靈芝孢子粉破壁技術(shù)、質(zhì)量分析與深加工相關(guān)研究進(jìn)展

黃宗延

摘要：靈芝破壁孢子粉是一種深加工產(chǎn)品，機(jī)體的吸收率更高，具有多種藥理學(xué)特性。靈芝孢子粉的破壁技術(shù)主要有機(jī)械法、物理法、生物化學(xué)法等，綜合利用工業(yè)生產(chǎn)，靈芝破壁孢子粉的質(zhì)控尚無國(guó)家統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，可根據(jù)地方標(biāo)準(zhǔn)綜合評(píng)估。靈芝孢子粉的提取物主要為孢子油。現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，靈芝孢子粉水醇提物、水提物應(yīng)用前景較佳，抗癌活性較強(qiáng)。本文對(duì)靈芝孢子粉的深加工、質(zhì)量控制、破壁技術(shù)進(jìn)行綜述、分類介紹。

關(guān)鍵詞：研究進(jìn)展;靈芝孢子提取物;質(zhì)量控制;破壁技術(shù);靈芝孢子粉

【中圖分類號(hào)】 R283 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A? ? ? 【文章編號(hào)】2107-2306（2022）09--01

靈芝性平、味甘，歸腎、肝、肺、心經(jīng)，具有平喘止咳、安神補(bǔ)氣的效果，野生紫芝或赤芝多生長(zhǎng)于闊葉樹枯干或根部，自然界較為少見[1]。近年來隨著對(duì)靈芝相關(guān)產(chǎn)品不斷深加工和栽培技術(shù)的不斷進(jìn)步，開發(fā)出新型靈芝深加工產(chǎn)品[2]。研究發(fā)現(xiàn)，靈芝孢子應(yīng)用破壁技術(shù)后，顯著增強(qiáng)了免疫活性，提高了有效成分的利用吸收率。本文對(duì)靈芝孢子粉的深加工、質(zhì)量控制、破壁技術(shù)進(jìn)行綜述、分類介紹，現(xiàn)報(bào)道如下。

1靈芝孢子粉的破壁技術(shù)

1.1生物化學(xué)法

1.1.1萌動(dòng)激活法

萌動(dòng)激活法是對(duì)靈芝孢子的萌動(dòng)進(jìn)行誘導(dǎo)的破壁技術(shù)。研究發(fā)現(xiàn)，新鮮的靈芝孢子，在避光、供氧調(diào)節(jié)下予以48h培育，ph值為5，溫度為28°C，萌發(fā)率約為70.0%左右，濃度0.1mg/ml的氯化鐵、氯化鈣、二氧化鎂可促進(jìn)萌發(fā)孢子。靈芝孢子在萌動(dòng)激活法下消耗能量較小，其抗癌活性較強(qiáng)，發(fā)展前景較佳，但需要保持靈芝孢子粉飽滿新鮮。

1.1.2酶解破壁法

酶解破壁法是應(yīng)用果膠酶、半纖維素酶、纖維素酶等在一定條件下對(duì)靈芝孢子粉進(jìn)行浸泡破壁的方式。酶解破壁法具有可對(duì)孢壁破壞程度進(jìn)行控制，條件溫和等優(yōu)勢(shì)，但酶成本較高，耗時(shí)較長(zhǎng)，目前多是結(jié)合其他方式聯(lián)合應(yīng)用[3]。

1.1.3 化學(xué)試劑法

可加入酸堿化學(xué)試劑浸泡，對(duì)靈芝孢子壁的結(jié)構(gòu)進(jìn)行破壞，有利于提取孢子粉的有效成分及破壁前處理。

1.2 物理法

物理法是應(yīng)用超臨界二氧化碳、微波、超聲波、冷凍（脆化）等物理方式對(duì)靈芝孢子的細(xì)胞壁進(jìn)行破壁的方法[4-5]。超聲波可促使靈芝孢子粉溶液轉(zhuǎn)變?yōu)槊芗男馀?，小氣泡炸裂后生成的機(jī)械力可起到破壁的作用[6-7]。微波則具有慣性低熱、穿透性、選擇加熱等優(yōu)勢(shì)，可在靈芝孢子中水分子等極性物質(zhì)發(fā)揮作用。超臨界二氧化碳具有高效率分離、無毒、低溫等優(yōu)越性，可破壁提取靈芝多糖，降低了靈芝活性成分的分解。

1.3 機(jī)械法

機(jī)械法是應(yīng)用各種機(jī)械，經(jīng)撞擊、粉碎氣流、噴射粉碎、擠壓、碾壓等方式對(duì)靈芝孢子壁進(jìn)行破壞的方式，機(jī)械法具有高破壁率，可簡(jiǎn)便操作。目前，多應(yīng)用超微粉碎激素予以機(jī)械破壁，分為濕法及干法，可將物料粉碎粒度<10um。濕法主要予以液體高壓粉碎機(jī)粉碎物料，干法粉碎包括氣流式粉碎、振動(dòng)式粉碎、沖擊式粉碎、球磨式粉碎[8-10]。

