基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和指紋圖譜的一枝蒿抗乙肝病毒質(zhì)量標(biāo)志物預(yù)測(cè)分析

毛 艷，劉榮昌，丁 曼，賀金華*

1新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所，烏魯木齊 830004；2新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，烏魯木齊 830011

一枝蒿(ArtemisiarupestrisL.)為菊科蒿屬植物，是新疆維吾爾族和哈薩克族民間傳統(tǒng)常用藥材，主要分布于新疆天山山脈、阿勒泰山脈等地草原、山坡或林下?，F(xiàn)收載于衛(wèi)生部《藥品標(biāo)準(zhǔn)》維吾爾藥分冊(cè)、《維吾爾藥志》(上冊(cè))和《中華本草》(維吾爾藥卷)。一枝蒿具有清熱解毒、祛風(fēng)涼血、抗HBV、抗病毒、保肝降酶、調(diào)節(jié)免疫及健胃促消化等作用，臨床主要用于病毒性感冒和肝炎等療效顯著，在民間特別是維吾爾醫(yī)院中廣為應(yīng)用[1]，據(jù)新疆維吾爾醫(yī)院處方調(diào)查顯示，一枝蒿用量之大堪稱維藥成方制劑之最，且藥物制劑品種多樣。新冠肺炎疫情期間，新疆衛(wèi)生健康委組織專家結(jié)合新疆地域特色，制定并印發(fā)了“新疆版”中醫(yī)藥防治方案，復(fù)方一枝蒿顆粒以首選藥入選其中，用于抑制呼吸系統(tǒng)炎癥和抗病毒。

本文建立了一枝蒿藥材的指紋圖譜，并對(duì)色譜峰進(jìn)行對(duì)照品指認(rèn)，同時(shí)運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對(duì)一枝蒿中多種成分與乙型病毒肝炎(HBV)的相互作用關(guān)系進(jìn)行研究，旨在為全面控制疆一枝蒿的質(zhì)量提供依據(jù)，并從整體的角度探討一枝蒿治療HBV可能的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制，為新疆一枝蒿的質(zhì)量標(biāo)志物的研究奠定基礎(chǔ)，并為后期進(jìn)一步開(kāi)展細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)提供了理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器

Agilent 1260 series快速高效液相色譜儀(美國(guó)Waldbronn Agilent Technologies公司)；TDZ5-WS多管架自動(dòng)平衡離心機(jī)(上海盧湘儀離心機(jī)儀器有限公司)；BP211D電子天平(德國(guó)Sartorius公司)；ASBDT型超聲波清洗器(頻率40 kHz，功率240W，上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司)。

1.2 材料

對(duì)照品一枝蒿酮酸(批號(hào)20170710，含量測(cè)定按99.9%計(jì))，購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院新疆理化技術(shù)研究所；綠原酸(批號(hào)：110753-201415，含量：96.6%)、蘆丁(批號(hào)：100080-201409，含量：92.6%)、芹菜素(批號(hào)：111901-201102，含量：99.6%)、蒙花苷(批號(hào)：1115283-201911，含量：98.5%)、洋艾素(批號(hào)：111879-2010011，含量：99.4%)均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；蔓荊子黃素(批號(hào)：Must-15092905，含量：99.09%)、木犀草素(批號(hào)：Must-16011015，含量：98.8%)購(gòu)自成都曼斯特生物科技有限公司；甲醇為色譜純(Fisher公司)；水為純化水。

18批一枝蒿藥材由新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所何江研究員鑒定為菊科植物新疆一枝蒿(ArtemisiarupestrisL.，簡(jiǎn)稱AR)的地上部分或全草。18批一枝蒿藥材具體產(chǎn)地信息見(jiàn)表1。

