2018—2020年新疆地區(qū)肥育豬主要病毒性傳染病的抗體檢測與分析

常軍帥，程露露，楊盛源，屈勇剛，梁 晏，李 娜，陳 寧，黨瑞瑩，邱國斌

（1.石河子大學動物科技學院，新疆 石河子 832003；2.動物疾病防控兵團重點實驗室，新疆 石河子 832003；3.第四師畜牧獸醫(yī)站，新疆 可克達拉 831304）

肥育豬通常指體重30 kg以上的商品豬群，可細分為肥育前期（30～60 kg）和肥育后期（60 kg以上）[1]。肥育豬是生豬養(yǎng)殖的最后階段，要想獲得更高的經(jīng)濟效益，就要提高存活率，降低料重比，用最短的時間、最低的成本來完成肥育豬的飼養(yǎng)過程。該階段豬群的消化系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)逐漸完善，對疾病的抵抗力也在不斷增強。肥育豬患病后死亡率低，但造成的料重比增高，嚴重影響了豬場的經(jīng)濟效益，并且患病豬長期向外排毒，威脅其他豬群健康。在生產(chǎn)中，危害肥育豬健康的主要為病毒性傳染?。簜慰袢。≒seudorabies，PR），其病原體為偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV），肥育豬患病后只有輕微的呼吸系統(tǒng)癥狀，體溫略有升高，2～3 d可自愈，經(jīng)常被誤診為豬流感，患病豬長期向外排毒[2]；豬圓環(huán)病毒?。≒orcine circovirus diseases,PCVD），主要是由豬圓環(huán)病毒2型（Porcine circovirus type 2, PCV2）引起，通過感染肥育豬淋巴結(jié)，降低機體免疫系統(tǒng)，感染PCVD后常繼發(fā)其他疾病或加重已患病的臨床癥狀，嚴重影響了疫苗免疫效果；豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS），其主要特點是導(dǎo)致呼吸道疾病和繁殖障礙，其病原為豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV），肥育豬患病呈一過性反應(yīng)，臨床可見呼吸急促、咳嗽、腹瀉、體溫升高等癥狀，采食量減少，料重比增高[3]；豬瘟（Classical swine fever, CSF） ，是由豬瘟病毒（Classical swine fever virus, CSFV）引起的一種急性、熱性和高度接觸性傳染病，世界動物衛(wèi)生組織（Office International Des Epizooties, OIE）將CSF列為必須上報的動物疫病，我國將其列為一類動物疫病，肥育豬患病后高燒不退、便秘、皮膚呈出血點，實質(zhì)性器官發(fā)生病變[4]。因此，為預(yù)防各種病毒性傳染病帶來的危害，生產(chǎn)中常采用疫苗免疫來保障豬群健康。

為監(jiān)測豬群抗體水平，以便定期調(diào)整免疫程序，生產(chǎn)中常采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）進行抗體檢測。該方法具有很高的特異性和靈敏度，可在短時間內(nèi)大批量檢測血清樣品，已被列為標準方法，在許多國家使用[4]。本試驗采用ELISA方法對采集到的216份肥育豬血清進行了PRV-gB、PRV-gE、PCV2、PRRSV、CSFV的抗體檢測，以期為該區(qū)的肥育豬的健康養(yǎng)殖提供幫助。

1 材料

1.1 樣品

2018年1月至2020年12月期間從新疆石河子市、巴音郭楞蒙古自治州、伊犁、塔城地區(qū)、奎屯市、阿克蘇市，隨機采集肥育豬216份血清樣品，送至石河子大學動物科技學院傳染病實驗室進行檢測。

1.2 材料和儀器

豬瘟病毒（CSFV）ELISA抗體檢測試劑盒、豬偽狂犬病病毒gB（PRV-gB）ELISA抗體檢測試劑盒、藍耳病病毒（PRRSV）ELISA抗體檢測試劑盒、豬偽狂犬病病毒gE（PRV-gE）ELISA檢測試劑盒均購自北京愛德士元亨生物科技有限公司；豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）ELISA抗體檢測試劑盒，購自哈爾濱元亨生物藥業(yè)有限公司；獸用一次性采血器5 mL為美康實業(yè)有限公司產(chǎn)品；自動酶標儀、微量移液器購自賽默飛世爾科技公司。

