草果甲醇溶出物抑制α-葡萄糖苷酶活性及調(diào)節(jié)血糖作用

解立斌，陳 佳，劇慧棟，胡連霞，韓愛(ài)云，俞龍泉

（石家莊學(xué)院化工學(xué)院，河北石家莊 050035）

過(guò)去三十多年間，中國(guó)糖尿病患病人數(shù)不斷增長(zhǎng)，2015～2017 年我國(guó)18 歲以上人群糖尿病患病率為11.2%，糖尿病人群中2 型糖尿病占90%以上[1-2]。α-葡萄糖苷酶抑制劑通過(guò)抑制小腸上皮細(xì)胞絨毛膜上的α-葡萄糖苷酶的活性，延緩人體對(duì)葡萄糖的吸收，控制餐后血糖的升高，有助于防治2 型糖尿病及其并發(fā)癥[3-4]。近年來(lái)，從藥用植物中篩選天然的α-葡萄糖苷酶抑制劑成為國(guó)內(nèi)外學(xué)者關(guān)注的研究熱點(diǎn)[5-6]。

草果（Amomum tsao-koCrevost et Lemaire），別名草果子、草果仁，為姜科（Zingiberaceae）豆蔻屬（Amomum）多年生常綠草本植物草果的成熟干燥果實(shí)。草果是一種藥食同源植物，具有健胃、消食、溫中、驅(qū)風(fēng)、促進(jìn)食欲等藥療作用[7]，收錄于中國(guó)藥典，在國(guó)內(nèi)廣泛應(yīng)用于食品香料行業(yè)。我國(guó)近10 多年來(lái)對(duì)草果化學(xué)成分、藥理作用及臨床應(yīng)用等方面進(jìn)行了一系列研究，發(fā)現(xiàn)草果可溶出芳香油，富含氨基酸、多種必需微量元素、多糖、多酚及黃酮類(lèi)化合物[8-9]。國(guó)內(nèi)外對(duì)其活性物質(zhì)的功效研究主要集中于抗氧化活性及降血脂等方面[10-12]。關(guān)于草果甲醇溶出物中活性脂質(zhì)成分抑制α-葡萄糖苷酶活性及血糖調(diào)節(jié)作用的系統(tǒng)研究尚未見(jiàn)報(bào)道。

本研究在前期對(duì)草果活性物質(zhì)進(jìn)行篩選的基礎(chǔ)上，通過(guò)體外試驗(yàn)研究草果甲醇溶出物對(duì)α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用，并通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究草果甲醇溶出物對(duì)改善空腹血糖、葡萄糖耐量以及胰島素抵抗三方面的影響，為利用該植物活性成分開(kāi)發(fā)降糖新藥提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

新鮮草果 購(gòu)自云南；C57BL/6 小鼠 成年雄性，SPF 級(jí)，8 周齡，體重28～32 g，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，許可證號(hào)：SCXK（京）2016-0006；柱層層析硅膠 200～300 目 青島海洋化工廠分廠；人體α葡萄糖苷酶檢測(cè)試劑盒 上海谷研實(shí)業(yè)有限公司；阿卡波糖標(biāo)準(zhǔn)品 石家莊華榮制藥有限公司；PBS 磷酸鹽 上海雷磁·創(chuàng)益儀器儀表有限公司；胰島素酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒 石家莊輝端生物科技有限公司；豬油 臺(tái)灣正義食品有限公司；無(wú)水甲醇 色譜純，天津市河?xùn)|區(qū)紅巖試劑廠；氯仿、丙酮、碳酸氫鈉 均為分析純，天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司；小鼠常規(guī)飼料 即空白組飼料，購(gòu)自河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心；模型組飼料 在常規(guī)飼料基礎(chǔ)上，添加10%的豬油[13]；草果低劑量組飼料 在模型組飼料基礎(chǔ)上，每公斤飼料添加100 mg 的草果甲醇溶出物；草果高劑量組飼料 在模型組飼料基礎(chǔ)上，每公斤飼料添加200 mg 的草果甲醇溶出物[14]。

