• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    新鮮枸杞葉中黃酮提取工藝的優(yōu)化及抗氧化性分析

    2022-05-17 07:47:38繆文玉李冠文殷孝瑩
    山西農(nóng)業(yè)科學(xué) 2022年5期
    關(guān)鍵詞:葉中提取液枸杞

    繆文玉,李冠文,殷孝瑩,秦 楠

    (1.太原城市職業(yè)技術(shù)學(xué)院 管理工程系,山西 太原 030027;2.山西中醫(yī)藥大學(xué) 中藥與食品工程學(xué)院,山西 晉中 030619)

    寧夏枸杞是中國(guó)藥典中最好的唯一藥用品種,其根、葉、花、果實(shí)均可入藥。枸杞葉(Lycium barbarumleaves)是茄科枸杞屬植物枸杞(LyciumbarbarumL.)的嫩葉,其性味苦、甘、澀,具有補(bǔ)腎益精、清熱明目、延緩衰老等功效[1]。現(xiàn)代研究表明,枸杞葉藥理作用復(fù)雜多樣,主要有抗衰老[2]、降血糖、降血脂[3-4]、抗炎鎮(zhèn)痛、抑菌、抗氧化[5-6]等作用且從枸杞葉化學(xué)成分來(lái)看,其所含活性成分有生物堿、黃酮、多糖、酚類、蛋白質(zhì)、脂肪、氨基酸、微量元素以及萜類化合物等,其中,以多糖類以及黃酮類化合物的含量較高,因而現(xiàn)代學(xué)者對(duì)枸杞葉中這2種化合物的研究較為廣泛。崔今[7]通過(guò)高效液相色譜-質(zhì)譜法(HPLC-MS法)對(duì)枸杞葉干藥材提取物進(jìn)行鑒定,研究表明,枸杞葉提取物是由11種黃酮類化合物組成,且藥理作用研究發(fā)現(xiàn)黃酮提取物可以達(dá)到顯著的降血糖效果。范艷麗等[8]的研究結(jié)果證實(shí)了枸杞葉干藥材黃酮提取物對(duì)超氧陰離子、·OH、DPPH、亞硝基以及ABTS自由基具有顯著的清除能力,因而得出黃酮提取物是天然的氧化劑的初步結(jié)論。呂海英等[9]研究發(fā)現(xiàn),黑果枸杞葉中的黃酮類化合物具有顯著的抗衰老、降血脂作用,推測(cè)可能與其中的蘆丁、槲皮素、木犀草素、異鼠李素及山奈素成分的含量息息相關(guān)。干藥材枸杞葉中富含較多活性成分且具有豐富的藥理作用,為本試驗(yàn)研究新鮮枸杞葉活性成分及抗氧化活性奠定了堅(jiān)實(shí)了理論基礎(chǔ)。

    枸杞葉黃酮類成分的提取以往大多采用有機(jī)溶劑提取法,該法存在有機(jī)溶劑消耗量大、回流時(shí)間長(zhǎng)等缺點(diǎn),而近幾年新興起的超聲波輔助酶解提取法具有耗時(shí)短、酶解速度快、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn),因此,本試驗(yàn)選用該提取法進(jìn)行研究。目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)中藥材枸杞屬枸杞的化學(xué)成分、藥理作用等研究主要集中在不同品種枸杞子以及黑果枸杞葉等,對(duì)寧夏枸杞葉研究多為干燥枸杞葉而對(duì)新鮮寧夏枸杞葉沒(méi)有相關(guān)研究。新鮮枸杞葉廉價(jià)易得、無(wú)任何前處理操作,可有效減少有效成分的損失。因此,本試驗(yàn)以新鮮寧夏枸杞葉為原材料,利用超聲波輔助酶解法手段提取枸杞葉中總黃酮,并通過(guò)BoXbenhnken設(shè)計(jì)分析得到最佳提取工藝參數(shù),在此基礎(chǔ)上初步探討新鮮枸杞葉黃酮提取液的抗氧化活性,旨在為新鮮枸杞葉的綜合利用提供理論依據(jù)。

    1 材料和方法

    1.1 試驗(yàn)材料及試劑

    新鮮枸杞葉采摘于寧夏枸杞種植基地。蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(≥98%)(上海融禾醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司);纖維素酶(鄭州宇控生物科技有限公司);無(wú)水乙醇(AR)、硫酸亞鐵(AR)、水楊酸(AR)、過(guò)硫酸鉀(AR)、30%過(guò)氧化氫(天津市天力化學(xué)試劑有限公司);硝酸鋁(AR)、亞硝酸鈉(AR)(山東西亞化學(xué)工業(yè)有限公司);氫氧化鈉(天津市東麗區(qū)南孫莊村西工業(yè)區(qū));Vc、·OH、DPPH、ABTS(純度均>99%)(北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司)。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 超聲波輔助酶解法提取黃酮化合物 將新鮮枸杞葉洗凈、干燥、粉碎,精密稱取約1.0 g枸杞葉粉末,加入16 mg纖維素酶混合均勻,加入30 mL 60%乙醇溶液后調(diào)節(jié)pH值至5.0,置于40℃水浴鍋中酶解30 min,然后將其轉(zhuǎn)移至超聲波清洗機(jī)中于超聲溫度50℃、超聲功率500 W條件下超聲提取30 min,抽濾。所得濾餅按照上述操作再次提取后合并2次濾液,最后定容至1 000 mL容量瓶中備用(圖1)。

