貓爪草的成分、藥理及栽培技術(shù)研究進(jìn)展*

羅 偉，楊立軍，班佳雯，張涵博，陳 瓊

(1 信陽農(nóng)林學(xué)院,河南 信陽 464000；2 信陽市大別山區(qū)天然藥物研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南 信陽 464000)

貓爪草(RadixRanunculiTernati)為毛莨科植物小毛莨(RanunculusTernatusThunb)的塊根，是20世紀(jì)50年代河南省信陽地區(qū)新發(fā)現(xiàn)的一種草藥，1977年開始被收載于《中華人民共和國(guó)藥典》[1]。我國(guó)主要分布于湖南、安徽、湖北、河南等地[2]，其中河南駐馬店、信陽地區(qū)所產(chǎn)質(zhì)量最優(yōu)[3]。貓爪草雖然分布廣泛但產(chǎn)量較少，被列為國(guó)家藥品監(jiān)督管理局重點(diǎn)發(fā)展的63種緊缺中藥材之一[4]。其在中醫(yī)臨床治療上具有化痰消腫、解毒散結(jié)等功效，常用于治療痰核、疔瘡等[5]?，F(xiàn)代中藥藥理研究發(fā)現(xiàn)，貓爪草能通過抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖，導(dǎo)致癌細(xì)胞的死亡[6]。目前，貓爪草的化學(xué)成分、藥理作用及栽培技術(shù)等方面概括不太全面，因此筆者通過檢索文獻(xiàn)，對(duì)其進(jìn)行綜述。

1 貓爪草的化學(xué)成分研究

1.1 多 糖

陳彥等[7]從貓爪草水提取液中分離純化得到一種以β-D-葡萄吡喃糖為主的多糖蛋白復(fù)合物——RTG-Ⅲ，其單糖比例為鼠李糖:阿拉伯糖:葡萄糖:半乳糖:甘露糖=1.00:1.17:51.71:2.16:0.46。Huang等[8]從貓爪草中分離到一種分子量為23930的水溶性多糖HB-1，GLC測(cè)定其糖組成為Glc、Ara、Gal，摩爾比為16.071:2.722:1，Glc的絕對(duì)構(gòu)型為D，Smith降解甲基化反應(yīng)顯示-1Glc的比例為約16%，-1Glc4-約62%，和-1Gal6-約8%。王愛武等[9]采用苯酚-硫酸法來比較各地方的貓爪草中多糖的含量，其結(jié)果顯示河南信陽、駐馬店多糖含量高達(dá)12.65%、12.05%，其次為安徽地區(qū)多糖含量達(dá)10.46%，湖北、山東等多糖含量較低不足10%，其結(jié)果與貓爪草在信陽地區(qū)的道地屬性相符。姚成[10]利用柱前衍生化與GC-MS，分析出貓爪草中含有葡萄糖、乳糖、麥芽糖等三種糖。

1.2 苷 類

熊英等[11-12,14]通過柱色譜及制備HPLC，分離鑒定出了16個(gè)化合物，其中一個(gè)為豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，采用溶劑提取和柱色譜分離等方法來分離和純化發(fā)現(xiàn)三個(gè)苷類化合物，其中苯甲醇O-β-D-吡喃葡萄糖苷首次從貓爪草中發(fā)現(xiàn)，另兩種為4-氧代-5-(O-β-D-吡喃葡萄糖基)-戊酸甲酯、4-氧代-5-(O-β-D-吡喃葡萄糖基)-戊酸正丁基酯，又采用ODS、Sephadex LH-20葡聚糖凝膠等多種柱色譜進(jìn)行分離，得到7個(gè)化合物，其中苷類化合物5個(gè)，經(jīng)鑒定，其結(jié)構(gòu)為2-脫氧-D-核糖酸-1,4-內(nèi)酯、正丁基-β-D-呋喃果糖苷、異麥芽酚-α-D-葡萄糖苷、香草酸4-O-β-D-葡萄糖苷、水楊苷。Tian等[13]從貓爪草根部分離得到兩種新的糖苷類化合物ternatoside A、ternatoside B和兩種已知苷類成分4-O-D-glucopyranosyl-p-coumaric acid、linocaffein。Zhang等[15]采用D101大孔吸附樹脂柱色譜、Sephadex LH-20 柱層析法，對(duì)貓爪草水萃取部位進(jìn)行分離得到11-O-β-D-glucopyranosyl rutaecarpine、11-O-α-L-rh-amnosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl rutaecarpine，并分別命名為ternatoside C、ternatoside D。

