下呼吸道感染病原菌分布與耐藥性研究

摘要：目的" 分析下呼吸道感染病原菌分布與耐藥性，指導(dǎo)臨床治療。方法" 選取我院呼吸內(nèi)科2020年8月～2021年7月收治的下呼吸道感染患者152例。收集患者經(jīng)清晨咳出、氣管插管、氣管切開等途徑取出呼吸道深部痰液標(biāo)本，進(jìn)行病原菌株分離培養(yǎng)，并實(shí)施菌株鑒定與藥敏試驗(yàn)，結(jié)合現(xiàn)有呼吸內(nèi)科下呼吸道感染病原菌分布與耐藥性文獻(xiàn)報(bào)道，研究呼吸內(nèi)科下呼吸道感染病原菌分布情況與對(duì)常用抗菌藥物耐藥性情況。

關(guān)鍵詞：呼吸內(nèi)科;下呼吸道感染;病原菌分布;耐藥性研究

針對(duì)下呼吸道感染患者，對(duì)其痰液標(biāo)本開展細(xì)菌學(xué)檢查以及藥敏試驗(yàn)依舊是鑒定病原菌以及指導(dǎo)臨床用藥的主要手段。收集患者痰液標(biāo)本，并及時(shí)明確致病菌種類、分布及耐藥性水平，對(duì)合理選擇抗菌藥物治療具有重要的指導(dǎo)意義[1]。本研究旨在分析下呼吸道感染病原菌分布與耐藥性，指導(dǎo)臨床治療。

1資料與方法

1.1 臨床資料

選取我院呼吸內(nèi)科2020年8月～2021年7月收治的下呼吸道感染患者152例。其中男84例，女68例;年齡41～74歲、平均（62.34±4.26）歲;合并肺炎31例、糖尿病24例、慢性阻塞性肺疾病42例、支氣管哮喘55例。本組患者均對(duì)感染部位實(shí)施細(xì)菌培養(yǎng)，其培養(yǎng)結(jié)果均為（+）。

1.2 方法

（1）標(biāo)本來源。患者早晨起床后用清水漱口，將口腔中雜質(zhì)清除，隨后用力咳嗽，將咳出痰液放置在無(wú)菌容器中立即送檢。若患者咳痰物理或者長(zhǎng)期臥床，使用纖維支氣管鏡、氣管插管、氣管切開等方式吸取呼吸道深部分泌物。對(duì)痰液標(biāo)本進(jìn)行涂片檢驗(yàn)，在低倍鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)鱗狀上皮細(xì)胞<10，多核白細(xì)胞>25，或二者比例<1：25，判定為合格標(biāo)本，符合檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)后方可繼續(xù)實(shí)施病原菌培養(yǎng)分離，以及生化鑒定。

（2）病原菌鑒定。將標(biāo)本分別接種在血平板、麥康凱平板、嗜血桿菌專用平板、沙保羅平板上，隨后置于5%～10%濃度CO2孵箱中，調(diào)整箱內(nèi)溫度35℃，培養(yǎng)時(shí)長(zhǎng)設(shè)定16～20 h。將細(xì)菌進(jìn)行分離純化，隨后應(yīng)用法國(guó)梅里埃公司VIREK 2 Compact 全自動(dòng)微生物分析儀完成病原菌鑒定。

（3）藥敏試驗(yàn)。應(yīng)用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法（Kirby-Bauer，K-B法），以及使用背景天壇生物技術(shù)公司藥敏紙片與培養(yǎng)基，參考美國(guó)實(shí)驗(yàn)室制定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病原菌藥敏測(cè)定。質(zhì)控菌株：由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中國(guó)中心提供的金黃色葡萄球菌（ATCC25923）、銅綠假單胞菌（ATCC27853）、大腸埃希菌（ACTT27853）。應(yīng)用苯唑西林制片測(cè)定抑菌圈直徑≤19mm的肺炎鏈球菌菌株，應(yīng)用青霉素E實(shí)驗(yàn)條測(cè)定其MIC值。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)痰液標(biāo)本中病原菌檢出情況，計(jì)算陽(yáng)性率。對(duì)常見革蘭氏陰性桿菌、革蘭氏陽(yáng)性球菌、真菌的耐藥性進(jìn)行分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)處理采用SPSS23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料用比率表示，采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 下呼吸道感染病原菌分布情況

