重癥肺炎患者Th17及Treg相關(guān)細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)變化

方昌全 徐麗敏 鄒麗 盧健聰 葉凱 謝燕君 林俊鴻

重癥社區(qū)獲得性肺炎(Severe community-acquired pneumonia，SCAP)是臨床常見急危重癥疾病之一，可迅速出現(xiàn)呼吸困難及呼吸衰竭，甚至導(dǎo)致多器官功能衰竭，死亡率高達(dá)30%～50%，目前盡管抗感染水平、液體復(fù)蘇、監(jiān)護(hù)設(shè)備及臟器功能支持手段等取得了較大進(jìn)步，但死亡率仍然居高不下[1-3]。研究發(fā)現(xiàn)免疫失衡及病原體感染后引發(fā)的炎癥反應(yīng)失控是重癥感染發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵機(jī)制，重癥肺炎患者體內(nèi)存在明顯Th17/Treg細(xì)胞的失衡[4-5]，通過監(jiān)測相關(guān)細(xì)胞因子可評(píng)估免疫功能狀態(tài)[6]。本研究擬通過動(dòng)態(tài)監(jiān)測Th17及Treg相關(guān)細(xì)胞因子IL-17A、IL-10水平，以了解重癥肺炎患者體內(nèi)炎癥及免疫失衡情況，為免疫支持治療提供依據(jù)。

資料與方法

一、研究對(duì)象

選擇2020年4月—2021年6月于惠州市中心人民醫(yī)院住院的重癥社區(qū)獲得性肺炎65例及同期輕癥社區(qū)獲得性肺炎、健康體檢者各30例為研究對(duì)象，其中重癥肺炎組患者存活44例，死亡21例，納入標(biāo)準(zhǔn)：≥18歲；符合2016年中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)制定的社區(qū)獲得性肺炎指南診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]，排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠、活動(dòng)性肺結(jié)核、HIV感染及合并惡性腫瘤者。本研究已通過醫(yī)院倫理委員會(huì)審核(編號(hào)：KYLL2020059)，已將研究目的、方法及注意事項(xiàng)向患者告知，并已簽署知情同意書

二、登記資料及標(biāo)本收集、檢測

登記所有研究對(duì)象的基本資料包括姓名、性別、年齡、基礎(chǔ)疾病、吸煙史及預(yù)后等，本研究吸煙史指吸煙累計(jì)或連續(xù)6個(gè)月或以上。

分別留取輕癥肺炎組第1天及重癥肺炎組患者第1、4～6、9～11天外周靜脈血3 mL，3000r/min離心10min后留取上層血清。運(yùn)用人TH1/TH2/TH17亞群檢測試劑盒及流式細(xì)胞儀檢測IL-17A、IL-10水平，所有操作及流程均嚴(yán)格按照儀器和試劑說明書進(jìn)行。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié) 果

一、重癥肺炎、輕癥肺炎組患者及健康體檢者基本資料

3組患者性別、年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見表1)。

二、重癥肺炎組患者IL-17A、IL-10水平動(dòng)態(tài)變化情況

(見表1)重癥肺炎患者促炎因子IL-17A水平明顯高于輕癥肺炎組及健康體檢者(P<0.05)，但抗炎因子IL-10水平差異不顯著，提示重癥肺炎早期以促炎反應(yīng)為主。動(dòng)態(tài)監(jiān)測顯示重癥肺炎患者IL-17A水平總體呈下降趨勢，存活組患者下降明顯，但死亡組下降緩慢，IL-10水平早期處于低水平，但后期逐漸升高，存活組患者IL-10輕度升高，但死亡組升高明顯，死亡組第4～6天、9～11天IL-17A、IL-10水平明顯高于存活組，提示重癥肺炎后期以抗炎反應(yīng)為主，無論是促炎反應(yīng)或抗炎反應(yīng)，過度的炎癥反應(yīng)可導(dǎo)致預(yù)后不良(見表2、3)。

表1 重癥肺炎、輕癥肺炎組患者及健康體檢者基線資料及IL-17A、IL-10水平的比較

表2 重癥肺炎組患者IL-17A、IL-10動(dòng)態(tài)變化

討 論

重癥肺炎的發(fā)病機(jī)制目前尚未完全清楚，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為主要與病原體感染機(jī)體后引起的失控的炎癥反應(yīng)相關(guān)，具體表現(xiàn)為促炎和抗炎介質(zhì)的失衡[8-9]，過度的炎癥反應(yīng)可導(dǎo)致Th17/Treg細(xì)胞失衡[10]，Th17細(xì)胞具有促炎癥反應(yīng)的作用,這主要是通過特異性分泌細(xì)胞效應(yīng)因子IL-17來達(dá)到的。

Treg細(xì)胞具有免疫抑制作用，其通過釋放IL-10、TGF-β等細(xì)胞因子可抑制炎癥因子的表達(dá)，降低過激的炎癥反應(yīng)[11]，故可通過測定IL-17、IL-10水平間接反映Th17/Treg細(xì)胞變化情況。

目前IL-17、IL-10在重癥肺炎中已有較多研究，但缺乏動(dòng)態(tài)監(jiān)測，本研究顯示重癥肺炎患者IL-17A水平總體呈下降趨勢，存活組患者下降明顯，但死亡組下降緩慢。IL-10水平早期處于低水平，但后期逐漸升高，存活組患者表現(xiàn)為輕度升高，但死亡組升高明顯，提示重癥肺炎存在明顯的炎癥失衡，早期以促炎反應(yīng)為主，后期以抗炎反應(yīng)為主，過度的炎癥反應(yīng)可導(dǎo)致預(yù)后不良。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，重癥肺炎早期Th17細(xì)胞明顯升高，發(fā)展到重癥肺炎最強(qiáng)的階段Th17細(xì)胞表達(dá)到峰值，Treg細(xì)胞早期低水平表達(dá)，后期則逐漸升高[12]，本研究通過監(jiān)測Th17及Treg相關(guān)細(xì)胞因子也發(fā)現(xiàn)相似動(dòng)態(tài)變化。Li L.L.等[13]報(bào)道重癥肺炎患者及肺炎致膿毒癥大鼠模型中Th17細(xì)胞及IL-17信號(hào)通路相關(guān)因子包括IL-17A等明顯升高，但Treg細(xì)胞表達(dá)下降[13]。而Kurata S.等的研究顯示衣原體肺炎大鼠IL-17A及IL-10水平均有不同程度升高[14]，我們的研究也顯示重癥肺炎患者IL-17A及IL-10均有不同程度升高，早期以IL-17A升高明顯。臨床研究發(fā)現(xiàn)，方堃等[15]報(bào)道重癥肺炎患者IL-17A及IL-10明顯升高，動(dòng)態(tài)研究顯示重癥肺炎IL-10水平隨著病情發(fā)展呈升高趨勢[16]。

表3 重癥肺炎死亡組和存活組IL-17A、IL-10動(dòng)態(tài)變化

綜上，我們認(rèn)為重癥社區(qū)獲得性肺炎早期多表現(xiàn)為免疫增強(qiáng)，后期則是免疫抑制為主，故針對(duì)性予免疫干預(yù)有可能改善患者預(yù)后。研究發(fā)現(xiàn)在免疫過度表達(dá)階段，予具有免疫抑制作用的糖皮質(zhì)激素治療，而免疫抑制階段，予具有免疫增強(qiáng)作用的胸腺肽治療均可取得良好的治療效果[17]。