2018—2021 年遼寧省豬口蹄疫免疫抗體水平監(jiān)測與分析

楊洺揚(yáng)，蘭德松，趙 培，孫世宇，馬建山，鄭洪玲，董 馨

（1. 遼寧省農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心遼寧省動(dòng)物醫(yī)學(xué)研究院，遼寧 沈陽 110164；2. 沈陽華美畜禽有限公司，遼寧 沈陽 110121）

口蹄疫（foot and mouth disease，F(xiàn)MD）是一種由口蹄疫病毒引起的感染豬、牛、羊、鹿等偶蹄動(dòng)物的急性、熱性和接觸性傳染病，臨床特征表現(xiàn)為口腔黏膜、蹄部及乳房皮膚出現(xiàn)水皰和爛斑，具有傳染性強(qiáng)、發(fā)病急、傳播快等特點(diǎn)[1-2]。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將口蹄疫列為A 類動(dòng)物疫病，我國將口蹄疫列為一類動(dòng)物傳染病，也是《國家中長期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）》中優(yōu)先防治和重點(diǎn)防范的動(dòng)物疫病之一[3-4]。為掌握遼寧省近年豬口蹄疫免疫效果及變化趨勢，研究對(duì)2018—2021 年春、秋兩季豬口蹄疫血清O型和A型免疫抗體的監(jiān)測數(shù)據(jù)進(jìn)行整理分析，查找遼寧省口蹄疫防控風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)，以期為遼寧省豬口蹄疫的有效防控提供參考[5]。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

2018—2021年，于遼寧省內(nèi)14個(gè)地級(jí)市，共采集口蹄疫免疫28 d豬血清6 218份。

采樣時(shí)間集中于4—10 月；采樣場點(diǎn)兼顧規(guī)?；B(yǎng)殖場和散養(yǎng)農(nóng)戶，其中覆蓋規(guī)?；B(yǎng)殖場168個(gè)和散養(yǎng)農(nóng)戶67 個(gè)。按照預(yù)期抗體合格率90%、95%置信水平、10%可接受誤差條件下進(jìn)行全群隨機(jī)抽樣[6]。

1.2 主要試劑

口蹄疫O 型抗體液相阻斷ELISA 檢測試劑盒和口蹄疫A型抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒，購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

1.3 試驗(yàn)方法

采用液相阻斷-酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法進(jìn)行血清抗體檢測，操作參考《口蹄疫診斷技術(shù)》（GB/T 18935—2018）[7]；被檢測樣本抗體效價(jià)大于或等于1∶128，即判為口蹄疫O型抗體陽性；1∶64～1∶128時(shí)，判為可疑；小于1∶64，判定為陰性?？梢裳鍢悠房梢灾販y；重測抗體效價(jià)大于或等于1∶128，判為陽性，小于1∶128判為陰性[8]。

2 結(jié)果與分析

2.1 遼寧省不同年份口蹄疫抗體監(jiān)測情況（見表1、表2）

由表1、表2 可知，2018—2021 年對(duì)全省共235 個(gè)養(yǎng)殖場點(diǎn)進(jìn)行口蹄疫抗體監(jiān)測（包括規(guī)模化養(yǎng)殖場168個(gè)和散養(yǎng)農(nóng)戶67個(gè)），共采集樣品6 218份，由于樣品析出血清效果差異（部分樣品血清析出量較少），部分樣本僅開展一項(xiàng)抗體檢測。

口蹄疫O 型抗體個(gè)體免疫合格率和場群免疫合格率分別為84.96%、84.68%；口蹄疫A 型抗體個(gè)體免疫合格率和群體免疫合格率分別為76.66%、73.62%，均達(dá)到農(nóng)業(yè)部不低于70%的要求。O 型抗體合格率呈逐年小幅度下降趨勢，2018 年A 型抗體合格率明顯低于其他年份，2018 年后逐年上升。

表1 遼寧省2018—2021年口蹄疫O型抗體監(jiān)測情況Tab.1 Surveillance of FMD O-type antibody in Liaoning Province from 2018 to 2021

2.2 遼寧省不同地級(jí)市口蹄疫抗體監(jiān)測情況（見表3、表4）

由表3、表4 可知，2018—2020 年共監(jiān)測了14 個(gè)地級(jí)市的179 個(gè)養(yǎng)殖場點(diǎn)的口蹄疫免疫抗體水平（2021 年監(jiān)測場點(diǎn)未計(jì)入統(tǒng)計(jì)）。各市O 型抗體個(gè)體免疫合格率為71.19%～95.16%，場群合格率為72.72%～100.00%，均達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的要求；各市A 型抗體個(gè)體免疫合格率為58.33%～91.67%，場群合格率為52.16%～93.90%。

2.3 遼寧省不同規(guī)模養(yǎng)殖場口蹄疫抗體監(jiān)測情況（見表5、表6）

由表5、表6 可知，2018—2021 年共監(jiān)測場點(diǎn)179 個(gè)（2021年部分監(jiān)測場點(diǎn)未計(jì)入統(tǒng)計(jì)），其中，規(guī)模場112個(gè)，散養(yǎng)戶67個(gè)。規(guī)模場和散養(yǎng)戶的O型抗體個(gè)體免疫合格率分別為88.08%、85.27%，場群免疫合格率分別為90.18%、88.06%。規(guī)模場和散養(yǎng)戶的A型抗體個(gè)體免疫合格率分別為78.11%、57.64%，場群免疫合格率分別為75.89%、56.72%。個(gè)體免疫合格率和場群免疫合格率規(guī)模場均顯著高于散養(yǎng)戶（P＜0.05）。