1.3 有機(jī)酸類

Chen等[16]對(duì)貓爪草醚提物用GC-MS進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，河南產(chǎn)貓爪草中含有23種有機(jī)化合物，有15種化合物被鑒定為脂肪酸，不飽和脂肪酸和油酸分別占總有機(jī)化合物的58.19%和35.68%。岳宣峰等[17]對(duì)貓爪草提取物的甲酯化樣品進(jìn)行GC-MS分析，質(zhì)譜圖用NIST譜庫檢索，鑒定出18種脂肪酸，主要為亞油酸(48.11%)、軟脂酸(21.37%)、油酸(13.75%)、亞麻酸(8.86%)和硬脂酸(1.75%)。熊英等[18]從正丁醇萃取物分離純化得到(R)-3-hydroxy-11-methoxy-11-oxoundecanoic acid和已二酸，然后又從石油醚萃取部分純化得到十六烷酸、棕櫚酸乙酯和硬脂酸。姚成[10]利用柱前衍生化與GC-MS分析鑒定出貓爪草中含有十五烷酸、棕櫚酸、棕櫚烯酸、油酸、亞油酸、亞麻酸、壬二酸、鄰笨二甲酸、肉豆蔻酸、十七酸、硬脂酸、8-十八碳烯酸、二十烷酸、二十二烷酸、二十三烷酸等15種有機(jī)酸。熊英等[14]從貓爪草石油醚及乙酸乙酯部位分離得到對(duì)羥基桂皮酸、4-氧化戊酸、丁二酸、壬二酸、對(duì)羥基苯甲酸。熊英等[12]從貓爪草的抗耐藥結(jié)核活性部位中分離得到3,4-二甲氧基苯甲酸、咖啡酸。

1.4 黃酮類

熊英等[13]通過柱色譜分離等方法分離出了9個(gè)化合物，其中為黃酮類化合物5個(gè)，經(jīng)鑒定為白果素、異銀杏素、穗花杉雙黃酮、粗貝殼杉黃酮-4′-甲醚、榧雙黃酮、羅漢松雙黃酮A[12]。Tian等從貓爪草根部分離得到1個(gè)黃酮類化合物sternbin。

1.5 內(nèi)酯類

熊英等[12,14]從貓爪草的抗耐藥結(jié)核活性部位中分離得到2-脫氧-D-核糖酸-1,4-內(nèi)酯，從貓爪草石油醚及醋酸乙酯部位分離得到3,4-二羥基苯甲酸甲酯γ-酮-δ-戊內(nèi)酯、琥珀酸乙酯、琥珀酸甲酯、5-羥基氧化戊酸甲酯、α-羥基-β,β-二甲基-γ-丁內(nèi)酯、4-羥甲基-γ-丁內(nèi)酯。姚成[10]首次采用GC-MS分析了河南產(chǎn)貓爪草乙醚提取物，鑒定出8-十八碳烯酸甲酯、油酸乙酯、亞油酸乙酯、亞麻酸乙酯等物質(zhì)。

1.6 其 他

研究發(fā)現(xiàn)貓爪草的化學(xué)成分還有揮發(fā)油、游離酸、美拉德類化合物等成分。張海松等[19]通過GC-MS，分析出61種揮發(fā)性成分，主要有丁二酸異丁酯、丁二酸甲基二異丁酯、烷烴以及少量的酸、酮、醛等。楊旭等[20]利用電位滴定法測(cè)定各地方的貓爪草總游離酸的含量，結(jié)果顯示各地總游離酸含量為為安徽4.56%，浙江5.55%，河南6.18%，以游離酸計(jì)河南產(chǎn)貓爪草品質(zhì)最佳。詹志[21]來等對(duì)貓爪草化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)分離，發(fā)現(xiàn)了一系列美拉德類化合物，其2-甲醛基毗咯環(huán)上氮原子均被丁酸取代，5位羥甲基被不同多元醇取代。