    1.2.2 超聲波輔助酶解法的單因素試驗(yàn)

    1.2.2.1 超聲溫度對(duì)新鮮枸杞葉黃酮提取率的影響 按照1.2.1步驟操作,固定料液比1∶20、乙醇體積分?jǐn)?shù)60%、超聲功率500 W,考察不同超聲溫度(30、40、50、60、70℃)提取條件下對(duì)枸杞葉總黃酮提取率的影響。

    1.2.2.2 超聲功率對(duì)新鮮枸杞葉黃酮提取率的影響 按照1.2.1步驟操作,固定超聲溫度50℃、料液比1∶20、乙醇體積分?jǐn)?shù)60%,考察不同超聲功率(100、200、300、400、500 W)提取條件下對(duì)枸杞葉總黃酮提取率的影響。

    1.2.2.3 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)新鮮枸杞葉黃酮提取率的影響 按照1.2.1步驟操作,固定超聲溫度50℃、料液比1∶20、超聲功率500 W,考察不同乙醇體積分?jǐn)?shù)(55%、60%、65%、70%、75%)提取條件下對(duì)枸杞葉總黃酮提取率的影響。

    1.2.2.4 料液比對(duì)新鮮枸杞葉黃酮提取率的影響 按照1.2.1的步驟操作,固定超聲溫度50℃、乙醇體積分?jǐn)?shù)60%、超聲功率500 W,考察不同料液比(1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30)提取條件下對(duì)枸杞葉總黃酮提取率的影響。

    1.2.3 響應(yīng)曲面設(shè)計(jì) 按照Box-benhnken中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,以考察新鮮枸杞葉中黃酮提取率(Y)為最終目的,選定超聲溫度(A)、超聲功率(B)、乙醇體積分?jǐn)?shù)(C)、料液比(D)共4個(gè)因素進(jìn)行4因素3水平共27個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)的響應(yīng)曲面設(shè)計(jì),各因素水平如表1所示。

    表1 響應(yīng)曲面試驗(yàn)設(shè)計(jì)的因素與水平Tab.1 Design factors and level s of response surface test

    1.2.4 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作及黃酮提取率的計(jì)算 參照丁建海等[10]的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線建立方法,在400~600 nm波長(zhǎng)下確定黃酮化合物的最大吸收波長(zhǎng),在最大吸收波長(zhǎng)下繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線。準(zhǔn)確量取新鮮枸杞葉黃酮提取液1 mL,按照蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線操作方法測(cè)定吸光度A值,計(jì)算黃酮提取率。

    式中,W表示新鮮枸杞葉中黃酮提取率(%);C表示新鮮枸杞葉黃酮提取液的質(zhì)量濃度(mg/mL);V1表示新鮮枸杞葉黃酮提取液的體積(mL);V2表示稀釋倍數(shù);m表示藥材取樣量(mg)。

    1.2.5 黃酮提取液的抗氧化性研究 按上述最佳制備工藝所得的黃酮提取液濃縮至恒質(zhì)量,稱取5 mg放于燒杯中,用適量65%乙醇溶解后轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中,定容至刻度線即可得到5 mg/mL的樣品溶液。取3 mL該樣品溶液于4個(gè)不同容量瓶中用65%乙醇分別稀釋至15.0、7.5、5.0、3.75 mL,即可得到質(zhì)量濃度分別為1、2、3、4 mg/mL的樣品溶液。將上述5個(gè)不同質(zhì)量濃度樣品溶液采用段亞云等[11]的方法進(jìn)行DPPH自由基的清除活性測(cè)定;采用鄭朝華等[12]的方法進(jìn)行OH自由基的清除活性測(cè)定;采用何蘭香等[13]的方法進(jìn)行ABTS自由基的清除活性測(cè)定。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    本試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0和Design-Expert V 8.0.6統(tǒng)計(jì)軟件分析,應(yīng)用最小差異顯著法(LSD)進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

    試驗(yàn)結(jié)果(圖2)顯示,新鮮枸杞葉黃酮提取液的適宜檢測(cè)波長(zhǎng)為510 nm,且當(dāng)蘆丁質(zhì)量濃度在0~0.6 mg/mL時(shí),濃度(X)與吸光度值(Y)的線性相關(guān)程度最好,線性方程為y=14.684x+0.028 1(R2=0.990 1),R2接近于1,表明在此區(qū)間y與x表現(xiàn)出較好的等比增長(zhǎng)關(guān)系,適宜用此方程式進(jìn)行后續(xù)樣品濃度的換算。

    2.2 單因素試驗(yàn)結(jié)果

    2.2.1 超聲溫度對(duì)新鮮枸杞葉黃酮提取率的影響 由圖3可知,超聲溫度的升高造成黃酮類化合物提取率呈現(xiàn)出急速上升后緩慢下降的現(xiàn)象,超聲溫度50℃時(shí)所對(duì)應(yīng)的黃酮提取率最高(4.5%)。高于50℃后提取率下降,推測(cè)可能是因?yàn)槌暅囟瓤梢詫㈣坭饺~細(xì)胞破碎增強(qiáng)空化作用,加速化學(xué)成分的溶出;當(dāng)超聲溫度高于一定程度后,由于高溫導(dǎo)致空化作用減弱阻礙了黃酮化學(xué)成分的溶出[14]。因此,選擇超聲溫度50℃進(jìn)入后續(xù)試驗(yàn)。

