛋白質(zhì)合成速率；Yang等[15]研究發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)CTRP3可抑制七氟醚麻醉引起的老齡大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡，抑制神經(jīng)元炎性反應(yīng)，減輕腦組織損傷，改善認(rèn)知功能障礙，而少有CTRP3在DPN發(fā)生中作用及機(jī)制的探索。

本文選擇觀察DPN患者血清CTRP3水平變化，分析CTRP3影響DPN的嚴(yán)重性及其對(duì)DPN的診斷的作用。我們的研究結(jié)果表明DPN患者血清CTRP3水平顯著降低，且是DPN的重要影響因素和較好的預(yù)測(cè)診斷指標(biāo)。提示CTRP3可能與DPN的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)，還可能成為臨床治療的新靶點(diǎn)。CTRP3影響DPN的可能機(jī)制為CTRP3對(duì)糖脂代謝、炎癥、氧化應(yīng)激反應(yīng)及微血管內(nèi)皮功能的調(diào)節(jié)作用。研究表明[16]，CTRP3水平與2型糖尿病的發(fā)生呈負(fù)相關(guān)，是影響胰島素抵抗的獨(dú)立因素。CTRP3下降引起糖異生增加，胰島素抵抗，肝臟和脂肪細(xì)胞的脂質(zhì)沉積增加，從而引起高血糖、高血脂。高血糖會(huì)改變多元醇途徑，使葡萄糖轉(zhuǎn)化為山梨糖醇和果糖，二者累積影響細(xì)胞代謝，導(dǎo)致神經(jīng)纖維結(jié)構(gòu)破壞，影響周圍神經(jīng)傳導(dǎo)速度，另外高血糖、高血脂也可通過(guò)多種途徑引起氧自由基過(guò)量累積，導(dǎo)致線粒體功能障礙，損傷神經(jīng)[17]。Ma等[18]研究發(fā)現(xiàn)敲除糖尿病大鼠心肌細(xì)胞中CTRP3可導(dǎo)致大鼠體外氧化損傷、炎癥。而過(guò)表達(dá)CTRP3可降低糖尿病大鼠的氧化應(yīng)激和炎癥。DPN患者神經(jīng)細(xì)胞存活所依賴的血管存在血管壁基底膜增厚、血管內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙，由此引起神經(jīng)細(xì)胞缺血和缺氧，導(dǎo)致神經(jīng)傳導(dǎo)異常[19]。Chen等[20]研究發(fā)現(xiàn)CTRP3可通過(guò)磷脂酰肌醇三激酶/蛋白激酶B/內(nèi)皮性一氧化氮合酶信號(hào)通路血管改善內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙，改善血管硬化；Yan等[21]發(fā)現(xiàn)CTRP3可觸發(fā)腺苷酸激活蛋白激酶-α，增加內(nèi)皮一氧化氮合成酶水平，增加了一氧化氮的產(chǎn)生，增強(qiáng)了微血管內(nèi)皮依賴性舒張，改善內(nèi)皮細(xì)胞功能。反之CTRP3水平下降，可導(dǎo)致DPN患者微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖及遷移能力下降，管腔變細(xì)，從而影響了神經(jīng)細(xì)胞的血供。說(shuō)明了CTRP3降低可引起糖脂代謝紊亂、炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激增加，內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙，促進(jìn)DPN的發(fā)生和發(fā)展。

綜上所述，DPN患者CTRP3水平降低，是DPN發(fā)生的影響因素和DPN的預(yù)測(cè)診斷指標(biāo)，也有可能是DPN治療的靶點(diǎn)。

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