1.4綜合法

靈芝孢子的破壁方法多應(yīng)用綜合法相結(jié)合，很少單一應(yīng)用一種方式。靈芝孢子破壁綜合技術(shù)是組合機(jī)械、物理、生物化學(xué)方式等[11-12]，申請(qǐng)了較多專利，包括“第三代去壁提純技術(shù)”，原料為破壁靈芝孢子粉，對(duì)孢子殼等無效成分進(jìn)行分離。

2 質(zhì)量控制

2.1 鑒定

靈芝孢子粉的鑒定方法包括破壁率鑒定、真?zhèn)舞b定、形態(tài)鑒定，實(shí)驗(yàn)室可應(yīng)用紅外光譜法、核磁共振波譜法、紫外光譜法、薄層色譜法等方式鑒定。一般經(jīng)血球計(jì)數(shù)板計(jì)算靈芝孢子粉的破壁率?？膳渲旗`芝孢子粉為混懸液，超過200倍放大顯微鏡予以鏡檢。孢子破壁后可見孢子壁殘破，未破壁者則內(nèi)壁突起，5-7um寬，8-12um長(zhǎng)，外壁無色，卵形呈褐色。這種鑒定方式雖在精密度上具有一定的缺陷，但簡(jiǎn)便易行，較低成本，可結(jié)合檢測(cè)有效成分的含量聯(lián)合鑒定。

2.2 分析有效成分

靈芝孢子破壁后含有生物堿、甾醇、三萜類、多糖類等物質(zhì)，其中評(píng)估臨床效果的有效成分為總?cè)坪痛侄嗵恰Ｄ壳?，紫外分光光度法、多?yīng)用高效液相色譜（HPLC）、氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）檢測(cè)靈芝孢子粉的單糖、多糖組成成分，應(yīng)用凝膠滲透色譜（GPC）法評(píng)估靈芝孢子粉的多糖分布情況和其相對(duì)分子質(zhì)量。同時(shí)靈芝孢子粉中含有微量元素、氨基酸、核苷酸、生物堿、脂肪酸等活性成分。研究表明，可應(yīng)用氣相色譜法檢測(cè)靈芝孢子粉中的亞油酸、油酸等脂肪酸成分。可應(yīng)用微波消解-電感耦合、等離子體光譜法等離子質(zhì)譜法（ICP-MS）檢測(cè)微量元素[13]。

2.3 安全性分析

靈芝孢子粉的破壁質(zhì)量的安全性可評(píng)估霉菌污染、有機(jī)溶劑殘余、破壁過程中金屬夾帶碎屑、栽培靈芝過程中的重金屬污染等情況，可應(yīng)用微波消解-ICP-MS方式對(duì)靈芝孢子粉不同破壁方式中無機(jī)元素含量，監(jiān)測(cè)重金屬污染[14]。

3 靈芝孢子粉提取物深加工研究

靈芝孢子粉的提取物主要為靈芝孢子油，多應(yīng)用超臨界二氧化碳萃取（SFE-CO2）予以工業(yè)制備，具有高萃取物純度、簡(jiǎn)單工藝、無污染、無溶劑殘余等優(yōu)勢(shì)，已得到廣泛應(yīng)用[15]。可應(yīng)用蝶式離心機(jī)與臥式螺旋離心機(jī)聯(lián)合技術(shù)，解決了孢子粉多糖水提取液中無法產(chǎn)業(yè)化過濾分離孢子粉技術(shù)，可提高靈芝脫脂孢子粉多糖提取率。

4小結(jié)和展望

靈芝孢子粉的破壁技術(shù)主要有機(jī)械法、物理法、生物化學(xué)法等，其中生物化學(xué)法包括萌動(dòng)激活法、酶解破壁法、化學(xué)試劑法、綜合法，物理法包括超臨界二氧化碳、微波、超聲波、冷凍（脆化）等物理方式，靈芝孢子粉的質(zhì)量控制包括鑒定（破壁率鑒定、真?zhèn)舞b定、形態(tài)鑒定，實(shí)驗(yàn)室可應(yīng)用紅外光譜法、核磁共振波譜法、紫外光譜法、薄層色譜法等方式鑒定）、有效成分分析、安全性分析（微波消解-ICP-MS），應(yīng)用紫外分光光度法高效液相色譜（HPLC）、氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）檢測(cè)靈芝孢子粉的單糖、多糖組成成分，應(yīng)用凝膠滲透色譜（GPC）法評(píng)估靈芝孢子粉的多糖分布情況和其相對(duì)分子質(zhì)量。 靈芝孢子粉的提取物主要為靈芝孢子油，多應(yīng)用超臨界二氧化碳萃?。⊿FE-CO2）予以工業(yè)制備，具有高萃取物純度、簡(jiǎn)單工藝、無污染、無溶劑殘余等優(yōu)勢(shì)，已得到廣泛應(yīng)用。

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