不同餌料對凡納濱對蝦性腺發(fā)育的影響

■ 文｜廣東海洋大學(xué) 朱國萍 葉寧

湛江市國興水產(chǎn)科技有限公司 林松

餌料營養(yǎng)是雌蝦繁育的關(guān)鍵因素。雌蝦需攝取大量的蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪酸等營養(yǎng)成分以供性腺發(fā)育。目前，雌蝦培育過程中多采用鮮活的沙蠶、冰凍的魷魚和牡蠣等天然餌料進(jìn)行投喂，對雌蝦的繁育均產(chǎn)生了較好的效果。投喂的沙蠶通常有天然雙齒圍沙蠶（俗稱紅蟲，以下簡稱紅蟲）和養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶（俗稱青蟲，以下簡稱青蟲），在生產(chǎn)中已發(fā)現(xiàn)紅蟲對提高雌蝦的繁育效果顯著，但其價格昂貴，且近年紅蟲資源枯竭，使得企業(yè)在生產(chǎn)中更多使用青蟲進(jìn)行替代投喂以降低雌蝦培育過程中的成本，并能降低雌蝦培育過程中對處于資源枯竭狀態(tài)的紅蟲的依賴。

為了提高雌蝦的繁育效果，并降低餌料的成本，本研究通過比較天然雙齒圍沙蠶、養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶和魷魚不同投喂次數(shù)對雌蝦性腺成熟的影響，篩選合適的餌料配方。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：每天投喂一次天然雙齒圍沙蠶、3次養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶和2次魷魚的雌蝦性腺成熟度最好，產(chǎn)卵量顯著提高，再次性成熟周期顯著縮短，幼體的孵化率沒有顯著差異，但幼體的質(zhì)量明顯提高。

一、材料

1.沙蠶來源。紅蟲由漁民在海邊泥灘上捕捉，消毒后再喂食，青蟲購自遂溪縣寶亨生物科技有限公司。魷魚購自湛江市東風(fēng)市場。

2.凡納濱對蝦雌蝦。由湛江市國興水產(chǎn)科技有限公司提供，蝦齡為15月齡。

二、試驗(yàn)方法

在湛江市國興水產(chǎn)科技有限公司徐聞省級對蝦良種場進(jìn)行，把試驗(yàn)用的雌蝦分為三組，每組45尾雌蝦，1組每天投喂1次紅蟲，3次青蟲和2次魷魚、2組每天投喂4次青蟲和2次魷魚，3組每天投喂3次青蟲和3次魷魚，每組均有3個平行。設(shè)置3m×3m×1m的40目網(wǎng)箱9個，每個網(wǎng)箱放15尾體長20cm、體重40g左右、健壯無病、無傷殘、體表光潔、反應(yīng)靈敏、活力好的凡納濱對蝦雌蝦。

釆用標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖（共同環(huán)境養(yǎng)殖），把9個網(wǎng)箱共同放入1個200立方的水泥池，每個網(wǎng)箱的水環(huán)境、餌料投放和藥物使用等管理措施保持一致，把每個網(wǎng)箱環(huán)境差異降到最低。

1.試驗(yàn)管理。（1）雌蝦進(jìn)行剪眼柄催熟。實(shí)驗(yàn)材料全部消毒，投喂時間分別為每天6∶00、10∶00、14∶00、18∶00、22∶00、02∶00，共6次投喂，日常投喂量占蝦體重15%～20%，以一小時食完為準(zhǔn)，投喂量視具體情況進(jìn)行增減。（2）定時測定水溫，保證水溫恒定在28℃～29℃。池水24小時增氧，使溶解氧保持在5mg/L左右。試驗(yàn)全過程海水鹽度為28‰ ～32‰，pH7.9～8.3，氨氮保持在0.1mg/L以下，亞硝酸鹽保持在0.05mg/L以下，光照周期為12h。每日給雌蝦池?fù)Q水兩次，上、下午各一次，每次換水20cm，并清理蝦池殘餌。

