2018—2021 年上海市嘉定區(qū)規(guī)模豬場主要疫病抗體監(jiān)測

甘葉青，朱九超，常曉靜，曹傳閨，孫泉云，衛(wèi)金良，夏爐明

（1.上海市嘉定區(qū)動物疫病預防控制中心，上海 201800；2.上海市動物疫病預防控制中心，上海 201103）

當前，危害我國生豬養(yǎng)殖業(yè)的疫病種類繁多，除必須嚴格控制的非洲豬瘟外，還包括豬瘟（CSF）、口蹄疫（FMD）、豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）、豬偽狂犬?。≒R）和豬流行性腹瀉（PED）等[1]。疫苗預防接種是目前規(guī)模豬場疫病防控的主要措施。但疫苗免疫效果受諸多因素影響，要確保豬群維持有效的免疫力，抗體水平（包括免疫抗體和感染抗體）監(jiān)測評估必不可少[2]。

上海市嘉定區(qū)目前共有2 個規(guī)模豬場，其中一個為地方豬（梅山豬）保種場，生豬存欄3 000余頭；另一個為商品豬場，生豬存欄8 500 余頭。本研究對嘉定區(qū)2 個規(guī)模豬場開展FMD（O 型，以下非特指均簡稱FMD）、CSF、PRRS、PR 和PED 等5 種主要疫病血清學監(jiān)測，從而掌握嘉定區(qū)規(guī)模豬場主要疫病的免疫抗體水平、動態(tài)變化情況和野毒感染狀況，及時發(fā)現(xiàn)疫病風險隱患，為規(guī)模豬場及時調整免疫程序，科學制定綜合防控措施提供數(shù)據(jù)支撐[3]。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 目標群 嘉定區(qū)現(xiàn)有2 個規(guī)模豬場的全部存欄生豬。

1.1.2 樣本量計算 按照置信水平95%、可接受誤差5%，以及免疫抗體合格率70%合格線的要求，通過估計流行率（本研究為估計免疫抗體合格率）的樣本量計算公式計算樣本總量；在每年每個規(guī)模豬場采樣數(shù)量方面，按照置信水平95%、試驗敏感性95%、預期免疫抗體不合格率30%，采用發(fā)現(xiàn)疫?。ū狙芯繛榘l(fā)現(xiàn)免疫不合格的豬只）的樣本量計算公式計算每個規(guī)模豬場的樣本量[4]。每個規(guī)模豬場采用分層隨機抽樣策略，按照生產母豬、后備母豬和育肥豬3 個生產階段進行血清樣品采集。2018—2021 年共采集嘉定區(qū)2 個規(guī)模豬場血清樣品340 份，其中生產母豬180 份、后備母豬50 份、育肥豬（120～150 日齡）110 份。嘉定區(qū)規(guī)模豬場FMD 等5 種疫病免疫程序見表1。

表1 嘉定區(qū)規(guī)模豬場FMD 等5 種疫病免疫程序

1.1.3 試劑和儀器 FMD 抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒，購自中國科學院蘭州獸醫(yī)研究所；CSF、PRRS 以及PR 病毒gB、gp1 抗體檢測試劑盒，均購自美國IDEXX 公司；PED 抗體檢測試劑盒，購自法國ID.vet 公司；FMD NS 抗體檢測試劑盒，購自荷蘭Thermo Fisher 公司。儀器包括離心機、酶標儀（TECAN SUNRISE REMOTE）和96 通道全自動洗板機（ELX405R）等。

1.2 方法

采用ELISA 方法，對血清樣品進行FMD、PRRS、CSF、PR（gB）和PED 免疫抗體檢測，以及FMD非結構蛋白（NS）和PR（gE）感染抗體檢測。操作步驟和判定標準按照試劑盒說明書進行。

2 結果與分析

2.1 總體情況

免疫抗體方面：2018—2021 年嘉定區(qū)2 個規(guī)模豬場FMD、PRRS、CSF、PR 等4 種疫病的免疫抗體合格率均在80%以上，表明嘉定區(qū)規(guī)模豬場這4 種疫病的免疫程序合理，免疫措施到位，防控效果確實；PED 免疫抗體合格率僅為23.5%，未形成有效的免疫屏障，說明規(guī)模豬場在PED 疫苗類型選擇、免疫程序制定、免疫頻次和計劃執(zhí)行等方面有待進一步優(yōu)化。

感染抗體方面：FMD（NS）和PR（gE）抗體均維持在較低感染水平（表2）。

表2 嘉定區(qū)規(guī)模豬場5 種主要疫病抗體檢測結果匯總

2.2 不同年份

2018—2021 年持續(xù)4 年對嘉定區(qū)2 個規(guī)模豬場進行了FMD、CSF 等5 種疫病免疫抗體和感染抗體檢測，檢測結果分別見表3 和表4。