HC-100 型高速萬(wàn)能粉碎儀 浙江省永康市金穗機(jī)械制造廠；RE-52AA 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠；XD-1200D 型超聲波細(xì)胞粉碎機(jī) 南京先歐儀器制造有限公司；RT-6000 全自動(dòng)酶標(biāo)儀 美國(guó)雷杜公司；OneTouch UltraTM 快速血糖測(cè)定儀及試紙 美國(guó)強(qiáng)生公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 草果甲醇溶出物的制備 取新鮮草果去殼，烘干粉碎為不大于100 目粉末。稱取50 g 草果粉末，加入混合醇提液（200 mL 氯仿、400 mL 甲醇和40 mL蒸餾水）靜置12 h，均質(zhì)5 min（18000 r/min），冷卻后用超聲波細(xì)胞粉碎儀粉碎10 min（功率70%，工作頻率20～25 Hz）。粉碎后混合物經(jīng)真空抽濾后收集濾液，濾餅加入減半量混合醇提液（100 mL 氯仿、200 mL甲醇和20 mL 蒸餾水），按照前述方法重復(fù)萃取兩次，收集3 次濾液，加入60 g 已活化硅膠粉末，經(jīng)25 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到草果脂質(zhì)硅膠粉末。將此粉末樣品干法上柱（自制50?×250 mm 的200～300 目硅膠氫柱，柱中硅膠分別依次經(jīng)甲醇、丙酮、氯仿4 h 活化預(yù)處理），先后用600 mL 氯仿、600 mL 丙酮、600 mL 甲醇洗脫，甲醇洗脫液經(jīng)微孔濾膜（0.22 μm）過(guò)濾，再經(jīng)蒸發(fā)濃縮、冷凍干燥后得到草果甲醇溶出物粉末[15-16]。

1.2.2 溶液的配制 PBS 磷酸鹽緩沖液：以蒸餾水為溶劑，制成濃度為10 mg/mL，pH 為6.8 的磷酸鹽緩沖液；α-葡萄糖苷酶溶液：以磷酸鹽緩沖液為溶劑，配制成濃度為1 U/mL 的溶液；PNPG 溶液：以磷酸鹽緩沖液為溶劑，配制成12.5 mmol/L 的溶液；草果甲醇溶出物溶液：取草果甲醇溶出物粉末，用磷酸鹽緩沖液配制成濃度為0.02、0.1、0.5、2.5、7.5 mg/mL不同反應(yīng)梯度的供試品溶液；阿卡波糖溶液：取阿卡波糖標(biāo)準(zhǔn)品，用磷酸鹽緩沖液配制成濃度為0.02、0.1、0.5、2.5、7.5 mg/mL 不同反應(yīng)梯度的對(duì)照品溶液；碳酸氫鈉溶液：以蒸餾水為溶劑，制成pH 為9.8的溶液。

1.2.3α-葡萄糖苷酶抑制實(shí)驗(yàn)α-葡萄糖苷酶抑制實(shí)驗(yàn)采用PNPG 法[17]。實(shí)驗(yàn)底物為對(duì)硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（PNPG），以PNP 的生成量計(jì)算α-葡萄糖苷酶活性。取草果甲醇溶出物樣品溶液、阿卡波糖測(cè)定溶液各40 μL 至96 孔板中，加入1 U/mL的α-葡萄糖苷酶溶液40 μL，混勻，于37 ℃孵育5 min；加入12.5 mmol/L 的PNPG 溶液20 μL，混勻，于37 ℃孵育30 min；加入碳酸氫鈉溶液100 μL 終止反應(yīng)（此時(shí)反應(yīng)總體積達(dá)200 μL）。以PBS 40 μL 為空白對(duì)照，以PBS 40 μL 代替α-葡萄糖苷酶溶液作為檢測(cè)背景以消除檢測(cè)誤差，使用酶標(biāo)儀于405 nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)各孔的光密度（OD），按下式計(jì)算2 種待測(cè)溶液對(duì)于α-葡萄糖苷酶活性的抑制率。