    2.2.2 料液比對(duì)新鮮枸杞葉黃酮提取率的影響料液比對(duì)化學(xué)成分的溶出具有重要作用,由圖4可知,新鮮枸杞葉中黃酮提取率隨著料液比的增大表現(xiàn)為先上升后逐漸下降趨勢(shì),在料液比為1∶25時(shí),黃酮提取率達(dá)到最高(3.7%),而此料液比后提取率下降的原因可能是由于原材料用量固定的情況下溶劑用量倍增造成新鮮枸杞葉中黃酮類化合物溶出率達(dá)到飽和,而其易溶于乙醇化學(xué)成分的逐步溶出影響了黃酮的分離[15]。因此,選擇料液比1∶25進(jìn)入后續(xù)試驗(yàn)。

    2.2.3 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)新鮮枸杞葉黃酮提取率的影響 由圖5可知,不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇對(duì)醇溶性物質(zhì)的溶出影響程度不同。新鮮枸杞葉黃酮提取率隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的升高表現(xiàn)出先上升后下降的趨勢(shì),并于體積分?jǐn)?shù)65%乙醇下達(dá)到最高(3.8%),此后提取率均低于此值。預(yù)測(cè)造成黃酮提取率下降的原因是乙醇體積分?jǐn)?shù)過(guò)高導(dǎo)致更多脂溶性物質(zhì)析出從而降低了目標(biāo)物的溶出率[16-17]。因此,選用65%乙醇進(jìn)入后續(xù)試驗(yàn)。

    2.2.4 超聲功率對(duì)新鮮枸杞葉黃酮提取率的影響 從圖6可以看出,超聲功率對(duì)黃酮類化合物提取率的影響程度較小,功率小于300 W時(shí)黃酮提取率趨于平穩(wěn);當(dāng)功率達(dá)到300~400 W時(shí)黃酮類化合物提取率有效升高最終達(dá)到臨界值(3.3%);超聲功率大于400 W后新鮮枸杞葉黃酮提取率驟然下降,其原因可能是由于功率在100~300 W時(shí)枸杞葉細(xì)胞內(nèi)黃酮受熱效應(yīng)影響而加速溶解,當(dāng)功率高于400 W時(shí),溫度隨之升高造成乙醇部分揮發(fā)影響了總黃酮的溶出[18]。因此,選用超聲功率400 W進(jìn)入后續(xù)試驗(yàn)。

    2.3 提取工藝的優(yōu)化

    2.3.1 響應(yīng)曲面分析及優(yōu)化 超聲溫度(A)、超聲功率(B)、乙醇體積分?jǐn)?shù)(C)、料液比(D)對(duì)黃酮提取率(Y)影響的具體數(shù)據(jù)進(jìn)行多元二次回歸,得到回歸模型方程:Y=5.59+0.35A-0.47B+0.68C+0.098D-0.41AB+0.48AC-0.16AD-0.67BC-1.21BD-0.73CD+0.13A2-0.33B2+0.051C2+0.17D2。

    根據(jù)表2中P值大小得出,對(duì)黃酮提取率的影響因素由大到小依次為C>B>A>D。模型中交互項(xiàng)AB、AC、BC、BD、CD對(duì)黃酮提取率均產(chǎn)生顯著影響(P<0.05),且交互項(xiàng)BC、BD、CD達(dá)到極顯著水平(P<0.01),其中,失擬誤差P值為0.981 0>0.05,表明多元二次回歸模擬方程可以充分說(shuō)明各因素與提取率之間的函數(shù)關(guān)系,模型不必再選擇更高級(jí)別函數(shù)。相關(guān)系數(shù)R2=0.964 8與R2Adj=0.929 7趨近于100%,代表方程模型與試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)契合度較高。模型的P<0.001,證實(shí)模型與試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)擬合效果絕佳,可以用于新鮮枸杞葉中黃酮提取率的理論預(yù)測(cè)。

    表2 模型的方差分析Tab.2 Variance analysis of the model

    響應(yīng)曲面設(shè)計(jì)建立的曲面模型可以對(duì)影響黃酮提取率的單因素以及兩因素之間的交互作用作出評(píng)價(jià),從而確立最佳水平范圍。3D響應(yīng)曲面圖中不同的傾斜度、顏色及整體趨勢(shì)可以反映出兩坐標(biāo)軸對(duì)應(yīng)的因素之間對(duì)響應(yīng)值即黃酮提取率的影響程度[19]。由圖7可知,BC、BD、CD交互作用曲面傾斜度相比其他較高,且曲面顏色可以直觀看到呈現(xiàn)加深趨勢(shì),而AD交互作用曲面傾斜度一般、顏色無(wú)明顯變化,說(shuō)明BC、BD、CD兩者之間交互作用較顯著,表現(xiàn)為響應(yīng)值變化趨勢(shì)劇烈增加。圖7所示的各響應(yīng)面形態(tài)各異且頂點(diǎn)都在試驗(yàn)水平范圍內(nèi),說(shuō)明黃酮提取率最佳優(yōu)化條件在試驗(yàn)的水平范圍內(nèi)。