152例患者中有134份標(biāo)本檢出病原菌，陽(yáng)性率88.16%。其中革蘭氏陽(yáng)性球菌17株，占比12.69%;革蘭氏陰性桿菌106株，占比79.10%;真菌11株，占比8.21%。檢出率前4病原菌分別為銅綠假單胞菌，占比25.37%;大腸埃希菌，占比16.42%;金黃色葡萄球菌，占比10.44%;肺炎克雷伯菌，占比9.71%。

2.2 常見革蘭氏陰性桿菌耐藥性情況

銅綠假單胞菌對(duì)妥布霉素、慶大霉素耐藥性低，對(duì)氨芐西林、頭孢唑林、頭孢曲松、呋喃妥因、頭孢替坦耐藥性為100%;肺炎克雷伯菌對(duì)阿米卡星、妥布霉素、亞胺培南、環(huán)丙沙星耐藥性低，對(duì)氨芐西林耐藥性為100%;大腸埃希菌對(duì)阿米卡星、亞胺培南、呋喃妥因耐藥性低，對(duì)氨芐西林耐藥性高，相比于其他革蘭氏陰性桿菌耐藥性整體較低。

2.3 常見革蘭氏陽(yáng)性球菌、真菌耐藥性情況

金黃色葡萄球菌對(duì)替加環(huán)素、萬(wàn)古霉素、利奈唑胺耐藥性為0，對(duì)青霉素耐藥性高。白色假絲酵母菌對(duì)兩性霉素B、5-氟尿嘧啶耐藥性為0，對(duì)伏立康唑耐藥性略高，整體耐藥性低。

3討論

本研究結(jié)果顯示，選取的152例呼吸內(nèi)科下呼吸道感染痰標(biāo)本中，有134份檢出病原菌，檢出率高達(dá)88.16%。說明由細(xì)菌和真菌造成的感染有較高的發(fā)生率。革蘭氏陰性桿菌在呼吸內(nèi)科下呼吸道感染患者的主要病原菌種類，占比高達(dá)79.10%，這說明革蘭氏陰性桿菌在呼吸道感染中占據(jù)明顯的主體地位。分析其原因，主要是呼吸內(nèi)科患者呼吸道分泌功能降低、纖毛運(yùn)動(dòng)減弱、不能及時(shí)排痰以及長(zhǎng)期應(yīng)用廣譜抗菌藥物、應(yīng)用糖皮質(zhì)激素、氣管插管、應(yīng)用無(wú)創(chuàng)或有創(chuàng)呼吸機(jī)造成菌群失調(diào)，耐藥率高的細(xì)菌定植生長(zhǎng)和繁殖。在標(biāo)本中分離出來的最多的革蘭氏陰性菌是銅綠假單胞菌，該病原菌在自然界分布十分廣泛，在醫(yī)院中該菌經(jīng)常分布在物體表面、水、空氣中，因此該病原菌感染的概率最高。在其他革蘭氏陰性菌中值得注意的是嗜麥芽窄食單胞菌，該菌在本研究的檢出率達(dá)到5.97%。

