四種天然產(chǎn)物對棉鈴蟲殺滅效果研究

□ 楊雪峰 張皓添 陳曉萱 范笑妍 周 延

（北京化工大學(xué)，北京 100029）

一、引言

（一）植物源農(nóng)藥研究意義

天然產(chǎn)物常表現(xiàn)出許多特殊的生物特性，千百年來被人們發(fā)現(xiàn)、利用，過去常作為天然殺蟲劑直接應(yīng)用于實際生產(chǎn)來解決病蟲害問題，而今又在創(chuàng)制天然產(chǎn)物源農(nóng)藥和殺蟲物質(zhì)中起到重要作用。當(dāng)今世界至少有25萬種不同植物，而在化學(xué)性質(zhì)上進(jìn)行過調(diào)查研究的僅占10%，天然產(chǎn)物的殺蟲功效還有很大研究空間。加之近年來，有機合成農(nóng)藥所造成的環(huán)境污染日益嚴(yán)重，因此，開發(fā)和應(yīng)用植物源農(nóng)藥已成為各國所追逐的目標(biāo)［1，2］。我國要全面加強生態(tài)環(huán)境保護(hù)，堅決打好污染防治攻堅戰(zhàn)。天然產(chǎn)物配方的殺蟲劑前景廣闊，使用簡單，帶來的環(huán)境負(fù)擔(dān)大大減小，更適合大規(guī)模施用，并且代表著未來殺蟲劑發(fā)展的新方向。

（二）國內(nèi)外研究現(xiàn)狀

目前，我國農(nóng)業(yè)上正在經(jīng)歷從使用對環(huán)境有較大破壞作用的純化學(xué)殺蟲劑到使用環(huán)境友好型天然產(chǎn)物殺蟲劑的轉(zhuǎn)變過程。使用純化學(xué)殺蟲劑防治棉鈴蟲害的方法之一是施用三氟氯氰菊酯。但是研究表明，棉鈴蟲已經(jīng)對三氟氯氰菊酯表現(xiàn)低水平抗性［3］，且這種物質(zhì)對人體有害，嚴(yán)重者將危及生命。并且三氟氯氫菊酯的降解周期長，降解速度慢，在環(huán)境中易積累，且耐雨水沖刷，僅能通過土壤中的微生物緩慢輔助降解，可造成土地污染，在食物中亦可能有殘留［4］。

國際上對天然產(chǎn)物類的殺蟲劑很早就開始了研究，其中精油類的天然產(chǎn)物引起了研究人員的極大興趣［5］。精油中的烯類物質(zhì)和萜類物質(zhì)對昆蟲具有很強的毒害驅(qū)趕作用［6］。苦木科鴉膽子屬植物含有苦木內(nèi)酯類、三萜類、生物堿類、黃酮類及甾體類等多種化合物，不僅在醫(yī)學(xué)上被廣泛應(yīng)用，其生物活性成分還可以抑制棉鈴蟲害，是開發(fā)植物源殺蟲劑的良好材料［7］。桉葉精油的主要成分有1，8-桉葉油素、α-蒎烯等，其對棉鈴蟲的生長繁殖有一定的抑制作用［8］。崗松精油對棉鈴蟲等害蟲具有較高的殺蟲活性，且來源于天然植物，不含有機溶劑，具有無公害、安全高效的特點，能夠作為綠色、安全植物源農(nóng)藥開發(fā)的潛在植物材料?？鄥A是一種可溶性藥劑，也是一種非常好的植物源殺蟲劑。利用苦參堿制作的材料具有天然性特征，成品藥劑在田間使用時呈現(xiàn)可溶性，因此不會對環(huán)境造成污染。植物源殺蟲劑在使用后不會在土壤和作物上形成過量殘留，不影響其后續(xù)種植。在農(nóng)藥中添加1%的苦參堿能夠有效防治各個蟲齡的棉鈴蟲，比起化學(xué)藥物等具有突出的優(yōu)越性［9］。

