落新婦粉色幻想組培快繁技術研究

魏進莉

（北京市花木有限公司天卉源綠色科技研究院，北京 100093）

落新婦（Astilbe chinensis）為虎耳草科（Saxifragaceae）落新婦屬（Astilbe）多年生耐寒草本花卉[1]。落新婦的穗狀花序簇擁在一起，酷似蓬松的泡沫，觀賞效果極佳，因而在日本被稱為“泡盛草”。落新婦的園藝栽培雜交種花色有紅色、粉紅和白色等，色澤鮮艷美觀，花朵錯落有致，株型華貴典雅。落新婦是21世紀新興的種植植物，也是營造花境的主要栽培品種之一，適合于花壇、盆栽和庭院栽培，同時落新婦是極好的鮮切花品種。此外，落新婦是很好的藥用植物，全草含氰酸，花含槲皮素，根莖含巖白菜素。根狀莖入藥可散瘀止痛、祛風除濕和清熱止咳。落新婦具有較好的抗癌作用，是一種值得開發(fā)的抗癌新資源[2]。落新婦作為一種集醫(yī)藥價值與園藝觀賞價值于一身的植物種類，具有廣闊的應用前景。落新婦以播種繁殖為主，也可分株繁殖。分株繁殖在春季萌芽前或夏季花后進行，挖出根莖，分割帶芽植株，直接栽植，每4～5年分株1次，繁殖效率較低[3]。播種繁殖通常在春季進行，發(fā)芽率較低，發(fā)芽較慢，發(fā)芽難度較大。例如，穴盤播種育苗時，每穴播種3～5粒，以保證每穴的出芽率；種子需在0～5℃低溫條件下處理3～4周，之后逐漸升高溫度，在20～25℃條件下，需14～21 d發(fā)芽；基質需保持較低的可溶性鹽含量，pH值保持在5.8～6.0之間；種子萌發(fā)需要光照，但也要進行遮陰處理，避免陽光直射；整個穴盤育苗時間達9周。然而，落新婦播種繁殖和分株繁殖的繁殖系數(shù)低，受環(huán)境因素影響大，無法實現(xiàn)快速繁殖?；诖?，應開發(fā)落新婦組培快繁技術，以實現(xiàn)大量規(guī)?；a(chǎn)，滿足市場需求。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 植物材料。外植體材料為落新婦粉色幻想的幼嫩葉片，來自北京市花木有限公司天卉源綠色科技研究院品種資源圃。

1.1.2 培養(yǎng)基。以MS為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度的6-BA和NAA，以及白砂糖30 g/L、瓊脂4.5 g/L（凝膠強度≥1 300 g/cm2，下同）。生根培養(yǎng)以1/2MS為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度NAA、白砂糖20 g/L、瓊脂5.0 g/L。各培養(yǎng)基pH值均為5.8～6.0，121℃高壓蒸汽滅菌20min。

1.2 試驗方法

1.2.1 外植體接種。采取落新婦粉色幻想的幼嫩葉片，放入自來水中浸泡8～15min，再用自來水沖洗20～30min，在超凈工作臺上用酒精浸泡消毒20～30 s，用20%次氯酸鈉溶液浸泡消毒8～10min，無菌水沖洗3～4次，剪去葉緣被消毒液殺死的組織，接入添加6-BA 1.0mg/L和NAA 0.1mg/L的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，共接種50瓶，每瓶1個葉片，培養(yǎng)30 d后統(tǒng)計結果。

1.2.2 增殖培養(yǎng)基的篩選。將無菌的芽苗接入添加激素 6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L、6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L、6-BA 1.5mg/L+NAA 0.2mg/L 的培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)溫度為（23±2）℃，光照強度為1 500～2 000 lx，每處理6瓶，每瓶7株，培養(yǎng)30 d統(tǒng)計結果。

1.2.3 最佳生根培養(yǎng)基的篩選。將大小適宜的組培苗分別接入添加NAA 0.10、0.25、0.50mg/L的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度（25±1）℃，光照強度 1 500～2 000 lx，每處理6瓶，每瓶15株，培養(yǎng)15 d觀察統(tǒng)計結果。

