113 例呼吸系統(tǒng)疾病患者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體的回顧研究

陳舒 許先國(guó) 洪小珍 朱發(fā)明

紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體是引起紅細(xì)胞輸血不良反應(yīng)、血型鑒定困難和輸注無(wú)效等的主要原因。精準(zhǔn)快速的不規(guī)則抗體鑒定對(duì)于迫切需要輸血治療的患者至關(guān)重要，然而其前提是對(duì)不同疾病患者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體特征的了解。目前尚缺乏呼吸系統(tǒng)疾病患者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體特異性的相關(guān)數(shù)據(jù)。因此，本次研究擬對(duì)本實(shí)驗(yàn)室收集的呼吸系統(tǒng)疾病患者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體檢測(cè)情況進(jìn)行回顧性分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 樣本 收集2012 年11 月至2021 年6 月期間由臨床醫(yī)院送檢的紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體初篩陽(yáng)性的呼吸系統(tǒng)疾病患者113 例，年齡1～96 歲。所有標(biāo)本經(jīng)知情同意采集送檢。

1.2 肺炎和肺部腫瘤類定義 本次研究將肺炎、間質(zhì)性肺炎、細(xì)菌性肺炎、吸入性肺炎、重癥肺炎、社區(qū)獲得性肺炎、肺部感染、肺部真菌感染等疾病納入肺炎類。

1.3 試劑和儀器 抗體篩選細(xì)胞、抗球蛋白試劑購(gòu)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司；凝聚胺試劑購(gòu)自珠海貝索生物技術(shù)有限公司；譜細(xì)胞分別購(gòu)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司、荷蘭Sanquin 公司、美國(guó)Immucor 公司和匈牙利REAGENS Kft 公司；UltraCW 細(xì)胞洗滌離心機(jī)由美國(guó)HELMER 公司生產(chǎn)；微柱凝膠卡、孵育器、卡式離心機(jī)均由美國(guó)DiaMed公司生產(chǎn)。

1.4 方法 將患者血清和/或血漿與篩選紅細(xì)胞、譜細(xì)胞以及患者自身紅細(xì)胞分別按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第4 版）》進(jìn)行鹽水試驗(yàn)、凝聚胺試驗(yàn)、間接抗球蛋白試驗(yàn)。根據(jù)其與篩選紅細(xì)胞、譜細(xì)胞和自身紅細(xì)胞的反應(yīng)格局判定抗體特異性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22.0 軟件，計(jì)數(shù)資料采用連續(xù)性校正的χ2檢驗(yàn)；非正態(tài)分布的計(jì)量資料采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)。設(shè)P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 呼吸系統(tǒng)疾病患者分類和紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1

表1 113 例呼吸系統(tǒng)疾病患者的分類和紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體檢測(cè)情況/例

由表1 可見(jiàn)，113 例呼吸系統(tǒng)疾病患者中，以肺炎類和肺部腫瘤類患者多見(jiàn)，經(jīng)確認(rèn)紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體陽(yáng)性共86 例（76.11%）。

2.2 86 例紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體的特異性分布見(jiàn)表2

表2 86 例紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體的特異性分布

由表2 可見(jiàn)，86 例紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者中共檢出15 種類型紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體，同種抗體主要為抗-M 和抗-E，自身抗體主要為冷凝集素。

2.3 肺炎類和肺部腫瘤類患者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體情況 肺炎類和肺部腫瘤紅細(xì)胞血型患者中位年齡分別為68.00 歲和63.00 歲，兩組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（U=320.00，P＞0.05）。肺炎類和肺部腫瘤類患者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體情況比較見(jiàn)表3。

由表3 可見(jiàn)，肺炎類患者抗-M 比例明顯低于肺部腫瘤類患者（χ2=5.32，P＜0.05）；肺炎類患者抗-E、冷凝集素比例與肺部腫瘤類患者比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2分別=0.00、3.74，P均＞0.05）。

表3 肺炎類和肺部腫瘤類患者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體比較

3 討論

既往關(guān)于紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體與疾病的關(guān)聯(lián)性研究并不多見(jiàn)：鄭皆煒等[1]比較了孕婦與其他患者的抗體特異性差異；許亞莉等[2]描述了不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者疾病分布情況；張秋會(huì)等[3]報(bào)告了不同臨床科室患者的不規(guī)則抗體檢出率。但這些數(shù)據(jù)缺乏針對(duì)呼吸系統(tǒng)疾病患者的分析。而李翠瑩等[4]雖然提及呼吸系統(tǒng)疾病患者，但也僅報(bào)道了其同種抗體和自身抗體的陽(yáng)性例數(shù)，并未涉及抗體特異性。為彌補(bǔ)這一空白，本研究對(duì)送檢至本實(shí)驗(yàn)室的113 例呼吸系統(tǒng)疾病患者進(jìn)行了回顧性分析。