（三）農(nóng)害棉鈴蟲

棉鈴蟲（Helicoverpa Armigera）是世界性廣布害蟲，對棉花、玉米、非洲水稻等糧食作物危害嚴(yán)重，其取食農(nóng)作物幼嫩生長點和繁殖器官，幼蟲鉆蛀，啃食花蕾［10］?，F(xiàn)階段主要采用化學(xué)農(nóng)藥對棉鈴蟲進(jìn)行防治。化學(xué)農(nóng)藥的長期和反復(fù)使用，易造成害蟲抗藥性的增加和環(huán)境污染。對于農(nóng)害棉鈴蟲雖有轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉的種植，但是長期、單一、大面積種植轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉，會加大對棉鈴蟲的選擇壓力，從而導(dǎo)致棉鈴蟲對轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉的抗性上升［11］。因此，綠色高效、環(huán)境友好型植物源農(nóng)藥已引起專家學(xué)者的廣泛關(guān)注。芳香植物多含有豐富的植物精油和抗蟲性化合物，是發(fā)現(xiàn)和提取植物源農(nóng)藥的良好材料。例如，狹葉菖蒲含有苯丙素類，黃酮類和萜類等多種具有驅(qū)蟲殺蟲和抗蟲活性的次生化合物［12］。另外，苦參堿，水楊酸，茉莉酸，植物漆酶等天然產(chǎn)物也有一定的驅(qū)蟲功效，尤其對于棉鈴蟲［13］。鑒于有許多已知或未知的天然植物產(chǎn)物可以起到同等或者更優(yōu)良的殺蟲效益，且大幅度減少環(huán)境污染與對于人體健康的危害，本研究致力于探究四種天然產(chǎn)物對棉鈴蟲的殺滅效果。

二、材料和方法

（一）材料

1.供試?yán)ハx

供試?yán)ハx棉鈴蟲（購于河南省濟源白云實業(yè)有限公司），購買蟲態(tài)為卵。室內(nèi)（溫度26±1℃，相對濕度40%～70%，光周期L：D=14h∶10h）［14］孵化后，用人工飼料（購于河南省濟源白云實業(yè)有限公司），飼養(yǎng)于養(yǎng)蟲桶內(nèi)（密度約50頭/L），選取相同生理狀態(tài)的3齡幼蟲作為供試?yán)ハx。

2.試劑及儀器

試劑：

PEG2000（購于山東優(yōu)索化工科技有限公司）；

K1，鴉膽子（購于南昌青亳網(wǎng)絡(luò)科技有限公司）；

桉葉精油（崗松精油由北京化工大學(xué)提供）。

儀器：

電子天平（北京化工大學(xué)提供）；

集熱式攪拌器（北京化工大學(xué)提供）。

（二）棉鈴蟲的飼養(yǎng)方法

3齡前幼蟲飼養(yǎng)：用75%酒精對養(yǎng)蟲桶內(nèi)壁進(jìn)行消毒，置于通風(fēng)櫥內(nèi)15min后取出。將切割為1cm×1cm×1cm大小的人工飼料塊置于養(yǎng)蟲桶底部，鋪滿一層即可。將帶有卵的棉網(wǎng)置于飼料上方，后對養(yǎng)蟲桶桶口用尼龍網(wǎng)紗布（100目）進(jìn)行封蓋。將養(yǎng)蟲桶置于室內(nèi)（溫度26±1℃，相對濕度40%～70%，光周期L∶D=14h∶10h）［14］人工飼養(yǎng)。

3齡后幼蟲飼養(yǎng)：3齡后幼蟲單獨飼養(yǎng)于90mm一次性塑料培養(yǎng)皿中，每個皿中投入4±0.1g（濕重）人工飼料。

成蟲飼養(yǎng)：將蟲蛹提前置于80cm×80cm×80cm養(yǎng)蟲籠內(nèi)，待羽化后，向養(yǎng)蟲籠內(nèi)放入盛有浸透10%蜂蜜水脫脂棉的塑料培養(yǎng)皿作為營養(yǎng)源，并及時更換蜂蜜水脫脂棉。