2 方法

2.1 樣品處理

將肥育豬固定好后，使用酒精棉球?qū)η扒混o脈窩消毒，采集5 mL血液，室溫下斜置30 min，收集血清，放于4 ℃短期保存。

2.2 ELISA檢測方法

根據(jù)不同檢測項目的說明書，進行PRV-gB、PRV-gE、PCV2、PRRSV、CSFV的抗體檢測。注意各個檢測過程中的溫度及避光要求。

2.3 結(jié)果判定

PRV-gB、PRV-gE：當陰性O(shè)D650平均值-陽性O(shè)D650平均值≥0.3時，試驗成立。計算S/N。當S/N＞0.70時，為陰性；當0.60＜S/N≤0.70時，為可疑；當S/N≤0.60時，為陽性。

PCV2：試驗成立的條件是陰性對照的OD450均值≤0.15，陽性對照OD450均值≥0.60。計算臨界值，被檢樣品OD450值＜臨界值，判定為抗體陰性；被檢樣品OD450值≥臨界值，則判定為抗體陽性。

PRRSV：試驗成立后，計算S/P值。S/P≥0.40為陽性，S/P＜0.40判為陰性。

CSFV：試驗判定成立后，計算阻斷率。當阻斷率≤30%時，為陰性；當30%＜阻斷率＜40%時，為可疑；當阻斷率≥40%時，為陽性。

當出現(xiàn)可疑時，再次檢測。不符合陽性標準，統(tǒng)一安排陰性處理（PRV-gE相反）。

2.4 數(shù)據(jù)分析

使用SPSS 20.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計算總體平均數(shù)。

3 結(jié)果

3.1 PRV-gB抗體檢測結(jié)果

在2018—2020年中，新疆地區(qū)肥育豬整體PRV-gB抗體陽性率為90.68%（107/118），其中2018年、2019年、2020年的PRV-gB抗體陽性率分別是100.00%（40/40）、80.00%（28/35）、90.70%（39/43）；平均S/N值為0.24。結(jié)果見表1。

表1 不同年份的肥育豬PRV-gB抗體檢測結(jié)果

3.2 PRV-gE抗體檢測結(jié)果

在2018—2020年中，新疆地區(qū)肥育豬整體PRV-gE抗體陽性率為17.80%（21/118），其中2018年、2019年、2020年的PRV-gE抗體陽性率分別是12.50%（5/40）、11.43%（4/35）、27.91%（12/43）；平均S/N值為0.67。結(jié)果見表2。

表2 不同年份的肥育豬PRV-gE抗體檢測結(jié)果

3.3 PCV2抗體檢測結(jié)果

由表3可知，在2018—2020年中，新疆地區(qū)肥育豬整體PCV2抗體陽性率為90.22%（83/92），其中2018年、2019年、2020年的PCV2抗體陽性率分別是100.00%（9/9）、88.64%（39/44）、89.74%（35/39）。在平均OD450值中，2018年的最低，為1.40；2019年最高，為1.65。

表3 不同年份的肥育豬PCV2抗體檢測結(jié)果

3.4 PRRSV抗體檢測結(jié)果

由表4可知，在2018—2020年中，新疆地區(qū)肥育豬整體PRRSV抗體陽性率為84.26%（182/216），其中2018年、2019年、2020年的PRRSV抗體陽性率分別是100.00%（20/20）、100.00%（35/35）、78.88%（127/161）。在平均S/P值中，2020年的最低，為1.32；2019年最高，為3.12。

表4 不同年份的肥育豬PRRSV抗體檢測結(jié)果

3.5 CSFV抗體檢測結(jié)果

在2018—2020年中，新疆地區(qū)肥育豬整體CSFV抗體陽性率為85.34%（99/116），其中2018年、2019年、2020年的CSFV抗體陽性率分別是82.86%（29/35）、85.71%（30/35）、86.96%（40/46）。結(jié)果見表5。

