噻唑膦微囊懸浮劑對(duì)南方根結(jié)線蟲的防治效果

趙恭文 唐劍峰* 狄春香 李昌鵬 宿景池 楊志航

（1 山東中農(nóng)聯(lián)合生物科技股份有限公司，山東濟(jì)南 250100；2 山東省農(nóng)村經(jīng)濟(jì)管理服務(wù)總站，山東濟(jì)南 250000）

根結(jié)線蟲（spp.）是危害溫室蔬菜的重要病原物，可侵染茄果類、瓜類、十字花科類等大多數(shù)蔬菜作物，每年因根結(jié)線蟲造成的損失高達(dá)70 億美元（Yue et al.，2020；Wang et al.，2021），隨著我國(guó)保護(hù)地蔬菜種植面積和種植年限不斷增加，根結(jié)線蟲發(fā)生的頻率和危害程度逐年升高，一般可造成減產(chǎn)20%～30%，發(fā)生嚴(yán)重時(shí)甚至可造成減產(chǎn)90%以上，嚴(yán)重危害蔬菜生產(chǎn)（翟明娟 等，2017；岳向國(guó) 等，2018；王洪山 等，2019；張潔 等，2019）。根結(jié)線蟲的防治包括農(nóng)業(yè)防治、生物防治和化學(xué)防治等措施（趙磊 等，2011；張潔 等，2019；孫海 等，2020），其中化學(xué)防治長(zhǎng)期以來(lái)一直是蔬菜作物根結(jié)線蟲防治中最高效、最主要的措施（Giannakou et al.，2010；崔鑫 等，2017）。噻唑膦作為防治根結(jié)線蟲的主要化學(xué)藥劑，近年來(lái)被廣泛應(yīng)用于溫室根結(jié)線蟲的防治，然而長(zhǎng)期過(guò)量且單一使用，已使根結(jié)線蟲對(duì)噻唑膦產(chǎn)生低水平抗性（吳青松，2016）?？茖W(xué)合理使用噻唑膦防治根結(jié)線蟲，延長(zhǎng)持效期、減少用藥量及次數(shù)是延緩其抗藥性發(fā)展的有效途徑。

微囊化技術(shù)一般指利用物理、化學(xué)以及物理化學(xué)或生物學(xué)的方法將化學(xué)物質(zhì)或生物材料包覆在囊壁材料中，使其緩慢釋放甚至控制釋放（李北興 等，2014）。30%噻唑膦微囊懸浮劑是近幾年開發(fā)的新型緩釋制劑，該產(chǎn)品將噻唑膦微囊化后能夠增強(qiáng)其穩(wěn)定性，延長(zhǎng)持效期，從而減少噻唑膦的使用量及使用頻次（李北興 等，2014；唐劍峰 等，2019）。本試驗(yàn)測(cè)定了噻唑膦原藥對(duì)山東省內(nèi)幾個(gè)蔬菜種植區(qū)根結(jié)線蟲的室內(nèi)毒力，比較了30%噻唑膦微囊懸浮劑和5%噻唑膦微乳劑對(duì)根結(jié)線蟲的防治效果，以期為噻唑膦科學(xué)合理使用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

根結(jié)線蟲采集自山東省濟(jì)南市濟(jì)陽(yáng)區(qū)、山東省泰安市岱岳區(qū)等地的黃瓜和番茄大棚，經(jīng)鑒定為南方根結(jié)線蟲（）。

1.2 試驗(yàn)藥劑

93.3%噻唑膦原油，由山東中農(nóng)聯(lián)合生物科技股份有限公司提供。

30%噻唑膦微囊懸浮劑，市售，山東省聯(lián)合農(nóng)藥工業(yè)有限公司生產(chǎn)。

5%噻唑膦微乳劑，市售，河北三農(nóng)農(nóng)用化工有限公司生產(chǎn)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 南方根結(jié)線蟲二齡幼蟲（J）的獲取 將被根結(jié)線蟲侵染的新鮮植物根洗凈，剪成1 cm 長(zhǎng)小段，放入組織搗碎機(jī)中加3 倍量的水搗碎30 s，轉(zhuǎn)入200 目（孔徑75 μm）和500 目（孔徑26 μm）組合標(biāo)準(zhǔn)篩，用自來(lái)水沖洗篩中植物組織，收集500 目標(biāo)準(zhǔn)篩內(nèi)的線蟲卵，用0.5%的NaClO 溶液表面消毒3 min，無(wú)菌水沖洗5 次后放入自制貝曼漏斗中，于25 ℃培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)，間隔24 h 收集1 次，制成200 條·mL左右的線蟲懸浮液備用（岳向國(guó) 等，2018，2019）。