表1 一枝蒿藥材信息

1.3 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測(cè)一枝蒿Q-Marker

1.3.1 一枝蒿“活性成分-HBV靶點(diǎn)”的構(gòu)建與分析

以“新疆一枝蒿”、“ArtemisiarupestrisL.”為關(guān)鍵詞在中國(guó)知網(wǎng)(https://www.cnki.net/)、萬(wàn)方(https://www.wanfangdata.com.cn/index.html)、維普(http://www.cqvip.com/)、PubMed(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，根據(jù)文獻(xiàn)收集藥效化合物，建立成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù)，并將化合物在TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行口服生物利用度(oral bioavailability，OB)和類藥性(drug likeness，DL)篩選，篩選條件設(shè)置為OB≥30%，DL≥0.18。在Disgenet、GeneCards、HERB數(shù)據(jù)庫(kù)以“乙型肝炎病毒”或“Hepatitis B Virus(HBV)”進(jìn)行搜索，收集疾病靶點(diǎn)。

1.3.2 “一枝蒿-潛在靶標(biāo)-乙肝病毒”蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)(PPI)的構(gòu)建

在GeneCards、HERB、DisGenet數(shù)據(jù)庫(kù)以“乙型肝炎病毒”“Hepatitis B”進(jìn)行靶點(diǎn)搜索，獲得化合物和疾病的交集靶點(diǎn)，上傳交集靶點(diǎn)至STRING數(shù)據(jù)庫(kù)，生物屬性設(shè)置為“Homo sapiens”置信度設(shè)置為High confidence(0.700)并刪除游離的靶點(diǎn)，其余設(shè)置保持系統(tǒng)默認(rèn)，并將得到的結(jié)果以TSV格式保存。最后用安裝CytoNCA插件的Cytoscape 3.8.0軟件進(jìn)行拓?fù)渚W(wǎng)絡(luò)可視化分析，其中核心靶點(diǎn)篩選根據(jù)度中心性(degree centrality)和介數(shù)中心性(betweenness centrality)分別大于兩倍中位數(shù)、接近中心性(closeness centrality)大于中位數(shù)確定。

1.3.3 GO功能富集分析與通路分析

基因本體(gene ontology，GO)功能富集分析主要用于描述基因靶點(diǎn)的功能，包括分子功能(molecular function，MF)、生物過(guò)程(biological process，BP)、和細(xì)胞組分(cellular component，CC)三個(gè)部分。京都基因與基因組百科全書(shū)(kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG)富集分析可以得到潛在靶點(diǎn)所富集的信號(hào)通路。通過(guò)安裝有org.Hs.eg.db、ggplot2、enrichplot數(shù)據(jù)包的Rstudio軟件進(jìn)行GO功能富集分析、clusterProfiler數(shù)據(jù)包進(jìn)行KEGG通路富集分析，以P≤0.05的條件收集結(jié)果，并利用Cytoscape進(jìn)行可視化分析。

1.4 一枝蒿指紋圖譜研究

1.4.1 供試品溶液的制備

取本品粉末(過(guò)3號(hào)篩)約2.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別加入50%甲醇水25 mL，超聲處理45 min(功率250 W，頻率40 kHz)，搖勻，濾過(guò)(0.45 μm)，取續(xù)濾液，即得。

1.4.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取綠原酸、蘆丁、蒙花苷、木犀草素、一枝蒿酮酸、芹菜素、蔓荊子黃素和洋艾素對(duì)照品適量，分別加甲醇溶解，制成每1 mL溶液含39.9、70.2、49.2、27.8、70.0、47.1、49.3、53.5 μg的混合對(duì)照品溶液。

1.4.3 指紋圖譜色譜條件

色譜柱：Agilent TC C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動(dòng)相A為甲醇、B為0.1%磷酸水溶液，梯度洗脫(0～10 min，5% A→25% A；10～25min，25% A→38% A；25～40 min，38% A；40～100 min，38% A→85% A；100～105 min，85% A→95% A；105～110 min，95% A→5% A；110～120 min，5% A)；流速：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：250 nm；進(jìn)樣量：10 μL。