2.雌蝦產(chǎn)卵及幼體孵化。性腺成熟的雌蝦放入雄蝦池子受精，受精后的雌蝦移入標(biāo)簽好的產(chǎn)卵桶中產(chǎn)卵。桶中預(yù)先加入已消毒過濾的新鮮海水，并加入5ppm的EDTA-2Na用以鉻合水中的重金屬，同時加入0.5ppm的優(yōu)樂碘用以抑殺水體中的病原微生物，保護(hù)受精卵不受水體環(huán)境的影響。水體的鹽度保持在28‰ ～33‰，水溫控制在29～30℃，并保持不間斷微充氣。雌蝦產(chǎn)卵后，用孔徑0.061mm（250目）的集卵篩絹網(wǎng)箱排水收集受精卵，并在2～3h內(nèi)完成產(chǎn)卵量計(jì)數(shù)。

3.雌蝦性腺再促熟。產(chǎn)卵后的雌蝦放回網(wǎng)箱內(nèi)繼續(xù)促熟，并觀察再次性成熟時間。

4.雌蝦性腺指數(shù)的測定。雌蝦準(zhǔn)備入桶產(chǎn)卵前，從各組的三個平行組中隨機(jī)抽取5條雌蝦，稱量雌蝦的體質(zhì)量，觀察各條雌蝦性腺的外觀，并解剖取出性腺稱重，計(jì)算其性腺指數(shù)。

性腺指數(shù)=性腺質(zhì)量×100/雌蝦體質(zhì)量

5.無節(jié)幼體孵化率的測定。受精卵用濃度1～3g/m3的碘制劑消毒后，移入孵化桶內(nèi)孵化，不間斷微充氣，每30分鐘推卵1次，保證受精卵不下沉，約13～15h變成無節(jié)幼體。用孔徑0.076mm（200目）篩絹網(wǎng)箱收集后，放入盆內(nèi)靜置1～2分鐘，虹吸底部死卵、壞卵后，統(tǒng)計(jì)健康無節(jié)幼體數(shù)量，用顯微鏡鏡檢對蝦無節(jié)幼體卵黃粒情況。

三、結(jié)果與分析

1.不同餌料對雌蝦產(chǎn)卵量的影響。從圖1可見，1組雌蝦的產(chǎn)卵量最多，達(dá)18×104粒，與2組及3組的產(chǎn)卵量均呈顯著性差異（P<0.001），2組與3組產(chǎn)卵量接近，不呈顯著性差異（P>0.05）。每天投喂1次紅蟲，3次青蟲和2次魷魚的雌蝦產(chǎn)卵量最高。

圖1 不同餌料對雌蝦產(chǎn)卵量的影響

2.不同餌料對雌蝦性腺指數(shù)的影響。從圖2可見，1組雌蝦的性腺指數(shù)最大，與2組及3組的性腺指數(shù)均呈顯著性差異（P<0.001），2組與3組性腺指數(shù)接近，不呈顯著性差異（P>0.05），與雌蝦的性腺指數(shù)結(jié)果相一致，1組雌蝦的性腺外觀可見明顯的橙黃色，性腺內(nèi)藏的卵子飽滿、結(jié)實(shí)；而2組與3組的性腺外觀僅可見淡淡的黃色，性腺內(nèi)藏的卵子稀疏、軟塌。每天投喂1次紅蟲，3次青蟲和2次魷魚的雌蝦性腺成熟度最好，性腺指數(shù)最高。

圖2 不同餌料對雌蝦性腺指數(shù)的影響

3.不同餌料對雌蝦性腺再成熟時間的影響。從圖3可見，不同餌料投喂的雌蝦性腺再成熟時間呈現(xiàn)不同的周期，1組的性腺再成熟時間顯著低于2組和3組（P<0.001），而2組和3組的性腺再成熟時間接近，差異性不大（P>0.05）。每天投喂1次紅蟲，3次青蟲和2次魷魚的雌蝦性腺再成熟時間最快。

