商品化甲氧芐啶膠體金快檢試劑盒檢測(cè)效果 評(píng)價(jià)與分析

葉雅真，駱和東,2*

（1.廈門市食品藥品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院，福建廈門 361012；2.?？萍瘓F(tuán)（廈門）股份有限公司，福建廈門 361015）

甲氧芐啶（Trimethoprim，TMP）是一種抗菌增效劑，在獸醫(yī)臨床常與磺胺類藥物或其他抗生素聯(lián)合使用，用于治療雞白痢、禽霍亂、呼吸道繼發(fā)性細(xì)菌感染等，以降低抗菌藥用量、增強(qiáng)抗菌藥療效、降低抗菌藥殘留及減少細(xì)菌對(duì)抗菌藥的耐藥性[1-3]。甲氧芐啶的廣泛使用和不合理用藥使動(dòng)物性食品中存在藥物殘留，從而威脅人體健康。為了更有效地開展甲氧芐啶殘留的快檢監(jiān)控工作，確保食品安全[4]。本文面向社會(huì)廣泛征集符合評(píng)價(jià)驗(yàn)證方案要求的快檢產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)，參加評(píng)價(jià)驗(yàn)證，組建專家組對(duì)各品牌快檢產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)科研能力等技術(shù)實(shí)力進(jìn)行資格審查，擇優(yōu)篩選出5個(gè)品牌快檢產(chǎn)品進(jìn)入檢測(cè)能力方面的現(xiàn)場(chǎng)質(zhì)量評(píng)價(jià)環(huán)節(jié)。通過統(tǒng)一制備盲樣，由企業(yè)實(shí)驗(yàn)人員自行快檢實(shí)驗(yàn)操作的方式，對(duì)這5個(gè)品牌商品化甲氧芐啶膠體金試劑盒產(chǎn)品進(jìn)行統(tǒng)一的現(xiàn)場(chǎng)質(zhì)量評(píng)價(jià)。本文擬對(duì)這5個(gè)品牌試劑盒產(chǎn)品的假陰性率、假陽性率、相對(duì)準(zhǔn)確度等性能指標(biāo)進(jìn)行考察，為確定動(dòng)物源性食品中甲氧芐啶的快速檢測(cè)方法的研究方向提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

本次評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)使用的甲氧芐啶快速檢測(cè)試劑盒由各品牌生產(chǎn)企業(yè)自行準(zhǔn)備。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

依據(jù)《食品快速檢測(cè)方法評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（食藥監(jiān)辦科[2017]43號(hào)）[5]和《關(guān)于規(guī)范使用食品快速檢測(cè)的意見》（征求意見稿）[6]制定評(píng)價(jià)方案?！妒称钒踩珖?guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中獸藥最大殘留限量》 （GB 31650—2019）對(duì)家禽中肌肉靶組織的最大殘留限量為50 μg/kg。因此，本文考察試劑盒對(duì)甲氧芐啶的檢測(cè)限要求為50 μg/kg，并根據(jù)《食品快速檢測(cè)方法評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》設(shè)定試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)性能指標(biāo)考察要求為假陰性率應(yīng)≤5%，假陽性率應(yīng)≤15%。每家企業(yè)盲樣數(shù)均為50份，其中陽性樣和陰性樣均為20～30份。各企業(yè)自行準(zhǔn)備參加評(píng)價(jià)驗(yàn)證所必需的食品快檢設(shè)備、輔助設(shè)備、試劑及實(shí)驗(yàn)耗材，由企業(yè)實(shí)驗(yàn)人員自行進(jìn)行快檢實(shí)驗(yàn)操作、出具快檢結(jié)果。對(duì)所有快檢結(jié)果進(jìn)行匯總分析，統(tǒng)計(jì)各品牌甲氧芐啶試劑盒產(chǎn)品的假陰性率、假陽性率、相對(duì)準(zhǔn)確度等指標(biāo)。

