王莎 唐愛民 冀少波
摘要:本試驗(yàn)旨在研究飼糧添加不同含量的殼寡糖對成貓血液免疫功能、糞便質(zhì)量的影響。選取27只成貓,隨機(jī)分3組,每組9個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)1只。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.03%、0.05%的殼寡糖。預(yù)飼期6d,試驗(yàn)期喂30d。結(jié)果表明:與對照組相比,添加0.03%、0.05%殼寡糖組,免疫性能有增加的趨勢,顯著地提高了免疫球蛋白A的分泌(P<0.05)。綜上,飼糧中添加殼寡糖可以提高貓機(jī)體的功能,可以應(yīng)用于貓糧中。
關(guān)鍵詞:貓;殼寡糖;免疫
殼寡糖又稱寡聚氨基葡糖、甲殼低聚糖,是由甲殼素脫乙?;漠a(chǎn)物殼聚糖降解獲得,是由2—10個(gè)氨基葡萄糖通過β-1,4-糖苷鍵鏈接而成的低聚糖[1],又稱β-1,4- 寡糖-葡萄糖胺。其資源比較豐富,殼寡糖也是自然界唯一大量存在的帶正電荷的堿性氨基多糖,是動物性纖維素。其水溶性能大于99%,比聚糖有更優(yōu)越的生物活性,無毒無副作用,可以直接通過腸道上皮細(xì)胞被吸收。以殼寡糖作為功能性食品形式早已應(yīng)用于食品工業(yè)中,并且在畜牧業(yè)生產(chǎn)中也被作為新型的飼料添加劑也得到了廣泛運(yùn)用。近年來隨著研究的深入,殼寡糖展現(xiàn)出特有的生理活性和功能,主要包括具有提高機(jī)體的免疫力功能[2],抗菌抑菌作用,增加抗腫瘤細(xì)胞的生長[3],促進(jìn)鈣、鐵等必需礦物質(zhì)吸收的效果,促進(jìn)肝臟脾臟抗體生成。調(diào)節(jié)動物血脂、血壓、血糖,調(diào)節(jié)消化道微生物區(qū)系,其中可以使雙歧桿菌增加120倍[4]等多種作用。
然而,當(dāng)今雖然對殼寡在畜禽、魚等的影響進(jìn)行了不少的研究,其相關(guān)的寡糖類的作用機(jī)理也有一定的研究,但是在寵物上研究較少,特別是貓上的研究少之甚少。因此本試驗(yàn)通過在貓日糧中添加不同濃度殼寡糖,探究對成年貓免疫功能的影響,及成年貓糞便質(zhì)量的影響,以期為殼寡糖在貓日糧中的應(yīng)用提供依據(jù)。
1 材料
1.1 殼寡糖購自某公司。
1.2 試驗(yàn)動物
選用27只發(fā)育良好,平均體重為(2.0±0.2)kg的10月齡的健康成年貓,隨機(jī)分為3組,每組9個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)1只。預(yù)飼期7d,正式試驗(yàn)期30d。
1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
依據(jù)成貓營養(yǎng)需要,對照組飼喂基礎(chǔ)糧,試驗(yàn)1組和2組分別在基礎(chǔ)糧上添加殼寡糖0.03%、0.05%。
1.4 飼養(yǎng)管理
試驗(yàn)貓隨機(jī)分為3組,飼養(yǎng)于同一動物舍,由專人采取相同的飼養(yǎng)管理方式,單籠飼養(yǎng)。試驗(yàn)前進(jìn)行驅(qū)蟲,并按常規(guī)免疫注射疫苗,每天飼喂2次,投料時(shí)間為早上8:00,下午4:00。飼糧需要稱重,保證寵物清潔飲水,貓舍清潔,通風(fēng)良好。
2 測定指標(biāo)與方法
2.1 血清指標(biāo)檢測
于試驗(yàn)第1天和第36天上午9點(diǎn)空腹采集左前肢靜脈血3mL,將采集的血液以4,000r/min離心5min,分離并收集上層血清,放置-20℃保存待測,最后樣品交于北京華英生物技術(shù)研究所檢測處理。
2.2 糞便質(zhì)量的測定
在試驗(yàn)期開始第1、15、30d,由6人組成客觀第三方對每只犬糞便進(jìn)行評分,評分標(biāo)準(zhǔn)(糞便含水量、糞便量)參考Nery J等方法對糞便質(zhì)量進(jìn)行等級評分。具體如表1:
2.3 數(shù)據(jù)分析
用Mircosoft Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入,SPSS22.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,用Duncan法進(jìn)行多重比較。結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,P<0.05表示差異顯著。
3 結(jié)果與分析
3.1 不同添加量的殼寡糖對貓免疫功能的影響
飼糧中添加不同含量的殼寡糖對成貓免疫功能的影響見表2。
從表2中看出飼糧中添加殼寡糖可以顯著提高成貓血清中的總蛋白的含量(P<0.05),增加免疫球蛋白A的水平。對白介素-6及免疫球蛋白G的含量無影響。
3.3 糞便評分影響及質(zhì)量
飼糧中添加不同含量的殼寡糖對貓的糞便評分的影響,飼糧中添加殼寡糖均保證成年貓的糞便正常,各組成貓的糞便評分無顯著差異(P>0.05),且糞便的評分都在2~2.5范圍內(nèi)。屬于成型良好,撿起來不留痕跡或者有印記之間。
飼糧中添加不同含量的殼寡糖對成貓糞便初水重的影響,見表3。
從表3可以看出,不同含量的殼寡糖對成貓糞便初水重?zé)o顯著影響(P>0.05)。
4 討論
動物機(jī)體的免疫系統(tǒng)主要由免疫器官、免疫細(xì)胞以及免疫分子組成。其中免疫分子由免疫球蛋白、補(bǔ)體、細(xì)胞分子、黏附分子及受體等組成。其中免疫球蛋白的含量是反應(yīng)免疫功能的重要指標(biāo)之一,它是含有抗體活性的動物蛋白,能與相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的球蛋白,是由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的,普遍存在于動物的血液、組織液、淋巴液和體外分泌液中的一類蛋白質(zhì),具有高特異性和高親和性。1964年WHO命名委員會統(tǒng)一將抗體和一些化學(xué)結(jié)構(gòu)、抗原性與其有關(guān)的蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白。并且免疫球蛋白對許多病原微生物和毒素具有抑制作用。免疫球蛋白以巨大的多樣性識別了外部世界紛繁的抗原結(jié)構(gòu),凝集、吞噬生物體內(nèi)的各細(xì)胞和毒素成分,增加機(jī)體防病抗病能力,免疫球蛋白的提高,可以反映動物機(jī)體的免疫力的強(qiáng)弱。白細(xì)胞介素-6 (Interleukin- 6),簡稱白介素6 (IL-6),是一種功能廣泛的多效性細(xì)胞因子。而白介素6的變化明顯是表現(xiàn)在病理狀態(tài)下。白介素6增加,可以反映動物機(jī)體處于病理狀態(tài),與疾病的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。
而本試驗(yàn)的結(jié)果表明,飼料中添加殼寡糖的含量可以增加對貓的免疫球蛋白A和免疫球蛋白G有增加的趨勢。從而提高貓的免疫力,增強(qiáng)抵抗力。這與唐峻等[5]的試驗(yàn)結(jié)果相似,通過飼料中添加殼寡糖能顯著的提高妊娠母豬的免疫功能,主要通過提高血清的sIgA的含量,提高了妊娠母豬抵抗外界的特異性病原體,提高了動物的抗感染能力。張藝等[6]研究殼寡糖同樣可以提高大菱鲆的免疫力,增強(qiáng)抗病力。對于小鼠來說,添加適量的殼寡糖也會提高它的特異性體液免疫和細(xì)胞免疫,添加量為120mg/kg[7]。還有Wu等[8]認(rèn)為,COS能顯著增加血清免疫球蛋白G與免疫球蛋白M的含量,從而增強(qiáng)小鼠的體液免疫功能[8]。這些試驗(yàn)看出飼糧中添加然殼寡糖能提高動物機(jī)體的免疫力,多數(shù)針對免疫分子類的物質(zhì)。