（三）四種天然產(chǎn)物不同濃度藥液的配制

1.桉葉精油、崗松精油

以PEG2000為增溶劑，水為溶劑，通過恒溫攪拌將桉葉精油和崗松精油分別配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.08%、0.80%、2.40%、4.80%、8.00%的精油藥液。桉葉精油和崗松精油為具有特殊氣味的透明液體，且具有易揮發(fā)的性質(zhì)，在配制過程中應(yīng)注意密封。配制完成后置于12±1℃的環(huán)境中冷藏。

2.苦參堿、鴉膽子

以水為溶劑，將苦參堿干粉和鴉膽子干粉分別配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.08%、0.80%、2.40%、4.80%、8.00%的藥液，并震蕩24h。震蕩完成后置于12±1℃的環(huán)境中冷藏。

（四）四種天然產(chǎn)物藥液自身毒性的測定

采用豆芽浸泡法測定4種天然產(chǎn)物藥液的自身毒性。

豆芽制備：取大小相同，飽滿度一致的黃豆置于培養(yǎng)皿皿蓋中，每皿20～30粒。向皿蓋中加水，直至水面恰好沒過黃豆，后將與皿蓋大小相近的紗布覆于水面上，重復(fù)操作。將處理后的黃豆置于室溫，每隔12h加一次水，待其發(fā)芽且芽長3cm左右。

豆芽浸泡法：取芽長3cm左右且生理狀況一致的豆芽，記錄豆芽長度。后分別在4種天然產(chǎn)物的系列濃度中浸泡2～3s，取出后用吸水紙吸去表面藥液。向1個空培養(yǎng)皿皿蓋中添加10個相同處理的豆芽，并向皿蓋中加水直至水面沒過豆芽。以清水為對照，每處理豆芽10個，重復(fù)3次。將處理后的豆芽置于室溫，每隔12h加一次水。24h后分別測量每個皿中豆芽長度，計算生長抑制率。

（五）四種天然產(chǎn)物藥液對棉鈴蟲拒食活性的測定

采用葉碟法［15，16］測定四種天然產(chǎn)物藥液對棉鈴蟲的拒食活性。將新鮮的玉米葉片洗凈、晾干，用打孔器制成大小一致的葉碟（直徑2.5cm）。將葉碟分別在4種天然產(chǎn)物的系列濃度中浸泡2～3s，取出自然晾干。向1個空培養(yǎng)皿中添加3片相同處理的葉碟，后分別接入1頭經(jīng)饑餓處理4h且生理狀態(tài)相同的3齡幼蟲。以清水為對照，每處理幼蟲10頭，重復(fù)3次。將處理后的試蟲置于溫度26±1℃，相對濕度40%～70%，光周期L∶D=14h∶10h條件下飼養(yǎng)。24h后，分別測量每個皿中葉碟剩余面積及試蟲死亡數(shù)，計算拒食率、死亡率及校正死亡率，得到拒食中濃度［17，18］。

（六）桉葉精油藥液、崗松精油藥液對棉鈴蟲觸殺活性的測定

精油藥液的配制：配制不同精油的藥液，質(zhì)量濃度分別為4.00%、6.00%、8.00%，方法同上。

對3齡幼蟲觸殺活性：采用滴蟲法測定觸殺活性。取相同生理狀況的棉鈴蟲3齡幼蟲，每個培養(yǎng)皿中補充添加4±0.1g（濕重）的人工飼料。用移液槍分別移取不同濃度的精油藥液100μL，精準(zhǔn)緩慢滴加在幼蟲蟲身上，滴加完成后蓋好皿蓋。以清水為對照，每處理幼蟲10頭，重復(fù)3次。將處理后的試蟲置于溫度26±1℃，相對濕度40%～70%，光周期L∶D=14h∶10h條件下飼養(yǎng)。24h、48h后，分別測量試蟲死亡數(shù)，計算死亡率及校正死亡率。