    2.3.2 驗(yàn)證試驗(yàn) 考慮到實(shí)際操作的可行性,數(shù)據(jù)分析所得最佳提取工藝(超聲溫度58.18℃、超聲功率320.69 W、料液比1∶28.96、乙醇體積分?jǐn)?shù)67.22%)經(jīng)調(diào)整后修正為60℃、超聲功率300 W、料液比1∶30、乙醇體積分?jǐn)?shù)65%,經(jīng)過(guò)試驗(yàn)驗(yàn)證后得到新鮮枸杞葉中黃酮實(shí)際提取率為7.742 1%,與理論值(7.706 1%)相差0.036百分點(diǎn),因此,試驗(yàn)結(jié)果表明響應(yīng)曲面設(shè)計(jì)所得模型的擬合度較高、產(chǎn)生的誤差較小,用模型確定的方程式預(yù)測(cè)新鮮枸杞葉中黃酮提取率的方法可信度很高。

    2.4 黃酮提取液的抗氧化性

    2.4.1 新鮮枸杞葉黃酮提取液對(duì)DPPH自由基的清除能力 DPPH[20-21]作為具有單一電子、穩(wěn)定的自由基,在有機(jī)溶劑中呈現(xiàn)特殊的紫色反應(yīng),而抗氧化劑的出現(xiàn)會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生的紫色變淺,從而發(fā)生由于強(qiáng)抗氧化性而造成吸光度值減小的現(xiàn)象。從圖8可以看出,黃酮提取液質(zhì)量濃度升高,造成清除率逐漸增大,當(dāng)質(zhì)量濃度在3~5 mg/mL時(shí)清除率趨于平穩(wěn),在5 mg/mL時(shí)清除率達(dá)86.48%,可以看出,此樣液對(duì)DPPH自由基具有一定的消除作用,且最終受濃度的影響會(huì)變小。

    2.4.2 新鮮枸杞葉黃酮提取液對(duì)·OH自由基的清除能力 Fe2+、H2O2與水楊酸發(fā)生反應(yīng)所得產(chǎn)物·OH自由基于510 nm波長(zhǎng)下有特殊吸收,當(dāng)樣品中存在可與·OH自由基反應(yīng)的物質(zhì)時(shí),由于有色化合物產(chǎn)率減少,從而造成吸光度值降低,并可得出樣品抗氧化活性增強(qiáng)的結(jié)論[22]。從圖9可以看出,清除率隨著樣液質(zhì)量濃度的升高而逐漸增大,在5 mg/mL時(shí)清除率達(dá)80.36%,以上結(jié)果顯示,不同質(zhì)量濃度的新鮮枸杞葉提取液對(duì)·OH自由基有近似呈正相關(guān)線性關(guān)系的消除作用。

    2.4.3 新鮮枸杞葉黃酮提取液對(duì)ABTS自由基的清除能力 供試品對(duì)ABTS自由基有清除活性的基本思路為:K2S2O8與ABTS反應(yīng)生成穩(wěn)定的ABTS+,供試品由于含抗氧化物質(zhì)可與ABTS+反應(yīng)得到最終產(chǎn)物,因此,使原溶液褪色造成吸光度值降低[23]。由圖10可知,隨著新鮮枸杞葉的提取液質(zhì)量濃度逐步升高,對(duì)ABTS自由基的清除能力呈現(xiàn)平穩(wěn)-輕微下降-迅速上升的趨勢(shì)。出現(xiàn)輕微下降的原因可能是供試品質(zhì)量濃度太低導(dǎo)致吸光度數(shù)據(jù)差距較小,此差距低于儀器檢測(cè)下限,造成儀器檢測(cè)是近似認(rèn)為無(wú)顯著差異。當(dāng)達(dá)到一定質(zhì)量濃度后,由于質(zhì)量濃度差距增大導(dǎo)致吸光度上升。結(jié)果顯示,黃酮提取液質(zhì)量濃度在5 mg/mL時(shí)清除率可達(dá)67.06%,證實(shí)該提取液對(duì)ABTS自由基有消除效果且與質(zhì)量濃度高低呈正相關(guān),因此,新鮮枸杞葉黃酮提取液在一定程度上具有抗氧化能力。

    3 結(jié)論與討論

    超聲波可以產(chǎn)生高速、強(qiáng)烈的空化效應(yīng)和攪拌作用,結(jié)合提取溶劑的滲透作用可以達(dá)到破壞中藥材植物的細(xì)胞壁、有效加大溶劑與目標(biāo)物的接觸面積的效果,從而縮短化學(xué)成分的溶出時(shí)間,提高有效成分的提取率。超聲波提取法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于各中藥材活性成分的提取方式,為活性成分的溶出提供了有利的后天條件。張鷹等[24]采用超聲波提取法得到枸杞葉中黃酮提取率為5.62%,小于本試驗(yàn)新鮮枸杞葉黃酮提取率(7.742 1%),造成此現(xiàn)象的原因可能是本試驗(yàn)采用了超聲波輔助酶解方法。