表3 2018—2021 年嘉定區(qū)規(guī)模豬場5 種疫病免疫抗體檢測結果匯總

表4 2018—2021 年嘉定區(qū)規(guī)模豬場FMD、PR 感染抗體檢測結果匯總

按照年份比較，免疫抗體方面，F(xiàn)MD、CSF免疫抗體合格率呈逐年上升趨勢，PRRS 免疫抗體總體維持在較高水平，年度間差異不顯著（P＞0.05），PR 呈先降低后升高趨勢，而PED 免疫抗體水平一直較低。在感染抗體方面，F(xiàn)MD（NS）抗體均為陰性，PR（gE）抗體呈現(xiàn)顯著下降趨勢（P＜0.01），2021 年感染抗體陽性率降至0。

2.3 不同豬場類型

目前，嘉定區(qū)僅有2 個規(guī)模豬場（1 個地方豬保種場、1 個商品豬場）。從免疫抗體檢測結果看，除CSF 和PR 外，種豬場的FMD、PRRS 和PED免疫抗體水平整體高于商品豬場（P＜0.05，表5）。感染抗體方面，商品豬場PR（gE）抗體顯著高于種豬場（P＜0.01，表6）。

表5 嘉定區(qū)不同類型規(guī)模豬場5 種主要疫病免疫抗體檢測結果匯總

表6 嘉定區(qū)不同類型規(guī)模豬場FMD、PR 感染抗體檢測結果匯總

2.4 不同生產階段

分別采集生產母豬、后備母豬和育肥豬（120～150日齡，F(xiàn)MD 3 次免疫后）等3 個生產階段豬群的血清學樣品。從檢測結果看，5 種疫病的免疫抗體合格率基本呈現(xiàn)生產母豬＞后備母豬＞育肥豬的特征，而PR（gE）感染抗體陽性率呈現(xiàn)生產母豬＞育肥豬＞后備母豬的規(guī)律。檢測結果見表7～8。

表7 嘉定區(qū)規(guī)模豬場不同生產階段豬群5 種疫病免疫抗體檢測結果匯總

3 討論

3.1 FMD

2018—2021 年，嘉定區(qū)規(guī)模豬場均未檢測出FMD（NS）感染抗體陽性，F(xiàn)MD 免疫抗體合格率呈逐年上升趨勢。疫苗毒株與流行毒株的匹配性是影響FMD 疫苗免疫效果的最重要因素，其次為免疫劑量、免疫頻次和免疫部位等[5]。嘉定區(qū)高度重視FMD 免疫工作，每年向規(guī)模豬場印發(fā)FMD 等豬群主要疫病免疫方案，要求選擇O-A FMD 二價滅活疫苗，對商品豬和后備母豬按照60、90、120日齡各免1 次的免疫程序實施強制免疫工作，連續(xù)4 年的檢測結果表明，嘉定區(qū)規(guī)模豬場FMD 免疫抗體水平遠超過70%的合格線，且均未檢測到感染抗體陽性，說明FMD 防控取得了良好效果。

表8 嘉定區(qū)規(guī)模豬場不同生產階段豬群FMD、PR 感染抗體檢測結果匯總

3.2 CSF

2017 年CSF 退出國家強制免疫計劃，但嘉定區(qū)各規(guī)模豬場始終高度重視CSF 的全面免疫和補免工作，事實也證明高質量的疫苗和科學合理的免疫程序對CSF 防控十分重要。2018—2021 年，嘉定區(qū)規(guī)模豬場CSF 免疫抗體平均合格率為84.7%，與FMD 等其他病種相比，CSF 免疫抗體水平還有一定的提升空間。種豬場CSF 免疫抗體水平不高可能與保育豬免疫日齡過早，受到母源抗體干擾有關[6]。我國的CSF 兔化弱毒疫苗，對各種豬群均有高度的安全性和優(yōu)良的免疫原性，商品豬CSF免疫程序制定時要充分考慮母源抗體的干擾，可將CSF 首免日齡適當推遲（如推遲到35～40 日齡，或根據(jù)商品豬母源抗體檢測結果來設定首免日齡），65～70 日齡二免（可用豬瘟-豬丹毒-豬肺疫三聯(lián)活疫苗代替），育肥豬可于140 日齡再補免1 次[6-7]。