對5齡幼蟲觸殺活性：采用滴蟲法測定觸殺活性。除處理試蟲為生理狀況相同的棉鈴蟲5齡幼蟲外，其余操作同上。

（七）四種天然產(chǎn)物對棉鈴蟲胃毒活性的測定

采用飼喂稱重法［19］測定四種天然產(chǎn)物對棉鈴蟲的胃毒活性。將四種天然產(chǎn)物分別按照質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.08%、0.80%、2.40%、4.80%、8.00%（干重）加到人工飼料中，并充分混勻，對照組不作處理。向1個空培養(yǎng)皿中添加4±0.1g相同處理的人工飼料，后分別接入1頭經(jīng)饑餓處理4h、生理狀態(tài)相同且完成稱重的3齡幼蟲。以不作處理的人工飼料為對照，每處理幼蟲10頭，重復(fù)3次。將處理后的試蟲置于溫度26±1℃，相對濕度40%～70%，光周期L∶D=14h∶10h條件下飼養(yǎng)。在處理后的第1、3天逐頭稱重，測量試蟲死亡數(shù)，計算體重抑制率，死亡率及校正死亡率。

三、結(jié)果與分析

（一）四種天然產(chǎn)物藥液自身毒性

四種天然產(chǎn)物藥液系列濃度對黃豆芽生長影響見表1。精油類天然產(chǎn)物藥液濃度越大，對黃豆芽的生長抑制越強，但低濃度的精油類天然產(chǎn)物藥液對黃豆芽有促進(jìn)生長作用。非精油類天然產(chǎn)物藥液對黃豆芽生長影響較小，且濃度的高低對黃豆芽生長影響的差別不大。其中，8.00%質(zhì)量濃度的崗松精油對黃豆芽的生長抑制最明顯，達(dá)到了10.25%。

表1 四種天然產(chǎn)物藥液系列濃度對黃豆芽生長影響

（二）四種天然產(chǎn)物藥液對棉鈴蟲的拒食活性

四種天然產(chǎn)物藥液對棉鈴蟲幼蟲的拒食活性見表2、表3。四種天然產(chǎn)物系列濃度藥液對供試的棉鈴蟲幼蟲均表現(xiàn)出較好的拒食活性。崗松精油藥液隨著濃度的增加，對棉鈴蟲幼蟲的拒食率呈下降趨勢，藥液濃度為0.08%時拒食效果最好，達(dá)52.75%；桉葉精油藥液拒食率隨著藥液濃度的增大先增大后降低，其中，藥液濃度為0.80%時拒食效果最好，達(dá)50.30%；鴉膽子藥液拒食率隨著藥液濃度的增大先增大后降低，其中，藥液濃度為0.80%時拒食效果最好，達(dá)62.74%；苦參堿不同濃度的藥液拒食效果基本一致，基本穩(wěn)定在54.00%左右，其中0.80%時拒食效果最差，為46.88%。桉葉精油，崗松精油，鴉膽子，苦參堿藥液的拒食中濃度分別為0.22，1.92，5.44，1.61g·g-1。

表2 四種天然產(chǎn)物藥液對棉鈴蟲的拒食活性

表3 四種天然產(chǎn)物藥液對棉鈴蟲的拒食中濃度

（三）桉葉精油藥液、崗松精油藥液對棉鈴蟲的觸殺活性

桉葉精油、崗松精油對棉鈴蟲3齡、5齡幼蟲的觸殺活性見表4、表5。桉葉精油和崗松精油的藥液對棉鈴蟲幼蟲的觸殺活性均隨著藥液濃度的增大而提高。桉葉精油和崗松精油的藥液對棉鈴蟲3齡幼蟲的觸殺活性表現(xiàn)較好，其中，8.00%的桉葉精油藥液效果最好，校正死亡率達(dá)91.67%，8.00%的崗松精油藥液也超過了半數(shù)致死率，并且桉葉精油不同濃度藥液對棉鈴蟲3齡幼蟲的觸殺活性普遍高于崗松精油。而桉葉精油和崗松精油的藥液對棉鈴蟲5齡幼蟲的觸殺活性表現(xiàn)較差，兩者最高濃度的藥液均沒有達(dá)到半數(shù)致死率，并且，對棉鈴蟲5齡幼蟲的處理，桉葉精油藥液和崗松精油藥液不同濃度間沒有表現(xiàn)出很大的差異性。