該病原菌屬于機(jī)會(huì)型致病菌，近幾年在院內(nèi)獲得性感染中的檢出率逐漸提高。在相關(guān)研究中，發(fā)現(xiàn)碳青霉烯類、頭孢他啶、喹諾酮類抗生素以及機(jī)械通氣的應(yīng)用屬于患者感染該病原菌的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。研究中雖然真菌感染占比較低，但是同樣具備一定比例[2]。真菌中最多的是白色假絲酵母菌，達(dá)到5.22%。真菌是條件致病菌，當(dāng)人體免疫功能降低、長(zhǎng)期應(yīng)用廣譜抗菌藥物、應(yīng)用大劑量激素、機(jī)械通氣等便容易出現(xiàn)真菌感染。該菌的致病力很強(qiáng)，并且危害較大，在臨床治療過程中，患者通常存在黏痰且不易咳出、痰液呈現(xiàn)拉絲狀、伴隨發(fā)熱癥狀，經(jīng)抗生素治療無(wú)效。但痰培養(yǎng)真菌（+）不能直接證明患者存在深部真菌感染，還需要結(jié)合患者癥狀、體征和影像學(xué)檢查結(jié)果，二次進(jìn)行病原學(xué)檢驗(yàn)，排除口咽正常定植污染造成的假陽(yáng)性，避免過度治療[3]。

分析藥敏結(jié)果，銅綠假單胞菌對(duì)氨芐西林、頭孢唑林、頭孢曲松、呋喃妥因、頭孢替坦耐藥性為100%，對(duì)氨芐西林/舒巴坦、復(fù)方新諾明的耐藥性也較高。該病原菌耐藥的原因主要是可以產(chǎn)生抗生素修飾酶或滅活酶，可以改變抗菌藥物的作用靶點(diǎn)，并產(chǎn)生生物膜，或者通過膜屏障作用和主動(dòng)外排作用限制藥物到達(dá)作用靶點(diǎn)。在本次研究中，該病原菌對(duì)妥布霉素、慶大霉素耐藥性低，均為5.88%。其他研究該菌對(duì)阿米卡星、頭孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦耐藥性低。大腸埃希菌對(duì)阿米卡星、亞胺培南、呋喃妥因耐藥性低，其他研究該菌對(duì)哌拉西林/他唑巴坦耐藥性低。因此，臨床需要根據(jù)患者實(shí)際情況選擇敏感性最高的藥物進(jìn)行治療。

革蘭氏陽(yáng)性菌主要為金黃色葡萄球菌，占比10.44%，在本次研究中的檢出率排名前4。在該病原菌的藥敏試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)其對(duì)青霉素具備較高的耐藥性，但是未發(fā)現(xiàn)替加環(huán)素、萬(wàn)古霉素、利奈唑胺的耐藥菌株。由于該菌經(jīng)常使用青霉素、紅霉素等進(jìn)行治療，因此對(duì)于青霉素、紅霉素具備較高的耐藥性。由于萬(wàn)古霉素不常使用，因此耐藥性低。還有研究發(fā)現(xiàn)該菌對(duì)替考拉寧耐藥率為0。因此在臨床治療時(shí)，醫(yī)生可以選擇替加環(huán)素、萬(wàn)古霉素、利奈唑胺、替考拉寧進(jìn)行治療[4～5]。

在一些研究中也說明了現(xiàn)有病原學(xué)檢查手段對(duì)抗感染治療的指導(dǎo)意義存在爭(zhēng)議。一直以來大眾觀點(diǎn)，軍事病原學(xué)檢查利于抗感染治療由經(jīng)驗(yàn)性用藥轉(zhuǎn)變?yōu)榘邢蛴盟帲梢蕴岣咧委煹尼槍?duì)性，減少耐藥菌株出現(xiàn)。但是國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)，在初始治療失敗的患者不論是按經(jīng)驗(yàn)還是按藥敏試驗(yàn)換藥，其病死率不存在差距。因此，對(duì)于病原學(xué)檢查，我們要客觀應(yīng)用，不僅參考檢測(cè)結(jié)果，還需要結(jié)合患者臨床癥狀、病情特征，判定檢出病原菌是否是責(zé)任致病菌，同時(shí)比較體外與體內(nèi)抗菌活性，合理用藥。

綜上所述，呼吸內(nèi)科下呼吸道感染發(fā)生率較高，病原菌耐藥性較高，要合理應(yīng)用抗菌藥物，減少耐藥菌株產(chǎn)生，有效控制感染，提高治療效果。

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