表5 不同年份的肥育豬CSFV抗體檢測結(jié)果

4 討論與分析

4.1 肥育豬抗體整體分析

通過對2018—2020年新疆地區(qū)的肥育豬進行PRV、PCV2、PRRSV、CSFV的抗體檢測得出，這4種病毒性傳染病的抗體陽性率均超過了國家標準（70%），說明隨著豬只日齡增大，免疫系統(tǒng)逐漸完善，疫苗的免疫產(chǎn)生較高的抗體水平，對豬群起到了保護作用，減少了料重比的增加[5]。

4.2 肥育豬PRV抗體分析

呂遠蓉等[6]曾對四川省南充市規(guī)?；i場的PRV-gB、PRV-gE抗體水平進行檢測，肥育豬的陽性率分別為67.50%（135/200）和28.50%（57/200）；張利平等[7]得出河南省肥育豬群的PRV-gB、PRV-gE抗體陽性率分別為92.59%（625/675）和38.07%（257/675），新疆地區(qū)肥育豬的PRV-gE抗體陽性率為17.80%（21/118），均低于上述地方，可能是由于各地飼養(yǎng)管理、疫苗免疫程序等不同所致，PRV-gE抗體陽性則表示豬群中存在PRV感染，生產(chǎn)中需及時淘汰陽性病豬，定期檢測，才可使豬場逐漸凈化PRV。新疆地區(qū)肥育豬的PRV-gB抗體陽性率為90.68%（107/118），低于河南省卻遠高于四川省南充市，需結(jié)合PRV-gE檢測結(jié)果來進行管理。

4.3 肥育豬PCV2抗體分析

在2018—2020年中，新疆地區(qū)肥育豬整體PCV2抗體陽性率為90.22%（83/92），免疫效果良好。PCV2為豬的免疫抑制性疾病，感染該病后常造成豬群免疫力下降，為其他病原入侵機體提供了機會。為提高免疫合格率，肥育豬還需科學飼養(yǎng)管理、做好日常清理工作、制定更合理的免疫程序、規(guī)范疫苗的儲存及運輸、正確選擇和使用疫苗[8]。

4.4 肥育豬PRRSV抗體分析

雖然肥育豬整體PRRSV抗體陽性率為84.26%（182/216），但2019年P(guān)RRSV的平均S/P卻高達3.12。ELISA抗體檢測的缺點在于不能區(qū)分是疫苗或野毒感染造成肥育豬存在的抗體，生產(chǎn)中可針對S/P過高的樣品進行抗原檢測分析，減少病毒存在傳播的機會[9]。

4.5 肥育豬CSFV抗體分析

在2018—2020年中，新疆地區(qū)肥育豬整體CSFV抗體陽性率分別是82.86%（29/35）、85.71%（30/35）、86.96%（40/46），呈逐步上升趨勢，說明該地區(qū)對CSF免疫工作重視。范慶紅[5]檢測得出山東省萊州市肥育豬CSFV抗體陽性率為83.22%（119/143），與本次結(jié)果基本一致，說明這兩地豬群得到了有效地保護。

4.6 肥育豬飼養(yǎng)管理措施

肥育豬科學飼養(yǎng)管理主要包括：在保育豬轉(zhuǎn)至肥育圈舍分圈密度要適宜，每頭豬最佳占地面積約1.6～2.0 m2；單個圈舍內(nèi)豬只體重相差不超過5 kg；肥育豬怕熱，飼養(yǎng)溫度最好在18～22 ℃；定期驅(qū)蟲，一般在90日齡和145日齡驅(qū)蟲兩次；注意空氣流通，防止糞便堆積產(chǎn)生有害氣體損壞豬群呼吸系統(tǒng)；定期清理糞便，按時消毒。肥育豬群只有科學飼養(yǎng)管理，才會對疫苗產(chǎn)生良好的抗體。