1.2.4 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

1.2.4.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及造模 實(shí)驗(yàn)小鼠經(jīng)適應(yīng)性喂養(yǎng)1 周后隨機(jī)分為2 組，為空白組（10 只）和模型組（40 只），空白組以常規(guī)飼料喂養(yǎng)，模型組以高脂飼料喂養(yǎng)，連續(xù)飼喂6 周后，模型組小鼠禁食不禁水14 h，按35 mg/kg?BW 腹腔注射由檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液（pH4.35）配制的1%鏈脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）溶液，72 h 后剪尾取血，以血糖儀測(cè)定空腹血糖高于11.1 mmol/L 作為建模成功的標(biāo)志[18]。本實(shí)驗(yàn)建模成功率為75%，將建模成功的30 只小鼠隨機(jī)分為3 組，分別為模型組、草果低劑量組、草果高劑量組，每組各10 只。各組分別給予模型組飼料、草果低劑量組飼料、草果高劑量組飼料，持續(xù)喂養(yǎng)6 周后實(shí)驗(yàn)結(jié)束。實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物自由飲用瓶裝飲用水，動(dòng)物識(shí)別采用5%苦味酸標(biāo)記。

1.2.4.2 一般狀態(tài)評(píng)估 實(shí)驗(yàn)期間，每天觀察小鼠毛色、飲食水、排泄以及活動(dòng)等基本情況，每周稱量攝食量、飲水量和體重。

1.2.4.3 空腹血糖測(cè)定 小鼠禁食不禁水6 h 后，通過(guò)剪尾采血，測(cè)定各組小鼠的空腹血糖。從實(shí)驗(yàn)第6 周開(kāi)始，每2 周1 次，連續(xù)4 次。

1.2.4.4 糖耐量試驗(yàn) 分別于實(shí)驗(yàn)第6 和第12 周時(shí)進(jìn)行葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)。在小鼠禁食10 h 后，腹腔注射葡萄糖溶液（1.5 g/kg），分別在注射前（0 min）、注射后15、30、60 和120 min 時(shí)，通過(guò)小鼠尾部采血，使用OneTouch UltraTM 快速血糖測(cè)定儀測(cè)量血糖水平，計(jì)算血糖曲線下面積AUC[19]，計(jì)算公式：

AUC=[（BG0+BG15）+（BG15+BG30）+（BG30+BG60）×2+（BG60+BG120）×4]×0.25×0.5

式中：BGi為在第i min 時(shí)的血糖值。

1.2.4.5 胰島素抵抗評(píng)估 于實(shí)驗(yàn)第13 周時(shí)，禁食10 h 后，于次日眼球后靜脈叢采血，用OneTouch UltraTM 快速血糖測(cè)定儀測(cè)定空腹血糖，剩余血液離心（3000 r/min，15 min）取血漿，利用ELISA 試劑盒測(cè)定空腹胰島素水平，基于空腹血糖和胰島素計(jì)算HOMA-β和HOMA-IR 作為表征胰島素抵抗的指標(biāo)[20]，計(jì)算公式：HOMA-β（%）=[20×空腹胰島素水平（mIU/L）]/[空腹血糖水平（mmol/L）-3.5]，HOMAIR=空腹血糖（mmol/L）×空腹胰島素（μU/mL）/22.5。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS19.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，正態(tài)分布資料兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，非正態(tài)分布資料兩組間比較采用兩獨(dú)立樣本符號(hào)秩和檢驗(yàn)。多組間比較采用單因素方差分析，如各組符合方差齊性則組間兩兩比較使用SNK法，如方差不齊，則使用 Dunnett’s T3 法。P值小于0.05認(rèn)為組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 草果甲醇溶出物對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制作用

本研究前期針對(duì)草果活性物質(zhì)進(jìn)行了篩選，通過(guò)丙酮、氯仿、甲醇等對(duì)草果脂質(zhì)進(jìn)行分離，分別確定各活性組分的生理活性，確定草果甲醇溶出物中富含降糖活性成分[21-22]，因此本研究在前期試驗(yàn)的基礎(chǔ)上采用甲醇溶出物作為考察對(duì)象。