2 結(jié)果

2.1 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測(cè)一枝蒿Q-Marker

2.1.1 一枝蒿“活性成分-HBV靶點(diǎn)”的構(gòu)建與分析

去除缺少靶點(diǎn)信息的化合物并結(jié)合文獻(xiàn)挖掘后，共篩選出15個(gè)具有生物活性的化合物，結(jié)果見(jiàn)表2，“活性成分-HBV靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖見(jiàn)圖1，共407個(gè)節(jié)點(diǎn)，745條邊，體現(xiàn)了新疆一枝蒿治療乙肝的多成分、多靶點(diǎn)協(xié)同作用的特點(diǎn)。

表2 具有活性化合物相關(guān)信息

圖1 活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)關(guān)系

2.1.2 PPI網(wǎng)絡(luò)分析

PPI可視化網(wǎng)絡(luò)圖和核心靶點(diǎn)分析結(jié)果分別如圖2、表3所示，其中節(jié)點(diǎn)的形狀越大、顏色越深，表明該節(jié)點(diǎn)可能和HBV的關(guān)系越緊密。

表3 PPI拓?fù)浞治霭悬c(diǎn)信息

圖2 新疆一枝蒿和乙肝蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)

2.1.3 GO功能富集分析與通路分析

經(jīng)過(guò)GO富集分析(見(jiàn)圖3)共得到1 725條富集結(jié)果，其中生物過(guò)程1 592個(gè)，主要涉及對(duì)細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激的作用、細(xì)胞對(duì)化學(xué)應(yīng)激的反應(yīng)、對(duì)藥物的反應(yīng)；細(xì)胞組分25個(gè)，主要涉及膜筏、蛋白激酶復(fù)合物、轉(zhuǎn)移酶復(fù)合物，轉(zhuǎn)移含磷基團(tuán)等過(guò)程；分子功能108個(gè)，主要涉及類固醇結(jié)合、核受體活性、配體激活轉(zhuǎn)錄因子活性等。

圖3 GO生物富集分析柱狀圖

KEGG富集TOP 20作用通路(P<0.05)如圖4所示，結(jié)果顯示：關(guān)鍵通路7條，其中前20條主要信號(hào)通路包含PI3K-AKT信號(hào)通路、Rap1信號(hào)通路、Ras信號(hào)通路等。

圖4 KEGG富集分析氣泡圖

2.1.4 活性成分-靶點(diǎn)-通路分析

經(jīng)過(guò)KEGG通路分析結(jié)果，將通路中的靶點(diǎn)映射到化合物中，并利用Cytoscape構(gòu)建“活性成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)圖(見(jiàn)圖5)。結(jié)果顯示：該網(wǎng)絡(luò)由76節(jié)點(diǎn)和260個(gè)邊組成，包括11個(gè)活性化合物、44個(gè)靶點(diǎn)和20個(gè)信號(hào)通路。其中表明，一枝蒿可以通過(guò)多種化合物、多個(gè)靶點(diǎn)作用于多種途徑，從而達(dá)到治療乙型肝炎病毒的效果。

圖5 成分-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖

2.2 一枝蒿指紋圖譜研究

2.2.1 精密度

取同一供試品溶液(S3)，按“1.4.3”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖。結(jié)果，各共有峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD <0.10%(n=6)，相對(duì)峰面積的RSD <3.44%(n=6)，表明儀器精密度良好。

2.2.2 重復(fù)性

取同一供試品(S3)6份，按“1.4.1”項(xiàng)下方法平行制備供試品溶液，再按“1.4.3”項(xiàng)下色譜條件下進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖。結(jié)果，各共有峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD<0.10%(n=6)，相對(duì)峰面積的RSD<4.93%(n=6)。表明重復(fù)性良好，符合指紋圖譜研究技術(shù)的要求(RSD≤5%)。

2.2.3 穩(wěn)定性考察

取同一供試品溶液(S3)，按“1.4.3”項(xiàng)下色譜條件，分別在0、2、4、6、8、10、24、48 h進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖。結(jié)果，在48 h內(nèi)各共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD<0.47%(n=6)，相對(duì)峰面積的RSD<4.58%(n=6)。表明供試品溶液室溫放置在48 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.4 指紋圖譜的建立

