櫻桃砧木吉塞拉6 號快繁體系建立

王 淼，趙 慧，王 媚，安 冬，劉智強

（大連市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)發(fā)展服務(wù)中心，遼寧大連 116036）

吉塞拉系列（Gisela）櫻桃砧木源于德國Justus Liebig大學(xué)果樹研究所，是將灰毛葉櫻桃（Prunus canescens L.）和酸櫻桃（Prunus cerasus L.）進行種間雜交培育而成的三倍體雜種[1]。吉塞拉系列櫻桃砧木是目前國內(nèi)外普遍認(rèn)為的最優(yōu)良的櫻桃砧木，吉塞拉6 號（簡稱G6）具有矮化性、早果性、早豐產(chǎn)、耐澇、抗病、土壤適應(yīng)能力強等優(yōu)點，與大多數(shù)甜櫻桃嫁接親和[2]，作為早熟品種的矮化櫻桃砧木，擴大種植規(guī)?？蓛?yōu)化種植產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)、提高市場供應(yīng)，具有極高的經(jīng)濟效益和社會效益[3]。嫁接繁殖的方式可以顯著提高櫻桃的經(jīng)濟效益，因此選擇并培育優(yōu)良的櫻桃砧木具有非常重要的意義。常規(guī)條件下，吉塞拉系列大櫻桃矮化砧木存在繁殖困難的問題，采用分株繁殖速度較慢，扦插成活率低。研究該砧木叢生芽的誘導(dǎo)、繼代、生根以及煉苗與移栽方面的組培快繁技術(shù)，旨在為大規(guī)模、快速生產(chǎn)該砧木組培苗提供理論和實踐依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗材料。櫻桃砧木吉塞拉6 號（G6）一年生枝條。

1.1.2 試驗試劑。培養(yǎng)基各藥品均為市售分析純和生化試劑。

1.2 方法

1.2.1 櫻桃外植體脫毒及增殖培養(yǎng)基篩選。取G6 一年生枝條，用清水沖洗干凈，剪成1～2 cm 的莖段，在75%的酒精中浸泡30 s，用0.1 HgCl2消毒10 min，無菌水沖洗3次，接種于增殖培養(yǎng)基上。每處理6 瓶，每瓶接種4 個莖尖。培養(yǎng)基以MS 為基本培養(yǎng)基，附加不同濃度和不同種類的植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，誘導(dǎo)約60 d 后，統(tǒng)計分化率、增殖倍數(shù)。

1.2.2 壯苗培養(yǎng)基篩選。當(dāng)不定芽長滿瓶時，將吉塞拉6號大櫻桃砧木的芽從培養(yǎng)瓶中取出，去除老化組織，進行切割，接于壯苗培養(yǎng)基中。以MS 培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，試驗不同濃度的6-BA、NAA、IBA 對材料平均高度的影響，每個處理6 瓶。

1.2.3 生根培養(yǎng)基篩選。選取苗高在1.5 cm 以上的健壯嫩苗，分別加入NAA 0.8 g/L、IBA 0.3 g/L+NAA 0.3 g/L、IAA 0.3 g/L+6BA 0.5 g/L+IBA 0.5 g/L +活性炭0.5 g/L 3種生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)。暗培養(yǎng)5 d 后，再置于正常的光照條件下進行培養(yǎng)。每處理30 株，40 d 后調(diào)查生根率和單株根數(shù)。

1.2.4 項目測定及方法。

分化率（%）=（已分化的外植體數(shù)/接種外植體總數(shù)）×100。

增殖系數(shù)=瓶苗在一個周期內(nèi)形成的有效苗數(shù)/接種苗數(shù)

1.2.5 數(shù)據(jù)處理。采用SPSS 軟件對數(shù)據(jù)進行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 櫻桃外植體脫毒及增殖培養(yǎng)基篩選

G6 外植體在6 號培養(yǎng)基上增殖能力最強，繁殖系數(shù)達3.4，且試管苗生長旺盛，葉片翠綠，玻璃化現(xiàn)象較少，試管苗莖尖褐化、枯死明顯得到抑制（圖1）；4 號、5 號培養(yǎng)基上增殖能力較強，增殖系數(shù)分別達2.9、3.0，生長情況較好；1 號和2 號培養(yǎng)基上增殖能力較差，且隨著培養(yǎng)時間延長，易出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象，葉片呈水浸透明狀。綜上，分化效果最好的培養(yǎng)基為MS+6BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L，分化率及增殖倍數(shù)可達92%和3.4。

圖1 G6 在不同分化培養(yǎng)基上的生長情況（從左至右分別為配方1～6）

2.2 壯苗培養(yǎng)基篩選

G6 組培苗在3 號和4 號培養(yǎng)基的壯苗效果最好，平均高度可達3.9 cm 和4.1 cm，但是在4 號培養(yǎng)基中，組培苗出現(xiàn)葉片變黃，莖尖枯死的現(xiàn)象，而在3 號培養(yǎng)基中，葉片翠綠，生長旺盛（圖2）。綜上，適合G6 組培苗壯苗的培養(yǎng)基為MS+6BA1.0 mg/L+IBA 0.05 mg/L+NAA 0.05 mg/L。

表1 吉塞拉6 號在不同增殖培養(yǎng)基中的生長結(jié)果

表2 吉塞拉6 號在不同壯苗培養(yǎng)基中的生長結(jié)果

圖2 G6 在不同壯苗培養(yǎng)基上的生長情況（從左至右分別為配方1～4 的生長情況）

2.3 生根培養(yǎng)基篩選

從表3 可以看出，1 號培養(yǎng)基苗的基部有愈傷組織出現(xiàn)，根系較粗而脆；2 號培養(yǎng)基生根率較高，但根數(shù)少，有時僅生長出一條細長的白色根，且易產(chǎn)生須根，根系較細而柔軟；3 號培養(yǎng)基生根較好，一般8 d 左右就能看見較粗的小根長出，單株根數(shù)也較多，因此，最適合吉塞拉6 號生根的培養(yǎng)基為1/2MS+IAA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L+活性炭0.5 g/L。

表3 吉塞拉6 號在3 種培養(yǎng)基中的生根情況

圖3 G6 在不同培養(yǎng)基中的生根情況（從左至右分別為配方1～3 的生根情況）

3 結(jié)論與討論

3.1 激素對吉塞拉6 號分化的影響

分化培養(yǎng)基中，只加入6-BA 時，分化率低，分化苗生長狀態(tài)不好，易出現(xiàn)玻璃化等現(xiàn)象；在分化培養(yǎng)基中加入適量的NAA，能顯著提高櫻桃砧木的分化率，也就是說6BA、IBA 和NAA 的共同作用下，分化率高于6BA 和IBA 組合。

3.2 激素對吉塞拉6 號生根的影響

生根培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)外源激素的添加量及種類是影響生根的關(guān)鍵，試驗中，添加過高的NAA 會在莖的底部產(chǎn)生過多的愈傷組織，生出的根系粗且脆，生根率低。添加IAA，IBA 和活性炭的效果較好，生根率高，生根數(shù)多，根系粗壯，側(cè)根多，基部愈傷組織少。