由圖1 可見(jiàn)，草果甲醇溶出物和阿卡波糖對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制均呈劑量依賴關(guān)系，隨著劑量的加大，抑制率增大。當(dāng)草果甲醇溶出物溶液濃度為0.5 mg/mL 時(shí)，對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制率達(dá)到63.72%。草果甲醇溶出物對(duì)α-葡萄糖苷酶的半數(shù)抑制濃度（IC50）為0.145 mg/mL，阿卡波糖為0.273 mg/mL，IC50的差異表明草果甲醇溶出物對(duì)α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用強(qiáng)于阿卡波糖。

圖1 草果甲醇溶出物和阿卡波糖對(duì)α-葡萄糖苷酶活力的抑制作用（n=3）Fig.1 Inhibitory effect of methanol extracts from Amomum tsao-ko and acarbose on the activity of α-glucosidase (n=3)

2.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 對(duì)小鼠攝食量、飲水量和體重的影響 由表1可見(jiàn)，與空白組相比，模型組在連續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)6 周后，小鼠攝食量、飲水量、體重都顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），印證了模型的有效性。本研究以小鼠腹腔注射STZ 溶液72 h 后采血測(cè)定空腹血糖高于11.1 mmol/L 為建模成功的標(biāo)志。12 周時(shí)模型組小鼠的飲水量、體重均顯著（P<0.05）高于空白組，說(shuō)明小鼠糖脂代謝紊亂狀態(tài)未得到緩解。經(jīng)每天飼喂草果低、高劑量組飼料干預(yù)6 周后，即在實(shí)驗(yàn)第12 周時(shí)，草果低劑量組和草果高劑量組小鼠的攝食量、飲水量都低于模型組（P<0.05），但仍高于空白組（P<0.05）。草果低劑量組和草果高劑量組小鼠的體重變化不明顯，在第12 周時(shí)均顯著低于模型組（P<0.05，P<0.01），與常規(guī)飼料組相比，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。說(shuō)明草果甲醇溶出物可能有改善小鼠代謝，減少體內(nèi)脂肪存儲(chǔ)量，抑制體重增長(zhǎng)的作用[23-24]。

表1 草果甲醇溶出物對(duì)小鼠攝食量、飲水量和體重的影響（，n=10）Table 1 Effects of methanol extracts from Amomum tsao-ko on food intake,water intake and body weight in mice (,n=10)

表1 草果甲醇溶出物對(duì)小鼠攝食量、飲水量和體重的影響（，n=10）Table 1 Effects of methanol extracts from Amomum tsao-ko on food intake,water intake and body weight in mice (,n=10)

注：#表示與空白組比較，P<0.05，##表示與空白組比較，P<0.01；*表示與模型組比較，P<0.05，**表示與模型組比較，P<0.01；圖2～圖3、表2同。

2.2.2 對(duì)小鼠空腹血糖的影響 由圖2 可見(jiàn)，空白組小鼠比較穩(wěn)定地維持空腹血糖低水平，模型組、草果低劑量組、草果高劑量組的空腹血糖值在4 個(gè)觀察點(diǎn)上均極顯著高于空白組（P<0.01）。當(dāng)給予低、高劑量的草果甲醇溶出物干預(yù)2 周后，即實(shí)驗(yàn)第8 周，草果低、高劑量組小鼠的空腹血糖值開(kāi)始下降，且均低于模型組。經(jīng)干預(yù)6 周后，低劑量組小鼠空腹血糖與模型組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，高劑量組空腹血糖顯著低于模型組（P<0.05），這應(yīng)與草果甲醇溶出物能抑制寡糖分解為單糖，減少腸腔對(duì)葡萄糖的吸收相關(guān)[25]。但草果低、高劑量組空腹血糖仍高于空白組，可見(jiàn)草果干預(yù)后并未逆轉(zhuǎn)空腹血糖受損，尚未能從根本上改善胰島β細(xì)胞的功能[26]。

圖2 草果甲醇溶出物對(duì)小鼠空腹血糖的影響Fig.2 Effect of methanol extracts from Amomum tsao-ko on fasting blood glucose in mice