表4 桉葉精油，崗松精油藥液對棉鈴蟲3齡幼蟲的觸殺活性

表5 桉葉精油，崗松精油藥液對棉鈴蟲5齡幼蟲的觸殺活性

（四）四種天然產(chǎn)物對棉鈴蟲的胃毒活性

四種天然產(chǎn)物對棉鈴蟲的胃毒活性見表6，表7。四種天然產(chǎn)物對棉鈴蟲幼蟲的胃毒活性表現(xiàn)均較差，其中桉葉精油和鴉膽子的胃毒活性在四種天然產(chǎn)物中表現(xiàn)較好，8.00%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的桉葉精油致死率達(dá)到了13.80%，8.00%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的鴉膽子致死率達(dá)到了10.35%。但四種天然產(chǎn)物對棉鈴蟲的體重抑制率表現(xiàn)均較好，崗松精油對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率隨質(zhì)量分?jǐn)?shù)的升高先降低后升高，在2.40%質(zhì)量分?jǐn)?shù)時出現(xiàn)了促進(jìn)棉鈴蟲生長的狀況；桉葉精油對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率隨質(zhì)量分?jǐn)?shù)的升高呈不穩(wěn)定上升趨勢，其中8.00%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的桉葉精油對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率第3天達(dá)到了70.97%；鴉膽子對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率隨質(zhì)量分?jǐn)?shù)的升高變化不穩(wěn)定，在25.00%附近；苦參堿對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率隨質(zhì)量分?jǐn)?shù)的升高先降低后升高。

表6 四種天然產(chǎn)物對棉鈴蟲幼蟲的胃毒活性

四、討論

（一）四種天然產(chǎn)物藥液自身毒性的討論

本實驗通過將4種天然產(chǎn)物系列濃度的藥液作用于發(fā)芽且生理狀況相同的黃豆芽上，通過黃豆芽生長長度的變化來判斷天然產(chǎn)物藥液是否對植株生長有毒害作用。此方法用生長周期短、發(fā)芽快的黃豆代替了試蟲主要蟲害的農(nóng)作物棉花，雖然此實驗與實際情況有一定的差距，但其結(jié)果仍有一定的參考價值。

桉葉精油和崗松精油的藥液在低濃度時均表現(xiàn)出了對黃豆芽生長的促進(jìn)作用，這可能與精油類物質(zhì)中的相關(guān)成分有關(guān)［20］，精油濃度低時起促進(jìn)作用，精油濃度過高時起抑制作用。相比于精油類物質(zhì)，非精油類的鴉膽子和苦參堿的藥液對黃豆芽的生長影響較小，推測其水提物中對黃豆芽生長影響的因子很少。從實驗結(jié)果來看，崗松精油藥液低濃度時對黃豆芽生長的促進(jìn)作用最強，高濃度時抑制作用也最強，但4種天然產(chǎn)物藥液的影響均不是很明顯，由此可判斷出這4種天然產(chǎn)物藥液具有可應(yīng)用性。

（二）四種天然產(chǎn)物藥液對棉鈴蟲拒食活性的討論

本實驗采用了葉碟法測定四種天然產(chǎn)物對棉鈴蟲的拒食活性，考慮到實驗的易操作性和材料的易獲取性，用玉米葉片［11］代替了棉花葉片。本實驗結(jié)果表明，四種天然產(chǎn)物系列濃度藥液對棉鈴蟲幼蟲均表現(xiàn)出較好的拒食活性。在實際生產(chǎn)生活中，植物體會產(chǎn)生不同的化學(xué)物質(zhì)，當(dāng)昆蟲攝取這些化學(xué)物質(zhì)后，會引起昆蟲體內(nèi)的生理生化機制發(fā)生改變進(jìn)而調(diào)節(jié)其生長發(fā)育過程［21］。這四種天然產(chǎn)物種特殊成分在棉鈴蟲幼蟲進(jìn)食時，直接或間接地抑制了昆蟲口器的化學(xué)感受器，進(jìn)而使其失去味覺功能，表現(xiàn)出局勢反應(yīng)［22，23］，從而使其因攝取不到足夠營養(yǎng)影響到自身的生長發(fā)育。