3.3 PRRS

當前，PRRS 仍然是影響我國生豬養(yǎng)殖的重要疫病之一，其流行范圍廣，污染面大，流行毒株復雜[8]。2018—2021 年，嘉定區(qū)規(guī)模豬場PRRS 免疫抗體合格率達到95.6%，抗體水平整體較高。一般認為弱毒疫苗免疫效果較好，但適用于感染豬場；滅活苗雖然安全性高，但免疫效果相對不佳。在PRRS 無凈化可能的條件下，建議陽性場使用弱毒苗或與滅活苗聯(lián)合使用，陰性場則不建議使用弱毒苗。目前，農業(yè)農村部批準的高致病性PRRS 毒株多達4 種（包括JXA1-R、HuN4-F112、TJM-F92和GDr180），由17 個疫苗廠家生產，建議一個規(guī)模豬場使用同一種毒株疫苗進行免疫[6]。

3.4 PR

PR 病毒可以感染多種動物（如狗、貓、牛、羊等），豬對其最為敏感。近年來規(guī)模豬場種豬調運不規(guī)范和飼養(yǎng)密度過高等因素，導致PR 在豬群中持續(xù)流行傳播。PR 防控成效與凈化關系到規(guī)模豬場的生產效益和經濟效應[9]。從免疫抗體檢測結果看，嘉定區(qū)規(guī)模豬場各生產階段豬群PR 免疫抗體水平良好，形成了良好的免疫屏障；從gE 感染抗體檢測結果分析，攜帶PR 病毒的高風險群體是生產母豬，因此PR 凈化工作需要從培育健康陰性后備豬群做起[10]。近年來，嘉定區(qū)規(guī)模豬場按照《豬偽狂犬病凈化規(guī)程》（DB31/T 1050—2017），采取“檢測—淘汰陽性豬只—培育陰性后備豬群”的凈化策略[11]，同時積極開展引種檢疫、隔離和消毒等工作[12]，取得了明顯的凈化效果。

3.5 PED

2011 年左右，仔豬PED 疫情的流行，給我國養(yǎng)豬業(yè)乃至國民經濟帶來了沉重打擊，曾經一度扭轉豬價多年逐波下行的趨勢，造成豬價快速飆升。近年來，PED 疫情雖然得到了一定的控制，但局部流行或散發(fā)現(xiàn)象仍然時有發(fā)生。目前，來源正規(guī)的“豬傳染性胃腸炎（TGE）＋PED”二聯(lián)滅活疫苗、“TGE+PED”二聯(lián)活疫苗和“TGE+PED+豬輪狀病毒（RV）”三聯(lián)活疫苗對PED 的免疫效果均不夠理想，免疫抗體難以激發(fā)或保護性抗體持續(xù)時間不長。針對該病的防控，除做好生物安全、飼養(yǎng)管理和持續(xù)監(jiān)測外，建立適合本場豬群特點的免疫程序十分重要。由于冬春季節(jié)是該病的高發(fā)期，必須在11 月之前建立起有效的免疫力，堅持全群免疫，母豬在每年9—10 月普免2 次，從11 月到次年5 月，對所有懷孕母豬做好產前的跟胎免疫，這樣可達到有效防止產房仔豬發(fā)生PED 的目的[13]。

規(guī)模豬場除因地制宜地制定符合生產實際的個性化免疫程序外，健全防疫制度、嚴格生物安全管理、完善飼養(yǎng)管理、降低飼養(yǎng)密度、保障良好的豬群健康水平等綜合防控措施也是構筑堅實、牢固免疫保護屏障的關鍵環(huán)節(jié)[14]。

3.6 樣品代表性與局限性

嘉定區(qū)現(xiàn)有2 個規(guī)模豬場，存欄生豬約1.1 萬頭。本研究對象為FMD、CSF 等5 種疫病的免疫群體，從2018—2021 年4 年的合計檢測量來看，采用估計流行率（免疫抗體合格率）的樣本量計算公式，樣本總量達到了代表性要求；本研究每年每場的檢測量為40～50 頭，依據(jù)發(fā)現(xiàn)疫?。庖卟缓细瘢┑臉颖玖坑嬎愎剑瑱z測數(shù)量亦達到代表性要求。在FMD 和PR 感染抗體陽性率方面，按照估計流行率的樣本量計算公式，嘉定區(qū)規(guī)模豬場FMD 感染抗體陽性率極低，每年每個規(guī)模豬場的檢測數(shù)量均具有代表性，但PR 感染抗體的檢測數(shù)量達不到代表性要求[4]。主要原因：一是本研究監(jiān)測疫病種類多，檢測項目多，難以兼顧；二是在非洲豬瘟疫情防控的大背景下，入場采樣難度大，只能依靠各個規(guī)模豬場送檢，具有一定的不可控性。今后需要繼續(xù)加大PR 感染抗體的監(jiān)測力度。