    隨著酶解法在提取手段上突顯出的優(yōu)勢(shì),酶解提取、超聲波輔助酶解提取法等新型提取方式隨之產(chǎn)生,且極大提高了化學(xué)成分的提取率、增強(qiáng)了道地藥材的生物利用度。然而由于不同酶的作用不同,產(chǎn)生的效果也不盡相同。陳書明[25]研究發(fā)現(xiàn),不同水解酶對(duì)杜仲葉總黃酮的提取率影響效果依次為蛋白酶>單寧酶>纖維素酶>果膠酶。而戢得蓉等[26]等對(duì)比不同水解酶對(duì)雪蓮果葉總黃酮提取率的影響,得出各種水解酶的提取率依次為纖維素酶>果膠酶>蛋白酶。因此,可以看出纖維素酶的利用度最好。本試驗(yàn)選用纖維素酶進(jìn)行酶解的原因除利用度較好外,還考慮到纖維素酶的特性。纖維素酶是專門用于降解纖維素的一種非單體的復(fù)合酶,是具有共同作用的多樣化酶系,其中富含的酶活力越高產(chǎn)生的酶解產(chǎn)物越徹底[27-28]。本研究前期對(duì)比了多家公司生產(chǎn)的纖維素酶,最終選定酶活力相對(duì)較好的鄭州宇控生物科技有限公司生產(chǎn)的纖維素酶?;诖松蟽?yōu)點(diǎn),本研究選用纖維素酶破壞植物細(xì)胞壁,利用超聲波輔助酶解的優(yōu)勢(shì)使細(xì)胞內(nèi)的活性成分和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可以大幅度溶出,從而達(dá)到本試驗(yàn)?zāi)康摹?/p>

    本試驗(yàn)結(jié)果表明,超聲波輔助酶解法提取新鮮枸杞葉黃酮的手段是切實(shí)可行的,經(jīng)響應(yīng)曲面法分析優(yōu)化后得到新鮮枸杞葉黃酮的最佳提取條件為:超聲溫度60℃、超聲功率300 W、料液比1∶30、乙醇體積分?jǐn)?shù)65%,在此條件下,黃酮實(shí)際提取率為7.742 1%。此外,由抗氧化活性數(shù)據(jù)可以得出,最佳工藝條件制備所得的不同新鮮枸杞葉黃酮提取液質(zhì)量濃度對(duì)各項(xiàng)自由基有不同的清除效果。當(dāng)提取液質(zhì)量濃度為5 mg/mL時(shí),DPPH、·OH和ABTS自由基對(duì)應(yīng)的清除率分別為86.48%、80.36%、67.06%??傊?,采用超聲輔助酶解提取得到新鮮枸杞葉中黃酮提取率較高,對(duì)進(jìn)一步研究其功效具有深遠(yuǎn)意義。