2.2.3 對(duì)小鼠葡萄糖耐量的影響 如圖3 所示，與空白組相比，模型組在連續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)6 周后，葡萄糖耐量AUC 顯著增加（P<0.01）。經(jīng)低、高劑量組的草果甲醇溶出物干預(yù)6 周后，在實(shí)驗(yàn)第12 周時(shí)，草果低、高劑量組小鼠AUC 均顯著低于模型組（P<0.05）。草果低劑量組小鼠AUC 顯著高于空白組（P<0.05），草果高劑量組小鼠AUC 與空白組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.07>0.05）。糖耐量低減主要是由于高脂飲食破壞小鼠血糖調(diào)節(jié)及脂質(zhì)代謝能力[27-28]，引起糖脂代謝紊亂，草果甲醇溶出物對(duì)高脂飲食引起的糖耐量異常有一定改善作用。

圖3 草果甲醇溶出物對(duì)小鼠葡萄糖耐量的影響Fig.3 Effect of methanol extracts from Amomum tsao-ko on glucose tolerance in mice

2.2.4 對(duì)小鼠胰島素抵抗的影響 胰島素抵抗指數(shù)HOMA-IR，會(huì)隨著胰島素抵抗水平升高而升高，胰島β細(xì)胞功能HOMA-β，會(huì)隨著胰島β細(xì)胞功能降低而減少。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)第13 周對(duì)各組進(jìn)行胰島素抵抗評(píng)估后發(fā)現(xiàn)（表2），與空白組相比，模型組小鼠出現(xiàn)了明顯的胰島素抵抗（P<0.001），當(dāng)用高劑量草果甲醇溶出物進(jìn)行干預(yù)后，其HOMA-β較模型組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），HOMA-IR 較模型組降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說(shuō)明高劑量草果甲醇溶出物改善了由高脂飼料誘導(dǎo)的胰島素抵抗。

表2 草果甲醇溶出物對(duì)小鼠胰島素抵抗的影響（）Table 2 Effect of methanol extracts from Amomum tsao-ko on insulin resistance in mice ()

表2 草果甲醇溶出物對(duì)小鼠胰島素抵抗的影響（）Table 2 Effect of methanol extracts from Amomum tsao-ko on insulin resistance in mice ()

3 討論

天然植物中的多酚、黃酮具有較明確的降糖功效[29]。單恬恬等[30]將草果粉碎后，分別使用70%無(wú)水乙醇和超純水（1:10 料液比），經(jīng)提取、凍干得到草果提取物，測(cè)得其中水提物總多酚、總黃酮含量分別為21.83±0.56、24.81±0.11 mg/g，醇提物總多酚、總黃酮含量分別為33.99±0.62、63.24±1.59 mg/g。任洪濤等[31]使用高效液相色譜法檢測(cè)草果中酚酸，發(fā)現(xiàn)其中原兒茶酸含量為9.12～17.42 mg/kg、原兒茶醛為7.11～15.51 mg/kg。本研究前期實(shí)驗(yàn)推測(cè)，草果甲醇溶出物降糖作用可能與其所含酚類(lèi)物質(zhì)兒茶素（兒茶酸）有關(guān)[32]，且經(jīng)福林酚法初步測(cè)定總酚含量不低于0.5 mg/g。這些研究表明從草果所含化學(xué)成分看，草果活性成分應(yīng)可作為天然降糖物質(zhì)進(jìn)行研究。