表4 遼寧省2018—2021年部分地級(jí)市口蹄疫A型抗體監(jiān)測情況Tab.4 Surveillance of FMD A-type antibody in some prefecture-level cities in Liaoning Province from 2018 to 2021

表5 遼寧省2018—2021年不同規(guī)模養(yǎng)殖場口蹄疫O型抗體監(jiān)測情況Tab.5 Surveillance of FMD O-type antibody in different scales farms of in Liaoning Province from 2018 to 2021

表6 遼寧省2018—2021年不同規(guī)模養(yǎng)殖場口蹄疫A型抗體監(jiān)測數(shù)據(jù)Tab.6 Surveillance of FMD A-type antibody in different scales farms of in Liaoning Province from 2018 to 2021

3 討論

3.1 不同年份口蹄疫抗體監(jiān)測情況

采集樣品時(shí)間覆蓋2018—2021 年，4 年中口蹄疫O 型免疫效果均保持較高水平，但呈逐年小幅下降，原因可能是養(yǎng)殖場戶均較為重視豬口蹄疫O 型的免疫，積極性較高。自2018年非洲豬瘟暴發(fā)，各養(yǎng)殖場戶生物安全意識(shí)顯著增強(qiáng)，飼養(yǎng)場區(qū)嚴(yán)格封閉管控，非本場人員不得進(jìn)入場區(qū)，強(qiáng)制免疫方式也隨之改變。但部分場戶采用自主領(lǐng)取疫苗、自主免疫的方式，疫苗的冷鏈運(yùn)輸保存和免疫注射技術(shù)難以得到有效保障，一定程度上影響了免疫效果。

2018年口蹄疫A型免疫效果較差（未達(dá)到70%），隨后3年明顯提高且均維持較高水平，其原因可能是2018年之前，豬口蹄疫A 型不是主要流行毒株血清型，未列入國家強(qiáng)制免疫范圍，養(yǎng)殖場戶免疫積極性較低，通常采用口蹄疫O型單價(jià)疫苗免疫；豬口蹄疫A型免疫列入國家強(qiáng)制免疫范圍后，口蹄疫O/A 雙價(jià)疫苗推出，豬口蹄疫A 型免疫密度逐年升高，免疫效果也隨之逐年提高[9]。

3.2 不同規(guī)模養(yǎng)殖場口蹄疫抗體監(jiān)測情況

由不同規(guī)模養(yǎng)殖場口蹄疫抗體監(jiān)測情況分析可知，規(guī)模場的個(gè)體免疫合格率和場群免疫合格率均明顯高于散養(yǎng)農(nóng)戶。規(guī)模場一般配備專職獸醫(yī)，執(zhí)行適合本場的免疫程序，在疫苗保存、免疫次數(shù)、免疫密度、防疫水平、免疫抑制類疫病控制方面均優(yōu)于散養(yǎng)農(nóng)戶。因此，規(guī)模場免疫效果高于明顯散養(yǎng)農(nóng)戶[10-11]。

3.3 不同血清型口蹄疫抗體監(jiān)測情況

綜合檢測結(jié)果可知，口蹄疫O型免疫效果明顯優(yōu)于口蹄疫A 型免疫效果。從免疫密度角度考慮，2018 年之前，O型口蹄疫為豬口蹄疫主要流行血清型，口蹄疫O型單價(jià)疫苗使用廣泛，免疫基礎(chǔ)好，養(yǎng)殖場戶較為重視，口蹄疫O 型免疫密度遠(yuǎn)高于A 型。從疫苗免疫效果角度分析，2018 年口蹄疫O/A 雙價(jià)疫苗廣泛使用后仍存在免疫效果差異現(xiàn)象。有部分學(xué)者認(rèn)為，O/A雙價(jià)疫苗中兩種毒株的病毒含量不同，導(dǎo)致兩種抗體效價(jià)存在差異[12]。從檢測方法角度分析，目前檢測口蹄疫免疫抗體一般采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法（ELISA）；檢測不同血清型抗體所選擇的包被抗原不同，導(dǎo)致ELISA 試驗(yàn)過程中，抗原抗體結(jié)合能力存在差異（O型檢測方法包被抗原的抗原性優(yōu)于A型檢測方法）。雖然采用同種原理試驗(yàn)方法，但敏感性和特異性也存在差異[13-15]。

3.4 局限性

本監(jiān)測數(shù)據(jù)自2018 年起至2021 年結(jié)束，覆蓋遼寧省14個(gè)地級(jí)市，采樣場點(diǎn)包括規(guī)模場和散養(yǎng)戶。因無法做到概率抽樣，個(gè)別年份、地區(qū)、場點(diǎn)采樣數(shù)量較少，可能存在系統(tǒng)誤差；且采樣僅區(qū)分規(guī)?；B(yǎng)殖場和散養(yǎng)農(nóng)戶，養(yǎng)殖場飼養(yǎng)規(guī)模未做區(qū)分。因此，本試驗(yàn)僅初步了解遼寧省2018—2021年口蹄疫免疫效果，后續(xù)可開展深入系統(tǒng)的免疫效果分析，以期為遼寧省口蹄疫防控提供全面科學(xué)的數(shù)據(jù)支持[6]。

4 結(jié)論

監(jiān)測結(jié)果分析表明，2018—2021年遼寧省豬場口蹄疫免疫效果總體較好，平均個(gè)體免疫合格率和場群免疫合格率均在70%以上，但個(gè)別地區(qū)散養(yǎng)農(nóng)戶的口蹄疫A型免疫效果不佳。因此，需持續(xù)加強(qiáng)散養(yǎng)戶的口蹄疫A型的免疫和監(jiān)測，降低口蹄疫發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。