    猜你喜歡
    葉中提取液枸杞
    枸杞
    是酸是堿?黑枸杞知道
    學(xué)與玩(2022年2期)2022-05-03 09:46:45
    采枸杞
    亞麻木脂素提取液滲透模型建立與驗(yàn)證
    枸杞到底是怎么養(yǎng)生的?
    穿山龍?zhí)崛∫翰煌兓椒ǖ谋容^
    中成藥(2018年2期)2018-05-09 07:20:06
    山香圓葉提取液純化工藝的優(yōu)化
    中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:28
    木菠蘿葉中水溶性黃酮苷的分離、鑒定和測(cè)定
    中成藥(2016年4期)2016-05-17 06:07:52
    正交法優(yōu)選杜仲葉中綠原酸提取工藝
    超聲強(qiáng)化提取橄欖葉中藥用有效成分的研究
    食品工程(2015年3期)2015-12-07 10:20:51
    国产成人精品久久久久久| 青春草亚洲视频在线观看| 嫩草影院精品99| 日本av手机在线免费观看| 一级毛片我不卡| 久久久久久久午夜电影| 在线观看一区二区三区| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 最后的刺客免费高清国语| 一级av片app| 久热这里只有精品99| 亚洲欧美日韩东京热| 男女啪啪激烈高潮av片| 日本wwww免费看| av在线天堂中文字幕| 免费观看的影片在线观看| 成人二区视频| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲第一区二区三区不卡| 少妇丰满av| 国产亚洲最大av| 国产亚洲av嫩草精品影院| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲电影在线观看av| 日韩av在线免费看完整版不卡| 最近最新中文字幕免费大全7| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 啦啦啦啦在线视频资源| 在线观看国产h片| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 国产极品天堂在线| av在线蜜桃| 亚洲欧美日韩东京热| av天堂中文字幕网| 寂寞人妻少妇视频99o| 日韩人妻高清精品专区| 神马国产精品三级电影在线观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 少妇人妻 视频| 亚洲自偷自拍三级| 听说在线观看完整版免费高清| 免费观看性生交大片5| 国产黄片视频在线免费观看| 啦啦啦在线观看免费高清www| 欧美bdsm另类| 日日啪夜夜爽| 久久久久久久国产电影| 欧美丝袜亚洲另类| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲成人久久爱视频| 国产精品久久久久久精品古装| 中文字幕免费在线视频6| 亚洲天堂国产精品一区在线| 成年女人在线观看亚洲视频 | 又大又黄又爽视频免费| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲精品影视一区二区三区av| 六月丁香七月| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 九草在线视频观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 黄色怎么调成土黄色| 青春草国产在线视频| 国产又色又爽无遮挡免| 男人舔奶头视频| 成人特级av手机在线观看| 狂野欧美激情性bbbbbb| av专区在线播放| av在线蜜桃| 国产成人精品婷婷| 99热6这里只有精品| 成人午夜精彩视频在线观看| 免费看a级黄色片| 我要看日韩黄色一级片| 成人二区视频| 精品酒店卫生间| 3wmmmm亚洲av在线观看| 精品久久久精品久久久| 欧美潮喷喷水| 街头女战士在线观看网站| 99九九线精品视频在线观看视频| 亚洲精品国产av蜜桃| 国产毛片a区久久久久| 视频区图区小说| 在线观看免费高清a一片| 免费黄网站久久成人精品| 成年版毛片免费区| 777米奇影视久久| 久久久色成人| 国产成人a区在线观看| 国产精品国产av在线观看| 精品一区二区三卡| 精品午夜福利在线看| 一级毛片电影观看| 亚洲国产色片| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 欧美激情国产日韩精品一区| 久久久久久久久久人人人人人人| 成人毛片60女人毛片免费| 中文欧美无线码| 日韩中字成人| 久久久久久久午夜电影| 精品人妻熟女av久视频| 国产探花在线观看一区二区| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 亚洲精品日韩av片在线观看| 久久影院123| 97热精品久久久久久| 欧美3d第一页| 久热这里只有精品99| 亚洲人成网站在线观看播放| 全区人妻精品视频| 久久99蜜桃精品久久| 欧美精品国产亚洲| 久久97久久精品| 国产精品伦人一区二区| 一级毛片aaaaaa免费看小| 永久网站在线| 精品国产三级普通话版| 欧美国产精品一级二级三级 | 91精品一卡2卡3卡4卡| 亚洲丝袜综合中文字幕| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 精品人妻偷拍中文字幕| 日韩伦理黄色片| 啦啦啦在线观看免费高清www| 97热精品久久久久久| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲人成网站在线播| 国产淫语在线视频| 亚洲最大成人中文| 亚洲av日韩在线播放| 成人黄色视频免费在线看| 日韩大片免费观看网站| 国产黄片视频在线免费观看| 国产精品99久久99久久久不卡 | a级毛片免费高清观看在线播放| 综合色av麻豆| 欧美成人a在线观看| av女优亚洲男人天堂| av在线app专区| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 少妇人妻 视频| 亚洲最大成人手机在线| 麻豆成人av视频| 最新中文字幕久久久久| 丝袜脚勾引网站| 日韩在线高清观看一区二区三区| 日本wwww免费看| 好男人在线观看高清免费视频| 亚洲精品一二三| 亚洲精品成人久久久久久| 六月丁香七月| 亚洲欧美成人精品一区二区| 亚洲国产精品专区欧美| 99热全是精品| 亚洲成色77777| 国产亚洲91精品色在线| 国产精品久久久久久久久免| 身体一侧抽搐| 色播亚洲综合网| 日本一本二区三区精品| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产精品久久久久久av不卡| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 一区二区av电影网| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 久久久久国产网址| 亚洲av福利一区| 99热6这里只有精品| 色综合色国产| 欧美国产精品一级二级三级 | 狂野欧美激情性bbbbbb| 大陆偷拍与自拍| 有码 亚洲区| 极品教师在线视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 精品一区在线观看国产| 免费黄网站久久成人精品| 两个人的视频大全免费| 精品少妇久久久久久888优播| 亚洲av在线观看美女高潮| 久久久久久九九精品二区国产| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 国产有黄有色有爽视频| 国产黄片视频在线免费观看| 一级毛片aaaaaa免费看小| av免费观看日本| 日本一二三区视频观看| 91狼人影院| av免费在线看不卡| 男人狂女人下面高潮的视频| 久久久久久九九精品二区国产| 91在线精品国自产拍蜜月| 精品久久久噜噜| 国产精品偷伦视频观看了| 成人无遮挡网站| 秋霞伦理黄片| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲精品日本国产第一区| 久久久久久久久久成人| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 色网站视频免费| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产久久久一区二区三区| 午夜福利网站1000一区二区三区| 日本爱情动作片www.