為避免多種疾病混雜的影響，本文針對(duì)一種診斷的患者進(jìn)行研究，并且為便于統(tǒng)計(jì)分析，對(duì)113 例呼吸系統(tǒng)疾病患者進(jìn)行了歸類，其中以肺炎類和肺部腫瘤類患者較多見(jiàn)。由于本實(shí)驗(yàn)室接收的是臨床醫(yī)院送檢的紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體初篩陽(yáng)性的疑難樣本，因此陽(yáng)性率明顯高于報(bào)道[5,6]。

本次研究顯示，在檢出的紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體中，同種抗體以MNS 血型系統(tǒng)抗-M 和Rh 血型系統(tǒng)抗-E 多見(jiàn)，但抗-M 比例高于抗-E 則與報(bào)道[5,6]有所不同。究其原因可能為：①本實(shí)驗(yàn)室樣本為臨床醫(yī)院送檢，醫(yī)院多采用微柱凝膠抗人球蛋白法，該法利于IgG 類抗體檢出可減少抗-E 送檢，但不利于抗-M 等IgM 類抗體鑒定，而本實(shí)驗(yàn)室常規(guī)采取的鹽水試驗(yàn)?zāi)芴岣呖?M檢出，因此可能導(dǎo)致本研究中抗-E 比例下降，抗-M 比例升高；②Rh 血型系統(tǒng)抗原匹配輸注導(dǎo)致抗-E 比例下降；③可能與疾病相關(guān)。對(duì)占比最多的肺炎和肺部腫瘤類患者進(jìn)一步分析顯示，紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體陽(yáng)性的肺炎患者中抗-M比例明顯低于肺部腫瘤患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。肺癌全基因患者關(guān)聯(lián)研究指出肺癌與GYPA基因上某些SNP 位點(diǎn)相關(guān)[7,8]，而M 抗原位于由GYPA基因編碼的紅細(xì)胞血型糖蛋白A 上，因此肺部腫瘤類患者抗-M比例高，是否與肺癌患者M(jìn) 抗原表達(dá)有關(guān)值得探索。兩類患者抗-E 比例無(wú)明顯差異（P＞0.05）則表明抗-E 與肺炎或肺部腫瘤關(guān)聯(lián)性不強(qiáng)。

本次研究中檢出的自身抗體以冷凝集素為主。與冷凝集素相關(guān)的主要有特發(fā)性冷凝集素病和繼發(fā)性冷凝集素綜合征。前者多為老年人原發(fā)性疾病，而后者常繼發(fā)于感染（病毒、支原體）或惡性淋巴細(xì)胞增殖性疾病[9]。肺炎患者冷凝集素比例約為肺部腫瘤患者的6 倍，但由于兩組患者年齡中位數(shù)及其分布不存在顯著差異，可以排除年齡因素導(dǎo)致的冷凝集素比例升高，從而推測(cè)肺炎患者的肺部感染為導(dǎo)致兩者比例不同的主要原因，這與眾多文獻(xiàn)[10～14]報(bào)道一致。然而本次研究發(fā)現(xiàn)，兩類患者冷凝集素比例無(wú)明顯差異（P＞0.05），可能是由樣本例數(shù)較少導(dǎo)致，今后應(yīng)收集更多樣本來(lái)進(jìn)一步予以確定。正常成年人體內(nèi)也存在冷凝集素，但是多為低效價(jià)（＜1∶64）[15]。冷凝集素效價(jià)在1∶32 以下時(shí)一般不會(huì)引起假凝集現(xiàn)象，大于1∶64時(shí)可干擾血型的鑒定和交叉配血試驗(yàn)的結(jié)果[16]。本次研究中檢出的冷凝集素均干擾了室溫條件下ABO 血型反定型或產(chǎn)生了不規(guī)則抗體篩查陽(yáng)性結(jié)果，可以預(yù)測(cè)其效價(jià)應(yīng)高于64。

綜上所述，呼吸系統(tǒng)疾病患者紅細(xì)胞血型不規(guī)則同種抗體以抗-M 和抗-E 多見(jiàn)，自身抗體以冷凝集素多見(jiàn)，其中抗-M 在肺部腫瘤患者中相對(duì)多見(jiàn)。在臨床血清學(xué)檢測(cè)中利用這些特點(diǎn)可以快速制定有針對(duì)性的鑒定策略，進(jìn)一步提高檢測(cè)效率，提升輸血安全性。