2 藥理作用

2.1 抗結(jié)核作用

何穎等[22]發(fā)現(xiàn)貓爪草可能抑制結(jié)核分枝桿菌的hsPX的表達(dá)，來影響細(xì)菌的正常生長(zhǎng)，最終起到抗結(jié)核菌的作用。熊友誼等[23]研究貓爪草石油醚提取物能明顯阻止多藥耐藥結(jié)核菌株細(xì)胞外、細(xì)胞內(nèi)的生長(zhǎng)，并促進(jìn)巨噬細(xì)胞TNF-α的表達(dá)。楊堃等[24]發(fā)現(xiàn)貓爪草石油醚萃取部位對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌和耐藥菌均有較好的抑制效果。徐瑞蘭[25]發(fā)現(xiàn)將貓爪草膠囊與抗結(jié)核藥物結(jié)合起來治療頸部淋巴結(jié)結(jié)核，能夠明顯縮短治療的時(shí)間，且未發(fā)現(xiàn)明顯的毒副作用。藍(lán)劍等[26]發(fā)現(xiàn)貓爪草水煎劑聯(lián)合標(biāo)準(zhǔn)抗結(jié)核方案可使頸淋巴結(jié)結(jié)核癥狀改善更快，提高痊愈率，機(jī)體免疫水平更強(qiáng)。王萬朋[27]發(fā)現(xiàn)2-醛基吡咯丁酸及其同系物2-羧基吡咯丁酸對(duì)結(jié)核分枝桿菌具有較好的抑菌活性，并且二者的生物利用度較高。陳小燕[28]研究發(fā)現(xiàn)超聲電導(dǎo)貓爪草透入輔助治療淺表淋巴結(jié)結(jié)核的臨床療效顯著，能顯著降低不良反應(yīng)發(fā)生率。

2.2 抗腫瘤作用

童曄玲等[29]發(fā)現(xiàn)貓爪草總皂苷對(duì)NCI-H460細(xì)胞增殖有較好的抑制作用，呈其機(jī)制可能與誘導(dǎo)凋亡、G0/G1期阻滯有關(guān)。陳璇等[30]利用3H-TdR 摻入法發(fā)現(xiàn)貓爪草總皂苷從12.5～200 μg/mL濃度對(duì)HepG2細(xì)胞均有一定的抑制作用，且呈量效關(guān)系。王愛武等[31]發(fā)現(xiàn)貓爪草皂苷及多糖對(duì)肉瘤S180、艾氏腹水瘤EAC、人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7的生長(zhǎng)有抑制作用。吳曉等[32]研究發(fā)現(xiàn)，貓爪草有機(jī)酸部位對(duì)YAC-1，SMMC-7721，A-549，BGC-823四種腫瘤細(xì)胞均有不同程度的抑制效果。

2.3 調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能

劉芊伊等[33]發(fā)現(xiàn)貓爪草醇提取物可促進(jìn)小鼠骨髓來源M0型巨噬細(xì)胞向M1型極化。王會(huì)敏等[34]研究發(fā)現(xiàn)，貓爪草能夠增強(qiáng)ANA-1細(xì)胞增殖能力，上調(diào)IL-6和TNF-αm RNA水平的表達(dá)，抑制LPS誘導(dǎo)的ANA-1細(xì)胞分泌NO和i NOS的表達(dá)。胡澤開等[35]研究發(fā)現(xiàn)，PRTR可明顯改善環(huán)磷酰胺致免疫抑制小鼠的免疫功能。楊牧之等[36]探索出不同濃度的貓爪草多糖均能使小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的活性提高，且貓爪草多糖濃度在100～400 μg/mL的細(xì)胞活力極顯著增強(qiáng)(p<0.01)。Niu等[37]探索出貓爪草多糖和皂苷均能讓小鼠免疫系統(tǒng)增強(qiáng)。陸軍等[38]研究貓爪草醇提取物可以促進(jìn)mRNA的表達(dá)，從而使小鼠的細(xì)胞免疫功能增強(qiáng)，因此具有抑制MDR-TB的功效。