在线观看| 天堂网av新在线| 亚洲欧美日韩无卡精品| 人妻少妇偷人精品九色| 99精国产麻豆久久婷婷| 深爱激情五月婷婷| av在线app专区| av在线观看视频网站免费| 好男人视频免费观看在线| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 韩国av在线不卡| h日本视频在线播放| 久久精品综合一区二区三区| 涩涩av久久男人的天堂| 精华霜和精华液先用哪个| 久久久久网色| 高清午夜精品一区二区三区| 亚洲av一区综合| 99热这里只有是精品50| 精品国产乱码久久久久久小说| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 又爽又黄无遮挡网站| 亚洲国产高清在线一区二区三| 深爱激情五月婷婷| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 日韩 亚洲 欧美在线| av福利片在线观看| 男女国产视频网站| 亚洲三级黄色毛片| 又大又黄又爽视频免费| 亚洲成人一二三区av| 午夜福利网站1000一区二区三区| 精品久久久精品久久久| 白带黄色成豆腐渣| 久久综合国产亚洲精品| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲精品aⅴ在线观看| 激情五月婷婷亚洲| 午夜精品一区二区三区免费看| 少妇人妻一区二区三区视频| 狂野欧美激情性bbbbbb| 1000部很黄的大片| 美女cb高潮喷水在线观看| 欧美人与善性xxx| 日韩av免费高清视频| 亚洲图色成人| 在线观看一区二区三区| 嘟嘟电影网在线观看| 日本黄大片高清| 午夜福利视频精品| 尾随美女入室| 日韩强制内射视频| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 精品人妻视频免费看| 水蜜桃什么品种好| 亚洲av日韩在线播放| 性插视频无遮挡在线免费观看| 中文资源天堂在线| 欧美另类一区| 亚洲丝袜综合中文字幕| 在线观看三级黄色| 又爽又黄a免费视频| 亚洲欧美精品专区久久| 久久精品国产亚洲网站| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 六月丁香七月| 成人免费观看视频高清| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 久久久欧美国产精品| 亚洲精品色激情综合| 中文字幕免费在线视频6| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 精品人妻熟女av久视频| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲色图综合在线观看| 欧美激情国产日韩精品一区| 嫩草影院精品99| 亚洲三级黄色毛片| 777米奇影视久久| 国产在线一区二区三区精| 亚洲自拍偷在线| 黄色视频在线播放观看不卡| 成人毛片60女人毛片免费| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 国产一区二区在线观看日韩| 久热久热在线精品观看| 欧美日韩视频精品一区| 韩国高清视频一区二区三区| 免费高清在线观看视频在线观看| 男人爽女人下面视频在线观看| av天堂中文字幕网| 精品久久久久久久末码| 国产精品.久久久| 我的女老师完整版在线观看| 最近2019中文字幕mv第一页| 中文字幕av成人在线电影| 一本一本综合久久| 身体一侧抽搐| 久久久久网色| 永久免费av网站大全| 一级毛片我不卡| 99久久九九国产精品国产免费| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 久久精品国产自在天天线| 国产视频内射| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 免费在线观看成人毛片| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 99热全是精品| 一区二区三区精品91| 51国产日韩欧美| 大话2 男鬼变身卡| 亚洲精品国产av成人精品| 亚洲成色77777| 国产成人免费无遮挡视频| 久久精品国产亚洲av涩爱| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| av专区在线播放| 啦啦啦在线观看免费高清www| 观看免费一级毛片| 爱豆传媒免费全集在线观看| 免费少妇av软件| 一本色道久久久久久精品综合| 欧美极品一区二区三区四区| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 色视频www国产| 男女边摸边吃奶| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产乱人视频| 最近的中文字幕免费完整| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 久久久久精品性色| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲av免费高清在线观看| 国产av码专区亚洲av| 嫩草影院入口| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲高清免费不卡视频| 色网站视频免费| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 欧美激情久久久久久爽电影| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 大香蕉久久网| 欧美成人一区二区免费高清观看| 在线a可以看的网站| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 日韩亚洲欧美综合| 亚洲av日韩在线播放| 一本一本综合久久| 午夜福利高清视频| 少妇 在线观看| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 免费播放大片免费观看视频在线观看| 国产久久久一区二区三区| 亚洲美女视频黄频| 亚洲国产精品国产精品| 97超视频在线观看视频| 精品视频人人做人人爽| 国产视频首页在线观看| 在线播放无遮挡| 久久影院123| 尾随美女入室| 国产高清有码在线观看视频| 久久女婷五月综合色啪小说 | 免费看光身美女| 日韩成人av中文字幕在线观看| 亚洲无线观看免费| 国产黄片视频在线免费观看| 色综合色国产| 亚洲精品影视一区二区三区av| 久久女婷五月综合色啪小说 | 亚洲国产日韩一区二区| 天天躁日日操中文字幕| 最近中文字幕2019免费版| 最后的刺客免费高清国语| 国产精品久久久久久久电影| 五月天丁香电影| 91久久精品电影网| 久久久久性生活片| 国产真实伦视频高清在线观看| 免费看av在线观看网站| 日韩伦理黄色片| 亚洲美女搞黄在线观看| 亚洲av男天堂| 国产免费又黄又爽又色| 精品一区在线观看国产| 内射极品少妇av片p| 国精品久久久久久国模美| 黄色配什么色好看| videossex国产| 