1.2.4 不同溫度對生根培養(yǎng)的影響。將接種于生根培養(yǎng)基中的落新婦組培苗置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，光照時間12 h，溫度為19～20℃，培養(yǎng)7 d后將一個培養(yǎng)箱溫度調至23～24℃，再培養(yǎng)23 d，觀察統(tǒng)計結果；另一個光照培養(yǎng)箱19～20℃培養(yǎng)15 d后將溫度調至23～24℃，再培養(yǎng)15 d，觀察統(tǒng)計結果。將接種于生根培養(yǎng)基中的落新婦組培苗置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，光照時間 12 h，分別于溫度 21～22、23～24、25～26℃條件下培養(yǎng)，培養(yǎng) 10、20、30 d時觀察統(tǒng)計結果。

1.2.5 溫室煉苗。將已生根的組培苗移到溫室，在瓶內(nèi)煉苗3～5 d后，取出洗去根部培養(yǎng)基，分1.0～1.5 cm、1.5～2.0 cm和1.5～2.5 cm等3種不同的規(guī)格，栽入準備好的煉苗基質（草炭∶珍珠巖=7∶3），噴水保濕，置于溫室遮陰網(wǎng)拱棚內(nèi)，光照強度不高于8 000 lx；移栽后4～5 d之內(nèi)，適當提高葉片噴水頻率，保證空氣濕度在85%以上；5～7 d后，新根逐漸形成，降低噴水頻率；10 d左右，逐漸改為澆水，在溫室光照不高于15 000 lx的情況下，拆除遮陰網(wǎng)，常規(guī)養(yǎng)護。在夜溫24℃、日溫26～27℃和空氣濕度70%～80%的條件下，養(yǎng)護30 d觀察統(tǒng)計結果。

2 結果與分析

2.1 外植體接種無菌苗的獲得情況

落新婦粉色幻想的幼嫩葉片培養(yǎng)15 d時，近葉柄的葉脈上開始形成愈傷組織，繼續(xù)培養(yǎng)至30 d，有小芽形成。此外，葉片越嫩越易形成愈傷組織和芽。

2.2 不同激素濃度對增殖的影響

由表1可知，培養(yǎng)基中添加的激素濃度越高，落新婦粉色幻想芽的增殖系數(shù)越高，組培苗生長越細弱。當培養(yǎng)基中添加的激素濃度較低時，組培苗生長較為健壯。

表1 不同培養(yǎng)基中芽的增殖及組培苗生長情況

當培養(yǎng)基中添加6-BA 1.5mg/L、NAA 0.2mg/L時，增殖倍數(shù)最高，達21.6，但芽小而細弱，不宜生根培養(yǎng)；當培養(yǎng)基中添加6-BA 0.5mg/L、NAA 0.1mg/L時，苗大小一致性較差，大苗較高而健壯，小芽較小。比較而言，培養(yǎng)基中添加6-BA 1.0mg/L、NAA 0.2mg/L最佳，苗的大小均一性較好，也較健壯，用來接種增殖和生根培養(yǎng)均較好。

2.3 不同激素濃度對生根培養(yǎng)的影響

由表2可知，在添加不同激素濃度的生根培養(yǎng)基中，組培苗生根率和根的生長情況不同。當NAA濃度較低時，根較少，根長一致性相對較差；隨著NAA濃度的增加，組培苗的生根率提高，根長較為一致；隨著NAA濃度的進一步增加，組培苗生根率下降，根的形成和生長受到抑制。由表2可知：添加NAA 0.25mg/L的生根培養(yǎng)基最佳，生根率達到100%，根較多，一致性也較好；添加NAA 0.10mg/L的生根培養(yǎng)基次之，生根率為98%，根數(shù)較少，根長短差異較大；添加NAA 0.50mg/L的生根培養(yǎng)基最差，生根率最低，為95%，根很短且有叢生現(xiàn)象。