1.3.2 室內(nèi)生物測(cè)定 試驗(yàn)于2018—2020 年間，在山東中農(nóng)聯(lián)合生物科技股份有限公司研發(fā)中心生測(cè)研究室進(jìn)行，采用浸蟲法測(cè)定室內(nèi)活性。將93.3%噻唑膦原油用丙酮溶液溶解并配制成母液，用0.1%吐溫80 水溶液將母液稀釋為100、50、20、10、2 mg·L等5 個(gè)濃度梯度的藥液。取0.5 mL 藥液和0.5 mL 線蟲懸浮液加入到24 孔板中混勻。每處理設(shè)3 次重復(fù)，設(shè)含有等劑量丙酮溶劑的0.1%吐溫80 水溶液為空白對(duì)照。放于（25 ± 1）℃培養(yǎng)箱中，黑暗處理48 h 后鏡檢各處理線蟲死亡情況，計(jì)算各處理J的校正死亡率，利用DPS 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)求出毒力回歸方程及LC值。

死亡率=死亡線蟲數(shù)/處理線蟲數(shù) × 100%

校正死亡率=（處理死亡率 -對(duì)照死亡率）/（100 -對(duì)照死亡率）× 100%

1.3.3 田間藥效試驗(yàn) 試驗(yàn)于2018—2020 年間，在山東省濟(jì)南市濟(jì)陽(yáng)區(qū)董家莊村（2018 年）、山東省濟(jì)南市濟(jì)陽(yáng)區(qū)安家莊村（2019 年）、山東省泰安市岱岳區(qū)西良甫村（2020 年）、山東省泰安市岱岳區(qū)朱家莊村（2020 年）等地的黃瓜和番茄大棚內(nèi)進(jìn)行。試驗(yàn)共設(shè)3 個(gè)處理：30%噻唑膦微囊懸浮劑（制劑用量7.5 kg·hm，單株灌根施藥）、5%噻唑膦微乳劑（制劑用量45 kg·hm，單株灌根施藥）和清水對(duì)照。每個(gè)處理設(shè)4 次重復(fù)，采用隨機(jī)區(qū)組排列，小區(qū)面積15～45 m。

作物定植后緩苗15 d 施藥，每小區(qū)按試驗(yàn)劑量稱取制劑，按照400 mL·株藥液量進(jìn)行單株灌根施藥。其他正常管理。

于施藥后30、60、90 d 在每小區(qū)隨機(jī)挖取20株，調(diào)查各處理根結(jié)線蟲發(fā)病率、發(fā)病級(jí)數(shù)，計(jì)算病情指數(shù)和防治效果。公式如下：

發(fā)病率=（發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)）× 100%

病情指數(shù)=〔∑（病級(jí) × 該病級(jí)株數(shù)）/（最高病級(jí) ×調(diào)查總株數(shù)）〕 × 100

防效=〔（對(duì)照組病情指數(shù) -處理組病情指數(shù)）/對(duì)照組病情指數(shù)〕× 100%

病情分級(jí)依據(jù)GB/T19780.38—2000《農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則（一）殺線蟲劑防治根部線蟲病》進(jìn)行。0 級(jí)：根系無(wú)蟲癭；1 級(jí)：根系有少量小蟲癭；3 級(jí)：2/3 根系布滿小蟲癭；5 級(jí)：根系布滿小蟲癭并有次生蟲癭；7 級(jí)：根系形成須根團(tuán)。