2.4 抗菌作用

卞曉霞等[39]研究發(fā)現(xiàn)，貓爪草提取物對(duì)不同供試菌種均有一定的抑制作用，對(duì)金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、痢疾桿菌的最低抑菌濃度分別為15.6、31.2、31.2、31.2 μg/mL。

2.5 抗氧化作用

呂小華等[40]研究發(fā)現(xiàn)貓爪草多糖具有較好的消除羥基自由基和氧自由基的能力。韓紅霞等[41]研究發(fā)現(xiàn)不同劑量的PRT(貓爪草多糖)均能提高肝組織T-AOC、SOD活力，改善肝組織損傷，推測(cè)PRT與抗氧化作用有一定的聯(lián)系。韓紅霞等[42]探索出PRT可提高D-gal衰老模型小鼠體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)酶活性，較好地維護(hù)小鼠體內(nèi)氧化/抗氧化平衡狀態(tài)。

3 貓爪草的栽培技術(shù)研究

貓爪草是國(guó)家63種緊缺中藥材之一，市場(chǎng)需求量巨大[43]。目前僅在河南信陽、安徽阜陽等地有大面積種植，種植戶迫切需要提高貓爪草栽培繁殖及技術(shù)，提高產(chǎn)量。因此對(duì)貓爪草的種植栽培技術(shù)和病蟲害防治匯總?cè)缦拢?/p>

3.1 整地、繁殖、移栽、施肥

貓爪草需在秋冬整地，開春施加農(nóng)家肥1000 kg/667 m2，過磷酸鈣25 kg/667 m2，尿素10 kg/667 m2做基肥[44]。

何慶等[45]按10 cm行距開深2～3 cm淺溝，再按5 cm株距播種塊根，用綠亨一號(hào)5000倍液順播種溝澆透，蓋1 cm左右細(xì)土，鋪地膜保濕，蓋草簾降溫，播種后10 d左右開始出苗。朱道玉[46]認(rèn)為子株長(zhǎng)出一片真葉時(shí)，即可移栽，行距15～20 cm，株距9～12 cm，栽后澆水。鐘仕強(qiáng)等[47]認(rèn)為11月和1月，每畝地追施復(fù)合肥50公斤有利豐產(chǎn)。

3.2 田間管理

貓爪草根系較淺，不需要鋤草，隨時(shí)拔草即可，要保持土壤潮濕，生長(zhǎng)期要注意澆水[44]。張艷玲等[48]研究發(fā)現(xiàn)30%的遮光度對(duì)貓爪草生長(zhǎng)發(fā)育。張艷玲等[49]研究發(fā)現(xiàn)摘除分枝(ZZ)、摘除花果(ZHG)和自然生長(zhǎng)(CK)有利于提高貓爪草產(chǎn)量和多糖、黃酮的積累，可以適用于大田生產(chǎn)。

3.3 病蟲害防治

鐘仕強(qiáng)等[47]研究發(fā)現(xiàn)1月至3月易發(fā)生立枯病，造成大面積死亡，需在分株前用生石灰消毒土壤，在發(fā)病前噴灑退菌特。李玉翠[50]發(fā)現(xiàn)危害貓爪草的主要害蟲是蚜蟲和地老虎，需針對(duì)性用相關(guān)殺蟲農(nóng)藥防治。

4 結(jié) 語

本文通過對(duì)近50年來貓爪草相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行綜述，發(fā)現(xiàn)其具有良好的抗腫瘤、抗肺結(jié)核、提高機(jī)體免疫力等作用，但相關(guān)臨床應(yīng)用報(bào)道較少，同時(shí)目前市場(chǎng)僅有貓爪草膠囊一款產(chǎn)品在售，貓爪草相關(guān)劑型的研究較少，不利于貓爪草系列產(chǎn)品開發(fā)。此外貓爪草的豐產(chǎn)栽培技術(shù)有待進(jìn)一步提高，某些病蟲害的防治依然是制約貓爪草大面積種植的主要原因，相關(guān)研究及科技幫扶工作需要進(jìn)一步加強(qiáng)。