從實驗結(jié)果中可觀察到，四種天然產(chǎn)物系列濃度藥液的校正死亡率與其拒食率基本成反比，可推斷出4種天然產(chǎn)物對棉鈴蟲幼蟲的殺滅作用主要通過其進(jìn)食完成的，即以胃毒作用為主。在以后的研究中，可將系列濃度細(xì)分，得到確切的關(guān)系曲線，在考慮拒食率、死亡率以及其他因素（如成本，易操作性等）下，得到最適的藥液濃度。四種天然產(chǎn)物的AFC50分別為：崗松精油0.22g·g-1，桉葉精油1.92g·g-1，鴉膽子5.44g·g-1，苦參堿1.61g·g-1。鴉膽子的AFC50最高，說明其對棉鈴蟲幼蟲的拒食活性不高。桉葉精油和苦參堿的AFC50相近，推測其具有相似的作用于棉鈴蟲幼蟲的機制。

（三）桉葉精油藥液、崗松精油藥液對棉鈴蟲觸殺活性的討論

本實驗采用自創(chuàng)滴蟲法進(jìn)行觸殺活性實驗，因考慮實際生產(chǎn)生活中噴灑農(nóng)藥時以農(nóng)藥溶液滴落在昆蟲蟲身上情況居多，故采用此法。相比于浸蟲法［12］，實驗結(jié)果更貼近實際，更便于實際應(yīng)用。從實驗結(jié)果可推斷出鴉膽子及苦參堿的水提物中對生物生長的影響因子很少，而精油中含有多種揮發(fā)性物質(zhì)，易進(jìn)入動植物體內(nèi)［20，24］，故本實驗只對精油類天然產(chǎn)物進(jìn)行了實驗。從實驗結(jié)果可以推斷出桉葉精油，崗松精油藥液在處理24h后活性大大降低，所以出現(xiàn)藥液處理48h后校正死亡率與藥液處理24h后的結(jié)果相比變化不大的情況。在實際生產(chǎn)生活中，應(yīng)考慮到精油類天然產(chǎn)物藥液的作用有效期，及時補充進(jìn)行二次處理或依據(jù)實際生產(chǎn)要求規(guī)劃好施用時間。

從實驗結(jié)果中也可以看出，棉鈴蟲幼蟲隨著蟲齡的增長，對桉葉精油，崗松精油藥液的抗性逐漸增大，因此，在實際生產(chǎn)生活中，應(yīng)該在蟲害發(fā)生前期及時進(jìn)行處理，越早處理效果越好，也更加經(jīng)濟。

（四）四種天然產(chǎn)物對棉鈴蟲胃毒活性的討論

本部分實驗采用飼喂稱重法來測定四種天然產(chǎn)物對棉鈴蟲的胃毒活性。從實驗結(jié)果可以看出，不同天然產(chǎn)物與人工飼料混合后對棉鈴蟲幼蟲進(jìn)行處理的表現(xiàn)各不相同，沒有統(tǒng)一的特點。

崗松精油，隨著質(zhì)量濃度的增加，對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率先降低后升高，并在2.40%質(zhì)量濃度時出現(xiàn)了促進(jìn)棉鈴蟲幼蟲生長的現(xiàn)象；而對應(yīng)的校正死亡率沒有大的差別且都很低。在0.08%質(zhì)量濃度時第1天和第3天的體重抑制率各達(dá)到了61.81%和60.33%。

桉葉精油，隨著質(zhì)量濃度的增加，對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率總體升高，但在4.80%質(zhì)量濃度時出現(xiàn)了體重抑制率大幅降低的現(xiàn)象，推測這個現(xiàn)象與崗松精油對棉鈴蟲幼蟲體重抑制率隨質(zhì)量濃度增加先降低后升高的現(xiàn)象類似，區(qū)別在于谷值大小和變化區(qū)間長短不同。在8.00%質(zhì)量濃度時第1天和第3天的體重抑制率各達(dá)到了70.34%和70.97%。在以后的研究中可將系列濃度細(xì)分，得到確切的關(guān)系曲線，驗證此推論是否正確。

苦參堿，隨著質(zhì)量濃度的增加，對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率先降低后升高，與崗松精油的表現(xiàn)類似，并且對應(yīng)的校正死亡率也是沒有太大的差別并且都很低，推測苦參堿和崗松精油作用于棉鈴蟲幼蟲的方式具有相似性。