α-葡萄糖苷酶是小腸內(nèi)麥芽糖、蔗糖的水解酶，通過(guò)飲食攝入的碳水化合物在α-葡萄糖苷酶的作用下，釋放葡萄糖并經(jīng)小腸吸收進(jìn)入血液，是餐后血糖升高的主要原因。α-葡萄糖苷酶抑制劑則可使淀粉分解為葡萄糖的速度減慢、延緩或抑制葡萄糖的吸收，可有效的降低餐后高血糖[33]。草果屬于姜科植物，國(guó)內(nèi)外有較多對(duì)姜科植物抑制α-葡萄糖苷酶作用的研究。陳浩南等[34]對(duì)高良姜的α-葡萄糖苷酶抑制作用研究中，發(fā)現(xiàn)高良姜中有豐富的多酚類(lèi)化合物，對(duì)α-葡萄糖苷酶的IC50為14.45 mg/mL。劉富月[35]對(duì)34 種生姜中降血糖物質(zhì)的篩選中，發(fā)現(xiàn)7 個(gè)生姜品種的乙醇提取物對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制活性超過(guò)60%，適合作為α-葡萄糖苷酶抑制劑。吳相歡[36]對(duì)黃姜花化學(xué)成分和藥理活性的研究發(fā)現(xiàn)，黃姜花根莖水提物和醇提物對(duì)α-葡萄糖苷酶表現(xiàn)極強(qiáng)的抑制效果，且抑制效果均比陽(yáng)性阿卡波糖好。He 等[37-38]的研究發(fā)現(xiàn)，草果中的多種二芳基庚烷類(lèi)化合物具有α-葡萄糖苷酶抑制作用。本研究的體外試驗(yàn)結(jié)果表明，草果甲醇溶出物對(duì)α-葡萄糖苷酶的IC50為0.145 mg/mL，抑制效果優(yōu)于阿卡波糖，與上述研究結(jié)果一致，說(shuō)明草果甲醇溶出物有明顯的α-葡萄糖苷酶抑制活性。此結(jié)果是相較團(tuán)隊(duì)前期研究做出的更細(xì)化深入的探索。

空腹血糖是臨床最常用的檢測(cè)指標(biāo)，可反映胰島β細(xì)胞的功能。胰島β細(xì)胞可以分泌適量胰島素，用以調(diào)節(jié)機(jī)體肌糖原和肝糖原與血液葡萄糖水平之間的平衡，長(zhǎng)期處于高血糖狀態(tài)會(huì)影響β細(xì)胞功能，增加β細(xì)胞凋亡[24]。Christ 等[39]和Cani 等[40]的研究認(rèn)為高脂飲食可間接通過(guò)影響腸粘膜通透性介導(dǎo)內(nèi)毒素入血引起機(jī)體長(zhǎng)期慢性炎癥與胰島素抵抗、血脂紊亂。在本研究的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)給予草果甲醇溶出物干預(yù)后，原本經(jīng)高脂飼料誘導(dǎo)的高血糖得到了一定改善，空腹血糖值有所下降，糖耐量受損和胰島素抵抗均得到一定改善，這可能是由于草果甲醇溶出物能選擇性地影響小腸二糖水解酶中消化蔗糖的蔗糖酶，從而抑制蔗糖的吸收，通過(guò)降低循環(huán)血糖途徑對(duì)于改善胰島素抵抗，保護(hù)胰島細(xì)胞正常生理功能，起到增強(qiáng)糖耐量作用[26]，這與其體外試驗(yàn)中表現(xiàn)出的α-葡萄糖苷酶抑制作用有密切的關(guān)聯(lián)。李姣[41]通過(guò)對(duì)2 型糖尿病大鼠使用草果乙醇提取物以100 mg/（kg·d）的劑量進(jìn)行干預(yù)，發(fā)現(xiàn)干預(yù)可以降低糖尿病大鼠的空腹血糖水平，改善大鼠胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。此結(jié)果與本研究發(fā)現(xiàn)草果甲醇溶出物干預(yù)具有一定的改善作用的結(jié)論一致，說(shuō)明草果甲醇溶出物具有調(diào)節(jié)血糖的能力。

綜上，本文通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)研究了草果甲醇溶出物對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制活性，又通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證了其在體內(nèi)對(duì)空腹血糖、糖耐量水平和胰島素抵抗的改善作用，初步明確了草果醇提物具有改善血糖的生物學(xué)活性，確定了草果降糖活性物質(zhì)富集于甲醇洗脫物中。但本研究并未對(duì)草果甲醇溶出物中活性成分進(jìn)行系統(tǒng)結(jié)構(gòu)解析，在后續(xù)研究中，將進(jìn)一步分析確定活性物質(zhì)官能團(tuán)，為草果活性物質(zhì)的開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。