按“1.4.1”項(xiàng)下方法制成18批一枝蒿藥材供試品溶液，按“1.4.3”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖，確定共有峰18個(gè)，將色譜圖導(dǎo)入《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)》2012A版中，以S3為參照?qǐng)D譜，采用中位數(shù)法，設(shè)定時(shí)間窗寬度為0.2，生成對(duì)照?qǐng)D譜(R)，多點(diǎn)校正法建立指紋圖譜[10](見(jiàn)圖6)。

圖6 一枝蒿藥材的指紋圖譜

2.2.5 指紋圖譜共有峰的標(biāo)定及相似度評(píng)價(jià)

采用對(duì)照品比對(duì)，指認(rèn)其中8個(gè)共有峰，分別為綠原酸(1號(hào)峰)、蘆丁(5號(hào)峰)、蒙花苷(11號(hào)峰)、木犀草素(12號(hào)峰)、一枝蒿酮酸(14號(hào)峰)、芹菜素(15號(hào)峰)、蔓荊子黃素(16號(hào)峰)、洋艾素(18號(hào)峰)。一枝蒿藥材及混合對(duì)照品溶液的HPLC圖見(jiàn)圖7，以對(duì)照指紋圖譜為參照，進(jìn)行共有峰相似度分析，結(jié)果見(jiàn)表4，S2、S4、S14三批藥材相似度在0.868～0.883，相似度較低。

圖7 混合對(duì)照色譜圖(A)及樣品色譜圖(B)

表4 18批一枝蒿的相似度評(píng)價(jià)結(jié)果

2.2.6 聚類分析(HCA)

以18批一枝蒿藥材的18個(gè)共有峰面積導(dǎo)入SPSS 23.0軟件對(duì)樣品進(jìn)行聚類分析，聚類方式選擇離差平方和、樣品的測(cè)量區(qū)間選擇歐式距離的平方[11]，結(jié)果見(jiàn)圖8。由圖可知，當(dāng)歐式距離的平方大于10時(shí)，一枝蒿藥材S1～S3、S8、S10～S12、S14、S17、S18聚為1類，S4～S7、S9、S13、S15、S16聚為2類。系統(tǒng)聚類分析大致可將不同產(chǎn)地區(qū)分開(kāi)，產(chǎn)地為新疆伊犁的一枝蒿藥材聚類趨勢(shì)較一致，但產(chǎn)地為新疆富蘊(yùn)和新疆阜康的樣品未按產(chǎn)地歸類，說(shuō)明產(chǎn)地只是一枝蒿藥材質(zhì)量的影響因素之一，不能完全用產(chǎn)地來(lái)評(píng)價(jià)藥材質(zhì)量。

圖8 一枝蒿藥材聚類分析

2.2.7 正交偏最小二乘法判別分析(OPLS-DA)

為更好地觀察組間差異，本實(shí)驗(yàn)將18批一枝蒿藥材共有峰面積作為變量，導(dǎo)入SIMCA-P 14.1軟件，采用有監(jiān)督模式的OPLS-DA進(jìn)一步分析不同產(chǎn)地一枝蒿的差異性。模型擬合參數(shù)結(jié)果為R2X=0.678，R2Y=0.714，模型預(yù)測(cè)參數(shù)Q2=0.599，均大于0.5，表明建立模型的預(yù)測(cè)能力和解釋能力均較好。OPLS-DA得分圖見(jiàn)圖9，可看出18批樣品可以按照產(chǎn)地聚為3類，即3個(gè)產(chǎn)地的一枝蒿明顯歸為3類，進(jìn)一步說(shuō)明不同產(chǎn)地的一枝蒿在成分上存在著差異。為明確一枝蒿組間差異性成分，結(jié)合變量重要性投影(VIP)正態(tài)分布圖(見(jiàn)圖10)，篩選出貢獻(xiàn)較大的10個(gè)變量(VIP>1)，VIP由大到小依次為：峰3>峰16(蔓荊子黃素)>峰13>峰14(一枝蒿酮酸)>峰8>峰9>峰5(蘆丁)>峰18(洋艾素)>峰4>峰15(芹菜素)。結(jié)果表明這10個(gè)成分在區(qū)分不同產(chǎn)地、批次的一枝蒿藥材時(shí)可以起到重要作用，是引起3個(gè)產(chǎn)地差異的主要標(biāo)志性成分。