国产有黄有色有爽视频| 国产人妻一区二区三区在| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 秋霞在线观看毛片| 精品人妻视频免费看| 中文字幕制服av| 少妇人妻 视频| av在线app专区| 国产一区亚洲一区在线观看| 少妇的逼水好多| 国产高清国产精品国产三级 | 亚洲欧美日韩无卡精品| 日本三级黄在线观看| 99久久精品热视频| 成人综合一区亚洲| 久久影院123| 免费看光身美女| 男男h啪啪无遮挡| 国产男女超爽视频在线观看| 久久国内精品自在自线图片| 91久久精品电影网| 干丝袜人妻中文字幕| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 日本三级黄在线观看| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 精品一区二区三卡| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产一区二区三区综合在线观看 | 免费在线观看成人毛片| 欧美精品一区二区大全| 亚洲精品久久午夜乱码| 在线观看美女被高潮喷水网站| 大香蕉久久网| 丰满乱子伦码专区| 夜夜爽夜夜爽视频| 日韩三级伦理在线观看| 免费黄频网站在线观看国产| 草草在线视频免费看| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 午夜爱爱视频在线播放| av在线蜜桃| 亚洲色图综合在线观看| 久久久久久久久久久丰满| 亚洲精品视频女| 色播亚洲综合网| 尾随美女入室| 亚洲自偷自拍三级| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 一区二区三区精品91| 亚洲成人久久爱视频| 日本-黄色视频高清免费观看| 六月丁香七月| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 国产亚洲最大av| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 美女国产视频在线观看| 国产91av在线免费观看| 亚洲成人中文字幕在线播放| 少妇熟女欧美另类| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲成人av在线免费| 日日摸夜夜添夜夜爱| 欧美激情国产日韩精品一区| 永久免费av网站大全| 亚洲欧美清纯卡通| 男女啪啪激烈高潮av片| 欧美极品一区二区三区四区| 日本午夜av视频| 老女人水多毛片| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 中文资源天堂在线| av国产久精品久网站免费入址| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 免费高清在线观看视频在线观看| 免费黄网站久久成人精品| 国产精品人妻久久久影院| 久久久精品免费免费高清| 69人妻影院| 亚洲国产高清在线一区二区三| 在线免费观看不下载黄p国产| 欧美bdsm另类| 国产探花在线观看一区二区| 日本av手机在线免费观看| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 最近2019中文字幕mv第一页| 在线观看一区二区三区| 国产淫语在线视频| 黄色怎么调成土黄色| 九九在线视频观看精品| 少妇熟女欧美另类| 亚洲伊人久久精品综合| 日韩一区二区视频免费看| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 国产精品一区二区在线观看99| 简卡轻食公司| 在线观看一区二区三区| 美女被艹到高潮喷水动态| 综合色丁香网| 国产午夜福利久久久久久| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲av成人精品一二三区| 国产免费又黄又爽又色| 亚洲精品久久午夜乱码| 寂寞人妻少妇视频99o| 少妇 在线观看| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 秋霞伦理黄片| 在线观看免费高清a一片| 91久久精品电影网| 亚洲精品国产av蜜桃| 777米奇影视久久| 内射极品少妇av片p| 久久国内精品自在自线图片| 91aial.com中文字幕在线观看| 最近最新中文字幕大全电影3| 久久久精品欧美日韩精品| 成人免费观看视频高清| 日韩 亚洲 欧美在线| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产色爽女视频免费观看| 嫩草影院精品99| 在线a可以看的网站| 国产中年淑女户外野战色| 99久久精品热视频| kizo精华| 最近手机中文字幕大全| 亚洲自拍偷在线| 99热这里只有是精品50| 精品少妇久久久久久888优播| 国产免费福利视频在线观看| 久热久热在线精品观看| 高清av免费在线| 欧美激情久久久久久爽电影| 午夜爱爱视频在线播放| 一区二区av电影网| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 一区二区三区免费毛片| 国产精品国产三级专区第一集| 国产精品久久久久久久久免| 一级片'在线观看视频| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲国产精品成人久久小说| 视频区图区小说| 少妇的逼水好多| 成人无遮挡网站| 国产黄频视频在线观看| 久久久a久久爽久久v久久| 观看美女的网站| 在线看a的网站| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 色综合色国产| 狂野欧美激情性bbbbbb| 日日撸夜夜添| 国产伦在线观看视频一区| 热99国产精品久久久久久7| 黄片无遮挡物在线观看| 国产色婷婷99| 亚洲色图综合在线观看| 男女啪啪激烈高潮av片| av在线app专区| 综合色丁香网| 91久久精品电影网| 直男gayav资源| 99九九线精品视频在线观看视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 久热久热在线精品观看| 男女边吃奶边做爰视频| 大陆偷拍与自拍| 免费看av在线观看网站| 高清av免费在线| 一个人看的www免费观看视频| 韩国av在线不卡| 黑人高潮一二区| 黄色一级大片看看| 在线免费观看不下载黄p国产| 色吧在线观看| 国产精品99久久久久久久久| 亚洲国产色片| 亚洲国产精品专区欧美| 亚洲在久久综合| 乱系列少妇在线播放| 亚洲综合色惰| 免费看光身美女| 亚洲人与动物交配视频| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲人与动物交配视频| 成人国产av品久久久| 国精品久久久久久国模美| 久久精品人妻少妇| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 天美传媒精品一区二区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 别揉我奶头 嗯啊视频| 中国国产av一级| 麻豆久久精品国产亚洲av| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 激情 狠狠 欧美| 免费观看在线日韩| 国产91av在线免费观看| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 1000部很黄的大片| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 校园人妻丝袜中文字幕| 日韩av不卡免费在线播放| 观看免费一级毛片| 91久久精品国产一区二区成人| 只有这里有精品99|