2 結(jié)果與分析

為避免對(duì)企業(yè)造成影響，對(duì)試劑盒品牌進(jìn)行編號(hào)表示，分別為A品牌、B品牌、C品牌、D品牌和E品牌，質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果見表1和表2。質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，5個(gè)品牌產(chǎn)品的假陰性率在9.1%～25.0%，均不符合規(guī)定的假陰性率應(yīng)≤5%的考察要求，其中A品牌、B品牌和E品牌產(chǎn)品假陰性率較高，漏檢風(fēng)險(xiǎn)較高；5個(gè)品牌產(chǎn)品的假陽性率在0%～10.0%，均符合規(guī)定的假陽性率應(yīng)≤15%的考察要求。

表1 質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果匯總

表2 質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

A品牌試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果所示，A品牌試劑盒在0.5倍檢測(cè)限未出現(xiàn)假陽性，對(duì)空白基質(zhì)的快檢結(jié)果假陽性率卻高達(dá)12.0%，而且對(duì)1倍檢測(cè)限的假陰性率高達(dá)25.0%，漏檢率是5個(gè)品牌中最高的，快檢結(jié)果相對(duì)準(zhǔn)確度只有84.0%，是5個(gè)品牌試劑盒快檢結(jié)果相對(duì)準(zhǔn)確度中最低的。通過查閱各品牌試劑盒產(chǎn)品說明書，發(fā)現(xiàn)在5個(gè)品牌中，只有A品牌試劑盒為消線法膠體金快檢產(chǎn)品，其余4個(gè)品牌的判定方式均為檢測(cè)線（T線）與控制線（C線）比色法。經(jīng)過市場(chǎng)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，甲氧芐啶消線法膠體金試劑盒品牌極少，只調(diào)研到2家。根據(jù)試劑盒產(chǎn)品說明書，A品牌適用于雞肌肉靶組織的檢測(cè)，另一個(gè)品牌適用基質(zhì)為血清。A品牌試劑盒產(chǎn)品的質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果，假陽性率高可能是受甲氧芐啶的消線法膠體金快檢技術(shù)的技術(shù)瓶頸影響，或是A品牌試劑盒產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝問題所導(dǎo)致。

B品牌、C品牌、D品牌和E品牌試劑盒假陰性率分別為19.0%、11.1%、9.1%和19.2%，B品牌和D品牌假陽性率分別為3.4%和7.1%，C品牌和E品牌未出現(xiàn)假陽性情況。結(jié)果顯示，4個(gè)品牌試劑盒都存在不同程度的漏檢風(fēng)險(xiǎn)，假陰性率均不符合考察要求的≤5%，試劑盒產(chǎn)品的實(shí)際檢測(cè)靈敏度均不夠，應(yīng)該對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行優(yōu)化，降低各品牌產(chǎn)品的實(shí)際檢測(cè)限，以降低產(chǎn)品假陰性率。

3 結(jié)論

膠體金快檢試劑盒最理想的檢測(cè)效果是0和0.5倍檢測(cè)限的快檢結(jié)果為明顯的陰性（T線顏色明顯深于C線顏色），1倍及以上檢測(cè)限的快檢結(jié)果為強(qiáng)陽性（T線顏色明顯淺于C線顏色，甚至T線幾乎不顯色）。在試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)現(xiàn)場(chǎng)觀察到，雖然B品牌試劑盒產(chǎn)品的絕對(duì)靈敏度最高，但是對(duì)空白基質(zhì)的快檢，B品牌試劑盒的快檢結(jié)果為比較弱的陰性（T線顏色略深于C線顏色），試劑盒對(duì)0.5倍檢測(cè)限和1倍檢測(cè)限的識(shí)別差異不大，0.5倍檢測(cè)限為弱陰性（T線顏色與C線顏色相當(dāng)），1倍檢測(cè)限為比較弱的陽性（T線顏色略淺于C線顏色）。在降低產(chǎn)品實(shí)際檢測(cè)限后，試劑盒的假陽性率可能增高，增加誤檢風(fēng)險(xiǎn)。

因此，有必要進(jìn)行快檢方法研究，對(duì)方法進(jìn)行優(yōu)化，提高試劑盒產(chǎn)品實(shí)際檢測(cè)靈敏度，提高快檢準(zhǔn)確度，確保試劑盒產(chǎn)品的快檢監(jiān)管效果。