圖9 OPLS-DA得分圖

圖10 差異性標(biāo)志物VIP圖

3 討論與結(jié)論

本研究以劉昌孝院士提出的質(zhì)量標(biāo)志物(Q-Marker)為基礎(chǔ)，通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和指紋圖譜對(duì)一枝蒿的質(zhì)量標(biāo)志物進(jìn)行預(yù)測(cè)分析。采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與指紋圖譜技術(shù)相結(jié)合評(píng)價(jià)中藥的質(zhì)量?jī)?yōu)劣，有效避免以某單一成分含量來(lái)評(píng)價(jià)中藥優(yōu)劣的弊端。研究中對(duì)18批不同產(chǎn)地、批次的一枝蒿樣品構(gòu)建了指紋圖譜，然后運(yùn)用相似度評(píng)價(jià)、HCA與OPLS-DA分析對(duì)其進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，得分情況說(shuō)明不同產(chǎn)地一枝蒿藥材的綜合質(zhì)量存在差異，有明顯的地域性區(qū)分，這進(jìn)一步說(shuō)明該方法可以簡(jiǎn)便快捷較可靠地應(yīng)用于一枝蒿的質(zhì)量控制。

通過(guò)對(duì)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)構(gòu)建的“活性成分-靶點(diǎn)”“成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)圖分析，可以得出一枝蒿治療乙肝病毒可以通過(guò)多成分調(diào)控PPI網(wǎng)絡(luò)中的AKT1、EGFR、SRC和ESR1等關(guān)鍵靶點(diǎn)，作用于PI3K-AKT信號(hào)通路、Rap1信號(hào)通路和Ras信號(hào)通路等關(guān)鍵信號(hào)通路發(fā)揮藥效作用。EGFR是一種受體酪氨酸激酶，可觸發(fā)對(duì)細(xì)胞過(guò)程至關(guān)重要的信號(hào)事件，包括Ras-絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)、PI3K-Akt和JAK-STAT通路。在用其配體表皮生長(zhǎng)因子(EGF)刺激后，EGFR會(huì)自動(dòng)磷酸化以激活這些信號(hào)通路[12]。迄今為止，據(jù)報(bào)道EGFR在不同類型病毒的進(jìn)入機(jī)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用，例如人類巨細(xì)胞病毒、丙型肝炎病毒(HCV)和呼吸道合胞病毒。Chen等[13]研究表明IFN-α可能通過(guò)調(diào)控PI3K/AKT通路抑制mTOR、p70S6K的磷酸化水平，從而緩解HBV引起的纖維化和肝功能損傷。Liu等[14]報(bào)道乙肝病毒X蛋白結(jié)合蛋白在肝癌細(xì)胞中高表達(dá)，可能通過(guò)激活PI3K/Akt信號(hào)通路促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖和遷移。

在篩選活性成分的過(guò)程中，degree值排名靠前有槲皮素(degree=187)、β-谷甾醇(degree=109)、木犀草素(degree=100)、豆甾醇(degree=86)、陸地棉苷(degree=53)、一枝蒿酮酸(degree=51)、金圣草黃素(degree=49)、金合歡素(degree=37)、山柰素(degree=28)、艾黃素(degree=20)連接度均大于10倍中位數(shù)，由于槲皮素、β-谷甾醇、胡蘿卜苷和豆甾醇這些成分廣泛存在于多種中藥材中，具有多種生物活性，因此不能作為辨別藥材質(zhì)量的質(zhì)量標(biāo)志性成分。