寡糖提高機(jī)體免疫功能的可能機(jī)制有:①眾所周知寡糖本身具有一定的免疫原性,可以刺激機(jī)體的免疫應(yīng)答;②寡糖分子與存在于腸內(nèi)皮細(xì)胞上的有害微生物的受體結(jié)構(gòu)相似,可以與之表面結(jié)合,作為外源抗原的佐劑減緩抗原的吸收,從而提高了抗原的效價(jià),增強(qiáng)動物機(jī)體內(nèi)的體液和細(xì)胞的免疫反應(yīng)[9];③寡糖還可促進(jìn)腸道內(nèi)的有益菌的大量增殖,其中有益菌雙歧桿菌可以提高機(jī)體的抵抗能力,激活巨噬細(xì)胞的吞噬活性,從而影響機(jī)體的免疫功能[10]。李振達(dá)等[11]研究殼寡糖對凡納濱對蝦生長和免疫力的影響中添加適量的殼寡糖可以提高蝦的相關(guān)免疫酶活,從而對蝦的生長和成活率也產(chǎn)生一定的影響。此外,殼寡糖能激活巨噬細(xì)胞釋放白細(xì)胞介素-1,提升巨噬細(xì)胞的活性。對于殼寡糖在寵物貓上的研究及其對貓免疫力的改善還需要大量的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,其對寵物貓的作用機(jī)理需要探索。
5 結(jié)論
飼糧中添加殼寡糖可以提高貓免疫功能,因此可以適用于貓糧中提高貓對外界應(yīng)激及增加自身的抵抗力。
參考文獻(xiàn):
[1] 胡志鵬.殼寡糖的研究進(jìn)展[J].中國生化藥物雜志,2003(4):210-212.
[2] 張麗萍,董萬福.低聚殼聚糖在斷奶仔豬應(yīng)用的研究進(jìn)展[J].飼料研究,2016(6):12-15.
[3]黃鑫瑋,楊莎莎,劉毅,等.殼寡糖對幼建鯉生長性能,脂肪代謝,非特異性免疫功能和腸道健康的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報(bào), 2015, 27(7):2106-2114.
[4]Van der Werf M J,Venema K. Bifidobacteria: genetic modification and the study of their role in the colon[J].J Agri Food Chem,2001,49(1) :378-383.
[5] 湯峻,黃皓源,周樂禮,等.殼寡糖對妊娠后期母豬免疫功能和仔豬初生重的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2016,44(6):174-176.
[6]張藝,徐瑋,崔麗卿,等. 殼寡糖對大菱鲆生長和免疫功能的影響[J]. 中國海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2012, 42(10):71-74.
[7]竇江麗,譚成玉,白雪芳,等. 殼寡糖對小鼠免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用[J].中國海洋藥物,2005(5):37-39.
[8]Guan-James Wu,Guo-Jane Tsai. Cellulase degradation of shrimp chitosan for the preparation of a water‐soluble hydrolysate with immunoactivity[J]. Fisheries Science,2004,70(6):1113-1120.
[9]唐凌,鄺聲耀,馮琳,等.甘露寡糖對水生動物腸道菌群和免疫功能的影響[J].中國畜牧獸醫(yī),2008(6):21-25.
[10]李風(fēng)娜,張繼成.寡糖對腸道菌群的調(diào)節(jié)及常用研究方法[J].獸藥與飼料添加劑,2005(4):23-25.
[11] 李振達(dá),陳小娥,廖智,等.殼寡糖對凡納濱對蝦生長和免疫力的影響[J].南方水產(chǎn)科學(xué),2011,7(4):36-42.