鴉膽子，隨著質(zhì)量濃度的增加，對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率總體趨勢不穩(wěn)定，在25.00%附近。推測鴉膽子內(nèi)的化學(xué)物質(zhì)在與飼料混合后大大降低了其對棉鈴蟲的拒食作用［25］。并且在實驗中可以得到四種天然產(chǎn)物的AFC50值，其中鴉膽子的AFC50最高，也間接驗證了該猜想。雖然鴉膽子對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率不高，但在該實驗中其校正死亡率普遍高于其他三種物質(zhì)。這說明鴉膽子對棉鈴蟲幼蟲作用后，以直接致死的作用方式為主［26，27］，而沒有致死的試蟲沒有表現(xiàn)出對鴉膽子的明顯拒食反應(yīng)。所以，推測鴉膽子對棉鈴蟲幼蟲作用方式以胃毒為主，且不會引起棉鈴蟲幼蟲強烈的拒食反應(yīng)。

五、結(jié)語

（一）四種天然產(chǎn)物藥液具有可應(yīng)用性

桉葉精油和崗松精油的藥液在濃度低時起促進(jìn)作用，精油濃度過高時起抑制作用。非精油類的鴉膽子和苦參堿的藥液對黃豆芽的生長影響較小，促進(jìn)和抑制作用都不明顯。從整體看來，這四種天然產(chǎn)物藥液具有可應(yīng)用性。

（二）四種天然產(chǎn)物藥液對棉鈴蟲均具有拒食活性

桉葉精油、崗松精油、鴉膽子、苦參堿系列濃度藥液校正死亡率與其拒食率基本成反比，四種天然產(chǎn)物的AFC50分別為：崗松精油0.22g·g-1，桉葉精油1.92g·g-1，鴉膽子5.44g·g-1，苦參堿1.61g·g-1。崗松精油的拒食活性最高，鴉膽子的拒食活性最低。

（三）桉葉精油藥液、崗松精油藥液對棉鈴蟲均具有觸殺活性

棉鈴蟲幼蟲隨著蟲齡的增長，對桉葉精油，崗松精油藥液的抗性逐漸增大，因此在實際生產(chǎn)生活中，應(yīng)該在蟲害發(fā)生前期及時進(jìn)行處理，越早處理效果越好，也更加經(jīng)濟。桉葉精油和崗松精油的藥液對棉鈴蟲3齡幼蟲的觸殺活性表現(xiàn)較好，其中，8.00%的桉葉精油藥液效果最好，校正死亡率達(dá)91.67%。

（四）四種天然產(chǎn)物對棉鈴蟲均具有胃毒活性

桉葉精油、崗松精油、鴉膽子、苦參堿對棉鈴蟲幼蟲的胃毒活性表現(xiàn)均較差，其中桉葉精油和鴉膽子的胃毒活性在四種天然產(chǎn)物中表現(xiàn)較好，8.00%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的桉葉精油致死率達(dá)到了13.80%，8.00%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的鴉膽子致死率達(dá)到了10.35%。

桉葉精油、崗松精油、鴉膽子、苦參堿對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率表現(xiàn)均較好，崗松精油對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率隨質(zhì)量分?jǐn)?shù)的升高先降低后升高，在2.40%質(zhì)量分?jǐn)?shù)時出現(xiàn)了促進(jìn)棉鈴蟲生長的狀況；桉葉精油對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率隨質(zhì)量分?jǐn)?shù)的升高呈不穩(wěn)定上升趨勢；鴉膽子對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率隨質(zhì)量分?jǐn)?shù)的升高變化不穩(wěn)定，在25.00%附近；苦參堿對棉鈴蟲幼蟲的體重抑制率隨質(zhì)量分?jǐn)?shù)的升高先降低后升高。崗松精油在0.08%質(zhì)量濃度時第1天和第3天的體重抑制率各達(dá)到了61.81%和60.33%。桉葉精油在8.00%質(zhì)量濃度時第1天和第3天的體重抑制率各達(dá)到了70.34%和70.97%。