本文根據(jù)劉昌孝院士提出的質(zhì)量標(biāo)志物五大原則：可測(cè)性、特有性、有效性、中醫(yī)藥理論的關(guān)聯(lián)性、溯源性來(lái)篩選作為中藥安全性和有效性的標(biāo)志性物質(zhì)，而化學(xué)成分可測(cè)性是中藥Q-Marker確定要素之一。新疆一枝蒿中黃酮及倍半萜類化學(xué)成分含量較為豐富，本課題組前期開(kāi)展大量的一枝蒿成分含量測(cè)定研究，包括針對(duì)不同產(chǎn)地、不同的采收期一枝蒿藥材及其復(fù)方一枝蒿膠囊、芩蒿滴鼻劑中共有成分的定量檢測(cè)[15-17]，其中可測(cè)成分為一枝蒿酮酸、綠原酸、木犀草素、蔓荊子黃素、芹菜素、6-去甲氧基-4′-O-甲基茵陳色原酮和洋艾素?；诖?，一枝蒿中的黃酮類及倍半萜類成分符合Q-Marker“可測(cè)性”的內(nèi)涵，可作為候選Q-Marker。而網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)篩選得到的艾黃素、金圣草黃素、陸地棉苷、金合歡素在一枝蒿藥材中含量較低，基于成分可測(cè)性角度，不適合作為評(píng)價(jià)一枝蒿藥材質(zhì)量的標(biāo)志性成分。

為進(jìn)一步明確一枝蒿的質(zhì)量標(biāo)志物，本研究采用HPLC對(duì)18批不同產(chǎn)地、批次的一枝蒿進(jìn)行研究，確定18個(gè)共有峰，通過(guò)對(duì)照品比對(duì)指認(rèn)了8個(gè)共有峰，分別為綠原酸、蘆丁、蒙花苷、木犀草素、一枝蒿酮酸、芹菜素、蔓荊子黃素和洋艾素；相似度在0.868～0.984，表明不同產(chǎn)地、批次一枝蒿化學(xué)成分相似度較高，但存在一定差異；通過(guò)OPLS-DA分析發(fā)現(xiàn)共有峰蘆丁、蔓荊子黃素、一枝蒿酮酸、洋艾素和芹菜素是不同批次一枝蒿藥材的重要差異性成分。

綜上所述，根據(jù)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)果，木犀草素和一枝蒿酮酸度值排名靠前，可將這2種成分作為一枝蒿的Q-Marker；根據(jù)指紋圖譜共有峰及含量結(jié)果分析，綠原酸、一枝蒿酮酸、芹菜素、蒙花苷、蘆丁含量較高，但綠原酸和蘆丁在多數(shù)中藥材中廣泛存在，不可作為質(zhì)量標(biāo)志性成分。一枝蒿酮酸在一枝蒿藥材中含量較高，且有研究報(bào)道一枝蒿酮酸具有保肝[18]，抗病毒[19]，抗乙肝病毒等作用，可作為一枝蒿的Q-Marker。Chiang等[20]研究表明芹菜素對(duì)單純皰疹病毒、腺病毒、乙型肝炎病毒等具有良好的抗病毒活性，可以考慮作為一枝蒿潛在的Q-Marker。Li等[21]發(fā)現(xiàn)木犀草素對(duì)糞腸球菌有抑制作用，且其能干擾病毒的復(fù)制、抑制病毒引起的細(xì)胞凋亡，適合作為一枝蒿潛在的Q-Marker?；诨瘜W(xué)成分有效性及指紋圖譜及化學(xué)計(jì)量結(jié)果分析，初步預(yù)測(cè)一枝蒿酮酸、芹菜素、木犀草素和蒙花苷為一枝蒿中潛在的Q-Marker，其質(zhì)量標(biāo)志物的確定，為全面控制和評(píng)價(jià)新疆一枝蒿質(zhì)量提供了科學(xué)依據(jù)，為新疆一枝蒿藥材的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供理論參考。但考慮到本研究使用的五個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)更新情況和預(yù)測(cè)靶點(diǎn)的機(jī)制的差異，仍然具有一定的局限性，后續(xù)仍需通過(guò)藥效實(shí)驗(yàn)對(duì)通路和靶點(diǎn)進(jìn)行驗(yàn)證，以進(jìn)一步確定本研究預(yù)測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。