2 結(jié)果與分析

2.1 噻唑膦對(duì)不同地區(qū)根結(jié)線蟲J2 活性的影響

室內(nèi)浸蟲法試驗(yàn)對(duì)各地區(qū)根結(jié)線蟲的室內(nèi)毒力結(jié)果見(jiàn)表1。噻唑膦處理各試驗(yàn)地采集的根結(jié)線蟲J48 h 后，LC值在4.18～5.86 mg·L，均表現(xiàn)出良好的活性。

表1 噻唑膦對(duì)不同地區(qū)根結(jié)線蟲J2 活性的影響

2.2 30%噻唑膦微囊懸浮劑對(duì)根結(jié)線蟲的防治效果

30%噻唑膦微囊懸浮劑防治根結(jié)線蟲的田間藥效試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖1。施藥后30 d，30%噻唑膦微囊懸浮劑與5%噻唑膦微乳劑防效都在80%以上，兩者間差異不顯著。施藥后60 d，30%噻唑膦微囊懸浮劑防效最高達(dá)80.22%，最低為69.61%，5%噻唑膦微乳劑防效最高達(dá)71.84%，最低為60.04%，兩者間差異達(dá)到顯著或極顯著水平。施藥后90 d，30%噻唑膦微囊懸浮劑防效最高可達(dá)72.12%，5%噻唑膦微乳劑最高防效僅為61.90%，30%微囊懸浮劑的防效均極顯著優(yōu)于5%噻唑膦微乳劑。

圖1 30%噻唑膦微囊懸浮劑對(duì)根結(jié)線蟲的田間防效

3 結(jié)論與討論

應(yīng)用化學(xué)農(nóng)藥仍是根結(jié)線蟲防治的主要措施。噻唑膦作為防治根結(jié)線蟲的主流藥劑，雖然已經(jīng)推廣了多年，但仍被廣泛應(yīng)用。

賢振華等（2014）測(cè)定噻唑膦對(duì)南方根結(jié)線蟲的LC（24 h）值為13.93 mg·L；漆永紅等（2011）的試驗(yàn)結(jié)果則表明10%噻唑膦顆粒劑處理南方根結(jié)線蟲24 h 后，其LC值為5.91 mg·L。本試驗(yàn)室內(nèi)毒力試驗(yàn)結(jié)果表明，噻唑膦處理南方根結(jié)線蟲48 h 后，對(duì)濟(jì)南、泰安地區(qū)2 種作物上采集的根結(jié)線蟲的LC值為4.18～5.86 mg·L，與前人測(cè)定結(jié)果差異不大，藥劑對(duì)南方根結(jié)線蟲依然表現(xiàn)出良好的活性。

微囊懸浮劑是通過(guò)一定方法將農(nóng)藥包裹于特定囊壁之內(nèi)，以達(dá)到緩慢釋放、避免敏感有效成分的光解、提升穩(wěn)定性、提高持效期、減少使用量的一種劑型，同時(shí)藥劑微囊化可明顯減少噻唑膦等有機(jī)膦農(nóng)藥刺激性氣味，減輕農(nóng)藥對(duì)農(nóng)作物的藥害（李北興 等，2014）。噻唑膦屬于易降解的農(nóng)藥（馬濤等，2017），魏蕓霞等（2018）通過(guò)GC-FPD 測(cè)定藥后30 d 噻唑膦在土壤中消解率達(dá)89.62%，田間施用時(shí)保證噻唑膦在土壤中的穩(wěn)定性可以在很大程度上延長(zhǎng)噻唑膦對(duì)線蟲的作用時(shí)間。本試驗(yàn)田間試驗(yàn)結(jié)果表明，30%噻唑膦微囊懸浮劑在施藥初期（藥后30 d）與5%噻唑膦微乳劑對(duì)根結(jié)線蟲的防效差異不顯著，但隨著時(shí)間延長(zhǎng)（藥后60 d 和90 d），二者防效差異達(dá)顯著或極顯著水平。說(shuō)明隨著時(shí)間延長(zhǎng)，5%噻唑膦微乳劑迅速降解，防效明顯下降，而30%噻唑膦微囊懸浮劑在緩釋性、持效性方面的優(yōu)勢(shì)明顯，從而能夠減少施藥次數(shù)，減少農(nóng)藥用量，保障農(nóng)產(chǎn)品安全。