圖3 不同餌料對雌蝦性腺再成熟時間的影響

4.不同餌料對幼體孵化率及質(zhì)量的影響。從圖4可見，投喂不同餌料的雌蝦其幼體孵化率接近（P>0.05）。盡管1組的幼體量高于2組和3組，但由于1組的雌蝦產(chǎn)卵量也高于2組和3組，使得1組的幼體孵化率僅輕微高于2組和3組，但不呈顯著性差異；1組的幼體劃動有力，趨光性強(qiáng)，體表干凈，附肢剛毛整齊無畸形，卵黃粒顏色呈現(xiàn)明亮的黃色，達(dá)到凡納濱對蝦養(yǎng)殖技術(shù)規(guī)范幼體培育技術(shù)（DB44/T228-2005）中描述的優(yōu)質(zhì)幼體標(biāo)準(zhǔn)，而2組和3組幼體卵黃粒的顏色偏淡，活動能力一般，只屬于一般質(zhì)量幼體標(biāo)準(zhǔn)。

圖4 不同餌料對幼體孵化率的影響

四、討論

營養(yǎng)是決定對蝦性腺發(fā)育和繁殖性狀的關(guān)鍵因素之一，在對蝦性腺發(fā)育期間如果營養(yǎng)供應(yīng)不足，對蝦性腺會停止發(fā)育。投喂雌蝦的餌料中脂類、蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、類固醇激素等營養(yǎng)成分均是影響對蝦性腺發(fā)育的重要營養(yǎng)因子，影響雌蝦卵巢發(fā)育和正常的性成熟。研究發(fā)現(xiàn)n-3、n-6系列脂肪酸，特別是DHA、EPA對卵巢和幼體的發(fā)育非常重要，通過對成熟卵巢與未成熟卵巢中多種不飽和脂肪酸的含量的比較，可發(fā)現(xiàn)成熟卵巢中的多種不飽和脂肪酸顯著增高，這些多不飽和脂肪酸還可能轉(zhuǎn)化成前列腺素，以促進(jìn)對蝦成熟與產(chǎn)卵。對蝦性腺發(fā)育過程中需提高蛋白質(zhì)的供給，以滿足卵黃蛋白的積累和相關(guān)激素及酶類物質(zhì)的合成，研究已發(fā)現(xiàn)雌蝦肝胰腺中的蛋白質(zhì)含量顯著降低，而卵巢中的蛋白質(zhì)含量顯著增加，表明雌蝦在性腺成熟過程中肝胰腺中的蛋白質(zhì)被轉(zhuǎn)移到性腺加以利用。

沙蠶、魷魚等傳統(tǒng)生物餌料對雌蝦的繁殖有較理想的效果，在雌蝦繁殖培育過程中已得到廣泛的認(rèn)可和應(yīng)用。沙蠶富含蛋白質(zhì)、多不飽和脂肪酸，Vc的含量也很多，魷魚蛋白質(zhì)含量高，且富含膽固醇，利用沙蠶與魷魚配合投喂雌蝦對促進(jìn)雌蝦性腺發(fā)育，提高雌蝦產(chǎn)卵量均能起到十分重要的作用。在本研究中，利用天然紅蟲、養(yǎng)殖青蟲和魷魚配合投喂雌蝦探究不同餌料配合對雌蝦繁殖期性腺的影響，從圖1至圖4可以看出，利用投喂1次紅蟲、3次青蟲和2次魷魚的雌蝦性腺成熟度最好，產(chǎn)卵量顯著提高，性腺再成熟周期顯著縮短，幼體孵化率差異不大但質(zhì)量明顯提高，表明天然紅蟲對促進(jìn)雌蝦性性腺發(fā)育起到至關(guān)重要的作用，這可能是天然紅蟲的營養(yǎng)成分更適宜雌蝦的攝取利用。天然紅蟲生活在自然海區(qū)，攝食營養(yǎng)全面豐富。胡園等人對天然沙蠶和養(yǎng)殖沙蠶的營養(yǎng)成分進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)天然沙蠶所含的蛋白質(zhì)高達(dá)66.22%、必需氨基酸達(dá)37.48%、EPA+DHA的含量達(dá)21.2μg/kg，且其n-3/n-6多不飽和脂肪的比例高達(dá)4.02，均遠(yuǎn)高于養(yǎng)殖沙蠶，這可能也是餌料中包含天然紅蟲會使雌蝦的產(chǎn)卵量、性腺發(fā)育等各指標(biāo)更好的原因。