表2 不同激素濃度對生根培養(yǎng)的影響

2.4 培養(yǎng)溫度對苗生長情況的影響

由表3可知，落新婦粉色幻想在培養(yǎng)過程中對溫度較為敏感，當溫度低于一定程度時，會出現(xiàn)死苗現(xiàn)象，隨著培養(yǎng)時間的延長，死亡現(xiàn)象加重。在19～20℃溫度條件下培養(yǎng)7 d，再將溫度升高到23～24℃繼續(xù)培養(yǎng)23 d時，苗的死亡率為7.3%，活苗較小，枯葉較少，根數(shù)較多；在19～20℃溫度條件下培養(yǎng)15 d，再將溫度升高到23～24℃繼續(xù)培養(yǎng)15 d，苗的死亡率達40.8%，活苗很小，葉片偏黃且枯葉較多，根系也很少。苗的生長情況具體見圖1和圖2。

表3 溫度變化對苗生長的影響

2.5 不同培養(yǎng)溫度對根形成的影響

由表4可知，溫度對落新婦粉色幻想的根系形成及苗的生長情況影響較大。溫度越低，落新婦粉色幻想根的形成和生長越慢，苗的生長也越慢；相反，溫度越高，落新婦粉色幻想根系的形成和生長越快，苗的生長也越快。當溫度為21～22℃時，培養(yǎng)20 d落新婦粉色幻想尚未生根，培養(yǎng)30 d落新婦粉色幻想的生根率與其他溫度條件一樣，達100%。當溫度為25～26℃時，培養(yǎng)10 d落新婦粉色幻想開始生根；培養(yǎng)20 d約有50%生根，根長約2mm；培養(yǎng)30 d生根率達100%，根長達10mm，根數(shù)≥10條，葉片數(shù)為12～14片，株高達 15mm。

表4 落新婦粉色幻想在不同溫度條件下的生根及生長情況

2.6 溫室煉苗成活情況

落新婦粉色幻想的生根苗在溫室煉苗的難度比較大，苗易爛根，根的形成和生長較慢。當落新婦粉色幻想組培苗較大時，其成活率相應較高。結果表明：當落新婦粉色幻想組培苗高度為2.0～2.5 cm時，組培成活率最高，為94.6%；當落新婦粉色幻想組培苗高度為1.0～1.5 cm，組培苗成活率最低，為90.5%；當落新婦粉色幻想組培苗高度為1.5～2.0 cm，組培苗成活率為93.2%

3 結論與討論

在外植體接種培養(yǎng)過程中，葉片越幼嫩越易誘導形成愈傷組織[4]。在消毒過程中，幼嫩的葉片組織易被消毒液損傷或殺死[5-6]。因此，在選取外植體材料時，要求植株健康無病蟲害、葉面干凈、葉片的幼嫩程度適中。

在增殖階段，培養(yǎng)基中激素的添加濃度與配比對芽苗的增殖倍數(shù)和生長情況有一定的影響，將組培快繁技術推廣應用于落新婦的工廠化生產(chǎn)過程中，應根據(jù)生產(chǎn)需求進行進一步改進優(yōu)化。在保持較高增殖倍數(shù)的情況下，保障芽苗的生長狀況良好，便于生根培養(yǎng)和提高煉苗成活率，以進一步控制生產(chǎn)成本。在組培繁殖過程中，落新婦對溫度較為敏感。溫度越高，芽苗的生長和生根狀況越好；溫度較低時，芽苗的生長狀況較差，尤其是當培養(yǎng)溫度低于20℃時，甚至會出現(xiàn)死苗的現(xiàn)象。此外，在低溫下存放時間越長，芽苗的死亡率越高。因此，落新婦的組培快繁生產(chǎn)適宜在夏季進行，不宜在冬季進行，以滿足其較高的生長溫度需求，提高增殖倍數(shù)、芽苗的生長規(guī)格、生根率和煉苗成活率，有效降低生產(chǎn)成本和提高煉苗成活后的穴盤苗質量。如何更好地把控生產(chǎn)成本與苗的質量，有待進一步試驗研究。